目的 建立反相高效液相色谱(reversed-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)法测定人干扰素α2b(human interferon alpha 2b,hIFNα2b)原液中三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)的残留量,并进行验证及初步应用.方法 液相色谱条件为:ZORBAX 300SB-C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm);流动相0.08％磷酸(pH 3.0)+5.0％甲醇溶液;检测时间6 min;流速0.8mL/min;柱温35 ℃;紫外检测器波长210 nm;上样量20μL;等度洗脱.对方法进行系统适应性、线性、专属性、准确性、精密性、定量限与检测限及耐用性验证.同时采用建立的方法和复合型色谱柱Comixsil ACRP(100 mm × 4.6 mm,5 μm)测定3批hIFNα2b原液样品的TFA残留量.结果 TFA在10～300 μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.998 4);平均加标回收率为101.8％,RSD为2.68％;重复性和中间精密度验证的RSD分别为0.46％和0.45％;定量限为10μg/mL,检测限为2 μg/mL;有机溶剂、缓冲盐pH与柱温箱温度在规定条件下轻微上下浮动对检测结果无明显影响,检测波长变化时峰面积会受到影响.采用2种方法检测3批hIFNα2b原液中TFA残留量,结果均未检出.结论 建立的RP-HPLC法具有较好的系统适应性、专属性、准确性、精密性及耐用性,可用于hIFNα2b原液中TFA残留量的测定.

目的 建立了水产品中阿维菌素(abamectin,ABA)和伊维菌素(ivermectin,IVM)的高效液相色谱-荧光检测方法.方法 样品经乙腈提取,正己烷除脂后,氮气吹至近干,加入衍生化试剂三氟乙酸酐和N-甲基咪唑室温衍生15 min,甲醇定容.采用甲醇/乙腈/0.4％乙酸溶液三元梯度洗脱,基质工作曲线法定量检测.结果 在23 min色谱保留时间内阿维菌素和伊维菌素得到有效的分离.添加水平为4 μg/kg、8μg/kg和20 μg/kg的平均回收率为88.2％～107.5％,相对标准偏差(RSD)为1.4％ ～9.6％,阿维菌素和伊维菌素的定量限均为3μg/kg.应用该方法对水产品中的阿维菌素和伊维菌素进行测定,5批次样品均未检出.结论 本法前处理过程简便高效,方法 灵敏度和准确度均满足实际样品的检测需求,适用于大批量水产品中阿维菌素和伊维菌素残留量的检测.

目的 建立检测1型肺炎球菌荚膜多糖(简称Pn1型多糖)中残留十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide,CTAB)含量的反相高效液相色谱(reversed-phasehigh performance liquid chromatography,RP-HPLC)方法,并进行验证.方法 色谱条件:选用反相色谱柱Waters/XSelect CSH C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为含三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)的10％甲醇水溶液,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温为20℃,检测波长为206 nm.优化流动相甲醇中TFA的比例(0.01％、0.05％和0.1％).Pn1型多糖用100 μg/mL脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,DOC)水溶液溶解,超滤离心后上样.验证方法的专属性、线性范围、灵敏度、准确性及重复性.应用该方法检测3批Pn1型多糖样品CTAB残留量.结果 选择含0.01％ TFA的10％甲醇水溶液作为流动相;加标样品除有CTAB对照品色谱峰外,还有2个杂质峰,且3个峰均达到基线分离,表明方法专属性良好;CTAB对照品在0.2～4.0 μg/mL浓度范围内与峰面积线性良好,r2＞0.999;检出限及定量限分别为0.1和0.2μg/mL;0.2、0.4及0.6 μg/mL浓度的加标样品回收率分别为101.18％、100.85％和101.72％,平行检测3次的RSD分别为1.69％、1.98％和0.76％.3批样品CTAB残留量均＜0.324 μg/mL,符合内控要求.结论 成功建立了检测Pn1型多糖中残留CTAB含量的RP-HPLC法,该方法具有良好的专属性、线性、准确性,灵敏度高,重复性好,可用于肺炎球菌荚膜多糖中的残留CTAB检测.

目的 建立用于检测塞来昔布原料药中的4种残留溶剂的方法.方法 采用顶空气相色谱法,色谱柱为Aglient DB-624(30 m×0.53 mm,3.0 μm),FID氢火焰离子化检测器,柱温采用程序升温,进样口温度:250℃,检测器温度:250℃,载气为氮气,流速:2 mL·min-1,分流比5∶1,顶空平衡温度:80℃,平衡时间:30 min.结果 甲醇、乙醇、三氟乙酸乙酯、乙酸乙酯4种残留溶剂的线性关系良好.(r=0.999 3～0.999 9),平均回收率均在91.96％～111.18％.结论 该方法适用于塞来昔布原料药中4种残留有机溶剂的含量测定

目的 采用衍生化HPLC法测定艾曲波帕中的基因毒性杂质3,4-二甲基苯肼.方法 用苯甲醛作为衍生化试剂,衍生化样品后,用HPLC法测定.采用Gemini C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以0.1％三氟乙酸溶液-乙腈(30:70)为流动相,流速1.0mL·min1-1,检测波长348nm.结果 3,4-二甲基苯肼衍生物与样品中其他组分能完全分离;0.02～0.12μg·mL-13,4-二甲基苯肼与峰面积的线性关系良好(r=0.9989),检测限为0.01μg·mL-1,进样精密度良好,3,4-二甲基苯肼衍生物在8 h内稳定(RSD=1.20％),平均回收率为102.10％,RSD为1.50％(n=9).样品中未检出3,4-二甲基苯肼,其含量在1.0 ppm以下,符合要求.结论 所用方法专属、灵敏、准确,适用于检测艾曲波帕中的基因毒性杂质3,4-二甲基苯肼.