目的:建立苯乙烯尿中代谢产物苯乙醇酸和苯乙醛酸的分散液液微萃取-高效液相色谱法的测定方法。方法:以正辛醇为萃取剂，乙醇为分散剂，对尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸进行萃取，涡旋离心后取上层液体，以高效液相色谱仪测定。结果:苯乙醇酸在0~10.0 mg/L浓度范围内的线性相关系数>0.999，方法检出限为9.9 μg/L，加标回收率为86.1%~101.6%，日内精密度（ RSD）为1.07%~3.76%，日间精密度（ RSD）为1.24%~3.33%。苯乙醛酸在0.0~2.0 mg/L浓度内的线性相关系数>0.999，方法检出限为2.6 μg/L，加标回收率为88.8%~100.3%，日内精密度（ RSD）为1.02%~3.17%，日间精密度（ RSD）为1.59%~2.41%。 结论:本方法方法检出限低，富集倍数高，灵敏度好，适用于职业接触苯乙烯人群尿中苯乙醇酸和苯乙醛酸的测定。

目的:建立尿中苯乙醛酸（PGA）和苯乙醇酸（MA）的超高效液相色谱串联质谱分析方法。方法:于2022年4月开展研究，尿样经初始流动相直接稀释，过膜后以Waters HSS T3色谱柱分离，在负电离模式（ESI -）、多反应监测（MRM）条件下分析，外标法定量测定人尿中PGA、MA的含量。 结果:PGA和MA的测定在10~1 000 ng/ml的范围内线性关系良好，相关系数 r为0.999 9。PGA的线性回归方程为 y=1 141.4 x+2 157.3，方法检出限和定量下限为0.081 ng/ml和0.269 ng/ml，加标回收率为90.47%~99.83%；MA的线性回归方程为 y=62.8 x+140.3，方法检出限和定量下限为0.551 ng/ml和1.836 ng/ml，加标回收率为92.75%~101.09%；PGA和MA的批内精密度和批间精密度均<5%。 结论:建立了尿中PGA和MA测定的超高效液相色谱串联质谱分析法，样品前处理操作简单，方法准确度和精密度均满足标准要求，可用于普通人群和职业接触人群尿中PGA和MA的监测评估。

目的:建立双硫仑样反应（disulfiram-like reaction，DLR）小鼠模型，观察还原型谷胱甘肽（reduced glutathione，GSH）对该模型血清乙醇及其产物乙醛水平的影响。方法:雄性C57BL/6小鼠35只，用随机数字表法随机分为模型组（M组， n=21）和对照组（S组， n=14），分别给予拉氧头孢溶液（M组：10 mg/mL，0.02 mL/g）和生理盐水（S组：0.02 mL/g）定时腹腔注射，每日一次，共2 d；于末次注射后1 h给予乙醇溶液（20% v/ v, 0.01 mL/g）灌胃；此后20 min自眶静脉采血50 μL。建模后M组随机分为3个亚组，每组7只，于乙醇灌胃后30 min分别给予5%葡萄糖（GS组）、地塞米松/维生素C（DC组）及GSH溶液（RG组）腹腔注射（0.01 mL/g）；其后0.5、1、1.5和2 h分别自眶静脉采血50 μL，留取血清标本后用气相色谱法检测乙醇及乙醛的含量。两组数据用独立样本 t检验分析，M组3个亚组计量资料用单因素方差分析，3组样本均数多重比较用Dunnett- t检验分析。 结果:M组血清乙醛水平（2.96±0.52）mg/100 mL高于S组（2.07±0.22）mg/100 mL，差异有统计学意义（ t=6.096， P<0.01）。GS及DC两组乙醇及乙醛水平差异在干预后不同时点均无统计学意义（ P>0.05）。与GS及DC两组比较，RG组乙醛及乙醇水平于干预前（0 h）差异无统计学意义；干预后各时点乙醛水平差异均有统计学意义（0.5 h， P<0.05；1 h、1.5 h和2 h， P<0.01）。RG组乙醇水平与GS组比较，于干预后各时点差异均有统计学意义（1 h， P<0.01；0.5 h、1.5 h、2 h， P<0.05）；与DC组比较，于干预后1 h及1.5 h差异均有统计学意义（1 h， P<0.01；1.5 h， P<0.05）,于0.5 h及2 h差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:GSH可促进乙醛及乙醇的代谢，降低C57BL/6小鼠血清乙醛和乙醇水平，可作为治疗DLR的有效解毒剂。

目的 对尿中苯乙醛酸和苯乙醇酸的高效液相检测标准方法进行修订.方法 通过试验对原高效液相色谱方法进行评估,比较ACQUITY UPLC BEH C8、C18、Phenyl(50 mm×2.1 mm×1.7 μm)色谱柱,并对定量方法、方法检出限、定量下限及方法稳定性进行研究.结果 采用苯基(BEH Phenyl)色谱柱分离,内标工作曲线定量,苯乙醇酸和苯乙醛酸内标工作曲线回归方程分别为y=3.660 7x+0.066 3和y=5.161 2x-0.007 3;线性相关系数分别为0.999 3和0.999 1,线性范围分别为0.10～1.00 mg/ml和0.04～0.40 mg/ml;苯乙醛酸回收率为91.6％～97.1％,批内和批间精密度分别为1.7％～2.4％、0.9％～4.6％,方法检出限1.1 mg/L,定量下限为3.7 mg/L;苯乙醇酸回收率为84.3％～99.0％,批内和批间精密度分别为0.5％～1.9％、1.1％～1.8％,方法检出限5.4 mg/L,定量下限为17.9 mg/L.结论 该方法采用苯基修饰色谱柱,明确了定量下限,提高了方法稳定性、检测准确度和检出限,满足职业人群生物样品的检测.

目的 观察乙醛脱氢酶2(ALDH2)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤及凋亡的影响以及潜在机制.方法 选择健康雄性SD大鼠40只,随机分成假手术组、激动剂(乙醇)+假手术组、缺血/再灌注组、激动剂+缺血/再灌注组,每组各10只.术前注射乙醇,后建立心肌缺血/再灌注损伤模型;假手术组仅开胸不结扎前降支.每组随机抽取5只用于心肌梗死面积测定,另外5只提取左心室组织进行苏木精-伊红(HE)染色,Western blot测定ALDH2、JNK、p-JNK、Bcl-2和Bax蛋白的表达,TUNEL检测细胞凋亡情况.结果 缺血/再灌注组心肌梗死比例较激动剂+缺血/再灌注组明显增大,(52.51±7.12)% vs. (24.10±5.37)%,差异有统计学意义(P<0.05).假手术组和激动剂+假手术组大鼠心肌纤维排列整齐,形态完整,结构正常.缺血/再灌注组大鼠心肌纤维排列紊乱,间质水肿,组织间隙明显增宽,心肌细胞多处肿胀、溶解断裂,细胞核肿胀,甚至消失;而激动剂+缺血/再灌注组的心肌损伤较轻.缺血/再灌注组ALDH2、Bcl-2表达低于激动剂+缺血/再灌注组[(25.28±3.92) vs. (37.42±7.27),(22.24 ±3.20) vs. (32.04±4.86)],差异有统计学意义(P均<0.05).缺血/再灌注组Bax表达较激动剂+缺血/再灌注组升高[(131.88±16.88)vs. (114.50±5.15)],而Bcl-2/Bax比值较激动剂+缺血/再灌注组降低[(0.17±0.04) vs. (0.28±0.05)],差异有统计学意义(P<0.05).缺血/再灌注组JNK、p-JNK蛋白表达高于激动剂+缺血/再灌注组[(193.03±3.98) vs. (154.17±9.82,(229.16±11.17) vs. (165.57 ±9.30)],p-JNK/JNK比值也高于激动剂+缺血/再灌注组,差异有统计学意义(P均<0.05).缺血/再灌注组和激动剂+缺血/再灌注组细胞凋亡率均高于假手术组和激动剂+假手术组,[(38.36±9.08)%、(16.33±2.29)% vs.(4.76±1.41)%、(5.19±0.62)%],差异有统计学意义(P均<0.05).四组心肌ALDH2表达量与心肌细胞凋亡率呈负相关(r=-0.799,P<0.01),与p-JNK/JNK呈负相关(r=-0.752,P<0.01).结论 ALDH2可能通过抑制JNK信号通路的活性,抑制心肌细胞凋亡,减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤,发挥心肌保护作用.

目的 探讨葛根枳棋子栀子提取物(PHGE)解酒护肝作用.方法 SPF级Wistar雄性大鼠120只,随机分为对照组、模型组和PHGE低、中、高剂量(0.2、0.5、1.2 g/kg)组,每组24只.除对照组外,其他组别通过喂饲Regular型Lieber-DeCarli酒精液体模型饲料造模,造模过程中,PHGE各组动物ig不同剂量的PHGE.每周测定动物体质量1次,每天测定摄食量1次;给药4周和8周每组分别取半数动物禁食过夜,采血测定血清生化指标;解剖取肝脏称质量并计算脏体系数;取部分肝脏冰冻切片进行油红“O”染色,观察肝脏脂肪肝情况;测定肝脏总脂肪含量,测定肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总谷胱甘肽(GSH)、乙醇脱氢酶(ADH)和乙醛脱氢酶(ALDH).结果 4周和8周造模,大鼠体质量均增长减缓(P＜0.05、0.01),第8周PHGE高剂量组动物体质量显著低于模型组(P＜0.05);摄食量未见明显差异.造模4周,模型组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、血糖(GLU)显著高于对照组(P＜0.05、0.01);与模型组比较,PHGE低、中、高剂量组AST、GLU,中、高剂量组ALT、TCHO、HDL,中剂量组LDL均显著下降(P＜0.05、0.01),并呈明显的剂量相关性,造模8周与造模4周结果一致.造模给药8周,模型组GSH显著高于对照组(P＜0.01),PHGE高剂量组GSH显著高于模型组(P＜0.01),高剂量组ADH显著高于模型组(P＜0.05);与对照组比较,造模给药4、8周,模型动物肝脏脂肪量显著升高(P＜0.05、0.01),给药8周,PHGE高剂量组肝脏脂肪量显著低于模型组(P＜0.05).模型组肝脏质量与对照组比较未见显著性差异,而肝脏系数显著增加(P＜0.01),应为动物体质量较小引起,PHGE各剂量组肝脏系数与同期模型组比较未见显著性差异.肝脏脂肪染色后,造模动物主要表现为弥漫性肝细胞内、中央静脉周边肝细胞内红染脂滴,PHGE中、高剂量组评分低于模型组.结论 PHGE发挥明显预防和/或改善酒精性脂肪肝的作用,改善肝功能,降低血糖和胆固醇.

目的 探讨线粒体乙醛脱氢酶(ALDH2)影响心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌线粒体功能和室性心动过速的机制. 方法 选取60只健康雄性SD大鼠,随机分为3组:假手术(sham)组、MIRI model组和ALDH2组,每组20只.ALDH2组在建模之前,大鼠给予2.5％乙醇(乙醛脱氢酶2激动剂)日常饮用,1周后乙醇调整至5％,持续8周.建立大鼠心肌缺血再灌注(ML/R)模型.采用标准肢体Ⅱ导联心电图连续监测大鼠心律失常变化;采用ELISA法测定大鼠心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量;采用流式细胞仪测定大鼠心肌线粒体膜电位的变化;采用实时定量PCR (q-PCR)法检测大鼠心肌组织中Bax的mRNA表达;采用Western blot检测大鼠心肌组织中ALDH2和Caspase-3的蛋白表达. 结果 心律失常测定显示,与sham组相比,model组大鼠室性心动过速的发生率升高(P＜0.01),其持续时间较长(P＜0.01);而AL-DH2组大鼠室性心动过速的发生率低于model组(P＜0.01),其持续时间较短(P＜0.01).ELISA测定显示,与sham组相比,model组大鼠心肌组织中SOD的含量降低(P＜0.01),MDA的含量升高(P＜0.01);而与model组相比,ALDH2组大鼠心肌组织中SOD的含量升高(P＜0.01),MDA的含量降低(P＜0.01).采用阳离子绿色荧光染料罗丹明123对线粒体的膜电位进行检测,与sham组相比,model组大鼠心肌线粒体膜电位降低(P＜0.01),而ALDH2组大鼠心肌线粒体膜电位较model组升高(P＜0.01).q-PCR测定显示,与sham组相比,model组大鼠心肌组织中Bax的mRNA表达上调(P＜0.01);而ALDH2组大鼠心肌组织中Bax的mRNA表达较model组降低(P＜0.01).Western blot测定显示,与sham组相比,model组大鼠心肌组织中ALDH2的蛋白表达下调(P＜0.01),Caspase-3蛋白表达上调(P＜0.01);而ALDH2组大鼠心肌组织中ALDH2的蛋白表达相对于model组升高(P＜0.01),Caspase-3蛋白表达低于model组(P＜0.01). 结论 增强ALDH2在MIRI大鼠心肌组织中的表达对MIRI有保护作用,其机制可能与抵抗室性心动过速、缓解氧化应激反应、提高心肌组织中线粒体膜电位及抑制细胞凋亡的发生有关.

目的:观察激活乙醛脱氢酶2(aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)对糖尿病心肌损伤中双孔钾离子通道TASK-1的影响及其对糖尿病心肌损伤的保护作用.方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组(N组)、糖尿病4周组(DM4W组)、糖尿病8周组(DM8W组),糖尿病8周组+低浓度乙醇干预组(DM8W+EtOH组).采用腹腔单次注射链脲佐菌素(55mg/kg)复制糖尿病大鼠模型.行心脏超声测定大鼠心功能,ELISA法检测心肌组织羟脯氨酸含量,HE染色观察心肌组织结构,PAS染色观察心肌组织阳性物质沉积情况,Western印迹检测心肌组织TASK-1蛋白表达情况,膜片钳记录心室肌细胞复极30％和90％时的动作电位时程(APD30,APD90)和双孔钾离子通道TASK-1电流,同时根据该钾通道对酸碱敏感的电生理特性判断是否为双孔钾离子通道TASK-1电流.结果:与N组相比,DM4W组和DM8W组大鼠左室舒张末期内径(end-diastole left ventricular diameter,LVIDd)及左室收缩末期内径(end-systolic left ventricular diameter,LVIDs)、羟脯氨酸含量、TASK-1蛋白表达增加,左室内径缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)和射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)均下降,APD30和APD90延长,TASK-1电流减少(P＜0.01);HE染色结果显示DM4W组和DM8W组大鼠心肌细胞及纤维排列紊乱,心肌细胞肥大,心肌间隙增宽;PAS染色显示DM4W组和DM8W组大鼠心肌组织阳性物质沉积增加.与DM4W组相比,DM8W组大鼠上述指标的变化更加明显(P＜0.05或P＜0.01).与DM8W相比,DM8W+EtOH组左室心功能指标LVIDd,LVIDs,LVFS,LVEF有所恢复,羟脯氨酸含量和TASK-1蛋白表达减少,TASK-1电流增加,APD30和APD90缩短(均P＜0.01);HE染色显示心肌细胞损伤较前减轻,PAS染色显示大鼠心肌组织阳性物质沉积减少.结论:ALDH2被低浓度的乙醇激活后可减轻糖尿病所致的心肌损伤及纤维化,其机制可能与其调节双孔钾离子通道TASK-1蛋白表达和TASK-1电流有关.

目的 评价小麦低聚肽对醉酒小鼠的解酒活性,探讨作用机理.方法 清洁级雄性KM种小鼠随机分为对照组和低、中、高剂量组(500、1 000、2 000 mg/kg·bw).受试物按10ml/kg·bw给予,30 min后,各组分别灌胃56％乙醇.灌胃结束后立即测定行为学指标,30 min后在各时间段分别测定血液中乙醇和乙醛含量,检测肝组织中ADH、ALDH、SOD、CYP450、CAT、XOD活性.结果 与对照组相比,小麦低聚肽能降低小鼠全血中乙醇和乙醛含量,增强肝组织中ADH、ALDH含量,提高CAT、SOD活性.结论 小麦低聚肽对醉酒小鼠具有解酒功能.

目的 通过观察不同干预措施对双硫仑样反应(DLR)患者治疗效果的影响,并通过实验测定小鼠DLR模型血清乙醇及其产物乙醛水平的变化,探讨还原型谷胱甘肽(RGSH)治疗DLR的机制.方法 三组DLR患者给予不同的治疗措施,分为地塞米松+维生素C组(DC组)、RGSH组(RG组)、地塞米松+维生素C+RGSH联合治疗组(DCG组),于给药后观察并比较患者心率降至90次/min时间、胸闷和呼吸困难症状消失时间、皮肤潮红消褪的时间.实验制作C57BL/6小鼠DLR模型21只,随机分为三组,于建模后30 min分别给予5％葡萄糖(AGS组)、地塞米松+维生素C(ADC组)及RGSH溶液(ARG组)腹腔注射(0.01 mL/g),于注射后不同时点分别白眶静脉采血,留取血清标本后用气相色谱法检测小鼠血清乙醇及乙醛水平.结果 临床观察发现,DC组心率降至90次/min时间、胸闷和呼吸困难症状消失时间及皮肤潮红消褪时间(min)分别为57.68±14.38、61.67±15.00及56.00±10.21,RG组分别为38.67±15.41、48.00±9.78及40.33±11.09,DCG组分别为29.41±10.88、37.94±8.85及32.94±7.72;与DC组比较,RG组及DCG组各观察指标差异均有统计学意义(P＜0.01);与RG组比较,DCG组心率降至90次/min时间差异无统计学意义(P＞0.05),胸闷、呼吸困难消失及皮肤潮红消褪时间差异有统计学意义(P＜0.05).动物实验显示,模型(M)组小鼠血清乙醛(mg/100 mL)水平2.96±0.52高于对照(S)组2.07 ±0.22,差异有统计学意义(P＜0.01).干预后0.5、1.0、1.5、2.0h,ADC组血清乙醛(mg/100 mL)水平分别为2.83 ±0.34、2.69-±0.12、2.49 ±0.26和2.11 ±0.15,AGS组分别为2.76 ±0.40、2.58 ±0.18、2.31 ±0.61和2.10±0.30,ARG组分别为2.22 ±0.40、1.79 ±0.19、1.73 ±0.25、1.66 ±0.25;ADC组血清乙醇(mg/100 mL)水平分别为155.69±47.47、129.35±28.33、94.47 ±41.49和61.85±10.35,AGS组分别为168.08±29.25、146.31±23.66、90.82±29.41和71.75 ±31.07,ARG组分别为122.52±15.31、71.13±13.05、54.58±13.58和44.54±13.15.ADC与AGS两组间血清乙醇及乙醛水平在各时点比较差异均无统计学意义(P＞0.05);与ADC及AGS组比较,ARG组血清乙醛水平于RGSH干预后明显降低,各时点差异均有统计学意义(P＜0.05);与ADC组比较,ARG组血清乙醇水平于1.0h及1.5h差异有统计学意义(1.0h,P＜0.01;1.5h,P＜0.05),于0.5h及2.0h差异无统计学意义(P＞0.05);与AGS组比较,ARG组血清乙醇水平于RGSH干预后降低,各时点差异均有统计学意义(0.5h、1.5h、2.0h,P＜0.05;1.0h,P＜0.01).结论 RGSH可迅速改善DLR患者临床症状,比维生素C、地塞米松的传统治疗方法起效快;RGSH与维生素C、地塞米松联合应用效果最佳,优于单独应用RGSH.RGSH治疗DLR的机制可能与其直接参与乙醛代谢,降低血清乙醛和乙醇水平,清除白由基,抗氧化,恢复蛋白质和酶活性,保护及恢复生物膜功能等有关.