牙源性干细胞具有间充质干细胞特性,通过与内皮细胞相互作用或分泌多种血管生成相关细胞因子促进血管再生.目前已分离并鉴定出的牙源性干细胞主要包括牙髓干细胞、脱落乳牙干细胞、牙周膜干细胞、根尖牙乳头干细胞、牙龈间充质干细胞和牙囊干细胞.本文通过整理分析近年文献资料,对上述牙源性干细胞促血管生成与组织再生的相关研究进展进行综述.

目的:研究WD重复结构域 63(WDR63)对人根尖牙乳头干细胞(SCAPs)体外成神经分化能力的作用.方法:通过实时荧光定量PCR检测未转染慢病毒SCAPs中WDR63 基因在成神经分化诱导 3、6、9 d的表达变化,利用慢病毒转染分别获得WDR63 稳定过表达和敲低的SCAPs,通过类神经球形成实验对各组SCAPs进行神经分化诱导,对类神经球的直径进行定量分析,免疫荧光染色实验检测SCAPs中巢蛋白(Nestin)和βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)的表达,实时荧光定量PCR实验检测神经分化相关指标βⅢ-tubulin、神经源性分化蛋白(NeuroD)、神经细胞黏附分子(NCAM)和Nestin基因的表达.结果:未转染慢病毒SCAPs中WDR63 的表达量在成神经分化后的3、6、9 d逐渐增加(P＜0.05);过表达WDR63 后,WDR63 基因(P＜0.001)和蛋白表达增加,神经球直径增加(P＜0.01),Nestin 和 βⅢ-tubulin 神经球样细胞荧光强度增加(P＜0.01),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达升高(P＜0.05);敲低WDR63 后,WDR63 基因(P＜0.01)和蛋白的表达降低,神经球直径降低(P＜0.05),Nestin和βⅢ-tubulin神经球样细胞荧光强度减少(P＜0.05),βⅢ-tubulin、NeuroD、NCAM和Nestin基因表达降低(P＜0.05).结论:WDR63 可促进SCAPs的成神经分化功能.

目的 评估新型生物陶瓷类材料c-Root SP对人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)的细胞增殖及骨诱导能力.方法 制备不同浓度c-Root SP浸提液,采用CCK-8 法检测其对hSCAPs的细胞增殖情况,使用碱性磷酸酶(ALP)活性测定法测定ALP酶水平和茜素红染色法观察钙化结节形成情况,数据采用单因素方差分析,与iRootSP对比,评价c-Root SP促进细胞增殖及骨诱导能力.结果 c-Root SP对hSCAPs的细胞增殖具有浓度依赖性,1/10 浓度浸提液增殖水平最好,c-Root SP1/5、1/10、1/1000 浓度浸提液对hSCAPs的细胞增殖的影响显著高于同浓度iRoot SP浸提液(P<0.05).成骨方面,矿化诱导 7 天,iRoot SP ALP活性显著高于c-Root SP(P<0.05),矿化诱导 14 天 c-Root SP矿化结节显著多于iRoot SP.结论 c-Root SP具有对hSCAPs的良好细胞增殖及骨诱导能力,与iRoot SP相似.

目的:探讨人牙源性干细胞（DSC）的数据独立采集（DIA）蛋白质组学的建立方法。方法:2021年8月至2022年9月于苏州口腔医院收集牙齿，培养来自不同个体的牙髓干细胞（DPSC）、牙龈间充质干细胞（GMSC）、牙周膜干细胞（PDLSC）、根尖乳头干细胞（SCAP）和人脱落乳牙来源的干细胞（SHED），每种细胞各3个样本，共计15个样本进行DIA蛋白组学测序。通过唯一肽段分布和蛋白质覆盖分布、蛋白质质量分布评估蛋白质鉴定结果，通过组内变异系数（CV）、主成分分析及样本定量相关性等方面来评估DIA数据的质量。结果:从细胞中提取的蛋白质样本合格，总样本中共鉴定出8 662个蛋白质。蛋白质鉴定的基本统计表明所鉴定的蛋白质是可靠的。差异蛋白分析显示，DSPC组与其他各组（GMSC、PDLSC、SCAP和SHED）比较，上调和下调的蛋白分别为125、168、100、102和106、107、94、107个。差异蛋白的热图显示，同DPSC比较，GMSC、PDLSC、SCAP和SHED均有不同高表达的蛋白图谱。京都基因和基因组百科全书数据库（KEGG）分析表明不同DSC的蛋白质富集在不同的信号通路。结论:本研究成功建立了不同DSC的DIA蛋白质组学分析方法，为后续研究奠定了基础。

目的:探究根尖牙乳头干细胞(SCAP)来源的凋亡囊泡(apoVs)是否通过影响糖酵解相关酶调控巨噬细胞(BMDMs)炎症表型,进而对炎症反应产生调节作用.方法:体外培养鉴定人源SCAP,经星形孢菌素诱导凋亡后提取apoVs,利用扫描电镜、流式细胞术等对其进行表征鉴定.分别空白处理、脂多糖(LPS)处理、LPS同apoVs共处理大鼠骨髓来源的BMDMs,利用流式细胞术检测促炎表型BMDMs表面标志分子CD80、CD86 的表达,利用Western blot检测BMDMs糖酵解相关酶的表达.结果:根尖牙乳头干细胞来源的apoVs能被BMDMs摄取,促炎表型标志分子CD80、CD86 的表达下调,糖酵解相关酶葡萄糖转运蛋白(GLUT)1、GLUT3 的表达显著下调(P＜0.05).结论:SCAP来源apoVs能降低促炎型BMDMs的分布,并对其糖酵解相关酶的表达产生影响.

迄今为止,已有多种牙源性间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)从具有外胚间充质来源的牙齿和牙周组织中分离出来,主要包括牙髓干细胞(dental pulp stem cells, DPSCs)、脱落乳牙干细胞(stem cells from human exfoliated deciduous teeth,SHED)、牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)、根尖乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)、牙囊干细胞(dental follicle stem cells,DFSC)、唾液腺干细胞(salivary gland stem cells,SGSCs)等.

目的:观察骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic proteins 4,BMP4)对人根尖牙乳头干细胞(stem cells from the apical papilla,SCAPs)增殖、迁移及矿化的影响,并探讨可能机制.方法:取P3代对数期SCAPs,随机分为空白组、NC组、mimics组、mimics+DAPT[神经源性基因Notch同源蛋白1(neurogenic locus notch homolog protein 1,Notch1)/Jagged1信号通路抑制剂]组.空白组不处理,NC组转染阴性对照质粒BMP4 NC,mimics组转染过表达质粒BMP4 mimics,mimics+DAPT组转染BMP4 mimics并加入DAPT(10 μmol/L).MTT法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力;茜素红染色法检测细胞矿化能力;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA 表达量;Western blot法检测细胞Notch1、Jagged1、发状分裂相关增强子1(Hes1)蛋白表达量.结果:与空白组、NC组比较,mimics组细胞24 h、48 h、72 h吸光度值,迁移量,矿化结节面积比,ALP、BSP、OCN mRNA表达量,Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达量升高(P＜0.05);与mimics组比较,mimics+DAPT组细胞24 h、48 h、72 h吸光度值,迁移量,矿化结节面积比,ALP、BSP、OCN mRNA表达量,Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达量降低(P＜0.05).结论:过表达BMP4可提升SCAPs增殖、迁移能力并促进其矿化,推测其作用机制可能与激活Notch1/Jagged1信号通路有关.

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子 1α(PGC-1α)在人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)定向分化中的作用.方法:hSCAPs矿化诱导 0、3、7 d,实时荧光定量PCR检测PGC-1α的基因表达水平.转染小干扰RNA(siRNA)构建稳定低表达PGC-1α的hSCAPs,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测PGC-1α的表达水平,采用碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色分别检测ALP活性和矿化水平的变化,Western blot和实时荧光定量PCR检测成牙/骨向分化相关蛋白和基因的变化.结果:PGC-1α的基因表达水平在hSCAPs定向分化过程中逐渐上调.与对照组相比,低表达PGC-1α的hSCAPs其ALP表达量下降,矿化结节减少,牙本质涎磷蛋白(DSPP)、ALP、Runt相关转录因子 2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)等成牙/骨向分化相关指标表达水平下调(P＜0.05).结论:沉默PGC-1α表达可抑制hSCAPs定向分化.

目的:探讨雌激素缺乏对大鼠根尖牙乳头干细胞(SCAPs)增殖及牙向/骨向分化能力的影响.方法:选取 20 只 8 周龄雌性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组和卵巢去势(OVX)组,每组各 10 只.全麻下OVX组摘除双侧卵巢,Sham组行相同切口保留双侧卵巢,术前、术后 1 个月分别检测两组大鼠血清雌二醇水平.1 个月后每组各处死 5 只大鼠,分离切牙根尖牙乳头组织,酶消化法分离培养两组SCAPs,采用MTT、碱性磷酸酶(ALP)活性检测、实时荧光定量PCR、Western blot检测雌激素缺乏对大鼠SCAPs增殖及成牙/成骨向分化能力的影响.将两组SCAPs细胞以明胶海绵为载体分别植入对应组别大鼠肾被膜下,8 周后取出植入组织,使用数字化X线牙片机对取出团块曝光成像及HE染色观察其矿化能力.结果:OVX组大鼠去势1 个月后血清雌二醇水平显著低于术前(P＜0.001),Sham组大鼠血清雌二醇水平术前、术后差异无统计学意义(P＞0.05).MTT结果显示,OVX组SCAPs增殖能力显著下降(P＜0.001).ALP活性检测结果显示,OVX组SCAPs的ALP活性低于Sham组(P＜0.001).实时荧光定量PCR和Western blot结果均表明OVX组SCAPs的牙本质涎磷蛋白(DSPP)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)、骨钙素(OCN)等成牙/成骨相关基因和蛋白表达低于Sham组(P＜0.01).体内移植结果显示,Sham组形成密度较高的较规则牙髓-牙本质复合体,而OVX组形成不规则结构.结论:雌激素缺乏减弱大鼠SCAPs的增殖及牙向/骨向分化能力.

[目的]分析经淫羊藿苷(ICA)刺激后,人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)增殖及骨向分化的作用机制.[方法]hSCAPs体外培养至第3 代后与不同浓度的ICA进行温育.2 d后,采用qRT-PCR和Western Blotting技术在mRNA和蛋白水平上分别检测hSCAPs的骨向分化相关因子骨保护素(OPG)和核因子-κB受体激活因子配体(RANKL)的表达;并通过CCK-8 检测hSCAPs受不同浓度的ICA诱导不同时间的增殖情况.[结果]根尖乳头分离出的hSCAPs在体外培养后,流式染色技术检测表面蛋白CD31、CD90和CD146细胞表达率分别为 4.03%、96.18%和95.42%.与对照组相比,ICA的体外刺激显著促进了hSCAPs中OPG的表达(P＜0.05),降低了RANKL的mRNA转录和翻译(P＜0.05),促进了hSCAPs的增殖分化(P＜0.05).当浓度为 0.1 mol/L时,ICA对hSCAPs的调控作用最强.[结论]ICA对hSCAPs细胞增殖和骨向分化的促进作用为临床上使用hSCAPs进行牙病治疗提供理论指导.