目的:评估小儿法罗培南钠对儿童呼吸道临床分离常见致病菌的体外抗菌活性，为其临床研究和应用提供参考。方法:回顾性分析。采用琼脂稀释法测定法罗培南钠、美罗培南、亚胺培南等抗菌药物对儿童临床分离的156株肺炎链球菌[青霉素敏感(PSSP)32株、青霉素中介(PISP)28株及青霉素耐药(PRSP)96株]、98株流感嗜血杆菌、173株肺炎克雷伯菌和55株卡他莫拉菌的最低抑菌浓度(MIC)，计算MIC 50、MIC 90及累积抑菌百分率。 结果:法罗培南钠对肺炎链球菌的MIC范围为0.010~2.000 mg/L；PSSP、PISP、PRSP的MIC分布无差别，MIC 90皆为1.000 mg/L。对流感嗜血杆菌的MIC范围为0.030~8.000 mg/L，其产酶和氨苄西林耐药表型不同的菌株之间比较，MIC分布无明显差别，MIC 90皆为4.000 mg/L。对肺炎克雷伯菌的MIC范围为0.250~>32.000 mg/L，MIC 50和MIC 90均>32.000 mg/L。法罗培南钠对卡他莫拉菌的MIC范围为0.030~2.000 mg/L，MIC 50为0.500 mg/L，MIC 90为1.000 mg/L。 结论:体外药敏试验结果表明，小儿法罗培南钠对肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌均有较好的抑菌效果，但抑制肺炎克雷伯菌的作用较弱。

目的:了解罕见致病菌马克斯克鲁维酵母（乳酒念珠菌）临床感染状况和耐药趋势，为临床诊疗提供经验。方法:对上海长海医院皮肤科真菌实验室于1例泌尿系结石患者中段尿标本中分离出的1株马克斯克鲁维酵母菌株进行形态学及分子生物学鉴定，体外微量稀释药物敏感性（简称药敏）试验，扫描电镜观察在不同药物作用下菌株超微结构的破坏情况。回顾性分析上海长海医院2009—2021年马克斯克鲁维酵母菌感染临床病例资料。结果:分离到的菌株沙氏琼脂培养基上形成光滑、柔软、奶酪样酵母菌落，镜下可见卵圆形至细长形孢子。经菌落形态、质谱分析和测序分析鉴定为马克斯克鲁维酵母，药敏试验显示两性霉素B最低抑菌浓度0.5 μg/ml，氟康唑0.5 μg/ml，伊曲康唑0.03 μg/ml，伏立康唑≤ 0.03 μg/ml，泊沙康唑0.06 μg/ml，氟胞嘧啶0.5 μg/ml，卡泊芬净≤ 0.016 μg/ml，米卡芬净0.06 μg/ml。扫描电镜观察到未经药物处理时该菌为卵圆形至细长形，大小（3.0 ~ 6.5） μm × （5.5 ~ 11.0） μm；在1 μg/ml药物作用24 h后，泊沙康唑较两性霉素B和伏立康唑对该菌的破坏作用更强，细胞膜皱缩凹陷更明显。2009—2021年上海长海医院共收集8例马克斯克鲁维酵母感染患者，男6例，女2例，菌株分离自腹水3株、肺泡灌洗液1株、痰液和中段尿各2株。结论:对于可疑马克斯克鲁维酵母感染，应利用多种方法尽早确定致病菌种，并完善菌株收集和药敏试验，有助于临床针对性治疗。

目的:探讨眼表感染细菌中耐药葡萄球菌对左氧氟沙星、妥布霉素、头孢唑林钠、克林霉素及夫西地酸5种眼科常用抗生素的体外敏感性，为临床选择用药提供参考。方法:实验研究。收集河南省立眼科医院微生物室2018年1月至2019年5月眼表分离的67株耐药葡萄球菌，包括耐药表皮葡萄球菌（28株）、耐药金黄色葡萄球菌（17株）、耐药中间葡萄球菌（15株）及少数其他种类耐药葡萄球菌（7株）。采用微量液基法测定左氧氟沙星、妥布霉素、头孢唑林钠、克林霉素及夫西地酸对67株耐药葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC），并依据美国临床和实验室标准化研究所的M100标准进行敏感性判定。采用卡方检验和Fisher精确检验对数据进行统计学分析。结果:28株耐药表皮葡萄球菌中，17株mecA基因阳性者有14株对夫西地酸敏感，与左氧氟沙星比较，差异有统计学意义（ P=0.032）；17株耐药金黄色葡萄球菌中，14株产β内酰胺酶者分别有14、11株对头孢唑林钠和夫西地酸敏感，两种药物与左氧氟沙星相比较，差异均有统计学意义（ P=0.000，0.007）；15株耐药中间葡萄球菌中，10株mecA基因阳性者分别有6、5株对头孢唑林钠和夫西地酸敏感，与左氧氟沙星相比，差异均有统计学意义（ P=0.011，0.033）；7株其他耐药葡萄球菌中，5株mecA基因阳性者有4株对头孢唑林钠敏感，与左氧氟沙星相比，差异有统计学意义（ P=0.048）。67株耐药葡萄球菌中，分别有54、48株对头孢唑林钠和夫西地酸敏感，敏感率为80.1%和71.6%，敏感性明显高于左氧氟沙星、妥布霉素、克林霉素3种药物，药物敏感性差异均有统计学意义（χ2 =18.377，9.940； P=0.000，0.003）。 结论:耐药葡萄球菌对头孢唑林钠和夫西地酸的敏感性优于左氧氟沙星、妥布霉素和克林霉素，可为临床治疗眼部耐药葡萄球菌感染的经验用药提供指导。 （中华眼科杂志，2020，56：621-625）

目的:探讨亚胺培南联合常用抗菌药物对bla KPC-2型碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CRKP）的体外抗菌作用。 方法:选取乐清市人民医院2018年1月至2019年1月分离的6株非重复的经聚合酶链反应和DNA序列确认的bla KPC-2型CRKP菌株，测量其对常用9种抗菌药物的敏感率，采取棋盘稀释法进行亚胺培南联合8种抗菌药物的药物敏感性试验，计算部分抑菌浓度指数（FIC）并评价联合应用效果；通过绘制体外时间-杀菌曲线评估联合用药的杀菌作用。 结果:6株bla KPC-2型CRKP菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、环丙沙星、利福平、头孢噻肟等抗菌药物耐药率为100.00％（6/6），对米诺环素、克拉维酸耐药率为66.67％（4/6），对替加环素耐药率为33.33％（2/6）；亚胺培南联合替加环素抗菌作用较好，对4株起协同作用、2株起相加作用；以菌株KPN2进行亚胺培南联合替加环素治疗的时间-杀菌曲线显示：菌株KPN2在亚胺培南1/2最低抑菌浓度（MIC）与替加环素1/4 MIC在（t+2）时杀菌率>95％，此作用可维持（t+10）h至（t+12）h，亚胺培南联合替加环素对002杀菌率逐步降低，002生长曲线逐渐上升。 结论:体外药物敏感性试验显示，亚胺培南联合替加环素对bla KPC-2型CRKP具有较好协同杀菌作用，可供临床治疗bla KPC-2型CRKP感染患者时参考。

目的:探讨硫氯酚与庆大霉素联用对粪肠球菌的抗菌活性。方法:11株粪肠球菌临床菌株于2018年1月至2019年12月收集自中南大学湘雅三医院住院患者，通过微量肉汤稀释法检测硫氯酚及庆大霉素对粪肠球菌的抗菌活性；通过微量棋盘稀释法检测硫氯酚与庆大霉素的联用效果；最后，选取亚抑菌浓度的硫氯酚及与庆大霉素分别单独及联合处理48 h后观察其持续抗菌效果。多组间计量资料比较采用单因素方差分析，多组中两两比较采用Tukey或Dunnett检验。结果:硫氯酚对粪肠球菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度分别为2~4 mg/L和4~8 mg/L。硫氯酚与庆大霉素联用具有协同抑菌作用，其协同抑菌指数为0.313~0.375。硫氯酚与庆大霉素联用48 h能持续抑制粪肠球菌的增殖（ P<0.01）。硫氯酚能协同庆大霉素抑制粪肠球菌生物膜的形成及分散24 h已形成的生物膜（ P<0.05）。 结论:硫氯酚与庆大霉素联用对粪肠球菌具有协同抑制作用，且抑菌效果可持续48 h以上。

目的:比较浅部、深部感染来源的氟康唑耐药白念珠菌体外对8种抗真菌药物的敏感性及耐药基因突变。方法:26株深部感染来源白念珠菌耐药株、33株浅部感染来源白念珠菌耐药株，参照CLSI酵母菌检测方案M27-A4测定上述菌株对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑、两性霉素B、氟胞嘧啶、特比萘芬、米卡芬净8种药物单独或联合的体外敏感性。提取所有耐药菌株DNA，通过PCR检测ERG3、ERG11、FUR1 3种耐药基因的突变情况。满足正态分布和方差齐性检验的定量资料两组间比较采用独立样本 t检验，不满足者组间比较采用Mann-Whitney U检验，定性资料组间比较采用卡方检验。 结果:氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、氟胞嘧啶的最小抑菌浓度（MIC）在浅部感染组和深部感染组间差异均有统计学意义（均 P<0.05），而两性霉素B、米卡芬净的MIC两组间差异无统计学意义（均 P > 0.05）。96.6%的菌株特比萘芬MIC值>64 μg/ml，无法进行组间对比。15株白念珠菌（7株深部感染来源、8株浅部感染来源）特比萘芬+唑类（氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、泊沙康唑）联合药敏试验均显示为协同效应，部分抑菌浓度（FIC）指数0.033~0.187；氟胞嘧啶+唑类、氟胞嘧啶+两性霉素B、两性霉素B +氟康唑组合均无明显协同作用，FIC指数0.56~1.125。浅部感染来源白念珠菌ERG3基因突变包括错义突变V351A（33株，100%），深部感染来源白念珠菌包括错义突变V351A（13株，50%）、A353T（4株，15%）；浅部感染来源白念珠菌ERG11基因突变包括错义突变I437V（32株，97%）、Y132H（23株，70%）、T123I（16株，48%）、K128T（6株，18%）、D116E（5株，15%）、A114S（4株，12%）、E266D（2株，6%）、G448E（2株，6%）、G465S（2株，6%），深部感染来源白念珠菌包括I437V（23株，88%）、E266D（13株，50%）、E260G（5株，19%）、V488I（4株，15%）；浅部感染来源白念珠菌FUR1基因突变包括错义突变R101C（11株，33%），深部感染来源白念珠菌未检出错义突变。 结论:浅部与深部感染来源白念珠菌氟康唑耐药株对药物的敏感性及基因突变位点均有所差别。

目的:研究复合万古霉素3D打印聚己内酯支架（载万古霉素水凝胶聚己内酯复合支架，简称载药复合支架）制备方法及体外抗菌作用。方法:采用3D打印技术制备的聚己内酯（PCL）支架作为骨修复的力学支撑。将负载万古霉素的醛基化透明质酸和羧甲基壳聚糖形成的复合水凝胶（Van@Gel）灌注在3D打印PCL支架的孔隙内，制备兼具抗感染性和促成骨修复的双功能骨再生复合支架。通过拉压力试验机对PCL支架进行抗压强度测试；应用紫外分光光度计测量载万古霉素水凝胶不同时间体外药物释放量；通过定性和定量检测载药复合支架体外抗菌性能。结果:力学检测发现PCL支架的弹性模量约为（14.89±0.24）MPa，抗压强度约为2 MPa。载万古霉素水凝胶能在30 d内持续释放抗生素，总释放量约为75.5%。在第4天，万古霉素的释放出现明显的突释现象，释放量约为46.6%。体外抗菌实验证实载药复合支架能有效抑制细菌的生长，孵育12 h后即能形成明显的抑菌圈，20 mg/L时抑菌率为52.89%，80 mg/L时抑菌率达到80.49%。结论:3D打印支架具有较强的力学性能，载万古霉素复合支架具有良好的体外抑菌作用。

目的:体外检测小檗碱对酵母相马尔尼菲篮状菌（TM）的抗菌活性。方法:TM标准株（ATCC22019）1株，临床分离株10株，野生竹鼠分离株10株。TM以（1~5）× 10 3菌落形成单位/ml菌悬液接种于用微量稀释法制备的小檗碱、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、卡泊芬净药敏板，在37 ℃下培养48 h后观察结果，同时设阳性对照（仅加TM和培养基，不加药物）和阴性对照（仅加培养基，不加TM和药物）。参照M27-A3方案测定最低抑菌浓度（MIC）。 结果:质控株（ATCC22019）MIC均在参考范围内，阳性对照孔TM生长良好。小檗碱MIC范围为32~64 mg/L；氟康唑对非耐药株MIC为2~4 mg/L，对2株临床耐药株为128 mg/L；伊曲康唑MIC为0.06~0.125 mg/L，伏立康唑为0.06~0.125 mg/L，两性霉素B为1~2 mg/L，卡泊芬净为16~32 mg/L。结论:小檗碱具有抑制酵母相TM活性的作用。

目的:初步评价自主构建的结核多组分重组蛋白疫苗EPRHP014免疫原性和保护效果，为研制结核新疫苗、有效防控结核病提供科学基础。方法:选择结核分枝杆菌全长蛋白抗原3种（EsxH、Rv2628和HspX）和经表位预测和优化的表位优势蛋白抗原2种（nPPE18和nPstS1），共5种组分构建蛋白抗原组合物EPRHP014，包括融合表达纯化的多组分蛋白抗原（EPRHP014f）和分别表达纯化单个蛋白构成多组分混合蛋白抗原（EPRHP014m）。EPRHP014f和EPRHP014m分别辅以铝佐剂制备多组分蛋白疫苗，采用卡介苗（BCG）作对照。皮下注射免疫BALB/c小鼠后，采用ELISA法检测血清特异性抗体效价，采用ELISpot和Luminex技术检测多种细胞因子分泌情况，采用结核分枝杆菌体外生长抑制试验观察其免疫保护作用。结果采用 t检验或秩和检验进行统计分析。 结果:EPRHP014m和EPRHP014f免疫小鼠后均能诱导产生高效价的IgG抗体及其亚型IgG1和IgG2a，抗体效价与BCG免疫组小鼠差异无统计学意义（ P>0.05）。EPRHP014f组诱导产生的分泌IFN-γ和IL-4的斑点形成细胞（SFC）数量均高于EPRHP014m组和BCG组（ P<0.05），而EPRHP014m组和BCG组的IFN-γ和IL-4的SFC数量差异无统计学意义（ P>0.05）。EPRHP014m组诱导分泌的GM-CSF、IL-12p70均高于BCG组（ P<0.05），而IL-6和IL-10分泌水平与BCG组的差异无统计学意义（ P>0.05）；EPRHP014f组和BCG组的IL-6、IL-10、IL-12和GM-CSF分泌水平差异无统计学意义（ P>0.05）。EPRHP014m组、EPRHP014f组和BCG组具有明显的体外抑菌作用，差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:EPRHP014f和EPRHP014m免疫后均能诱导小鼠产生较强的体液免疫和细胞免疫应答，且有较强的体外抑制结核分枝杆菌生长的能力，显示抗原组合物EPRHP014具有良好的结核疫苗研发和应用价值。

目的:了解儿童百日咳鲍特菌感染的临床特点、菌株体外耐药模式和治疗效果，为百日咳的诊治提供参考。方法:采集2017年浙江大学医学院附属儿童医院临床疑诊为百日咳的住院患儿的鼻咽拭子培养百日咳鲍特菌，并收集患儿的临床表现资料，菌株以百日咳特异性抗血清凝集试验鉴定，并经质谱分析最终确认。药物敏感试验采用E-test法，抗菌药物治疗2周评价疗效。统计学分析采用曼-惠特尼 U检验和 χ2检验。 结果:1 029例患儿中211例(20.5%)鼻咽拭子培养百日咳鲍特菌阳性，7月份分离率最高[31.2%(45/144)]。211例患儿中，男105例(49.8%)，女106例(50.2%)，年龄为3.8(2.2，6.9)个月，114例(54.0%)未接种百白破混合疫苗。192例(91.0%)患儿在标本采集前曾使用抗菌药物，142例(67.3%)来自多孩家庭，其中136例(95.8%)为家庭中的幼子。159例(75.4%)夜间阵发性咳嗽剧烈，61例(28.9%)咳嗽后有鸡鸣样回声。白细胞计数>20×10 9/L、淋巴细胞计数>10×10 9/L的患儿分别为94例(44.5%)和97例(46.0%)。红霉素、阿奇霉素和克林霉素对138株(65.4%)菌株的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)均>256.000 mg/L。氨苄西林、头孢曲松、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南和甲氧苄啶/磺胺甲基异口恶唑对菌株的MIC 90分别为0.190、0.190、0.094、0.094和0.750 mg/L；哌拉西林/他唑巴坦对所有菌株的MIC均<0.016 mg/L。195例(92.4%)患儿经治疗后症状明显好转出院。76例(57.1%)经红霉素或阿奇霉素治疗满7 d症状无改善者改用或联合应用其他抗菌药物。使用头孢哌酮/舒巴坦或哌拉西林/他唑巴坦的患儿单药治疗2周[46/48(95.8%)比46/57(80.7%)]、出院后1周[45/46(97.8%)比39/47(83.0%)]和出院后2周[45/45(100.0%)比41/47(87.2%)]鼻咽部细菌阴转率均高于使用红霉素或阿奇霉素治疗的患儿，差异均有统计学意义( χ2＝5.50、5.86、6.15， P＝0.019、0.015、0.013)。 结论:百日咳患儿鸡鸣样回声较少，百日咳鲍特菌对大环内酯类抗菌药物耐药率高，头孢哌酮/舒巴坦或哌拉西林/他唑巴坦的临床应用价值值得进一步评估。