研究乳源性外泌体与脂质体进行膜融合得到的杂化外泌体装载青藤碱(sinomenine,SIN)后对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗效果.通过蔗糖密度梯度离心法从鲜牛乳中提取外泌体,采用乳化蒸发-低温固化法制备脂质体,共孵育法进行膜融合后对杂化外泌体进行表征:透射电镜检测形貌,纳米粒度电位仪检测粒径与电位,蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测膜融合前后外泌体膜表面特征蛋白CD63和TSG101的表达.超声法装载青藤碱后,酶标仪检测其载药量与包封率.胶原抗体诱导法建立CIA大鼠模型,药效实验设对照组、模型组、SIN组、SIN-脂质体组、SIN-乳外泌体组、SIN-杂化外泌体组及阳性药(地塞米松)组.记录给药期间大鼠体质量变化,以足肿胀度、免疫器官指数、关节炎指数、微循环指标变化、滑膜组织病理学检查、血清炎症因子水平变化为指标进行药效学研究.透射电镜结果显示,杂化外泌体与乳外泌体外观均呈茶托状,共孵育后外泌体粒径由(97.92±3.42)nm 增长到(132.70±4.07)nm,Zeta 电位由(-2.01±0.33)mV 变为(-17.90±2.13)mV,WB结果显示CD63与TSG101蛋白在乳外泌体及杂化外泌体中均正常表达.酶标仪测定乳外泌体包封率31.64％±2.48％、载药量2.35％±0.52％,杂化外泌体包封率48.21％±3.12％、载药量3.17％±0.36％.药效学结果显示,与模型组相比,各给药组一般情况及足肿胀度、关节炎指数及免疫器官指数均得到显著改善(P＜0.05,P＜0.01),微血管综合评分及血管阻力显著下降(P＜0.05,P＜0.01),血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)炎症因子水平显著降低(P＜0.01),滑膜组织的病变得到一定程度的改善.同时与SIN组、SIN-脂质体组及SIN-乳外泌体组相比,SIN-杂化外泌体组具备更平稳持久的药效.该研究将乳源性外泌体与脂质体共孵育得到的杂化外泌体成功改善了外泌体载药量小与脂质体生物相容性差等问题,负载青藤碱的杂化外泌体对CIA大鼠有着良好的疗效,可有效解决青风藤等疗效佳但生物半衰期短的问题,为传统中药的新发展及类风湿性关节炎等疾病的治疗提供了新思路.

目的 制备托伐普坦纳米结构脂质载体(Tol-NLCs),以提高托伐普坦(Tol)的口服生物利用度.方法 根据溶解度对辅料进行筛选,包括固体脂质(双硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、聚乙二醇-8山嵛酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯和单亚油酸甘油酯)、液体脂质(油酸聚乙二醇甘油酯、单油酸甘油酯、月桂酸聚乙二醇甘油酯和单辛酸丙二醇酯)和表面活性剂(聚山梨酯80、聚氧乙烯蓖麻油、聚乙二醇-15羟基硬脂酸酯和泊洛沙姆188),采用乳化超声-低温固化法制备Tol-NLCs,并使用Box-Behankn效应面法优化处方;分别采用电镜(TEM)观察、粒径分布及Zeta电位测定、差示扫描量热法(DSC)对制备的Tol-NLCs进行表征,同时比较Tol原料药和Tol-NLCs体外药物释放特点、跨膜转运特征;比较Tol混悬液和Tol-NLCs经大鼠ig给药后的体内药动学特征.结果 根据溶解度确定以山嵛酸甘油酯作为固体脂质,单油酸甘油酯作为液体脂质,聚乙二醇-15羟基硬脂酸酯作为表面活性剂,通过优化得到Tol-NLCs的最佳处方:总脂质质量浓度为40.0mgmL-1,表面活性剂质量浓度为25.0 mg·mL-1,超声时间为6 min.在透射电镜下可观察到制备的Tol-NLCs呈类球状,分布均匀;Tol-NLCs的平均粒径为(106.2±14.7)nm,PDI为(0.196±0.004),Zeta电位为(-26.6±0.6)mV;药物在Tol-NLCs中以非结晶形式存在.Tol-NLCs在pH 6.8磷酸盐缓冲液中表现为前期药物释放较快,后期药物释放平缓.Caco-2细胞跨膜转运结果显示,Tol-NLCs的Papp(AP→BL)值为(11.16±0.58)×10-6cm·s-1,Papp(BL→AP)值为(4.51±0.46)×10-6cm·s-1,与Tol溶液相比,Pap(AP→BL)表现出明显增加趋势,Papp(BL→AP)表现出明显降低趋势,说明Tol包裹在NLCs中促进了药物吸收,抑制了P-糖蛋白(P-gp)的外排作用.与Tol混悬液相比,大鼠ig Tol-NLCs后,Tol生物利用度提高了 2.5倍.结论 按优化处方制备的Tol-NLCs,能够显著提高药物的生物利用度.

目的 制备白杨素固体脂质纳米粒,并评价其药动学行为.方法 乳化超声-低温固化法制备纳米粒,测定其粒径、Zeta电位、体外释放度.12只SD大鼠随机分为2组,分别灌胃给予原料药、纳米粒混悬液.HPLC法测定血浆中白杨素含有量,绘制血药浓度-时间曲线,计算药动学参数.结果 所得纳米粒平均粒径为(207.15±30.59)nm,PDI为0.224±0.067,Zeta电位为(-34.8±5.9)mV,36 h内累积释放度达84.36％.其Cmax、AUC0～t分别为(9.04±1.52) μg/mL、(33.67±3.47) μg·h/mL,明显高于原料药(P＜0.01).结论 固体脂质纳米粒可促进白杨素的口服吸收和生物利用度,并具有显著缓释特征.

目的:比较去氢骆驼蓬碱磁固体脂质纳米粒(HM-MSLN)的不同制备方法,以单因素考察结合星点设计响应面法优化制备工艺.方法:比较薄膜超声分散法、微乳超声法、乳化低温固化法、乳化溶剂挥发法制备HM-MSLN,筛选得到粒径小、载药量高、稳定性好的制备方法;再以单因素考察结合星点设计响应面法优化处方与制备工艺.结果:优选的薄膜超声分散法所制备的HM-MSLN粒径为(178.00±6.07)nm,包封率为(95.38±1.08)％,载药量为(4.21±0.03)％.结论:薄膜超声分散法所制备的HM-MSLN具有粒径小、载药量较高、制备工艺简单等特点.

目的 制备白杨素固体脂质纳米粒水凝胶骨架缓释片.方法 乳化超声-低温固化法制备固体脂质纳米粒后进一步制成冻干粉,再以HPMC15KM为缓释材料制备水凝胶骨架缓释片.在单因素试验基础上,以HPMC15KM用量、PEG400与PEG4000比例、PEG用量、硬脂酸镁用量为影响因素,累积释放度为评价指标,正交试验优化处方,再进行释药模型拟合.结果 最优处方为HPMC K15 M用量50 mg,PEG 400与PEG 4000比例2∶1,PEG用量30 mg,硬脂酸镁用量0.5％,12h内累积释放度为93.19％.水凝胶骨架缓释片体外释放符合一级方程(r=0.994 1),释药机制为骨架溶蚀与扩散并存.结论 该方法简便可靠,可用于制备具有明显体外缓释特征的白杨素固体脂质纳米粒水凝胶骨架缓释片.

目的 制备用于静脉注射的蒿甲醚固体脂质纳米粒(ARM-SLNs),并评价小鼠体内药动学以及抑瘤效果.方法 采用热熔乳化超声-低温固化法制备ARM-SLNs,并考察其理化性质;测定了ARM-SLNs在小鼠体内的药动学行为,评价ARM-SLNs对小鼠接种HepG2肿瘤细胞的抑制效果.结果 本研究制备的ARM-SLNs呈球形分布,平均粒径大小为(77.6±1.3) nm,Zeta电位为(-20.1 +0.4)mV,包封率为(93.5±1.2)％,载药量为(9.2±0.3)％,冻干对ARM-SLNs的粒径大小、包封率和载药量均未产生显著影响;ARM-SLNs在体外显示出缓慢释药特性,符合一级动力学方程;小鼠药动学研究表明ARM-SLNs的t1/2及AUC0-t分别是ARM注射液的9.67倍和3.88倍;小鼠药效学研究表明ARM-SLNs的对HepG2肿瘤生长的抑制率显著高于ARM注射液(P＜0.05).结论 本研究制备的ARM-SLNs对HepG2肿瘤细胞起到了良好的抑制效果,有望成为ARM的新型给药系统应用于临床研究中.

目的 制备白藜芦醇磷脂复合物固体脂质纳米粒,并考察其体内药动学.方法 乳化超声-低温固化法制备固体脂质纳米粒,测定其粒径、Zeta电位、包封率、载药量、体外稳定性、体外释药.18只大鼠随机分为3组,分别灌胃给予原料药、磷脂复合物、固体脂质纳米粒0.5％ CMC-Na混悬液(20 mg/kg),于0、2、4、8、12、24 h采血,HPLC法测定白藜芦醇血药浓度,计算主要药动学参数.结果 固体脂质纳米粒平均粒径为218.6 nm,Zeta电位为-15.6 mV,包封率为84.07％,载药量为2.62％,48 h内累积溶出度为76.18％,白藜芦醇含量在48 h内无明显变化.与原料药、磷脂复合物比较,固体脂质纳米粒tmax延长(P＜0.01),Cmax、AUC0～t、AUC0～∞升高(P＜0.01),其相对生物利用度与原料药相比增加至3.00倍.结论 固体脂质纳米粒可提高白藜芦醇磷脂复合物体外溶出度和稳定性,促进该成分体内吸收.

目的 制备依折麦布固体脂质纳米粒(EZE-SLNs),在该处方基础上加入D-α-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS),制备基于TPGS表面修饰的EZE-SLNs (TPGS-EZE-SLNs),并考察2种载药固体脂质纳米粒经大鼠灌胃给药后的生物利用度.方法 采用乳化超声-低温固化法分别制备EZE-SLNs和TPGS-EZE-SLNs,通过激光粒度仪分别测定EZE-SLNs与TPGS-EZE-SLNs的粒径分布、多聚分散系数(PDI)和Zeta电位,在透射电镜下观察2种纳米粒的微观形态;反向透析法评价纳米粒的体外药物释放行为;比较EZE-SLNs和TPGS-EZE-SLNs经大鼠灌胃给药后的体内药动学特征.结果 EZE-SLNs和TPGS-EZE-SLNs的粒径分布分别为(89.3±6.7)、(92.4±9.1) nm,PDI分别为(0.204±0.009)、(0.199±0.012),Zeta电位分别为(36.9±1.6)、(-39.7±1.1)mV,在透射电镜下可观察到EZE-SLNs和TPGS-EZE-SLNs均呈球形分布,大小均匀;体外药物释放显示出2种固体脂质纳米粒均提高了药物释放度;大鼠经灌胃给药后体内药动学结果显示,EZE-SLNs和TPGS-EZE-SLNs均能缩短药物的达峰时间(tmax),提高药物的达峰质量浓度(Cmax)和药时曲线下面积(A UC0～∞),但TPGS-EZE-SLNs提高更为显著.结论 制备的TPGS-EZE-SLNs能够提高药物在大鼠体内的吸收速率,显著增加药物的生物利用度.

目的 制备人参皂苷-Rg5 (G-Rg5)固体脂质纳米粒(G-Rg5 SLNs),并评价其对人宫颈癌细胞(Hela)的抑制效果.方法 采用热熔乳化超声-低温固化法制备G-Rg5 SLNs,以脂质质量浓度(X1)、乳化剂质量浓度(X2)和助乳化剂质量浓度(X3)作为自变量,以G-Rg5 SLNs的粒径分布(Y1)与药物包封率(Y2)作为评价指标,通过Box-Behnken实验设计优化G-Rg5 SLNs的处方,并采用透射电镜观察其微观形态,考察G-Rg5 SLNs的体外药物释放特性;通过四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法比较G-Rg5原料药与G-Rg5 SLNs对Hela细胞的抑制效果.结果 经Box-Behnken实验设计优化得到G-Rg5 SLNs的最优处方组成为:脂质质量浓度为19.0mg· mL-1,乳化剂质量浓度为9.0 mg·mL-1,助乳化剂质量浓度为10.0 mg·mL-1,根据最优处方制备的3批G-Rg5 SLNs粒径分布为(212.9±12.3) nm,包封率为85.1％±2.6％,透射电镜照片显示,G-Rg5 SLNs呈圆球状,分布均匀;体外药物释放结果显示,G-Rg5 SLNs中的药物表现出双相释药特征;体外药效学研究表明,G-Rg5 SLNs对Hela细胞的抑制率显著高于G-Rg5原料药.结论 将G-Rg5制备成固体脂质纳米粒,处方合理,工艺可行,体外抑制Hela效果显著,有待进一步通过动物体内药效学实验证实.

目的 将洛匹那韦(LPV)制备成固体脂质纳米粒(LPV-loaded-SLNs),并对其药剂学性质进行初步评价.方法 采用乳化超声低温固化法制备LPV-loaded-SLNs,并利用Box-Behnken实验设计对其处方工艺进行优化.测定LPV-loaded-SLNs的粒径分布和包封率,在透射电镜下观察LPV-loaded-SLNs的微观形貌,通过差示扫描量热法(DSC)初步判断LPV-loaded-SLNs中药物的存在形式;考察LPV-loaded-SLNs的稀释稳定性及体外释药特征.结果 经实验优化得到制备LPV-loaded-SLNs的最佳处方工艺为:脂药比为4:1,表面活性剂质量浓度为30 mg·mL-1,超声时间为10 min,LPV-loaded-SLNs的粒径分布为(351.5±5.8)nm,包封率为89.5％±1.4％,在透射电镜下可观察到LPV-loaded-SLNs为球形,分布均匀;根据DSC测定结果推测LPV-loaded-SLNs中的药物以非结晶形式存在;LPV-loaded-SLNs经不同pH介质稀释后稳定性均较好,且在不同pH介质中的药物释放速率也无明显差异.结论 制备的LPV-loaded-SLNs粒径小,包封率高,释药缓慢,对提高LPV的口服生物利用度具有参考价值.