目的:评价慢性心力衰竭（心衰）患者肠道菌群构成、功能及代谢产物的改变。方法:通过检索中国生物医学文献数据库（CBM）、中国期刊全文数据库（CNKI）、万方数据库、美国国立医学图书馆数据库（PubMed）、医学文摘数据库（EMbase）、Cochrane循证医学数据库（Cochrane Library）检索出有关慢性心衰患者肠道菌群改变的研究，检索时段为从各自数据库建库起至2019年12月，系统评价慢性心衰患者肠道菌群构成、功能及代谢产物的改变。结果:共纳入10篇关于慢性心衰患者肠道菌群的研究。系统评价结果显示慢性心衰患者肠道菌群β-多样性改变明显，粪杆菌属、布劳特菌属、拟杆菌属、普雷沃菌属、厌氧棒状菌属丰度降低，链球菌属、大肠杆菌/志贺氏菌属、韦荣球菌属、肠杆菌属丰度升高。慢性心衰患者增加的微生物功能模块是色胺酸代谢、脂质代谢和脂多糖合成等，且与氧化三甲胺生成相关的细菌基因明显增加，与生成有益性代谢物丁酸盐相关的细菌基因减少，有害代谢产物氧化三甲胺水平升高。结论:慢性心衰患者肠道菌群的构成、功能及代谢产物发生了明显的变化。

目的:探讨携带泛素化修饰丁型肝炎抗原(hepatitis D antigen, HDAg)的树突状细胞来源的胞外体(dendritic cell derived exosomes，Dexs)在诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte, CTL)反应中的作用及其分子机制。方法:提取并诱导C57BL/6小鼠髓源性树突状细胞(dendritic cell，DC)后与Ub-S-HDAg-Dexs共孵育48 h，流式细胞仪检测表面分子[CD86、CD80、主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex，MHC)Ⅱ]的表达水平。提取C57BL/6小鼠脾源性T淋巴细胞与经胞外体刺激的DC共孵育后共培养72 h，分为Ub-S-HDAg-Dexs组(加入50 μg/mL Ub-S-HDAg-Dexs)、Blank-Dexs组(加入50 μg/mL无质粒转染的DC来源胞外体)、Con-Dexs组(加入50 μg/mL经空白慢病毒转染的DC来源胞外体)、PBS组[加入50 μL/mL磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline，PBS)]、Ub-S-HDAg-Dexs+AG490组(加入50 μg/mL Ub-S-HDAg-Dexs，经胞外体刺激的DC与T淋巴细胞混合时同时加入50 μmol/L AG490)，流式细胞术检测CD8与γ干扰素双阳性T细胞，非放射性乳酸脱氢酶检测试剂盒检测CTL细胞的杀伤活性。采用实时定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法分别检测T淋巴细胞中Jak激酶(Janus kinase, JAK)2、GATA结合蛋白3(GATA-binding protein 3，GATA3)、T-bet、信号转导及转录激活因子(signal transduction and activator of transcription，STAT)1、STAT4的mRNA和蛋白质表达水平。统计学分析采用独立样本 t检验。 结果:经Ub-S-HDAg-Dexs刺激，DC表面分子CD80、CD86、MHCⅡ阳性率为83.850%±0.219%、68.910%±0.134%、84.320%±0.445%。在Ub-S-HDAg-Dexs组，γ干扰素和CD8双阳性率为6.420%±0.028%, 高于PBS组、Blank-Dexs组、Con-Dexs组、Ub-S-HDAg-Dexs+AG490组( t＝90.78、30.32、63.06、85.42，均 P<0.001)；细胞杀伤率为82.4%±3.9%，高于PBS组、Blank-Dexs组、Con-Dexs组、Ub-S-HDAg-Dexs+AG490组( t＝17.28、9.74、3.95、15.89，均 P<0.050)。Ub-S-HDAg-Dexs组JAK2、T-bet、STAT1、STAT4 mRNA相对表达量分别与Con-Dexs组( t＝10.74、32.34、13.00、16.28，均 P<0.001)、Blank-Dexs组( t＝15.05、21.51、6.46、13.12，均 P<0.050)、PBS组( t＝21.83、41.42、7.30、17.50，均 P<0.050)、Ub-S-HDAg-Dexs+AG490组( t＝35.75、20.69、17.02、17.07，均 P<0.001)相比，差异均有统计学意义。Ub-S-HDAg-Dexs组T-bet、STAT1、STAT4蛋白质表达水平高于PBS组，差异均有统计学意义( t＝346.70、57.54、55.81，均 P<0.001)。Ub-S-HDAg-Dexs组加入AG490后，T-bet、STAT1、STAT4的蛋白质表达水平均较Ub-S-HDAg-Dexs组下降，差异均有统计学意义( t＝355.40、52.79、126.10，均 P<0.001)。 结论:胞外体转运泛素化修饰的HDAg能有效促进DC成熟，诱导T淋巴细胞分化，产生特异性CTL反应，为丁型肝炎免疫治疗提供新的思路。

目的:探讨氢核磁共振( 1H-NMR)技术在维生素A缺乏(VAD)早期筛查中的应用价值。 方法:2019年1月至6月在遵义地区收集40例确诊VAD<1岁留守儿童为VAD组，另选取40例健康儿童为健康对照组，采集2组儿童尿液，测定 1H-NMR波谱。应用代谢组学技术，结合多变量统计分析比较2组代谢产物，筛选出VAD患儿差异性代谢产物。 结果:健康对照组血清视黄醇水平[(1.35±0.18) μmol/L]与VAD组[(0.56±0.10) μmol/L]比较，差异有统计学意义( t＝23.93， P<0.001)。尿液 1H-NMR光谱图结果显示：与健康对照组比较，VAD组儿童尿液中甲基丙二酸、2-酮异戊酸酯、N-乙酰基糖蛋白、二甲基甘氨酸、三甲铵乙内酯水平明显升高，差异均有统计学意义(| r|>0.602，均 P<0.05)；异戊基丙基甘氨酸、2-羟基异丁酸酯、肌酸、磷酸胆碱/甘油磷酸胆碱、马尿酸盐水平明显下降，差异均有统计学意义(| r|>0.602，均 P<0.05)。 结论:VAD患儿与健康儿童比较，尿液代谢产物存在差异，差异代谢产物与肠道微生态平衡、消化系统疾病、呼吸系统疾病、免疫相关疾病及能量代谢、生长发育密切相关，尿液 1H-NMR代谢组学分析在VAD早期筛查中具有潜在应用价值。

目的:探讨黄芪甲苷对人内皮祖细胞(EPC)分泌外泌体及外泌体中微小RNA-126(miRNA-126)表达的影响。方法:取湖南中医药大学第一附属医院妇产科2019年出生的1名足月健康新生儿脐带血，采用密度梯度离心法分离单个核细胞并培养7 d，其间行形态学观察；取第3代细胞，采用CD31免疫磁珠分选法和双荧光染色法鉴定。将鉴定成功的EPC按照随机数字表法分为黄芪甲苷组和磷酸盐缓冲液(PBS)组。黄芪甲苷组细胞加入终质量浓度100 mg/L的黄芪甲苷培养24 h，PBS组细胞加入等体积的PBS培养24 h。培养结束后收集2组细胞培养上清液中的外泌体，采用蛋白质印迹法检测外泌体特征性标志物CD9、CD63和CD81表达，于透射电子显微镜下观察EPC外泌体(EPC-Exo)形态，采用纳米颗粒跟踪分析技术检测EPC-Exo的粒径，采用二辛丁酸法测定EPC-Exo的浓度(样本数为3)，采用反转录PCR法测定EPC-Exo中与血管新生相关miRNA-126-3p和miRNA-126-5p的表达(样本数为3)。对数据行独立样本 t检验。 结果:(1)培养第4天，细胞开始贴壁生长，圆形、梭形、条形等多形态同时出现；继续培养至第7天时，细胞边缘清晰，呈铺路石样排列，中央细胞呈圆形，周边细胞呈梭形。(2)CD31免疫磁珠分选法显示细胞膜染绿色，细胞核染蓝色；双荧光染色法显示细胞呈橙黄色。经以上鉴定，细胞被证实为EPC。(3)培养24 h，2组EPC-Exo的CD9、CD63和CD81表达均呈阳性，证实本实验已成功提取EPC-Exo。(4)培养24 h，2组EPC-Exo均呈圆形膜囊泡，形态无明显差异。(5)培养24 h，黄芪甲苷组中98.7%的EPC-Exo粒径为84.7～143.1 nm，PBS组中98.0%的EPC-Exo粒径为88.7～123.5 nm。(6)培养24 h，黄芪甲苷组EPC-Exo的质量浓度为(310±5)μg/mL，明显高于PBS组的(257±5)μg/mL， t＝13.369， P<0.01。(7)培养24 h，黄芪甲苷组EPC-Exo中miRNA-126-3p( t＝16.062， P<0.01)和miRNA-126-5p( t＝3.252， P<0.05)均明显多于PBS组。 结论:黄芪甲苷可改善人EPC分泌外泌体的功能，且所分泌的外泌体负载miRNA-126。

电子烟早期作为一种戒烟辅助工具被发明，近年来其使用越来越普及，特别是青少年，电子烟已成为他们吸食传统卷烟的门户。但是人们对电子烟的健康危害，特别是肺健康危害所知甚少。事实上电子烟作为一种戒烟辅助工具缺乏循证证据，电子烟烟雾含有尼古丁、多环芳香烃、挥发性有机化合物、超细颗粒、重金属和硅酸盐等多种有害物质，甚至含有致癌物质，可产生多种急慢性生物效应，包括气道上皮细胞损伤、呼吸道免疫功能抑制、黏蛋白MUC5AC增加，导致肺功能损害，乃至肺癌的发生发展。2019年爆发于美国的电子烟或电子烟产品应用相关肺损伤流行被证实与吸食含四氢大麻酚的电子烟相关。目前中国已出台多部有关法律法规。建议有关部门加强严格执法，学界加深对电子烟健康危害的研究，以控制电子烟的流行，降低其健康危害。

目的:探讨丁酸钠对严重烫伤小鼠肠道屏障的作用及相关机制。方法:将18只雌性8～12周龄C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假伤组、单纯烫伤组、烫伤＋丁酸钠组，每组6只。将单纯烫伤组、烫伤＋丁酸钠组小鼠背部浸入90 ℃热水中9 s，造成30%体表总面积Ⅲ度烫伤；将假伤组小鼠背部浸入37 ℃温水中9 s模拟致假伤。3组小鼠均于伤后即刻腹腔内注射乳酸林格液1 mL。此外，烫伤＋丁酸钠组小鼠分别于伤前30 min及伤后即刻经腹腔注射300 mg/kg剂量丁酸钠溶液；假伤组及单纯烫伤组小鼠仅腹腔注射相同体积的无菌磷酸盐缓冲液。伤后24 h，取3组小鼠抽取门静脉血采用异硫氰酸荧光素-葡聚糖荧光探针示踪法检测肠道通透性，取回肠组织采用蛋白质印迹法检测肠黏膜带状闭合蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白、密封蛋白1、密封蛋白2、核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18蛋白表达，采用间接免疫荧光法检测肠黏膜ZO-1分布。对数据行单因素方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。结果:(1)伤后24 h，假伤组、单纯烫伤组、烫伤＋丁酸钠组小鼠肠道通透性分别为0.88±0.19、2.62±0.48、1.23±0.16。与假伤组比较，单纯烫伤组小鼠肠道通透性明显增强( P<0.01)，烫伤＋丁酸钠组无明显变化( P>0.05)。与单纯烫伤组比较，烫伤＋丁酸钠组小鼠肠道通透性明显减弱( P<0.01)。(2)伤后24 h，与假伤组比较，单纯烫伤组和烫伤＋丁酸钠组小鼠肠黏膜紧密连接蛋白ZO-1、闭合蛋白及密封蛋白1表达量均明显降低( P<0.05)，密封蛋白2表达量明显增加( P<0.05)。伤后24 h，与单纯烫伤组比较，烫伤＋丁酸钠组小鼠肠黏膜ZO-1及闭合蛋白表达量明显增加( P<0.05)，密封蛋白2表达量明显减少( P<0.05)，密封蛋白1表达量无明显变化( P>0.05)。(3)伤后24 h，与假伤组比较，单纯烫伤组和烫伤＋丁酸钠组小鼠肠黏膜NLRP3、IL-1β、IL-18蛋白表达量均明显增加( P<0.05)；与单纯烫伤组比较，烫伤＋丁酸钠组小鼠肠黏膜NLRP3、IL-1β及IL-18蛋白表达量均明显减少( P<0.05)。(4)伤后24 h，假伤组小鼠肠黏膜ZO-1沿细胞膜均匀分布，光滑连续；单纯烫伤组小鼠肠黏膜ZO-1分布不规则，有断裂；烫伤＋丁酸钠组小鼠肠黏膜ZO-1分布改变较单纯烫伤组有所改善。 结论:丁酸钠能够抑制严重烫伤后小鼠肠黏膜NLRP3炎症小体激活，减少IL-1β和IL-18产生，从而减轻紧密连接蛋白表达和分布异常，保护肠道屏障功能。

几乎所有的抗精神病药都会导致体重增加、胰岛素抵抗、血脂升高等代谢紊乱，这会增加心血管疾病的发病率和过早死亡的风险。抗精神病药引起的体重增加和代谢紊乱部分归因于肠道微生物的改变。益生菌是一种活的微生物。膳食纤维是一种不易消化的成分，可被肠道微生物群发酵生成短链脂肪酸，从而介导免疫调节和控制饱腹感。益生菌和膳食纤维能够通过独立或协同作用来调节肠道微生物群，从而调节糖脂代谢、免疫和炎症等生理过程。膳食纤维作为肠道微生物群的主要营养来源，在形成微生物群的组成中起着重要作用。肠道微生物群通过发酵膳食纤维产生的丁酸盐，在抗氧化反应、抗炎和缓解肠道屏障功能障碍方面是有效的。既往研究证明了益生菌和（或）膳食纤维在肥胖或糖尿病人群中减肥和代谢改善的有效性。膳食纤维的添加减少了体重增加，改善了2型糖尿病。然而，很少有研究探讨益生菌和（或）膳食纤维在抗精神病药所致体重增加中的作用。

目的:探讨超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱（ultra-high performance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight mass spectrometer，UHPLC/Q-TOF-MS）技术在新生儿败血症早期诊断中的应用。方法:前瞻性选择2019年1月至2020年1月在湖南省人民医院新生儿科住院的新生儿败血症患儿为败血症组，选择同期门诊体检的健康新生儿为对照组，取患儿入院第1天/体检当天的静脉血标本，采用UHPLC/Q-TOF-MS技术进行代谢组学分析，探讨败血症患儿代谢产物特点。结果:共纳入败血症组20例，对照组10例。败血症组患儿血苯丙氨酸、法尼基焦磷酸、6-磷酸葡萄糖、乳糖、4-羟基甲苯丁酰胺、伊洛前列素、顺式8，11，14，17-二十碳四烯酸、皮质酮、雌三醇3-硫酸盐16-葡糖醛酸、苯乙酰胺、血氧烷B2、二氯二甲基二乙胺共12种代谢产物高于对照组（ P<0.05），采用受试者工作特征曲线对这些代谢物进行可信度分析，得到7种可信度较高的代谢物，分别为4-羟基甲苯丁酰胺、皮质酮、雌三醇3-硫酸盐16-葡糖醛酸、法尼焦磷酸、6-磷酸葡萄糖、苯乙酰胺、苯丙氨酸。 结论:新生儿败血症患儿代谢产物明显异常，4-羟基甲苯丁酰胺、皮质酮、雌三醇3-硫酸盐16-葡糖醛酸、法尼基焦磷酸、6-磷酸葡萄糖、苯乙酰胺、苯丙氨酸7种代谢物水平明显升高。

目的:观察小鼠肠道菌群的变化，探讨粪菌结合益生菌移植干预急性严重肝损伤的结局。方法:选雄性BALB/c小鼠40只，随机分为空白对照组10只，模型组10只，普通粪菌移植组10只，粪菌+益生菌移植组10只，除空白对照组外，其余各组给予D-氨基半乳糖（3.0 g/kg）腹腔注射制备急性严重肝损伤模型，普通粪菌移植组和粪菌+益生菌移植组在造模同时分别给予普通粪菌液和益生菌+粪菌液灌肠（1次/d），48 h后取血清用于检测丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、总胆红素，取肝组织用于病理学检测。取结肠内容物用于提取DNA进行16S V3-V4区高通量测序，用生物信息学分析技术对测序结果进行可操作分类单元聚类分析，α多样性分析，β多样性分析，线性判别分析找到不同分组小鼠的结肠内容物特征性差异细菌。临床生物化学指标组间差异比较采用 t检验，16S V3-V4区测序结果组间差异采用Wilcoxon检验。 结果:模型组小鼠血清肝脏生物化学指标高于其他3组，差异有统计学意义（ P < 0.05），模型组肝脏HE染色结果显示肝组织镜下呈严重炎性改变；普通粪菌移植组和粪菌+益生菌移植组较模型组明显减轻，炎症减轻。16S rRNA高通量测序分析结果显示，空白对照组小鼠群菌结构与其他3组的Shannon差异无统计学意义，Observed Species差异有统计学意义，菌群构成差异大，粪菌移植增加小鼠肠道内物种数量。β-多样性分析结果显示，空白对照组与其他3组的组间差异大于疾病组之间的组间差异，粪菌+益生菌移植组改变疾病小鼠肠道菌群结构的差异细菌多为产丁酸盐细菌。 结论:粪菌+益生菌增强粪菌移植治疗效果，改善肝脏炎症，增加肠道内产丁酸盐细菌数量。

目的:探讨内毒素致急性肺损伤（ALI）时核因子E2相关因子2（Nrf2）对细胞紧密连接蛋白Claudin-18的影响。方法:将18只健康雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组、内毒素致ALI模型组（ALI组）及Nrf2激活剂叔丁基对苯二酚（tBHQ）预处理组（tBHQ+ALI组），每组6只。通过腹腔注射脂多糖（LPS）15 mg/kg制备小鼠内毒素致ALI模型；对照组注射等量磷酸盐缓冲液（PBS）。tBHQ+ALI组于制模前3 h分3次腹腔注射tBHQ，每次间隔1 h（合计50 mg/kg），最后一次注射tBHQ的同时给予LPS 15 mg/kg；对照组和模型组给予等量PBS，最后一次给药时分别注射PBS或LPS。注射LPS后12 h处死小鼠取肺组织，苏木素?-?伊红（HE）染色后，光镜下观察肺组织病理学改变，并计算肺损伤评分；测定肺湿/干质量比值（W/D）；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测肺组织Nrf2蛋白表达；采用免疫组化法检测肺组织Claudin-18阳性表达。结果:对照组肺组织结构完整，无明显病理学改变。与对照组相比，ALI组肺泡间隔增宽，伴有炎症细胞浸润、毛细血管充血及组织水肿，肺损伤评分及肺W/D比值均明显升高〔肺损伤评分（分）：6.50±1.05比1.83±0.75，肺W/D比值：3.79±0.22比3.20±0.14，均 P<0.01〕，且肺组织Nrf2蛋白表达及Claudin-18阳性表达均明显降低〔Nrf2蛋白（Nrf2/β-actin）：0.41±0.33比1.22±0.33，Claudin-18（ A值）：0.28±0.07比0.44±0.10，均 P<0.05〕。tBHQ预处理后，肺组织病理损伤程度较ALI组明显减轻，肺泡间隔轻度异常，炎症细胞浸润及组织水肿减轻，肺损伤评分及肺W/D比值均明显降低〔肺损伤评分（分）：3.00±0.89比6.50±1.05，肺W/D比值：3.28±0.19比3.79±0.22，均 P<0.01〕，且肺组织Nrf2蛋白表达及Claudin-18阳性表达均明显升高〔Nrf2蛋白（Nrf2/β-actin）：1.26±0.09比0.41±0.33，Claudin-18（ A值）：0.45±0.04比0.28±0.07，均 P<0.05〕。 结论:Nrf2能通过上调Claudin-18表达减轻肺水肿，从而改善内毒素致ALI。