目的 探讨体腔热灌注化疗联合贝伐珠单抗在子宫内膜癌中的应用效果.方法 选取2018年1月至2020年1月期间大兴区人民医院与解放军总医院第八医学中心收治的子宫内膜癌(EC)患者89例,随机分为对照组(44例)和研究组(45例),对照组采用体腔热灌注化疗,研究组采用贝伐珠单抗联合体腔热灌注化疗.对比两组的化疗效果,化疗前后的血清恶性生物学指标、原癌基因表达、不良反应发生情况及预后.结果 研究组化疗后有效率与疾病控制率均高于对照组(P＜0.05);化疗后两组的血清恶性肿瘤特异性生长因子(TSGF)、泌乳素(PRL)、血管内皮生长因子(VEGF)、糖类抗原125(CA125)水平均下降(P＜0.05),研究组化疗后上述血清恶性生物学指标均低于对照组(P＜0.05).两组化疗后的原癌基因人类表皮生长因子受体2(c-erbB2)、髓细胞增生原癌基因(c-myc)、Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(K-ras)mRNA表达量均下降(P＜0.05),研究组化疗后c-erbB2、c-myc、K-ras表达量均低于对照组(P＜0.05).两组的毒副反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).随访6～36个月,对照组与研究组的无进展生存率分别为47.70％、68.20％,无进展生存时间分别为10个月和16个月,总生存率分别为20.5％、42.20％,总生存时间分别为18个月和23个月,两组的无进展生存率(Log-Rank x2=7.404,P=0.007)和总生存率比较差异有统计学意义(Log-Rank x2=8.432,P=0.004).结论 对EC患者应用贝伐珠单抗联合体腔热灌注化疗的效果显著,能有效降低血清恶性生物学指标和原癌基因的水平,延长患者的生存时间,且安全性佳.

目的:探讨葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、人类血管内皮生长因子C(VEGF-C)、核因子κB(NF-κB)在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及其对患者预后的影响。方法:回顾性研究。纳入2011年1月—2014年11月蚌埠市第三人民医院117例乳腺浸润性导管癌患者(年龄20～79岁)的临床资料及癌组织病理学标本，并随机采集其中51例患者的癌旁组织标本。以免疫组织化学法检测标本中GLUT-1、VEGF-C、NF-κB的表达，比较其在癌组织和癌旁组织中表达量的差异，分析阳性表达与浸润性导管癌临床病理因素的关系，及其对临床预后的影响。结果:GLUT-1、NF-κB、VEGF-C在浸润性导管癌组织中阳性表达率高于癌旁组织，差异均有统计学意义(χ 2＝45.785、48.433、48.236, P值均<0.01)。GLUT-1、NF-κB、VEGF-C在不同肿瘤大小、有无淋巴浸润、不同TNM分期和病理分级患者阳性表达率的差异均有统计学意义( P值均<0.05)。117例浸润性导管癌患者中，失访7例，死亡32例。110例随访的乳腺浸润性导管癌患者中，GLUT-1阳性表达患者的5年生存率(21.82%)显著低于阴性表达患者(77.09%)，差异有统计学意义(χ 2＝10.854， P<0.01)；NF-κB、VEGF-C阳性表达与阴性表达患者5年生存率差异均无统计学意义(χ 2＝0.843、0.852， P值均>0.05)。 结论:GLUT-1、VEGF-C、NF-κB表达升高可能参与了乳腺浸润性导管癌的侵袭进展过程，其中GLUT-1是影响患者预后的高风险因素。

患者，男，57岁，因"视力突然下降1个月余，注药后加重半月余"就诊于山东省中医院眼科。2021年3月患者因眼部不适就诊于当地医院，裸眼视力检查示：右眼1.0，左眼1.0。眼底彩照未见明显异常（见图1）。4月视力突然下降就诊于外院。患者自述未有高血压、糖尿病病史。外院裸眼视力检查示：右眼0.3，左眼0.2。眼底彩照示：双眼视网膜可见点片状出血，视网膜动脉变细，静脉充盈（见图2A-B）。光学相干断层扫描血管成像（Optical coherence tomography angiography，OCTA）示：双眼浅、深层供血破坏，可见异常血流信号，黄斑区水肿（见图2C-D）。眼底荧光素血管造影（FFA）示：双眼动静脉充盈迟缓，可见荧光渗漏及无灌注区，晚期动静脉管壁着色（见图3A-C）。光学相干断层扫描（OCT）示：双眼黄斑区水肿（见图3D-E）。外院诊断：双眼糖尿病性视网膜病（Diabetic retinopathy，DR）；双眼黄斑水肿。入院查体：糖化血红蛋白测定为6.7%；白细胞指数为13.68×10 9/L，中性粒细胞百分比为88.9%，中性粒细胞绝对值为12.17×10 9/L；血糖为8.65 mmol/L，余其他指标均正常。人类白细胞抗原B27（Human Leukocyte Antigen B27，HLA-B27）示：弱阳性；补体C3+C4、凝血四项、抗核抗体测定、抗核抗体谱测定、感染系列、C反应蛋白、血液免疫球蛋白（G、A、M）、抗中性粒细胞浆抗体检测均未见明显异常。外院给予双眼玻璃体腔注射康柏西普眼用注射液（浪沐）0.5 mg。注药次日，患者自觉视力下降明显，裸眼视力检查示：右眼指数/50 cm，左眼指数/50 cm；FFA示：双眼动脉灌注不良，荧光渗漏及荧光遮蔽，黄斑水肿，晚期血管壁着色（见图4A-D）；OCT示：双眼黄斑水肿（见图4E-F）。先后行2次视网膜激光治疗，视力提升至右眼0.2，左眼0.5。5月因视力持续下降就诊于山东省中医院，刻下症见：双眼视力下降，纳眠可，二便调。眼科检查示：裸眼视力右眼0.15，左眼0.08；双眼眼前节无异常，晶状体皮质混浊，玻璃体透明。眼底检查示：双眼视盘界欠清色淡，视网膜动脉血管变细呈白线状，静脉充盈但未见明显迂曲，A（动脉）：V（静脉）=1:3,平行血管可见点片状出血，黄斑区出血、水肿，中心凹反光（-），视网膜周边部可见激光斑（如图5A-B）。OCT示：双眼黄斑区水肿、出血（见图5C-D）。眼内液化验结果示：白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）为30.4 pg/ml；血管内皮生长因子-A（Vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A）为31.0 pg/ml；血管细胞黏附分子（Vascular cell adhesion molecule，VCAM）为1704.8 pg/ml，可排除病毒可能性。诊断为：双眼缺血型视网膜血管炎；双眼视网膜不全动脉阻塞；双眼黄斑水肿。治疗：给予泼尼松45 mg/d，15 d后减量为35 mg，之后逐渐减量；复方血栓通胶囊（广东众生药业股份有限公司），每天1.5 g，1天3次，治疗半个月后裸眼视力恢复至右眼0.2，左眼0.15。

目的:运用网络药理学方法和分子对接技术探讨炙甘草汤减轻心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制.方法:利用中医药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)与中药分子机制生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)获取炙甘草汤有效成分并预测其作用靶点,然后应用人类基因综合(GeneCards)与人类疾病相关基因和突变信息的综合平台(DisGeNET)数据库预测 MIRI靶点,通过Venny在线绘图软件获取炙甘草汤抗 MIRI潜在作用靶点.利用蛋白质相互作用分析数据库(STRING数据库)平台构建蛋白互作(PPI)网络,并通过 Cytoscope 3.9.1软件可视化、筛选出核心靶点,利用 Metascape 基因功能分析平台对筛选出的核心靶点进行基因本体(GO)富集分析与京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,探究炙甘草汤抗 MIRI机制,再次利用 Cytoscape 3.9.1软件构建活性成分-疾病-核心靶点-通路网络.最后利用分子对接程序 AutoDock vina对炙甘草汤主要活性成分与其核心靶点结合活性进行验证.结果:经筛选获得炙甘草汤 147个活性成分、865个基因靶点,MIRI 144个靶标,通过 Venny数据库获取炙甘草汤抗 MIRI潜在作用靶点 79个;经 PPI网络分析并筛选出 40个关键靶点,其中肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、蛋白激酶B(AKT1)、血管内皮生长因子 A(VEGFA)、一氧化氮合酶 3(NOS3)、过氧化氢酶(CAT)、CC趋化因子配体 2(CCL2)、髓过氧化物酶(MPO)均与炎症反应或氧化应激有关.经 GO富集分析发现氧化应激、炎症反应与此生物学过程密切相关;经 KEGG分析探究炙甘草汤抗 MIRI的通路,共映射出 178条信号通路.将炙甘草汤活性成分-疾病-核心靶点-通路网络中排名居前 3位的成分及其关键靶点进行验证,结果显示炙甘草汤主要活性成分与关键作用靶点结合活性很强,能形成稳定的化合物.结论:甘草查尔酮 A、人参皂苷 Rh2、6-醛基异麦冬黄酮 B、山柰酚、芒柄花黄素、麦冬皂苷 C等为炙甘草汤抗 MIRI的主要成分,通过 TNF、IL-6、AKT1、VEGFA、NOS3、CAT、CCL2、MPO等核心靶点调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、TNF、Toll样受体-4(TLR4)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶 B(PI3K/AKT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转化生长因子-β(TGF-β)、核转录因子-κB(NF-κB)等信号通路,减轻改善 MIRI,体现出炙甘草汤多成分-多靶点-多途径的作用优势,为进一步深入动物学实验与临床试验提供了数据与理论支持.

目的 探讨秦艽不同配伍药对对风湿热痹型类风湿关节炎(RA)大鼠踝关节血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达及病理学的影响.方法 SD大鼠80只,随机分为正常对照组、Ⅱ型胶原组、病证模型组、阳性药组(雷公藤多苷片组,6 mg·kg-1)、单味秦艽组、秦艽威灵仙组(平-温相配)、秦艽桑寄生组(平-平相配)和秦艽防己组(平-寒相配),每组10只;采用天然牛Ⅱ型胶原(CⅡ)+人工气候箱模拟人类痹证成因,连续造模18 d建立风湿热痹型RA模型大鼠;造模结束后,各中药组按25.05 g·kg-1连续灌胃给药21 d.实验第38天对各组大鼠进行关节炎指数(AI)评分;HE染色观察踝关节组织病理切片;分别用免疫组织化学法及Western Blot法检测踝关节VEGF的表达.结果 与正常对照组比较,Ⅱ型胶原组和病证模型组踝关节滑膜组织血管增生,结缔组织破坏,炎性细胞浸润,血管翳形成,软骨破坏,且病证模型组关节面完全破坏,其破坏程度明显高于Ⅱ型胶原组;Ⅱ型胶原组和病证模型组AI评分、VEGF表达量均显著增加(P<0.01),且病证模型组高于Ⅱ型胶原组.与病证模型组比较,各给药组炎性细胞明显减少,毛细血管减少,绒毛变少,肉芽组织老化,纤维增多成为瘢痕,并且软骨破坏减轻;各给药组的AI评分、VEGF表达量均有不同程度的降低,其中秦艽防己组最为显著(P<0.01).结论 秦艽各配伍药对可能通过调节风湿热痹型RA模型大鼠的VEGF表达,进而抑制新生血管的增生,发挥对RA的治疗作用,且平-寒相配效果优于平-温、平-平相配.

贝伐珠单抗是一种人源化的抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)重组单克隆抗体,其人类免疫球蛋白 G(IgG)片段占 93％,其余的是鼠源结构,人源化部分可以使该药的 t1/2 延长和免疫原性降低[1].VEGF 是血管生成的重要调控因子, VEGF-A/VEGFR2信号由 PLC-γ1通过促进其激动激酶 C和 Raf-MEK信号通路,最终通过 ERK1/2促进血管内皮细胞的增殖[2].原位杂交研究表明,多种人实体肿瘤中均存在 VEGF mRNA的表达[3].肿瘤新生血管的生成是肿瘤与其周围环境中血管生长因子相互作用的结果[4],贝伐珠单抗可以与 VEGF特异性结合,从而阻断其与受体结合,使血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)无法活化,从而发挥抗血管生成的作用.因 VEGF能促进异常肿瘤血管内皮细胞增殖、迁移、新生和增加肿瘤血管通透性,故贝伐珠单抗结合 VEGF后,异常肿瘤血管得到改善,肿瘤血管通透性变得正常,肿瘤部位的血管出现退化,肿瘤体积变小.同时,组织间隙的压力下降,最终使化疗药物更多更顺利地到达肿瘤部位[5].

高血压已成为危害人类健康主要原因之一.其中,90％以上是原发性高血压,全世界每年因高血压及相关并发症而死亡人数达900万[1].血管内皮细胞是介于血管平滑肌和血液间的机械屏障,是许多活性物质的靶器官.其可分泌血管舒张因子和收缩因子,二者达到平衡可调节血管舒缩、促进纤溶系统与凝血平衡、抑制血小板聚集及炎性细胞黏附于血管内皮,调节血管平滑肌生长等.血管内皮功能障碍是由于临床各种病理情况,导致血管内皮细胞发生的功能异常.舒血管因子NO释放减少,缩血管因子内皮素1分泌增多,血管平衡稳态被打破,参与了高血压、冠心病等心血管事件的发生.本综述将对血管内皮功能障碍、修复机制与高血压的关系进行探讨.

目的 探讨二烯丙基三硫化物(DATS)对TNF-α诱导的人RA-成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖以及炎症因子、MMPs和血管内皮生长因子(VEGF)分泌的影响.方法 体外培养RA-FLS,采用不同浓度DATS处理细胞,通过CCK-8法测定细胞增殖的活性,加用TNF-α刺激后,通过实时荧光定量(q)-PCR、ELISA检测IL-1β、MMP-1、VEGF的mRNA和蛋白的表达水平,采用单因素方差分析比较多组定量资料,采用LSD-t法比较组间均数.结果 分离出的RA-FLS中CD90、CD29表达的阳性率>90％.经100μmol/L、200μmol/L、300μmol/L DATS处理,细胞增殖活力分别为[(98.92±0.40)％、(95.91±0.32)％、(94.05±0.24)％],与正常对照组比较增殖活性均下降,加入200μmol/L、300μmol/L DATS的实验组差异有统计学意义(t=4.46,P<0.05;t=7.98,P<0.05).加用TNF-α刺激后,与实验对照组相比,加入100μmol/L DATS实验A组中的IL-6 mRNA相对表达量升高[(1.14±0.04)倍,t=5.74,P<0.05],但蛋白变化差异无统计学意义,MMP-1、VEGF蛋白及mRNA变化差异无统计学意义.加入200μmol/L DATS实验B组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平分别为[(108.0±4.7)ng/L,t=-63.79,P<0.05;(26.0±1.0)ng/L,t=-9.68,P<0.05;(57.9±0.7),t=-34.59,P<0.05]、mRNA较实验对照组的相对表达量分别为[(0.42±0.06)倍,t=-23.47,P<0.05;(0.14±0.03)倍,t=-36.59,P<0.05;(0.36±0.09)倍,t=-13.1,P<0.05];加入300μmol/L DATS实验C组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平[(24.2±2.3)ng/L,t=-88.69,P<0.05;(22.7±1.0)ng/L,t=-14.13,P<0.05;(34.5±1.7),t=-48.45,P<0.05],mRNA较实验组对照组的相对表达量为[(0.041±0.027)倍,t=-38.48,P<0.05;(0.027±0.027)倍,t=-41.22,P<0.05;(0.131±0.047)倍,t=-17.74,P<0.05],均较实验对照组明显降低,且2组蛋白水平间比较差异有统计学意义(t=-24.89,P<0.05;t=-4.45,P<0.05;t=-13.87,P<0.05).结论 DATS浓度≥200μmol/L时能够抑制RA-FLSs的增殖,并抑制其分泌IL-6、MMP-1、VEGF,而且呈剂量依赖关系.

目的:研究桃仁-红花药对治疗股骨头坏死(ONFH)的作用机制.方法:采用网络药理学方法.以化合物口服利用度(OB)>30％和类药性(DL)>0.18为标准,通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)、反向分子对接服务器(DRAR-CPI)、人类基因数据库(GeneCards)和在线《人类孟德尔遗传》数据库(OMIM)筛选桃仁-红花药对的活性成分及治疗ONFH的作用靶标.借助网络拓扑属性分析软件Cytoscape 3.6.0构建活性成分-ONFH靶标网络.结合STRING数据库构建靶蛋白相互作用网络,筛选连接度排名前5的靶蛋白,并利用分子对接服务器预测其与桃仁-红花药对活性成分的结合活性.利用生物学信息注释数据库(DA-VID)对靶点基因本体(GO)生物过程和京都基因与基因组百科全书(KEGG)中代谢通路进行富集分析.结果:从桃仁-红花药对中筛选出活性成分44个,包括黄芩苷、槲皮素等,与ONFH相关的作用靶点78个,包括血管内皮生长因子(VEGF)、内皮细胞生长抑制因子(VEGI)、急性C反应蛋白(CRP)等.经分子对接服务器分析发现,桃仁-红花药对的活性成分与靶蛋白结合能力较强.经GO和KEGG通路富集分析发现,桃仁-红花药对治疗ONFH的生物过程与凋亡过程负向调节、核转录因子κB活动的正向调节等有关,主要通过调节分泌型糖蛋白信号通路、黑色素生成信号通路、VEGF信号通路、基底部细胞癌信号通路、腺苷酸活化蛋白激酶信号通路等发挥作用.结论:本研究初步明确了桃仁-红花药对治疗ONFH的主要靶标和通路,可为后续进一步研究其药理作用奠定基础.

目的 基于网络药理学,探究仙鹤草对治疗结肠癌(Colon cancer)可能的作用机制.方法 利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库以及文献查阅,检索并收集仙鹤草成分的活性成分及其对应的靶标.通过Uniprot数据库和人类基因组注释数据库(Genecards),收集与结肠癌相关的靶标,并与药物成分所对应的靶标相比较,筛选出共同部分,获得仙鹤草与结肠癌重合的潜在靶基因.使用Cytoscape 3.6.0软件构建仙鹤草的"候选成分-作用靶标"网络.使omicshare平台将药物靶蛋白和疾病靶点相映射,并绘制Venn图.结合string数据库及Cytoscape软件中的Generate style from statistics工具,构建蛋白质相互作用网络.通过Systems Dock Web Site网络服务器与仙鹤草的活性成分进行分子对接.利用Database for Annotation,Visualization and Integration Discovery(DAVID)生物信息资源数据库,对仙鹤草的作用靶标进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析和GO分类富集分析.结果 共从仙鹤草中筛选得到5个候选活性成分,包括ellagic acid(鞣花酸)、kaempferol(山奈酚)、(+)-catechin、luteolin(木犀草素)、quercetin(槲皮苷),和158个作用靶标,包括丝苏氨酸激酶(AKT1),肿瘤抑制基因p53(TP53),白介素-6(IL-6),血管内皮生长因子(VEGF)、氨基端激酶(c-JUN)等,主要涉及低氧诱导因子1(HIF-1),磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)等信号通路.结论 本研究基于网络药理学的方法初步预测了仙鹤草治疗结肠癌的可能的作用机制,为后续的深入研究提供了方向.