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肠道菌群在氯胺酮减轻小鼠术后认知功能障碍中的作用:与膈下迷走神经的关系
编辑人员丨1周前
目的:评价肠道菌群在氯胺酮减轻小鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用及其与膈下迷走神经的关系。方法:SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠144只,18月龄,体质量32~35 g,采用随机数字表法分为8组( n=18):假手术组(Sham组)、手术组(S组)、氯胺酮+手术组(SK组)、氯胺酮+手术+膈下迷走神经切除组(SK+SDV组)、伪无菌小鼠+生理盐水组(GM+V组)、伪无菌小鼠接受S组小鼠粪菌移植组(GM+S组)、伪无菌小鼠接受SK组小鼠粪菌移植组(GM+SK组)和伪无菌小鼠+膈下迷走神经切断+接受SK组小鼠粪菌移植组(GM+SDV+SK组)。吸入2.0%异氟烷麻醉下行胫骨离断髓内固定手术。SK组于缝皮开始时腹腔注射氯胺酮50 mg/kg。术后24 h时收集S组和SK组小鼠的新鲜粪便,制备成粪菌滤液。SK+SDV组于氯胺酮给药前、GM+SDV+SK组于粪菌移植前切断膈下迷走神经。伪无菌小鼠模型:于粪菌移植或膈下迷走神经神经切断前2周将广谱抗生素混合液加入小鼠饮用水中,每2 d更换1次。GM+SK组、GM+SDV+SK组经抗生素干预14 d后,每天固定时间灌胃给予相应小鼠粪菌滤液200 μl,GM+V组给予生理盐水溶剂,连续14 d。胫骨离断髓内固定术后或粪菌移植完成后24 h,收集小鼠粪便,行16S rRNA基因高通量测序,采用ELISA法检测海马IL-6、IL-17、TNF-α、IL-4和IL-10的含量,采用Morris水迷宫实验评价小鼠学习和记忆能力。 结果:与Sham组比较,S组术后肠道菌群Simpson多样性指数、Shannon指数、Ace指数降低,海马IL-6、IL-17和TNF-α含量增加,海马IL-4和IL-10含量降低,训练阶段逃避潜伏期、测试阶段逃避潜伏期和游泳距离延长,目标象限停留时间缩短( P<0.05);与S组比较,SK组术后肠道菌群Simpson多样性指数、Shannon指数、Ace指数升高,海马IL-6、IL-17和TNF-α含量降低,海马IL-4和IL-10含量增加,训练阶段逃避潜伏期、测试阶段逃避潜伏期和游泳距离缩短,目标象限停留时间延长( P<0.05);与SK组比较,SK+SDV组术后肠道菌群Simpson多样性指数、Shannon指数、Ace指数降低,海马IL-6、IL-17和TNF-α含量增加,海马IL-4和IL-10含量降低,训练阶段逃避潜伏期、测试阶段逃避潜伏期和游泳距离延长,目标象限停留时间缩短( P<0.05)。与GM+V组比较,GM+S组海马IL-6、IL-17和TNF-α含量增加,IL-4和IL-10含量降低,训练阶段逃避潜伏期、测试阶段逃避潜伏期和游泳距离延长,目标象限停留时间缩短( P<0.05);与GM+S组比较,GM+SK组海马IL-6、IL-17和TNF-α含量降低,海马IL-4和IL-10含量增加,训练阶段逃避潜伏期、测试阶段逃避潜伏期和游泳距离缩短,目标象限停留时间延长( P<0.05);与GM+SK组比较,GM+SDV+SK组海马IL-6、IL-17和TNF-α含量增加,海马IL-4和IL-10含量降低,训练阶段逃避潜伏期、测试阶段逃避潜伏期和游泳距离延长,目标象限停留时间缩短( P<0.05)。 结论:氯胺酮可改善肠道菌群紊乱,减轻小鼠POCD,其机制可能与膈下迷走神经传导有关。
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编辑人员丨1周前
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基于RNA-seq的脓毒症相关性脑病小鼠海马转录组分析及竞争性内源性RNA调控网络的构建
编辑人员丨1周前
目的:采用转录组测序技术(RNA-seq)筛选脓毒症相关性脑病(SAE)小鼠海马差异表达的长链非编码RNA(lncRNA)及mRNA,构建竞争性内源性RNA(ceRNA)调控网络。方法:清洁级健康雄性C57BL/6小鼠10只,6~8周龄,体质量20~25 g,采用随机数字表法分为2组( n=5):假手术组(Sham组)和脓毒症组(Sepsis组)。Sepsis组采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备小鼠脓毒症模型,Sham组只开腹不进行盲肠结扎和穿孔。分别于术前1 d及术后3 d时行Morris水迷宫实验和条件恐惧实验检测小鼠认知功能。随后Sham组随机处死3只小鼠,Sepsis组处死认知功能测试最差的3只小鼠,取海马组织,通过BGISEQ-500平台行转录组测序,得到差异表达的mRNA和lncRNA,测序结果通过深圳华大基因科技服务有限公司提供的Dr.Tom平台行可视化分析,利用Cytoscape软件构建ceRNA调控网络。 结果:与Sham组比较,Sepsis组逃避潜伏期延长,靶向限停留时间百分比和僵直时间百分比降低( P<0.05)。转录组数据分析共获得差异表达的lncRNA 62个,其中45个lncRNA表达上调,17个lncRNA表达下调;差异表达的mRNA 282个,其中173个mRNA表达上调,109个mRNA表达下调。对差异表达的mRNA进行生物学过程的GO富集分析,结果显示差异表达的mRNA参与了记忆、学习或记忆、炎症应答、衰老相关行为减退的调空、突触可塑性调节等生物学过程;对差异表达的mRNA进行KEGG通路富集分析,结果显示差异表达的mRNA富集于IL-17信号通路、TNF信号通路、NF-κB信号通路等。对差异表达的mRNA进行KDA分析,结果示Ch25h、Il6ra、Lcn2、Sgk1、Nr4a3、Osm、Saa3、Ccl7、Sqle、Dhcr24为SAE的关键基因。基于9个lncRNA、28个mRNA和134个miRNA成功构建了SAE小鼠海马的ceRNA调控网络。 结论:RNA-seq结果分析发现Ch25h、Il6ra、Lcn2、Sgk1、Nr4a3、Osm、Saa3、Ccl7、Sqle、Dhcr24 10个mRNA以及Rian、Gm35874、Gm34347等lncRNA是调控小鼠SAE的关键基因;同时成功构建了SAE小鼠海马基于lncRNA-miRNA-mRNA的ceRNA调控网络。
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编辑人员丨1周前
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乳酸诱导的脊髓神经元线粒体分裂在小鼠糖尿病神经病理性痛中的作用
编辑人员丨1周前
目的:评价乳酸诱导的脊髓神经元线粒体分裂在小鼠糖尿病神经病理性痛(DNP)中的作用。方法:选择SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠36只,2月龄,体质量20~25 g,采用随机数字表法分为3组( n=12):对照组(C组)、DNP组和DNP+草氨酸钠组(OXA组)。采用腹腔注射链脲佐菌素130 mg/kg构建糖尿病模型。糖尿病建模成功后,OXA组腹腔注射草氨酸钠750 mg/kg,1次/d,持续4周,抑制乳酸生成;C组和DNP组于相同时点腹腔注射等容量生理盐水。于造模前、造模后1、2、3和4周时测定左侧后足机械缩足阈值(MWT)。最后一次行为学测试完成后,取血标本和L 4-6段脊髓组织,采用比色法检测血清和脊髓组织乳酸水平,分别采用JC-1和DHE探针检测线粒体膜电位和ROS含量,采用Western blot法检测线粒体动力相关蛋白1(Drp1)和线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达,透射电镜观察线粒体的结构和数量,采用免疫荧光双标观察Drp1与神经元标志物NeuN共表达情况。 结果:与C组比较,DNP组和OXA组造模后MWT降低,血清和脊髓组织乳酸水平、脊髓ROS含量升高,线粒体膜电位下降,Drp1表达上调,Mfn2表达下调,线粒体数量增多,面积减小( P<0.05),Drp1和NeuN共表达增加;与DNP组比较,OXA组造模后MWT升高,血清和脊髓组织乳酸水平、脊髓ROS含量降低,线粒体膜电位升高,Drp1表达下调,Mfn2表达上调,线粒体数量减少,面积增大( P<0.05),Drp1和NeuN共表达减少。 结论:乳酸诱导的脊髓神经元线粒体过度分裂可导致线粒体功能障碍,可能参与小鼠DNP的维持机制。
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编辑人员丨1周前
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以比赛为契机的弹力带健身操训练对成年人身体成分及训练依从性的影响
编辑人员丨1周前
目的:探究以比赛为契机的弹力带健身操训练对成年人身体成分及训练依从性的影响。方法:全国各省市24个健康管理示范基地组队参加弹力带健身操比赛活动。各参赛队通过视频学习弹力带健身操比赛动作,自行组织练习。各健康管理示范基地经过专业流程培训的工作人员,完成其参赛队员训练前后的各项指标测试以及出勤率等资料收集。测试指标:形态学指标包括身高、体重、体脂含量、肌肉含量、腰围、臀围和体脂率;生理指标包括安静收缩压和安静舒张压。采用配对样本 t检验对前后测结果进行统计分析。 结果:经过8周的弹力带健身操训练,男性参赛者的体重、体质指数、腰围、体脂含量、收缩压和舒张压与训练前比较差异有统计学意义( P<0.01),分别下降1.39%、1.45%、0.98%、3.61%、2.28%、2.34%和3.05%;女性参赛者的体重、腰围、臀围、腰臀比、体脂含量以及体脂率较训练前比较差异有统计学意义( P<0.01),分别下降1.25%、1.59%、0.65%、0.99%、4.22%和2.38%。进入决赛的前10支队伍和未进入决赛的14支队伍,两者缺勤率相比差异有统计学意义(平均缺勤率分别为2.8%和10.7%);且参赛人员总体出勤率为92.6%,高于临床界定高依从性80%的标准。 结论:8周弹力带健身操训练能显著改善成年人的身体成分,降低体脂率,减小腰围;以比赛为契机的训练方案可显著提高成年人运动依从性。
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编辑人员丨1周前
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线粒体DNA拷贝数的增龄改变与人体内在能力和体成分的相关性探讨
编辑人员丨1周前
目的:研究外周血相对线粒体DNA拷贝数(mtDNAcn)与人体内在能力和体成分的相关性,探讨外周血mtDNAcn是否可作为评估老年人健康衰老的可靠生物标志物。方法:选取2019年9月至2021年6月在江苏省人民医院老年内分泌科的住院患者416例,提取受试者的外周血mtDNA,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测相对性mtDNAcn。内在能力评估包括5个方面,分别是:运动[摩尔斯跌倒评分(MFS)、生理衰弱表型(PFP)、肌少症问卷调查(SARC-CalF)、简易体能状况(SPPB)、起立-行走计时测试(TUG)量表];活力[微量营养评估(MNA)、住院患者多维预后指数(MPI)量表];认知[简易智能评价(MMSE)量表];心理[抑郁评估(GDS)、焦虑自评(SAS)量表]、感觉功能[疾病累积评分-共病指数(CIRS-CI)量表];评估体成分使用双能X线吸收仪测定受试者躯体各部位脂肪,包括躯干脂肪量、全身脂肪量、腹部脂肪量、臀部脂肪量,计算脂肪指数(FMI)和四肢骨骼肌量指数(ASMI)。结果:Spearman相关性分析和校正性别、体质指数后的偏相关分析结果均显示,mtDNAcn和年龄呈负相关( r=-0.176、-0.144,均 P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,mtDNAcn与4 m步速、SARC-CalF、MFS、MNA、MMSE、MPI及其子量表日常生活活动能力(ADL)、简易智能状态问卷(SPMSQ)的评分有相关性( r=0.171、-0.207、-0.163、0.221、0.184、-0.210、0.241、-0.269,均 P<0.05),在校正年龄、性别和体质指数后,mtDNAcn与4 m步速、MFS、MNA、MPI、SPMSQ评分仍显著相关( r=0.170、-0.170、0.148、-0.242、-0.188,均 P<0.05)。此外,进一步分析mtDNAcn与体成分的Spearman相关性分析结果显示,mtDNAcn与FMI、躯干脂肪量、全身脂肪量、腹部脂肪量、臀部脂肪量有相关性( r=0.168、0.143、0.175、0.116、0.199,均 P<0.05),校正年龄、性别的偏相关分析结果显示,mtDNAcn与FMI、全身脂肪量、臀部脂肪量仍显著相关( r=0.126、0.131、0.127,均 P<0.05)。且进一步的多元线性回归分析结果显示,mtDNAcn与年龄、步速、FMI、全身脂肪量、臀部脂肪量、MFS、PFP、MNA、MPI评分显著相关( β=-0.191、0.156、0.126、0.131、0.125、-0.119、-0.145、0.151、-0.171,均 P<0.05)。 结论:mtDNAcn与躯体功能、衰弱、营养、跌倒、认知及体成分密切相关,可作为评估人体内在能力的运动及活力的生物标志物。
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编辑人员丨1周前
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基于体质学说亚健康人群背部痧象特征的探讨
编辑人员丨1周前
目的:基于体质学说,通过对亚健康人群实施诊断性刮痧,探讨不同体质的亚健康人群背部痧象的特征。方法:采用横断面研究方法,2021年3月至2022年9月,广州中医药大学第三附属医院通过线下、线上结合的方式招募志愿者,用温通刮痧杯对2 239名研究对象实施中医体质辨识测试和背部诊断性刮痧,观察不同中医体质亚健康人群背部痧象,比较痧斑颜色、出痧速度、痧量、形态、疼痛性质及刮痧板下感觉特征与平和体质区别。结果:不同体质亚健康人群的痧象特征存在差异。其中平和质痧斑颜色鲜红色者占49.02%(351/716),出痧速度快者占90.64%(649/716),痧量多者占5.73%(41/716),形态为片状痧斑者占3.35%(24/716),疼痛性质为刺痛者占3.35%(24/716),刮痧板下感觉有结节者为0;湿热质人群中痧斑颜色为鲜红色者占86.72%(457/527),出痧速度快者占95.64%(504/527),痧量多者占100.00%(527/527)、形态为片状痧斑者占88.80%(468/527),疼痛性质为刺痛者占95.64%(504/527),刮痧板下感觉有结节者占97.72%(515/527),二者痧象特征比较,差异均有统计学意义( χ2值为11.27~1 243.00,均 P<0.05)。 结论:不同体质的亚健康人群背部痧象特征不一,通过痧象特点辨识中医体质,能够指导患者健康调护,提高患者对中医刮痧治疗的满意度。
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编辑人员丨1周前
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乳酸脱氢酶在小鼠糖尿病神经病理性痛中的作用:与PGC-1α的关系
编辑人员丨1周前
目的:评价乳酸脱氢酶在小鼠糖尿病神经病理性痛(DNP)中的作用及其与过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)的关系。方法:SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠,6~8周龄,体质量18~22 g,采用腹腔注射链脲佐菌素120 mg/kg的方法制备小鼠糖尿病模型。取糖尿病造模成功小鼠24只,采用随机数字表法分为2组( n=12):DNP组和DNP+草氨酸钠组(OXA组)。另取12只同月龄正常小鼠为对照组(C组)。OXA组在糖尿病造模成功后腹腔注射草氨酸钠750 mg/kg,1次/d,持续28 d;C组和DNP组腹腔注射等容量生理盐水。于链脲佐菌素注射前3 d、注射后1、2、3和4周(T 0-4)时测定小鼠右侧后足机械缩足反应阈(MWT)、血糖和体质量。最后一次行为学测试完成后,麻醉小鼠后眼眶采集血样,测定血清乳酸浓度,随后处死取大脑前额叶皮质组织,测定乳酸含量,采用JC-1法检测线粒体膜电位,DHE探针检测ROS含量,采用Western blot法检测组蛋白乳酸化修饰水平及PGC-1α表达。 结果:与C组比较,DNP组和OXA组T 2-4时MWT降低,血清乳酸浓度、前额叶皮质组织乳酸、ROS含量和组蛋白乳酸化修饰水平升高,线粒体膜电位降低,PGC-1α表达下调( P<0.05);与DNP组比较,OXA组小鼠血糖与体质量差异无统计学意义( P>0.05),T 2-4时MWT升高,血清乳酸浓度、前额叶皮质组织乳酸、ROS含量和组蛋白乳酸化修饰水平降低,线粒体膜电位增加,PGC-1α表达上调( P<0.05)。 结论:乳酸脱氢酶促进小鼠DNP形成发展,其机制与促进前额叶皮质组蛋白乳酸化修饰水平增高及下调PGC-1α表达有关。
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编辑人员丨1周前
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学龄期支气管哮喘患儿身体活动水平调查
编辑人员丨1周前
目的:了解学龄期支气管哮喘(哮喘)患儿身体活动水平和久坐时间现况。方法:2021年3月至5月连续纳入在线使用《中国儿童哮喘行动计划》智能手机客户端的6~17岁哮喘患儿,发放国际体力活动问卷(IPAQ)短卷评估其身体活动水平、学龄儿童健康行为(HBSC)问卷评估其久坐行为、儿童哮喘控制测试(C-ACT)和哮喘控制测试(ACT)评估哮喘控制水平。收集年龄、性别、体质量指数(BMI)、运动后呼吸道症状、是否坚持用药等临床信息。结果:共收集265份有效问卷,年龄中位数9.4(7.5,11.6)岁,ACT/C-ACT得分≥20分者占比74.0%(196例),达到高、中、低活动水平者分别为52例、110例、103例。活动水平与性别、BMI、是否规律用药、父母文化程度无显著相关性(均 P>0.05)。每日久坐时间≥2 h的患儿在学习日和周末分别为204例和233例,周末显著多于学习日(87.9%比77.0%, χ2=10.967, P=0.001)。160例(60.4%)患儿曾出现运动后呼吸道症状,最常见症状依次为咳嗽(72例)、喘息(53例)、呼吸困难(42例)、胸痛(16例)、胸闷(15例),但79.6%(211例)的患儿有参加身体活动的主观意愿。ACT/C-ACT得分≥20分者出现运动后症状比例显著低于得分≤19分的患儿(37.8%比72.5%),差异有统计学意义( χ2=10.967, P<0.001)。 结论:学龄期哮喘患儿身体活动多数处于中低水平,且久坐时间长;哮喘控制不良的患儿更易出现运动后呼吸道症状。应制定规范化、个体化的运动处方,指导哮喘患儿进行安全有效的运动。
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编辑人员丨1周前
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小鼠围术期神经认知障碍时海马miR-3065-5p与IGF-1/PI3K/Akt信号通路的关系
编辑人员丨1周前
目的:评价小鼠围术期神经认知障碍(PND)时海马miR-3065-5p与胰岛素样生长因子-1/磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(IGF-1/PI3K/Akt)信号通路的关系。方法:清洁级健康雄性C75BL/6小鼠80只,12~14周龄,体质量20~30 g,采用随机数字表法分为4组( n=20):对照组(C组)、PND组、miR-3065-5p激动剂组(Ag组)和miR-3065-5p激动剂阴性对照组(Ag-NC组)。采用吸入1.5%异氟烷麻醉下胫骨骨折髓内固定术制备小鼠PND模型。于术前2 d,Ag组侧脑室注射miR-3065-5p agomir 2 μl,Ag-NC组注射miR-3065-5p agomir阴性对照2 μl。于术后7 d时行Morris水迷宫实验和旷场实验,测试结束后麻醉处死取海马组织,采用qRT-PCR法检测miR-3065-5p、IGF-1 mRNA和Bcl-2 mRNA的表达水平,采用Western blot法检测IGF-1、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)和Bcl-2的表达水平。 结果:4组旷场实验各指标比较差异无统计学意义( P>0.05)。与C组比较,其余3组术后逃避潜伏期延长,目标象限停留时间百分比降低,穿越原平台位置次数减少,海马组织miR-3065-5p表达上调,IGF-1 mRNA、Bcl-2 mRNA、IGF-1、p-Akt、p-GSK3β和Bcl-2表达下调( P<0.05);与PND组和Ag-NC组比较,Ag组术后逃避潜伏期延长,目标象限停留时间百分比降低,穿越原平台位置次数减少,miR-3065-5p表达上调,IGF-1 mRNA和Bcl-2 mRNA、IGF-1、p-Akt、p-GSK3β和Bcl-2表达下调( P<0.05)。 结论:海马miR-3065-5p表达上调可抑制IGF-1/PI3K/Akt信号通路激活,可能是小鼠PND发生机制之一。
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编辑人员丨1周前
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耳部全息铜砭刮痧对气虚质人群的免疫调控
编辑人员丨1周前
目的:探讨耳部全息铜砭刮痧对气虚质人群体质、相关症状及免疫功能的影响。方法:2020年4—6月,南京中医药大学附属苏州市中医医院通过线下、线上结合的方式,招募经"中医体质测试"判断为气虚质的受试者80例,按照随机数字表法分为对照组和试验组,每组40例。对照组给予线上常规健康教育,试验组在线上常规健康教育基础上,予以耳部全息铜砭刮痧干预,每周1次,4次为1个疗程,共3个疗程。比较2组干预前后相关症状评分、气虚质转化分、外周血CD4 +比例、CD8 +比例、CD4 +/CD8 +值。 结果:最终,试验组纳入38例,对照组纳入34例。干预后,试验组疲乏、气短、易感冒、懒言、声音低弱的气虚质症状评分及气虚质转化分分别为(3.26 ± 0.76)、(2.92 ± 0.82)、(3.08 ± 0.82)、(2.66 ± 0.97)、(2.71 ± 0.80)、(46.16 ± 17.96)分,对照组分别为(4.12 ± 0.41)、(3.76 ± 0.55)、(3.50 ± 0.56)、(3.65 ± 0.65)、(3.18 ± 0.67)、(56.88 ± 10.80)分,2组比较差异有统计学意义( t值为-6.02~-2.51,均 P<0.05)。外周血检测结果显示,试验组CD8 +比例为24.76(19.92,28.23)%,对照组为27.19(24.39,31.57)%,2组比较差异有统计学意义( Z=-2.25, P<0.05)。 结论:耳部全息铜砭刮痧可调理气虚质人群的气虚体质,提高免疫功能。
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编辑人员丨1周前
