目的:探讨类甲基转移酶3（METTL3）通过促进叉头框蛋白O（FOXO）3的N6-甲基腺苷修饰（m6A）及其表达参与糖尿病诱导的内皮细胞凋亡的机制。方法:构建晚期糖基化终末产物（AGE）诱导的人主动脉内皮细胞（HAEC）损伤模型，将HAEC分为6组：细胞对照组、细胞AGE组、细胞对照+阴性对照小干扰RNA（siRNA）组、细胞AGE+阴性对照siRNA组、细胞AGE+ FOXO3 siRNA组、细胞AGE+ METTL3 siRNA组，每组设置3个平行组。采用甲基化RNA免疫沉淀测序（MeRIP-Seq）及生物信息学技术检测并分析其m6A修饰谱，采用RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）检测 FOXO3 mRNA的m6A修饰水平，采用流式细胞术检测细胞凋亡，采用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测 FOXO3 mRNA表达水平，Western blotting法检测FOXO3和METTL3蛋白水平。6只6周龄载脂蛋白E基因敲除雄性小鼠按随机数字表法分为单纯动脉粥样硬化组和糖尿病动脉粥样硬化组，每组均为3只。通过Western blotting检测小鼠FOXO3、METTL3蛋白表达，采用免疫荧光共定位检测小鼠FOXO3、METTL3在内皮细胞中的表达。采用两独立样本 t检验进行组间比较。 结果:与细胞对照组相比，细胞AGE组的总m6A修饰及FOXO3的m6A修饰显著升高（ P<0.001），FOXO3和METTL3的蛋白表达显著升高（ P<0.05）。与单纯动脉粥样硬化组相比，糖尿病动脉粥样硬化组小鼠主动脉斑块区域内皮细胞的FOXO3和METTL3的蛋白表达显著升高（ P<0.05）。与细胞AGE+阴性对照siRNA组相比，细胞AGE+ FOXO3 siRNA组的凋亡显著降低（ P<0.01）。与细胞AGE+阴性对照siRNA组相比，细胞AGE+ METTL3 siRNA组FOXO3的m6A修饰（ P<0.001）及FOXO3蛋白表达均显著下降（ P<0.05），且凋亡显著降低（ P<0.001）。 结论:AGE诱导的HAEC中m6A修饰发生了显著变化，METTL3通过促进 FOXO3 mRNA的m6A修饰并调控其表达，从而参与糖尿病诱导的血管内皮细胞凋亡。

主动脉夹层是指主动脉内膜撕裂，血液经内膜撕裂口进入主动脉壁造成正常主动脉壁分离，形成真假腔的一种凶险的心血管疾病。常见于中老年人群，尽管发病率低，但发病突然，且病死率极高。主动脉夹层的诱因错综复杂，发病机制尚未完全明确，主要与主动脉壁结构异常、血管壁炎症反应和血流动力学有关。该文重点整理了炎性细胞和主动脉固有细胞在主动脉夹层发生发展过程中的作用，为该疾病的治疗提供新思路。

目的:应用彩色多普勒超声(CDUS)观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)联合β-氨基丙腈(BAPN)诱导小鼠主动脉夹层模型主动脉各段形态及血流动力学指标的变化特点。方法:选取20只健康状况良好的6~8周龄雄性C57BL/6小鼠，随机分为2组：模型组( n＝10)，AngⅡ联合BAPN腹腔注射建立小鼠主动脉夹层模型；对照组( n＝10)，腹腔注射生理盐水。常规记录小鼠体重、收缩压和舒张压，第42 d应用CDUS测量2组小鼠升主动脉、胸降主动脉和肾上主动脉的横截面内径，以及收缩期最高流速(PSV)、舒张期末期流速(EDV)、阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、时间平均流速(TAMV)、心率、血流最大剪切率(SR)等。将主动脉自根部至肾动脉分叉部分取出，行HE染色观察主动脉壁病理变化。 结果:①模型组与对照组体重、收缩压、舒张压、心率差异有统计学意义(均 P<0.05)；与对照组比较(0/10)，模型组升主动脉夹层发生率(8/10)明显增高，差异有统计学意义( P<0.05)；而胸降主动脉夹层发生率(4/10)、肾上主动脉夹层发生率(3/10)略增高，差异无统计学意义(均 P>0.05)。②模型组升主动脉内径、PSV、EDV、TAMV、PI、SR明显高于对照组，差异有统计学意义(均 P<0.05)；两组间RI差异无统计学意义( P>0.05)。模型组胸降主动脉PSV、EDV、TAMV、PI、SR明显高于对照组，差异有统计学意义(均 P<0.05)；两组间内径、RI差异无统计学意义(均 P>0.05)。模型组肾上主动脉PSV、TAMV、RI、PI、SR明显高于对照组，差异有统计学意义(均 P<0.05)；两组间内径、EDV差异无统计学意义(均 P>0.05)。③模型组主动脉组织HE染色显示，主动脉明显扩张、不规则，管壁不均匀增厚；内皮细胞核染浅淡，部分内膜及中层断裂向外凸出形成夹层动脉瘤；外膜炎症细胞明显浸润。 结论:超声可初步评价高血压合并主动脉夹层血流动力学改变，主动脉PSV、TAMV、PI和SR可能是早期预测高血压发生主动脉夹层的重要指标。

目的:探讨Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源外泌体(VECs-AngⅡ exos)在小鼠腹主动脉瘤(AAA)发生发展的作用。方法:使用8周龄雄性敲除Apoe小鼠皮下埋泵构建血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的腹主动脉瘤模型。提取并鉴定健康内皮细胞来源外泌体(VECs-exos)及Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源外泌体(VECs-AngⅡ exos)，使用收集的外泌体(20 μg/ml)处理小鼠原代血管平滑肌细胞(VSMCs)。VECs-exos及VECs-AngⅡ exos每周尾静脉注射至腹主动脉瘤模型小鼠体内，4周后获取小鼠动脉瘤组织行苏木精-伊红(HE)、EVG和马松(Masson)染色观察腹主动脉形态改变、弹性纤维断裂和胶原沉积。蛋白质印迹法(Western blot)检测小鼠动脉组织收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、SM22α和CNN表达。采用 t检验分析数据统计学差异。 结果:小鼠实验组动脉瘤发生率[(80.670±4.842)%， t＝16.66， P<0.01]、最大主动脉直径[(0.554 3±0.096 2) mm， t＝5.759， P<0.01)及主动脉质量比[(0.560 0±0.106 0) mg/g， t＝5.285， P<0.01)高于对照组。VECs-AngⅡ exos刺激VSMCs后α-SMA(0.608 4±0.056 6， t＝10.76， P<0.01)、SM22α(0.465 6±0.076 6， t＝6.082， P<0.01)、CNN(0.490 8±0.161 5， t＝3.039， P<0.01)表达低于VECs-exos组。尾静脉注射VECs-AngⅡ exos组小鼠动脉瘤发生率[(48.330±6.839)%， t＝7.067， P<0.01]，最大主动脉直径[(0.527 1±0.138 6) mm， t＝3.803， P<0.01]及主动脉质量比[(0.557 1±0.138 9) mg/g， t＝4.012， P<0.01]高于VECs-exos组。尾静脉注射VECs-AngⅡ exos组小鼠主动脉组织中α-SMA(0.719 1±0.141 0， t＝5.101， P<0.01)、SM22α(0.578 2±0.101 8， t＝5.677， P<0.01)、CNN(－0.520 2±0.068 8， t＝7.564， P<0.01)表达低于VECs-exos组。 结论:Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源的外泌体介导血管平滑肌细胞表型转换参与腹主动脉瘤发生发展。

主动脉瘤是一种主动脉呈慢性扩张的疾病，通常无症状，一旦破裂病死率极高，目前尚无有效治疗药物。microRNA特指19~25核苷酸的非编码小RNA。microRNA靶向多个基因的特性使其形成了复杂的调控网络而受到研究者的关注。越来越多研究表明microRNA与主动脉瘤的发生发展关系密切。众多microRNA参与了主动脉瘤复杂的病理机制过程，包括内皮细胞功能失调、炎性细胞浸润、平滑肌细胞凋亡、细胞外基质降解等。本文将阐述用于主动脉瘤研究的动物模型以及microRNA与主动脉瘤的最新研究进展。

目的:探究类泛素蛋白FAT10对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的血管内皮炎症因子释放的作用机制。方法:选取雄性16周龄WKY大鼠3只和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）、人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）、人血管平滑肌细胞（VSMC）。使用Western blot检测大鼠胸主动脉、颈动脉、肾动脉以及上述细胞中FAT10的表达。使用HUVEC细胞筛选FAT10表达量最高时AngⅡ的浓度及作用时间。构建空白对照质粒、过表达FAT10质粒、无效干扰质粒及干扰FAT10质粒，使用上述质粒转染HUVEC细胞。在加入100 nmol/L AngⅡ培养36 h后，采用Western blot 检测炎症因子单核细胞趋向性蛋白-1（MCP-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的蛋白表达水平；采用激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧生成水平；对转染空白对照质粒和过表达FAT10质粒的细胞应用活性氧清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸（NAC），采用Western blot检测应用或不应用NAC时MCP-1、TNF-α蛋白的表达水平。结果:FAT10在正常血压大鼠的颈动脉、胸主动脉、肾动脉以及HUVEC、VSMC、MDA-MB-231细胞系中均有表达。在HUVEC中，随着AngⅡ作用时间及浓度增加，FAT10的表达量逐渐增高，且在100 nmol/L AngⅡ作用36 h时达最高（ P<0.01）。在AngⅡ诱导下，过表达FAT10的HUVEC中炎症因子MCP-1（ P<0.001）与TNF-α的蛋白表达显著增加（ P<0.01），干扰FAT10的HUVEC中MCP-1与TNF-α的蛋白表达降低（ P均<0.001）。过表达FAT10的HUVEC中活性氧生成水平增加（ P<0.001），干扰FAT10的HUVEC中活性氧生成水平降低（ P<0.05）。应用NAC后，过表达FAT10的HUVEC中炎症因子MCP-1与TNF-α的蛋白表达升高趋势被逆转（ P均<0.05）。 结论:FAT10通过增加细胞内活性氧生成水平而促进AngⅡ诱导的内皮细胞炎症因子释放。

目的:探讨不同剂量氟对大鼠血管内皮损伤的影响。方法:选取2 ~ 3月龄的清洁级雄性SD大鼠30只，体质量为180 ~ 220 g，采用饮水染氟法建立大鼠氟中毒模型，按照体质量采用随机数字表法分为对照组（氟化钠含量0 mg/L）、低剂量组（氟化钠含量100 mg/L）、高剂量组（氟化钠含量200 mg/L），每组10只。大鼠持续染氟12周，每隔2周测量体质量。染氟12周后，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各组大鼠血清骨钙素（BGP）、内皮素-1（ET-1）、细胞间黏附因子-1（ICAM-1）、白细胞介素-6（IL-6）、脂联素（APN）的含量。透射电镜观察大鼠腹主动脉血管内皮超微结构的改变。结果:大鼠染氟第4周，对照组体质量[（306.90 ± 19.13）g]高于低、高剂量组[（280.31 ± 18.44）、（269.03 ± 17.47）g， P均< 0.05]，但低剂量与高剂量组间比较差异无统计学意义（ P > 0.05）；染氟第6、8、10、12周，对照组体质量[（377.40 ± 23.72）、（422.89 ± 32.23）、（450.00 ± 29.26）、（473.20 ± 28.43）g]高于低、高剂量组[（329.50 ± 21.78）、（368.90 ± 23.79）、（395.17 ± 28.22）、（409.27 ± 29.95）g；（306.75 ± 27.09）、（343.00 ± 18.41）、（362.99 ± 21.77）、（371.76 ± 21.65）g， P均< 0.05]，且高剂量组体质量低于低剂量组（ P均< 0.05）。大鼠饮水染氟12周后，对照组血清BGP、ET-1、ICAM-1、IL-6水平均低于低、高剂量组，血清APN高于低、高剂量组（ P均< 0.05）；高剂量组血清BGP、ET-1、ICAM-1、IL-6水平高于低剂量组，APN低于低剂量组（ P < 0.05）；同对照组相比，低剂量组血管内皮细胞外部突体不规范，内皮与基膜连接不紧密，空泡明显；高剂量组内皮细胞连接变短或脱离，胞内异染色质含量明显增多，内皮细胞脱落到血管腔，内皮细胞凋亡。 结论:高氟可引起大鼠血管内皮损伤。

目的:构建一种稳定、高效的小鼠动脉内膜增生模型。方法:设计改良的钳夹损伤方案，将其运用于小鼠(C57BL/6小鼠33只，雄性，8～12周，由汉堡大学附属艾本多夫医学中心动物房提供)腹主动脉，24只小鼠通过随机数表随机分为2组(术后28天)：对照组和手术组，每组12只；剩下9只随机分成3组，对照组、术后即刻组和术后4天组，每组3只。对照组小鼠仅麻醉处理，手术组小鼠进行腹主动脉钳夹损伤，术后定期取小鼠腹主动脉，进行苏木精-伊红(HE)染色、弹力纤维(EVG)染色、血小板内皮细胞黏附分子(CD31)免疫荧光染色等组织学检测，分析观察结果，包括增生病变的分布，内、外弹性膜周长、中膜面积、免疫荧光表达等，组间比较采用 t检验。 结果:全部手术小鼠均存活，其中92%(11/12)的手术小鼠产生了内膜增生，且HE染色结果表示增生内膜多发生于近心端的腹主动脉。动脉内弹性膜周长手术组高于对照组[(1 769.21±77.61) μm比(1 616.16±55.05) μm， t＝5.202， P<0.01]，动脉外弹性膜周长手术组高于对照组[(1 836.75±97.10) μm比(1 645.03±80.19) μm， t＝5.270， P<0.01]，动脉中膜面积手术组高于对照组[(38 079.89±8 711.61) μm比(29 808.88±2 753.53) μm， t＝3.140， P<0.01]。CD31染色结果显示损伤动脉出现了内皮剥脱和再内皮化的过程。 结论:该研究建立了一种新的更为高效稳定的用于研究动脉内膜增生的小鼠模型。

目的:探讨胰高糖素样肽-1（GLP-1）对晚期糖基化终末产物（AGE）诱导人主动脉内皮细胞（HAEC）铁死亡的作用及可能机制。方法:将HAEC分为6组：对照组、AGE组、AGE+铁死亡抑制剂铁抑素-1（Fer-1）组、AGE+GLP-1（7~37）组、AGE+GLP-1（9~36）组、AGE+GLP-1（28~36）组。每组设置3个平行组。培养48 h后，试剂盒检测细胞活力及丙二醛（MDA）含量，实时荧光定量聚合酶链反应检测铁死亡相关基因［前列腺素内过氧化物合成酶2（ PTGS2）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（ ACSL4）、谷胱甘肽过氧化物酶4（ GPX4）］mRNA表达水平，Western blotting法检测细胞GPX4、ACSL4、苏氨酸蛋白激酶（LKB1）、磷酸化LKB1（p-LKB1）、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化AMPK（p‐AMPK）蛋白水平。组间比较采用单因素方差分析和 t检验。 结果:与对照组相比，AGE组细胞线粒体出现形态异常，且显著抑制细胞活力（ P<0.05），AGE+Fer-1组细胞活力明显回升（ P<0.05）。AGE组铁死亡正向调控基因 PTGS2 mRNA水平上调（ P<0.05）， ACSL4 mRNA水平表达升高（ P<0.05），而负向调控基因 GPX4 mRNA水平表达下调（ P<0.05），且上述基因表达在AGE+Fer-1组均被逆转（ P<0.05）。与AGE组相比较，GLP-1及其小分子片段组HAEC细胞活力均明显升高（ P<0.05），细胞内MDA含量减少，脂质过氧化程度减轻（均 P<0.05）。铁死亡负调控蛋白GPX4表达上调（ P<0.05），铁死亡正调控蛋白ACSL4表达下调（均 P<0.05），p‐LKB1和p‐AMPK蛋白显著增加（均 P<0.05）。 结论:GLP-1可以减少AGE诱导的HAEC铁死亡，其机制可能与激活LKB1/AMPK信号通路有关。

目的:探讨瑞舒伐他汀是否作用于淋巴系统，影响淋巴系统介导的胆固醇逆转运发挥抗动脉粥样硬化作用。方法:使用48只高脂饮食饲养载脂蛋白E -/-小鼠构建动脉粥样硬化模型。随机分为4组，每组12只，分别予瑞舒伐他汀、血管内皮生长因子-C（VEGF-C）、瑞舒伐他汀+VEGF-C抑制剂作为实验组，对照组无干预措施。8周后检测小鼠主动脉斑块面积，淋巴液内高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量、腘窝淋巴管引流外周Evans蓝的功能、淋巴系统转运外周细胞膜红色荧光探针标记高密度脂蛋白（HDL）的能力。随后分别检测不同浓度瑞舒伐他汀对淋巴内皮细胞增殖、迁移、成管功能的影响和对淋巴内皮细胞上B类1型清道夫受体（scavenger receptor class B type 1，SR-B1）表达的影响。 结果:与对照组相比，瑞舒伐他汀和VEGF-C可以减小主动脉动脉粥样硬化斑块面积（ P<0.05）。在瑞舒伐他汀他汀基础上加用VEGF-C抑制剂，主动脉内斑块面积增加（ P<0.05）。与对照组相比，瑞舒伐他汀可以增加小鼠淋巴液内HDL-C含量（ P<0.05），增强淋巴管引流功能，增强淋巴系统转运组织液中HDL的能力。与对照组相比，VEGF-C增加小鼠淋巴液内HDL-C的含量（ P<0.01）、增强腘窝淋巴管引流功能、增强淋巴系统转运HDL的能力。在瑞舒伐他汀基础上加用VEGF-C抑制剂，淋巴液中HDL-C含量减少、腘窝淋巴管出现引流中断，淋巴系统转运HDL的能力降低。免疫印迹试验结果显示，瑞舒伐他汀可以增加SR-B1的蛋白表达。 结论:瑞舒伐他汀可促进淋巴内皮细胞的增殖、迁移和成管；同时促进淋巴内皮细胞上SR-B1的表达，从而增强淋巴系统介导的胆固醇逆转运，发挥抗动脉粥样硬化作用。