目的 构建中国地鼠口腔颊黏膜癌(OSCC)中差异表达的miRNA和mRNA表达谱,初步预测与OSCC发生发展相关的miRNA和mRNA.方法 运用新一代高通量测序技术构建miRNA和mRNA表达谱,通过Gene Ontology功能富集和KEGG Pathway分析预测与OSCC发生发展相关的miRNA和mRNA.结果 成功构建中国地鼠口腔颊黏膜癌中差异表达的miRNA和mRNA表达谱,共发现11个已知miRNA、3个新miRNA显著性差异表达和194个mRNA差异表达,且一个miRNA可调控多个mRNA,多个miRNA靶向调控某个mRNA.结论 本实验OSCC中差异表达的miRNA通过调控mRNA形成复杂的调控网络,在口腔癌的发生发展中发挥重要作用,为口腔癌的发生、发病机制,及临床治疗及预后判断提供理论依据.

中国地鼠是我国具有研究价值的特色实验动物资源,在医学、遗传学和生物制药等研究领域都发挥着重要作用.随着研究的深入,越来越多的中国地鼠生物学特性被发现,目前建立了诸多的中国地鼠模型.本文对中国地鼠的开发研究过程及其在分类学和医学研究中的应用作简要概述.

目的 建立结肠小袋纤毛虫快速鉴定方法,进行国内实验动物感染调查,为国家标准的修订提供参考依据.方法 选择2012年12月～2017年12月期间全国60个不同厂家的14964只实验动物(包括:猴382只,小型猪725只,犬806只,兔1517只,地鼠422只,豚鼠1545只,大鼠1489只,小鼠8053只,鸡25只)作为调查对象.应用实时动态显微技术识别结肠小袋纤毛虫病原体.利用PCR和测序技术鉴定结肠小袋纤毛虫ITS,18S rRNA和SSU RNA基因.结果 通过实时动态显微技术,在这些样本中发现了少量的结肠小袋纤毛虫滋养体和包囊.通过PCR扩增和测序鉴定ITS,18S rRNA和SSU RNA基因的分子特性证明了样本中结肠小袋纤毛虫的存在.2012年12月～2017年12月期间,对14964只实验动物调查结果显示,结肠小袋纤毛虫感染率为0.03％(4/14964).结论 实时动态显微技术、PCR和测序技术相结合可完成实验动物的结肠小袋纤毛虫检验工作.国内实验动物中存在结肠小袋纤毛虫感染.因此,建议设计合理的筛查程序用于防止动物传播的结肠小袋纤毛虫病.有必要开发新的诊断工具,特别是快检技术用于这一重要人兽共患病的未来研究.

目的 探讨miR-34c在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织及细胞中的表达及其对口腔癌细胞生物学行为的影响.方法 qPCR检测中国地鼠口腔癌组织中miR-34c的表达水平,脂质体RNAiMAX介导miR-34c模拟物组(miRNA-34c mimics)和miR-34c抑制物组(miRNA-34c inhibitor)转染Tca8113细胞,并通过CCK-8和划痕实验检测调控miRNA-34c表达对Tca8113细胞活力及迁移能力的影响.结果 与正常组相比,中国地鼠口腔癌组miRNA-34c表达水平显著升高.miR-34c模拟物组Tca8113细胞增殖能力显著减弱(P<0.01),迁移能力降低不明显.miRNA-34c抑制组miRNA-34c的表达显著下调,细胞的增殖能力和迁移能力显著增强(P<0.05).结论上调miRNA-34c表达能有效抑制口腔癌细胞增殖,迁移能力降低不显著,但有降低迁移能力的趋势,下调miRNA-34c表达可促进口腔癌细胞的增殖,提高细胞迁移能力.

目的 建立弓形虫快速鉴定方法,进行国内实验动物感染调查,为国家标准的修订提供参考依据.方法 选择2012年12月至2016年12月期间全国60个不同厂家的12 394只实验动物(包括:猴290只、小型猪425只、犬579只、兔1 234只、地鼠372只、豚鼠1 363只、大鼠987只、小鼠7 144只)作为调查对象.采用ELISA方法检测动物血清中弓形虫抗体IgG和循环抗原CAg.利用PCR技术鉴定弓形虫p30基因.应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术识别弓形虫虫体.结果 用ELISA从12 394份动物血清中检出4份弓形虫抗体IgG阳性.在这4份抗体IgG阳性样本中都发现了弓形虫虫体和DNA.通过PCR扩增p30基因的分子特性证明了样本中弓形虫病原体的存在.通过直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,在这些样本中发现了弓形虫速殖子.2012年12月至2016年12月期间,对12 394只实验动物调查结果显示,弓形虫感染率为0.03％(4/12 394).结论 ELISA、PCR、直接镜检实时动态显微视屏摄录技术相结合可完成实验动物的弓形虫检验工作.国内实验动物中存在弓形虫感染.因此,建议设计合理的筛查程序用于防止动物传播的弓形虫病.有必要开发新的诊断工具,特别是快检技术用于这一重要人兽共患病的未来研究.

目的 筛选中国地鼠口腔鳞状细胞癌组织样本中具有差异表达的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA),预测其靶基因,探究靶基因的生物学功能及富集的信号通路.方法 采用二甲基苯并蒽涂抹法建立中国地鼠口腔鳞状细胞癌模型,高通量测序技术构建LncRNA差异表达谱,生物信息学技术筛选差异表达的LncRNA并进行靶基因预测,GO与KEGG富集分析分别预测靶基因的生物学功能及富集的信号通路.结果 与正常组织样本相比,口腔鳞状细胞癌组织样本中筛选出54个显著差异表达LncRNA(31个上调,23个下调).功能性分析表明:与口腔癌相关的GO条目73条;KEGG富集的信号通路25条.结论 中国地鼠口腔鳞状细胞癌样本中差异表达的LncRNA可能通过靶向调控其靶基因参与调控多种生物学功能及口腔癌相关的信号通路,在口腔鳞状细胞癌形成过程中可能发挥重要作用.

α-2肾上腺受体激动剂是强有力的胰岛素分泌抑制剂，但对其抑制胰岛素分泌的分子机制则尚不十分明了。为了了解α-2肾上腺能受体激动剂抑制胰岛素分泌的分子机制，我们使用SV40病毒转染的中国地鼠β细胞瘤细胞系（HIT细胞），系统全面地研究了肾上腺素和α受体激动剂氯压定对胰岛素分泌的抑制作用。材料和方法：HIT细胞于含10％胎牛血清的RPMI 1640中培养3日后使用；细胞内K^＋外流量用⁸⁶Rb^＋Cl做示踪剂进行测定；细胞内Ca^2＋水平用Fura－2荧光染料做示踪剂进行动态测定；胰岛素分泌量测定则用放射免疫测定法测定。