报道广西来宾市1例片形吸虫病诊疗和流行病学调查过程,为片形吸虫病预防控制提供依据.患者因上腹部疼痛到医院就诊,根据患者主要症状、体征、临床表现,经腹部B超、CT检查及粪便水洗沉淀法镜检发现片形吸虫卵,提取虫卵DNA经ITS2基因扩增、测序和比对,与NCBI巨片形吸虫ITS2序列同源性为99.2％,确诊患者为巨片形吸虫病,经三氯苯达唑驱虫治疗后症状消失、粪便复查虫卵阴性.以水洗沉淀法检测患者周边33份人粪便样本和以压片镜检200份小土蜗螺及20份尖膀胱螺检测片形吸虫卵均为阴性;检测患者居住地附近10份水牛粪便,有8份(占80％)检测到片形吸虫卵,ITS2基因扩增、测序证实为巨片形吸虫;收集患者种植并腌制生吃芋檬10份,也未发现片形吸虫囊蚴粘附.结果表明,本次病例是1例偶然的片形吸虫感染病例,患者临床症状缺乏特异性,需结合大便虫卵检查和分子诊断进行确诊.

目的:测定市售萘敏维滴眼液14批样品的抑菌效力,并探索抑菌剂苯扎溴铵、羟苯乙酯、三氯叔丁醇的合理添加量.方法:按中国药典2015年版,以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉为试验菌株,进行菌落计数方法适用性试验.根据试验结果进行样品微生物挑战试验,测定样品中不同时间存活试验菌数lg值,并与初始接种lg值比较,判断抑菌效力.根据抑菌剂抑菌效力结果设计浓度梯度,对最适抑菌浓度进行考察.结果:添加苯扎溴铵的样品均符合抑菌效力A级要求,最适抑菌浓度为0.01～0.03 mg·mL-1;添加羟苯乙酯的样品符合抑菌效力B级要求,最适抑菌浓度为0.6～0.8 mg· mL-1;添加三氯叔丁醇的样品达不到抑菌效力B级要求,最适抑菌浓度为6.0～8.0 mg·mL-1.结论:市售萘敏维滴眼液苯扎溴铵添加过量,三氯叔丁醇添加不足,羟苯乙酯添加较为合理.建议厂家合理使用抑菌剂,以确保用药安全.

目的 改进JQ1的合成工艺.方法 以4-氯苯甲酰基乙腈为原料,与丁酮和硫在碱性条件下环合得到中间体V[(2-氨基-4,5-二甲基噻吩-3-基)(4-氯苯基)甲酮];中间体V再与9-芴甲氧羰基-天冬氨酸-β-叔丁基酯成酰胺后,脱保护得到中间体Ⅲ[(S)-3-氨基4-((3-(4-氯苯甲酰基)-4,5-二甲基噻吩-2-基)氨基)-4-氧丁酸叔丁酯],后者经环合、构建三唑环,得到目标化合物JQ1.结果与结论 通过1HNMR、13CNMR、MS及IR对目标产物进行了结构确证,HPLC检测其纯度达100％;以原料4-氯苯甲酰基乙腈计算,产物的总收率为21.2％.

目的 本课题组近年报道了非二噁英样多氯联苯化合物对哺乳动物细胞的致突变作用,且作用依赖于人细胞色素P450(CYP)2E1酶的代谢活化;本研究进一步探讨非二噁英样化合物2,4,4'-三氯联苯(PCB28)的致突变作用.方法 采用CCK8法、微核实验和Hprt致突变实验检测PCB28对中国仓鼠V79和重组表达人和硫酸基转移酶(SULT)1A1的V79衍生细胞(V79-hCYP2E1-hSULT1A1)的细胞毒性和遗传毒性,并利用酶抑制剂观察重组表达的酶对于受试物毒效应的影响.结果 PCB28(5～40 μmol/L)经12 h染毒、12 h恢复,对V79-Mz和V79-hCYP2E1-hSULT1A1细胞均无细胞毒作用,1-氨基苯并三唑(60 μmol/L,CYP抑制剂)和五氯苯酚(10 μmol/L,SULT1抑制剂)的与受试物同时暴露于V79-hCYP2E1-hSULT1A1细胞对细胞活力影响甚微.PCB28在5～20 μmol/L对V79-Mz细胞没有诱发微核的作用,但对V79-hCYP2E1-hSUT1A1细胞则明显增加其微核细胞率(P＜0.05),且具有浓度依赖效应;此作用可被1-氨基苯并三唑明显降低,而被五氯苯酚明显增强.PCB28(10～40 μmol/L)对V79-Mz细胞Hprt基因突变频率无影响,对V79-hCYP2E1-hSUT1A1细胞则诱发基因突变频率增加(P＜0.05),其作用呈浓度相关性.结论 PCB28可能经CYP2E1酶活化为致突变性代谢物,后者可由人SULT1A1酶代谢减毒;同其他非二噁英样多氯联苯类似,PCB28可能是一个由人CYP2E1酶活化的前致突变物.

目的 分析片形吸虫病的一般情况、临床表现、辅助资料、治疗及预后. 方法 收集2017年7月至2018年3月大理大学第一附属医院住院治疗的15例片形吸虫病患者的临床资料,总结并分析其一般情况、临床表现、治疗及预后等. 结果 15例片形吸虫病病例呈散在分布,分别来自普洱市(3例)、大理市(6例)、临沧市(5例)、丽江市(1例).男性4例,女性11例.临床首发症状主要为腹痛(11例)、发热(8例)、腹胀(5例)、乏力(3例)、体质量下降(4例)、纳差(2例)、恶心(2例)、呕吐(2例)等.病程在1 d至2年不等.秋季就诊患者为8例、冬季4例、夏季2例、春季1例.15例行血常规检查,12例嗜酸粒细胞百分比升高,9例中性粒细胞百分比降低,7例淋巴细胞百分比降低,7例血小板升高,6例白细胞升高.15例行肝功能检查,10例碱性磷酸酶升高,10例γ-谷氨酰转肽酶升高.12例行C反应蛋白检测,6例升高,最高为154 mg/L.12例行血沉检测,11例升高,最高为120 mm/h.2例患者粪便中找到片形吸虫卵.15例患者ELISA检测血清片形吸虫抗体均为阳性.上腹部CT表现为肝弥漫多发结节灶、斑片状病变,病变不强化或周边轻度强化.腹部超声提示肝不均质回声包块声像.2例患者肝穿刺组织病理检查可见大量嗜酸粒细胞浸润、淋巴细胞、嗜酸性脓肿和局部坏死.1例患者皮肤组织病理检查可见大量嗜酸粒细胞浸润,局部小血管壁内膜增厚.15例患者中有11例辗转至云南多家医院诊治,被误诊为肝脓肿(2例)、肝占位性病变(2例)、胆管癌(2例)、肝癌(1例)、肠炎(1例)、结缔组织病(1例)、嗜酸细菌性肺炎(1例)、腹腔结核(1例).确诊后15例患者均给予三氯苯达唑10 mg/(kg·d)×2d治疗,治疗后症状明显改善.出院后电话随访6个月,10例未失访患者预后良好. 结论 大理及周边地区仍存在人片形吸虫感染,且为散发,以秋冬季多见,患者临床表现无特异性,三氯苯达唑治疗片形吸虫病可取得较好的疗效,为首选治疗药物.

目的:设计合成6-氯喹唑啉类p21活化激酶4(PAK4)抑制剂,并对其酶抑制活性进行评价.方法:以2-氨基-5-氯苯甲酸为起始原料,经过环合反应、氯代反应、两次芳香亲核取代反应制得6-氯-2-胺基-4-[(3,5-二(三氟甲基))苄基]胺基喹唑啉类化合物(A类);以取代的甲酸乙酯为起始原料,经过Claisen缩合反应、环合反应、取代反应制得6-氯-2-胺基4.(1H-3-吡唑基)胺基喹唑啉类化合物(B类).采用HTRF技术测试目标化合物对PAK4的体外酶抑制活性.结果 与结论:合成了22个6-氯喹唑啉类衍生物,目标化合物的结构经ESI-MS和1H-NMR谱确证;初步体外酶活性测试结果表明,A类化合物的活性弱于先导化合物Cl-02(N4-3,5-双三氟甲基苄基-N2-环己基喹唑啉-2,4-二胺),B类化合物的活性优于先导化合物Cl-02,其中有8个化合物在1μmol·L-时对PAK4的抑制率达到50％以上,具有进一步研究的价值.

收集2011年11月-2018年11月云南省6地(市)片形吸虫病病例的临床资料.65例病例中,男28例,女37例.职业以农民为主,占64.6％ (42/65),民族以汉族为主,占89.2％ (58/65),病例主要来自大理地区,占72.3％ (47/65).65例病例均食过凉拌生菜,6例喝过生的山沟箐水.18例涉及5户家庭,有家庭聚集现象.全部病例均因不同程度发热、腹痛等就诊,血常规均提示嗜酸粒细胞增高,腹部彩超或CT(和/或)MRI检查结果示,以肝脏为主不同程度的脏器损害;粪检片形吸虫卵阳性率23.1％ (15/65),血清片形吸虫抗体检测强阳性58例,阳性7例,阳性率100％ (65/65).全部病例经三氯苯达唑治疗后发热、腹痛明显好转,血常规嗜酸粒细胞、肝脏等病变也恢复正常.

片形吸虫病是片形吸虫感染引起的一种人兽共患寄生虫病,该病是影响世界的主要公共卫生问题之一.三氯苯达唑(Triclabendazole,TCZ)是治疗片形吸虫病的首选药物,也是世界卫生组织推荐的唯一治疗片形吸虫病的药物,单剂量10 mg/kg对胆管内的成虫和通过肝脏迁徙的未成熟吸虫有效且疗效较好,同时疗程短和不良反应少.本文就其作用机理、临床疗效、不良反应等作扼要的介绍.

目的:改进LW33的制备工艺.方法:以2,4,6-三氯-5-嘧啶甲醛和环戊基肼盐酸盐为起始原料,通过3步反应合成了磷酸二酯酶9A(PDE 9A)抑制剂LW33{(S)-6-[1-(4-氯苯基)乙氨基]-1-环戊基-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-酮}.结果:目标产物结构经1H核磁共振(1H-NMR)、13C核磁共振(13C-NMR)和电喷雾质谱(ESI-HRMS)确证,纯度经高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法检测可达99.9％,路线总收率达43.6％.结论:改进后的制备工艺反应条件温和、操作简单、产物纯度好、收率高,适合用于工业化生产.

目的 观察三氯苯达唑对斯氏狸殖吸虫作用后体壁超微结构的改变.方法 将20只大鼠随机分成实验组和对照组,感染60 d后,实验组给予三氯苯达唑治疗,对照组不作治疗.用药3d后剖杀两组大鼠,回收虫体,作透射电镜观察.结果 实验组的虫体皮层消失,基质膜破坏;肌层坏死;细胞质线粒体变性,内质网扩张.对照组虫体体壁由外至内由皮层、外环肌、内纵肌及其皮层细胞组成;皮层从外至内由外质膜、基质及基质膜组成;肌层的肌纤维丝清晰,皮层细胞大,细胞核及细胞膜均清晰.结论 三氯苯达唑造成斯氏狸殖吸虫体壁超微结构损伤.