目的:应用三维(3D)组织学重建技术观察研究小鼠睾丸下降过程及其毗邻组织器官形态、位置的时序性变化。方法:取怀孕(GD)及出生后(PD)不同天数(GD15、GD17、GD19及PD3、PD7)雄性昆明小鼠肾脏平面以下整块组织连续切片、HE染色，再使用PerkinElmer全自动切片分析系统进行镜下图像全景扫描，Photoshop软件配准、对齐，3D-doctor软件进行3D重建及分析。结果:1．附睾将睾丸包绕其中，附睾尾部与睾丸引带相连，睾丸下极与睾丸引带未见有直接连接；孕期时，小鼠附睾各部分及输精管相互堆积成团，不易于辨认，睾丸引带发生"膨大反应"，出生后，附睾变大、拉长，在形态上可辨认，睾丸引带则退化成纤维索带样组织，在整个过程中，睾丸引带的体积在形态上明显小于睾丸的体积。2.双侧睾丸形态相近，位置不对称，左侧睾丸位置低于右侧，并先于右侧开始下降；孕期时，小鼠双侧睾丸从肾下极开始下降，左侧睾丸下降至膀胱下部位置，右侧睾丸下降至膀胱中部位置，出生后，左侧睾丸降至膀胱颈部以下，右侧睾丸降至膀胱颈部，最终是左侧睾丸位置低于右侧。3.附睾先于睾丸启动下降；在整个过程中，附睾尾部始终先于睾丸开始下降，附睾尾下降后拉动整个附睾下降，睾丸则沿着附睾体的下降路径进入阴囊，下降完全后，附睾尾始终位于睾丸之下。结论:小鼠睾丸的下降过程可能是睾丸引带首先牵引附睾尾部下降至内环口，附睾尾部及体部通过其形态改变不断扩张内环口及腹股沟管，并继续降入阴囊且扩大阴囊，睾丸及附睾头顺着附睾体通过扩大的内环、腹股沟管进入阴囊。

目的:介绍"股骨髁间孔"、"胫骨髁间隆突孔"的发现及命名，并探讨膝关节周围侵袭性肿瘤术后高复发率与膝关节周围孔道结构的关系。方法:影像学观察、测量：收集我院影像中心数据库200例患者的CT扫描三维重建资料，观察"股骨髁间孔"、"胫骨髁间隆突孔"、"股骨髌股关节面上孔"的普遍性，并进行影像学定位、测量。解剖及组织学观察：通过15例车祸或肿瘤截肢新鲜标本及60例尸体解剖，实物证明其存在，并对"股骨髁间孔"、"胫骨髁间隆突孔"具体位置、孔道周围结构、孔道近端覆盖情况、孔道内容物、孔口、孔壁及孔底组织进行研究分析。切取瘤段解剖、组织及病理学观察：通过对股骨远端及胫骨恶性肿瘤切取瘤段的研究，包括原发以及骨转移瘤通过此通路向骨内传播转移，通过解剖与组织学以及影像学分析，观察孔道结构与肿瘤的关系；判断肿瘤通过孔道隐匿及双向传播情况；肿瘤复发与孔道结构的相关性分析。病变孔口滑膜分析，尤其影像疑似滑膜受累及的病例，观察滑膜是否肿瘤浸润。结果:"股骨髁间孔"、"胫骨髁间隆突孔"是人体固有的生理存在，200例均观察到该结构，其生理功能为膝中动脉分支进入股骨髁间窝及胫骨髁间隆突（孔）的血管孔；股骨髁间孔"、"胫骨髁间隆突孔"孔口与关节腔之间由滑膜组织间隔，并且其由滑膜组织、半月板及交叉韧带与关节腔形成立体间隔。膝关节侵袭性肿瘤侵犯到孔道结构后，并非即刻突入关节腔，而在孔道中隐匿，以其特定的生物学行为对滑膜进行侵犯，滑膜病变顺序：反应性水肿、增厚，退变、钙化、玻璃样变（部分病例观察到浸润），滑膜破裂，肿瘤侵犯关节腔。往往在滑膜破裂之前，临床上已观察到肿瘤或观察到肿瘤复发。肿瘤有沿膝中动脉传播至腘血管及周围软组织、淋巴管的趋势，影像表现为腘血管周围淋巴结肿大。色结、其他部位肿瘤也可经此孔道侵入或转移至骨内。结论:"股骨髁间孔"、"胫骨髁间隆突孔"是膝中动脉分支的滋养孔，是人体固有结构，这组特定的孔道结构是膝关节周围侵袭性肿瘤很重要的传播、隐匿途径及复发因素。

目的:建立基于胚胎融合面的胰头三维影像学重建模型，提供胰头形态学测量参数，为胰腺的基础与临床研究提供帮助。方法:根据腹胰、背胰的组织学特点进行胰腺胚胎融合面的组织学定位，进一步将该组织学定位应用于CT影像学定位。在此基础上，以南京医科大学附属常州第二人民医院就诊的志愿者为研究对象，应用三维可视化重建软件进行基于CT影像的包括腹胰、背胰头部和胚胎融合面等结构在内的胰头三维重建，同时对胰头各相关结构进行形态学测量。结果:正常胰头组织免疫组化检测验证了早前关于定位胚胎融合面的报道，CT断层结构上能够进行胚胎融合面的大体定位。成功建立了基于胚胎融合面的胰头三维重建模型，该模型可直观显示腹胰、背胰头部和胚胎融合面等结构。共纳入35例志愿者，包括男性19例，女性16例，年龄(48.26±8.26)岁，BMI(22.29±1.78)kg/m 2。形态学测定结果表明，胰头、背胰头部及腹胰体积分别为(32.80±8.15)cm 3、(22.21±6.94)cm 3、(10.59±3.87)cm 3，胚胎融合面面积为(12.46±3.20)cm 2。将所有志愿者依据性别分组，统计学分析表明组间胰头总体积、背胰头部体积、腹胰体积及胚胎融合面积等差异均无统计学意义( P>0.05)。 结论:基于胚胎融合面的胰头三维可视化重建是可行的，该模型的建立及相关形态学参数可为胰腺的基础与临床研究提供帮助。

目的:使用精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽(RGD)修饰骨仿生支架并探究其应用于大鼠股骨缺损区的成骨性能.方法:通过三维(3D)打印技术制备聚乳酸-羟基磷灰石支架(PLA-HA),在其表面修饰甲基丙烯酰化明胶(GelMA)和RGD构建复合水凝胶支架PLA-HA/GelMA/RGD(PHD),扫描电镜(SEM)表征支架表面形貌,CCK-8实验评估骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖能力.将18只SD大鼠随机均分为3组(n=6)制备股骨缺损模型,分别植入PLA-HA/GelMA(PHG)、PHD支架,空白对照组不植入.于术后4周拍摄Micro-CT测算骨缺损面积和新生骨指标,并对缺损区的股骨样本进行HE染色和Masson三色染色观察组织学形态.结果:SEM观察到支架和水凝胶孔径明显,同时水凝胶稳健的连接到支架表面;CCK-8结果显示与PHG组相比,PHD组显示细胞增殖活性更佳.术后4周,Micro-CT三维重建图像显示空白组和PHG组新骨形成较少,PHD组骨缺损内部见大量新骨形成,同时定量分析发现该组骨体积分数、骨小梁厚度均显著大于空白组和PHG组.组织学染色结果显示PHD组形成连续且致密的骨组织.结论:负载RGD的PLA-HA骨仿生支架在体外具有促进成骨细胞增殖的能力,同时在体内诱导大鼠股骨缺损区新骨形成,成功地实现了早期骨缺损修复.

目的:研究自组装类釉原蛋白两亲性寡肽的骨缺损修复作用.方法:构建具有黏附特性的自组装类釉原蛋白寡肽纳米凝胶、骨髓间充质干细胞(BMSCs)细胞膜片和大鼠股骨骨缺损模型,将SD大鼠随机分为空白对照(Control)组、BMSCs种子细胞膜片(Cell sheet)组、类釉原蛋白寡肽生物支架(OPA scaffold)组、BMSCs种子细胞膜片+类釉原蛋白寡肽生物支架(Cell sheet/OPA scaffold)组,将各组材料填充于股骨骨缺损处,在术后8周分别通过大体观察、微型CT扫描重建及组织学来评估骨缺损修复情况.结果:术后大体标本观察发现4组均有不同程度骨修复,Cell sheet组缺损区大致轮廓仍清晰可见且缺损区仍较深,骨修复最差.与Control组相比,其余两组骨修复较好,以Cell sheet/OPA scaffold组骨缺损区域修复最好,缺损轮廓已不明显.微型CT三维重建及定量分析结果显示,Cell sheet组新骨生成率低于Control组(P＜0.05);OPA scaffold组和Cell sheet/OPA scaffold组新骨生成率优于Control组(P＜0.05),两组缺损区域都有较高的骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、相对骨体积(BV/TV)、连接密度(Conn.D)和较低的骨小梁分离度(Tb.Sp),其中以Cell sheet/OPA scaffold组最高.组织学结果显示,OPA scaffold组和Cell sheet/OPA scaffold组有较多趋向成熟的骨小梁生成,Control组和Cell sheet组有少量趋向成熟的骨小梁生成.结论:自组装类釉原蛋白寡肽纳米凝胶具有很好的成骨能力及骨缺损修复能力,具有作为骨组织工程支架材料的潜力加以进一步研究.

目的:探究磷酸化聚酰胺-胺(P-PAMAM)树状大分子交联胶原蛋白支架在体内成骨效能.方法:通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)对P-PAMAM进行表征,扫描电镜对胶原蛋白支架、聚酰胺-胺(PAMAM)复合胶原蛋白支架及P-PAMAM复合胶原蛋白支架进行形态表征.将 3 种复合支架植入SD大鼠颅骨骨缺损后,使用Micro-CT三维重建分析骨愈合过程中骨质、骨量的变化,采用HE染色及Masson染色对大鼠颅骨标本进行组织学分析.结果:FTIR显示PAMAM被成功磷酸化;扫描电镜显示,复合支架均具有良好的孔隙;体内成骨实验显示,与胶原蛋白支架和PAMAM复合胶原蛋白支架相比,P-PAMAM复合胶原蛋白支架具有更好的成骨诱导作用.结论:P-PAMAM树状大分子复合胶原蛋白支架在体内具有促进成骨作用.

目的:探讨构建一种观测小鼠股骨种植体周围骨血管的改良方法，并分析局部血管在种植体周围骨愈合过程中时空变化规律。方法:对C57BL/6小鼠双侧股骨进行血管阻射剂灌注，并应用显微计算机断层扫描（Micro-CT）技术对种植体周围血管进行扫描，定量分析三维血管结构与分布的相关参数。其中左侧股骨干骺端在灌注前作种植体骨结合模型（灌注实验组），右侧股骨干骺端未行手术（空白对照组）。同步术后观察时间点1、3、7和14 d，采用组织学检测作为Micro-CT结合血管灌注改良观测方法的验证（组织学对照组）。通过空白对照组排除各时间点样本原始血管的差异，采用单因素方差分析结合Turkey′s法对灌注实验组进行各时间点之间种植体周围血管数据参数的比较。结果:通过采用推出种植体的脱钙骨组织样本、筛选扫描重建参数的改良Micro-CT结合血管灌注方法，发现相较于空白对照组，灌注实验组种植体周围血管的血管总体积、血管体积分数及血管管径在术后7 d均较术后1、3和14 d有统计学差异。其中，术后7 d的血管体积（F = 14.340，P1 d<0.001，P3 d = 0.001）、血管体积分数（F = 16.230，P1 d<0.001，P3 d<0.001）、血管管径（F = 9.427，P1 d = 0.006，P3 d = 0.002）显著高于术后1、3 d；术后7 d的血管分支数量显著高于术后1 d（F = 4.723，P1 d = 0.019）；但术后14 d植体周围组织血管结构参数相较于术后7 d出现显著下降，其中血管体积分数下降了58%（F = 16.230，P = 0.006），血管平均管径下降了35%（F = 9.427，P = 0.041）。组织学对照组与灌注实验组观察结果趋势一致。结论:改良Micro-CT扫描重建结合血管灌注方法为观测种植体周围血管时空分布提供一种低成本可靠的途径；种植体骨结合过程中种植体周围血管经历先增加再衰退的过程，在术后1周的高峰期可形成侧支循环围绕种植体。

类器官是成体干细胞或多能干细胞体外三维培养形成具有特定结构的组织类似物,与对应的器官具有高度相似的组织特性和生理功能.肿瘤类器官能够很好地保留癌症患者体内肿瘤的组织学和突变特征,在构建肿瘤类器官样本库、重建肿瘤微环境、研究肿瘤的发生发展机制以及制定个性化治疗方案和药物筛选等方面发挥了重要的作用,但目前仍存在着一些因素限制了肿瘤类器官的进一步发展.综述类器官技术在肿瘤基础研究和临床转化中的应用及面临的挑战,并对未来肿瘤类器官的发展方向予以展望.

目的 探讨CGF对促进大鼠下颌骨联合部成骨的作用及机制研究.方法 24只SD大鼠随机分为三组,于大鼠下颌骨联合部缺损处分别填满:单纯Bio-Oss胶原骨(胶原骨组);Bio-Oss胶原骨并于表面覆盖CGF凝胶(CGF+胶原骨组);单纯CGF凝胶(CGF组).分组手术第3、6个月后,分两批处死大鼠.离体标本拍摄micro-CT,通过三维重建及截断面比较各组间放射学表现,按标准评分后进行统计学分析.标本拍摄micro-CT完成后脱钙处理,制作组织学切片,观察比较各组间的差异.结果 结果表明第3个月时,CGF+胶原骨组评分要明显高于CGF组和胶原骨组(P=0.026 6,P=0.026 6),而CGF组和胶原骨组间差异无统计学意义;第6个月时,CGF+胶原骨组评分与CGF组和胶原骨组相比,具有显著优势(P=0.002 1,P=0.010 1),而胶原骨组评分看似优于CGF组,却差异无统计学意义.通过HE染色发现,CGF+胶原骨组在第3个月时评分显著优于CGF组和胶原骨组(P=0.003 8,P=0.003 8),而CGF组和胶原骨组间差异无统计学意义;第6个月时,与CGF组和胶原骨组相比,CGF+胶原骨组评分依然具有显著优势(P=0.008 2,P=0.019 4),胶原骨组评分略微高于CGF组,然而在统计学分析上无显著差异.结论 CGF与胶原骨联合使用可以明显促进骨缺损的修复,但单独使用CGF对大范围骨缺损的效果并不理想.

目的:三维重建小鼠牙发育早期牙胚的形态结构,对比无牙区发育不全的牙胚(rudimentary bud 2,R2)与磨牙区第一磨牙(the first molar,M1)牙胚的形态差异.方法:选取胚胎 12.5 d(E12.5)及胚胎 13.5 d(E13.5)小鼠胚胎头部标本,经冠状面连续石蜡切片、苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色后,获取组织学图像数据.图像经Photoshop CC 2018 软件处理并配准,用Fiji软件再配准与赋予虚拟CT值后,导入Mimics Research 19.0 软件进行三维重建和分析.结果:在重建的三维图像中观察到无牙区R2 上皮可向间充质内陷形成蕾状,但其下方无明显的间充质细胞团形成.赋予无牙区R2 和磨牙区M1 虚拟CT值后,对重建图像进行半定量测量,发现凝聚在无牙区R2 蕾状上皮周围的间充质细胞密度较低,凝聚面积较小.此现象可能与无牙区细胞增殖不如磨牙区活跃有关.结论:基于组织学切片的三维重建结果提示,发育早期小鼠无牙区丧失了形成间充质细胞团的能力.