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生存素下调瘦素水平并改善肥胖小鼠的瘦素敏感性
编辑人员丨2天前
目的:探讨生存素对瘦素转录调控及其敏感性的影响。方法:用慢病毒构建过表达生存素的脂肪细胞模型,以RNA测序(RNA-seq)探讨生存素对脂肪细胞分泌蛋白表达调控的影响;通过腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)定点注射的方法在小鼠腹股沟脂肪组织(inguinal adipose tissue, iWAT)中实现过表达生存素,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测瘦素、脂联素等转录水平,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清、小鼠血清中瘦素、脂联素分泌水平。用Western印迹法检测下丘脑信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)磷酸化水平,分析生存素对中枢瘦素敏感性的影响。结果:3T3-L1脂肪细胞及原代脂肪细胞中,过表达生存素在未影响脂肪细胞分化时,均可显著下调瘦素转录水平( P<0.01)。过表达生存素在未影响细胞上清中脂联素水平的同时,使瘦素水平显著下降( P<0.001)。同样,由注射AAV实现的小鼠iWAT中过表达生存素不仅可下调局部脂肪组织中瘦素转录水平,还可导致小鼠血清中瘦素分泌水平的下降( P<0.05)。在短期高脂饲料喂养小鼠中,iWAT过表达生存素小鼠下丘脑STAT3磷酸化水平增加,提示瘦素中枢敏感性改善。 结论:脂肪中过表达生存素可下调瘦素转录及分泌水平,改善高脂饲料喂养肥胖小鼠瘦素敏感性。
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编辑人员丨2天前
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异基因造血干细胞移植后Wernicke脑病1例
编辑人员丨2天前
患者,女,40岁,2020年1月诊断为"骨髓增生异常综合征EB-2(WPSS评分3分)",分别于2020年1月、2020年3月和2020年5月应用地西他滨去甲基化治疗。移植前骨髓原始粒细胞占0.020,微小残留病(MRD)0.77%,WT1基因定量18.658%,NPM1-A基因突变定量1.244%。预处理方案:阿糖胞苷4 g·m -2·d -1,移植前10 d(-10 d)、-9 d,地西他滨20 mg·m -2·d -1,-10 d~-6 d,白消安3.2 mg·kg -1·d -1,-8 d~-6 d,环磷酰胺1.8 g·m -2·d -1,-5 d、-4 d,兔抗人胸腺细胞球蛋白2.5 mg·kg -1·d -1,-5 d~-2 d,司莫司汀250 mg/m 2,-3 d,移植物抗宿主病(GVHD)预防方案:西罗莫司、霉酚酸酯联合短程甲氨蝶呤。患者于2020年8月18日行单倍型造血干细胞移植(女供母,HLA 6/12,AB+供A+),回输供者外周血干细胞单个核细胞(MNC)9.63×10 8/kg,CD34 +细胞3.84×10 6/kg。移植后11 d(+11 d)粒细胞及血小板植活。+3 d患者发生呕血,给予禁食水、抑酸治疗。患者高热,血培养、病毒、细菌、真菌筛查均为阴性,给予广谱抗生素抗感染治疗后体温未降。+8 d,患者出现皮疹。+9 d,患者发生上腹部烧灼感伴腹泻,考虑急性GVHD,加用甲泼尼龙2 mg·kg -1·d -1,体温降至正常。+13 d,患者血脂明显升高(甘油三酯38.18 mmol/L,总胆固醇8.65 mmol/L)。患者间断恶心、呕吐伴上腹不适,+14 d,患者出现乳糜血(甘油三酯41.70 mmol/L,总胆固醇7.49 mmol/L),停西罗莫司(此时西罗莫司浓度17.7 μg/L),改为环孢素A治疗GVHD,甘油三酯降至3.80 mmol/L,总胆固醇降至6.15 mmol/L。+25 d,患者出现嗜睡,恶心、呕吐好转,血巨细胞病毒、EB病毒DNA阴性,环孢素A浓度165.5 μg/L。+26 d,患者昏睡,定向力、计算力障碍、四肢肌力下降,腰穿脑脊液压力100 mmH 2O,氯114.3 mmol/L,葡萄糖8.30 mmol/L,蛋白0.55 g/L。脑脊液细菌培养、真菌培养及抗酸杆菌均阴性,脑脊液神经免疫病检测:血清和脑脊液中AQP4、MOG、MBG抗体均为阴性。脑脊液和外周血病毒PCR筛查均阴性,脑脊液病原体二代测序(NGS)阴性。TMA筛查阴性。头颅平扫+增强磁共振成像(MRI):双侧颞叶深部(海马区)及室管膜下区、左侧颞叶皮层多发异常信号并下丘对侧斑片明显强化灶。右侧小囊幕增厚并明显强化。结合患者近1个月进食差,伴有恶心、呕吐、腹泻,考虑不除外Wernicke脑病,给予维生素B 1 200 mg每8 h 1次治疗,+27 d患者神志转清,肢体肌力明显好转。患者维生素B 1<1.0 μg/L,明确诊断为Wernicke脑病,继续补充维生素B 1治疗。复查头颅MRI:双侧颞叶(及海马区)及室管膜下区多发异常信号并双侧下丘、右侧小脑幕明显强化灶,较前部分病变信号明显减低,范围减小。+30 d,复查骨髓完全缓解(CR),MRD阴性,NPM1基因突变阴性,短串联重复序列-聚合酶链反应(STR-PCR)完全供者型。+36 d,间断谵妄,给予奥氮平对症治疗后好转,+50 d,患者谵妄好转,停用奥氮平。随访至移植后8个月,患者无明显神经、精神症状及体征,环孢素A血浓度50 μg/L,原发病处于完全缓解状态,MRD阴性,STR-PCR完全供者型。头颅MRI:双侧颞叶(及海马区)及室管膜下区多发异常信号并双侧下丘脑、右侧小脑幕病变强化灶明显减低,范围明显缩小。
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编辑人员丨2天前
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p-STAT3在成釉细胞型颅咽管瘤中的表达及其意义
编辑人员丨2天前
目的:探讨磷酸化信号传导蛋白和转录激活物3(p-STAT3)在成釉细胞型颅咽管瘤(ACP)中的表达情况及其意义。方法:ACP组织标本来源于南方医科大学南方医院神经外科行手术切除的12例颅咽管瘤患者。通过苏木素-伊红(HE)染色明确ACP标本的组织学形态特征。通过免疫荧光染色方法检测p-STAT3、pan-CK、β-catenin及E-cadherin在肿瘤组织中的表达情况。原代培养ACP细胞,设立实验组[以STAT3抑制剂隐丹参酮(5.0 mmol/L)处理]、阴性对照组(以DMSO处理)以及空白组(ACP原代细胞,未予处理),采用划痕实验检测细胞的迁移能力,采用Transwell实验检测细胞的侵袭能力。设立低剂量抑制剂组(以2.5 mmol/L隐丹参酮处理)、高剂量抑制剂组(以5.0 mmol/L隐丹参酮处理)以及阴性对照组(以DMSO处理),通过CCK-8实验检测各组细胞的增殖能力。通过蛋白质免疫印迹法检测应用隐丹参酮后上皮-间质转化相关指标(包括转录因子Slug、Twist、E-cadherin以及N-cadherin)的变化情况。结果:HE染色结果显示,12例ACP组织中,ACP与下丘脑组织之间可形成"卯榫"样结构。免疫荧光染色结果显示,"卯榫"样结构内的涡轮状细胞中,p-STAT3呈阳性表达、pan-CK呈阴性表达、β-catenin出现核转移,而E-cadherin的表达明显下调。划痕实验结果提示,实验组细胞的迁移能力明显较其他两组降低[空白组、阴性对照组和实验组的迁移距离分别为(282±44)μm、(290±61)μm和(170±11)μm, P<0.05]。处理72 h后,Transwell实验结果提示,实验组穿过Transwell小室的细胞数较其他两组更少[空白组、阴性对照组和实验组的穿膜细胞数分别为(95±14)个、(104±11)个和(57±14)个, P<0.05]。CCK-8实验结果表明,隐丹参酮对ACP原代细胞增殖能力的抑制作用呈时间和剂量依赖性(均 P<0.05)。Western blot结果显示,利用不同浓度隐丹参酮处理ACP原代细胞后,Slug、Twist和N-cadherin的表达下降(均 P<0.01),而E-cadherin的表达升高(均 P<0.001)。 结论:p-STAT3可在ACP与下丘脑之间形成的"卯榫"样结构内的涡轮状胞中表达,其介导的上皮-间质转化可能是ACP中下丘脑受累的原因,p-STAT3有可能成为治疗ACP的潜在靶点。
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编辑人员丨2天前
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基于肠脑轴探讨复方熊胆茵陈颗粒对代谢相关脂肪性肝病大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响
编辑人员丨2天前
目的:研究复方熊胆茵陈颗粒对代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)大鼠肠、脑及下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的影响。方法:SD大鼠50只随机分为正常对照组、模型对照组、复方熊胆茵陈颗粒低剂量组、中剂量和高剂量组,正常对照组给予基础饲料喂养、模型对照组与中药组以高脂饲料喂养,为期6周。造模成功后复方熊胆茵陈颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组予以复方熊胆茵陈颗粒(按原药材计4.73、9.46、18.92 g·kg -1·d -1)灌胃,正常和模型组给予2 ml生理盐水灌胃,共4周。灌胃4周后取材,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝、结肠组织和下丘脑组织病理变化,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、免疫组化检测结肠、下丘脑中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(CORT)的表达。 结果:HE染色结果显示,复方熊胆茵陈颗粒组大鼠肝细胞的脂肪空泡减少、肝索排列整齐、肝小叶清晰可见,较模型对照组明显改善;复方熊胆茵陈颗粒组大鼠结肠壁各层结构基本整齐,黏膜下层炎性细胞浸润减少,较模型对照组明显改善;复方熊胆茵陈颗粒组下丘脑神经细胞水肿减轻、固缩减少。实时荧光定量PCR检测结果显示,与模型对照组比较,中药中、高剂量组结肠组织CRH、ACTH、CORT降低(均 P<0.05),中药高剂量组下丘脑组织CRH、CORT、ACTH表达降低(均 P<0.05)。免疫组化检测结果显示,复方熊胆茵陈颗粒能降低结肠组织和下丘脑组织中CRH、ACTH、CORT蛋白的表达(均 P<0.05)。 结论:复方熊胆茵陈颗粒能改善MAFLD大鼠肝组织损伤,减轻肠道炎症反应、改善肠黏膜屏障,减轻下丘脑神经细胞肿胀、固缩,减少MAFLD大鼠结肠及下丘脑中CRH、ACTH、CORT的分泌,提示复方熊胆茵陈颗粒治疗MAFLD的作用机制可能与改善HPA轴功能紊乱有关。
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编辑人员丨2天前
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垂体疾病的规范化诊治
编辑人员丨2天前
垂体疾病是指各种垂体本身结构和功能异常导致的疾病,通常泛指包括蝶鞍及其周围解剖区域在内的对垂体结构和功能产生影响的疾病,按照病变的性质可以包括多种类型,如肿瘤性疾病(如垂体瘤、颅咽管瘤、生殖细胞肿瘤、脊索瘤、淋巴瘤、组织细胞增生症、转移性肿瘤等)、炎症性疾病(如原发性垂体炎、继发性垂体炎、垂体脓肿等)、囊肿性疾病(如Rathke囊肿、蛛网膜囊肿等) [1]。垂体疾病可影响垂体和下丘脑的正常功能,导致激素分泌过多或过少,影响生长发育、生殖、能量代谢、水与电解质平衡的调控,引起一系列相关的症状;垂体疾病还可波及鞍区及其周围的重要解剖结构,如颅神经、视交叉,引起视力下降、动眼障碍等症状。垂体疾病的治疗应根据疾病性质的不同,对垂体及其靶腺功能产生不同的影响,由包括内分泌科、神经外科、病理科、影像医学科和放射治疗等在内的多学科团队进行规范化、个体化的诊疗。
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编辑人员丨2天前
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瘦素对肥胖小鼠下丘脑神经元活性及脂肪组织代谢的影响
编辑人员丨1个月前
目的 探讨瘦素对肥胖小鼠下丘脑神经元活性的影响,以及对脂肪组织脂质代谢的作用.方法 选取10只瘦素基因纯合突变(ob/ob)小鼠和同窝出生的10只野生型(WT)小鼠作为研究对象,随机分为对照组和瘦素治疗组.通过免疫荧光染色、HE染色和Real-time PCR分析小鼠阿黑皮质素原(POMC)神经元和酪氨酸羟化酶(TH)神经元活性、脂肪组织形态变化及脂质相关基因的表达.结果 与WT小鼠相比,ob/ob小鼠POMC神经元和TH+神经元活性显著降低,脂肪组织和肝脏组织细胞直径明显增大,皮下白色脂肪中产热相关基因解耦联蛋白1(UCP1)、细胞色素C氧化酶亚基8b(Cox8b)和细胞死亡激活剂CIDE-A(Cidea)的表达显著降低,脂质合成相关基因固醇调节元件结合蛋白1(Srebp1)和脂肪酸合酶(Fas)的表达显著升高;瘦素治疗后,WT和ob/ob小鼠POMC神经元和TH+神经元活性增加,ob/ob小鼠脂肪组织和肝脏组织细胞直径明显减小,空泡变性程度降低,褐色脂肪组织产热相关基因和脂解相关基因的表达显著升高,脂质合成相关基因的表达显著降低.结论 瘦素通过激活ob/ob小鼠下丘脑POMC神经元和外周脂肪组织交感神经系统,抑制食物摄入,增加脂肪降解并降低脂质合成作用,从而改善脂肪白色化并抑制肥胖的发展.
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编辑人员丨1个月前
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多发性骨髓瘤伴心脏淀粉样变性并继发性肾上腺皮质功能减退症1例
编辑人员丨2024/6/15
多发性骨髓瘤是一种浆细胞恶性增殖性疾病,部分患者可合并系统性淀粉样变性,心脏淀粉样变性是该类患者常见的死亡原因.继发性肾上腺功能不全是由下丘脑和/或垂体功能障碍所致,而多发性骨髓瘤患者合并继发性肾上腺皮质功能减退症的病例在国内鲜见报道.患者,55岁,男性,2018年6月5日因"反复胸闷、乏力7个月,晕厥1 h"就诊于深圳市罗湖区人民医院急诊科,后转入血液内科,经骨髓穿刺等检查明确诊断为多发性骨髓瘤(λ轻链型)伴系统性淀粉样变性.化学治疗(化疗)第1疗程方案为硼替佐米、环磷酰胺和地塞米松,疗程结束后患者肺部出现细菌与真菌混合感染,经治疗后好转.第2疗程开始方案调整为硼替佐米和地塞米松,第4疗程后患者多发性骨髓瘤即达到完全缓解;第5疗程后患者再次发生严重肺部混合感染,治疗后好转,但后续出现顽固性低血压,皮质醇和促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)水平下降,诊断为继发性肾上腺皮质功能减退症,予以氢化可的松替代治疗.患者接受9个化疗疗程后,以伊沙佐米维持治疗,多发性骨髓瘤评估为严格意义的完全缓解状态,心脏淀粉样变性疗效评估为非常好的部分缓解;继发性肾上腺皮质功能减退症以氢化可的松维持治疗,皮质醇水平在正常范围内.
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编辑人员丨2024/6/15
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杜仲补天素丸对肾阴虚小鼠的影响
编辑人员丨2024/5/25
目的 研究杜仲补天素丸对肾阴虚小鼠的影响.方法 采用灌胃复方利血平片和甲状腺片的方法制备肾阴虚模型,测定小鼠体温,痛阈值,力竭游泳时间,血清甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、环磷酸鸟苷(cGMP)、环磷酸腺苷(cAMP)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素 6(IL-6)、还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平,乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性.结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数、痛阈值、力竭游泳时间、血清 cGMP、GSH 水平和 LDH、SOD 活性降低(P<0.05,P<0.01),血清 T3、T4、cAMP、ACTH、CRH、IFN-γ、IL-6、MDA水平升高(P<0.05,P<0.01),肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,杜仲补天素丸组小鼠胸腺指数、脾脏指数、痛阈值、力竭游泳时间增加(P<0.05,P<0.01),血清cGMP、GSH水平和LDH、SOD活性升高(P<0.05,P<0.01),血清T3、T4、cAMP、ACTH、CRH、IFN-γ、IL-6、MDA水平(P<0.05,P<0.01)及肝组织Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性降低(P<0.05,P<0.01).结论 杜仲补天素丸能够改善肾阴虚小鼠的基础代谢起到抗疲劳作用,调节甲亢型肾阴虚小鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴和下丘脑-垂体-甲状腺轴功能,改善免疫功能.
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编辑人员丨2024/5/25
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基于淫羊藿治疗下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤药物有效化学成分及其作用靶点的网络药理学与分子对接技术分析
编辑人员丨2023/11/18
目的:采用网络药理学方法联合分子对接技术分析淫羊藿治疗下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤药物有效化学成分及其作用靶点,并初步阐明其作用机制.方法:采用中药系统药理学(TCMSP)数据库和分析平台结合相关文献资料获取淫羊藿的有效化学成分及其对应的靶点蛋白,采用Uniprot数据库将靶点蛋白信息标准化得到对应的标准基因名,检索GeneCards 数据库和DisGeNET数据库收集下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤的相关靶点基因,采用Cytoscape 3.7.1软件绘制淫羊藿有效化学成分和疾病作用靶点关系的网络图,采用STRING数据库绘制药物与疾病的交集靶点的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图,采用基迪奥生物信息平台(OmicShare)进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,采用Pymol软件和Autodock Tools软件进行淫羊藿药材有效化学成分与下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤靶点蛋白的分子模拟对接和可视化.结果:筛选得到27个淫羊藿有效化学成分和217个相对应作用靶点,下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤靶点基因465个,其中62个靶点基因与淫羊藿治疗下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤有密切关联.得到淫羊藿关键有效成分为槲皮素、木樨草素、山柰酚和淫羊藿苷等,关键靶点蛋白为含半胱氨酸的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、白细胞介素6(IL-6)、低聚糖(FOS)、肿瘤坏死因子(TNF)、低氧诱导因子1α(HIF1A)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素1B(IL-1β)、雌激素受体1(ESR1)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)等.KEGG信号通路富集分析,其共同靶点主要富集于免疫炎症、激素调节和能量代谢等相关通路上.分子对接,淫羊藿中的潜在有效成分与IL-6、PTGS2、醛糖还原酶(AR)和促分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)等靶点蛋白有较好的亲和作用.结论:淫羊藿可通过多靶点和多通路在抗炎免疫、激素调节及能量代谢等方面对下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤发挥潜在的治疗作用.
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编辑人员丨2023/11/18
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下丘脑对CSA模型大鼠调控的基因表达谱分析
编辑人员丨2023/8/6
目的:分析椎动脉型颈椎病(CSA)模型大鼠下丘脑组织差异基因表达谱变化,探讨下丘脑对CSA的调控机制.方法:将10只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为模型组和正常组,采用复合造模法建立CSA模型,模型成功后取下丘脑组织,提取总RNA,用全基因芯片检测基因表达谱,筛选差异基因,本体论(GO)、信号通路分析.结果:与正常组比较,差异基因表达谱分析显示:差异基因总数为246个(|fold change|>2,P<0.05),其中表达上调的基因有150个,下调的有96个;富集的GO功能共有1301条,涉及对血管形成、神经细胞功能、对外界刺激、细胞黏附、细胞增殖及细胞膜活性的调节等;参与调节的信号通路共有109条,包括脂类代谢、Ras、有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)、血小板活化、环-磷酸腺苷(cAMP)、FcγR-介导的吞噬作用信号通路等.结论:下丘脑对CSA的调控机制主要是对血管形成、神经功能、对刺激的应激反应等的调节.
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编辑人员丨2023/8/6
