实验旨在探究不同水平的大豆球蛋白对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)肠道菌群和抗菌相关基因的影响.在饲料中添加0(G0组,作为对照组)、1.82％(GL组)、3.64％(GH1组)、5.46％(GH2组)和7.28％(GH3组)五种不同水平的大豆球蛋白饲喂克氏原螯虾(平均体重约为4.3 g)4周.养殖实验结束后测定肠道微生物的组成和抗菌相关基因的表达.结果显示:(1)饲料中的大豆球蛋白对克氏原螯虾肠道菌群的Alpha多样性没有显著性影响,但改变了其肠道菌群组成.GL组Cloacibacterium、沙曼气单胞菌(Aeromonas sharmana)等菌群的相对丰度显著高于其他4组.与G0组相比,红杆菌属(Rhodobacter)、副球菌属(Paracoccus)、丙酸杆菌属(Propionicimonas)和生丝微菌属(Hyphomicrobium)等益生菌及亨氏柄杆菌(Caulobacter henricii)的相对丰度在GH2或GH3组中显著下降;而GH3组壤霉菌属(Agromyces)、巴氏微杆菌(Microbacterium barkeri)、假黄色单胞菌属(Pseudoxanthomonas)和军团杆菌属(Legionella)等潜在病原菌的相对丰度显著高于G0组.(2)随着大豆球蛋白水平的升高,各组肠道抗菌相关基因的表达水平呈现一次线性和二次响应的变化趋势.与G0组相比,GL组抗脂多糖因子(alf)、甲壳素(cru)和血蓝蛋白(hem)基因的表达水平显著下降;除组织蛋白酶-B(cst-b)外,GH1、GH2和GH3组其他抗菌相关基因的表达水平随着饲料中大豆球蛋白水平的升高而显著上升;GH2组cst-b的表达水平显著高于其余4组.(3)斯皮尔曼相关分析结果表明肠道菌群和抗菌相关基因之间存在显著的相关关系.cru、alf、C型凝集素(lec-c)、溶菌酶(lys)、白细胞介素增强因子结合子-2(iebf-2)、hem、热休克蛋白-70(hsp-70)和cst-b的表达水平与亨氏柄杆菌、副球菌属、红杆菌属、丙酸杆菌属、Desulfovibrio putealis、Thermomonas dokdonensis、沙曼气单胞菌和气单胞菌属、Chitinilyticum aquatile、台湾几丁质杆菌、Cloaci-bacterium 和生丝微菌属等菌群的相对丰度具有显著的负相关关系;而与壤霉菌属、产气荚膜梭杆菌(Clostri-dium Perfringens)、巴氏微杆菌、乳球菌(Lactococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、类诺卡氏菌属(Nocar-dioides)和Peredibacter starrii等菌群的相对丰度具有显著的正相关关系.综上所述,饲料中低水平的大豆球蛋白(1.82％)在一定程度上能够促进肠道中益生菌的生长,改善肠道菌群健康,同时下调抗菌相关基因的表达;而高水平的大豆球蛋白(≥3.64％)可能抑制了益生菌的生长,导致病原菌的增殖,从而破坏了肠道菌群稳态,并且上调了抗菌相关基因的表达.相关分析结果表明抗菌相关基因与肠道菌群之间可能存在一定的互作关系.

自长江禁渔以来,鄱阳湖凶猛性鱼类数量呈持续增长的态势,为明确凶猛性鱼类的捕食活动是否会对克氏原螯虾的种群造成影响,研究以鲶(Silurus asotus)、乌鳢(Channa argus)为捕食者,选择8种不同种类的饵料生物,即3种规格[小:(39.20±1.30)mm;中:(49.82±2.13)mm;大:(58.99±1.16)mm]的克氏原螯虾(Procambarus clarkii)幼体、鲤(Cyprinus carpio)、鲫(Carassius auratus)、赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)、食蚊鱼(Gambu-sia affinis)、鲢(Hypophthalmichthys molitrix)、麦穗鱼(Pseudorasbora parva)和日本沼虾(Macrobrachium nip-ponense)为猎物,分别开展鲶和乌鳢对饵料生物种类和克氏原螯虾幼体规格的选择性研究.结果表明:(1)鲶、乌鳢均喜好在夜间捕食,并且鲶、乌鳢的捕食高峰期均集中在为20:00-8:00;(2)多种饵料生物同时存在时,鲶、乌鳢均未捕食克氏原螯虾幼体,并且对鲤、食蚊鱼和日本沼虾表现出较明显的捕食偏好性.(3)同种规格克氏原螯虾幼体的组合中,鲶对小规格克氏原螯虾幼体存在明显的捕食偏好性,同时乌鳢捕食小规格克氏原螯虾幼体的数量也显著高于大规格的数量(P＜0.05).(4)多种规格克氏原螯虾幼体等量混养组合中,鲶、乌鳢对小规格克氏原螯虾幼体存在明显的捕食偏好性,并且这种偏好性随克氏原螯虾幼体间规格差距增大而升高.综上,在多种饵料生物共存时,克氏原螯虾不是凶猛性鱼类的最佳猎物;但当其他饵料生物种类及数量较少时,较小的克氏原螯虾幼体依旧面临较高的捕食威胁.

实验研究了添加不同水平酵母水解物(Yeast hydrolysate,YHY)对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)生长性能、消化、抗氧化和非特异性免疫能力的影响.实验选用300尾平均体重为(6.43±0.55)g的个体,随机分为5组,分别饲喂在基础饲料中添加0(对照组)、0.5％、1％、2％和4％YHY的饲料,每组3个重复,养殖密度为20尾/缸.为期8周的实验结束后,测定克氏原螯虾生长指标、胃和肝胰腺消化酶活性、肝胰腺抗氧化性能、血清生化指标和免疫酶活性.结果表明:(1)饲料中添加1％—4％YHY对该虾生长指标有促进作用.其中,2％添加组的存活率(SR)、最终体重(FBW)、最终体长(FBL)和肝胰腺指数(HSI)达最大值且显著高于对照组(P＜0.05),增重率(WGR)和特定生长率(SGR)在1％添加组达到最大值且显著高于其余各组(P＜0.05);(2)1％YHY添加组的全虾粗蛋白质含量显著高于其他组(P＜0.05),而肌肉粗蛋白和粗脂肪含量在2％添加组达到最大值;(3)与对照组相比,2％—4％YHY添加组的胃和肝胰脏消化酶活性显著提高(P＜0.05);(4)2％YHY添加组的肝胰腺抗氧化酶(过氧化氢酶,CAT;总超氧化物歧化酶,T-SOD;总抗氧化能力,T-AOC)和免疫酶(碱性磷酸酶,AKP;酸性磷酸酶,ACP)的活性达到最大值、丙二醛(MDA)的含量达到最小值,且与对照组相比均有显著差异(P＜0.05);(5)2％YHY添加组该虾血清中总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)含量显著高于其他组(P＜0.05),1％和2％YHY添加组谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性显著低于其他各组(P＜0.05).结果表明,饲料中添加2％的酵母水解物可显著提高克氏原螯虾的消化、生长及肌肉粗蛋白和粗脂肪含量,并显著改善其抗氧化和非特异性免疫能力.

以双低菜粕替代饲料中不同比例[0(R0)、25％(R25)、50％(R50)、75％(R75)和100％(R100)]的鱼粉蛋白,配制成双低菜粕含量分别为0、21.25％、42.50％、63.75％和85％的5种等氮等能饲料,饲喂平均初始体重为(2.49±0.01)g的克氏原螯虾(Procambarus clarkii)幼虾42d,探讨其对克氏原螯虾幼虾生长性能、饲料利用率、消化能力及抗氧化能力的影响.结果显示:(1)R0、R25和R50组之间终末体重(FBW)、特定生长率(SGR)、饲料效率(FE)和蛋白质效率(PER)无显著差异(P＞0.05),R75和R100组的FBW、SGR、FE和PER显著低于R0组(P＜0.05);与R0组相比,R50、R75和R100组克氏原螯虾幼虾粗蛋白和粗脂肪含量显著降低(P＜0.05);R75和R100组克氏原螯虾幼虾肝胰腺蛋白酶活性、肝胰腺脂肪酶活性及肠道胰蛋白酶活性均显著低于R0组(P＜0.05),各组间淀粉酶活性无显著差异(P＞0.05);R75和R100组肝胰腺和肠道NPY和TRY基因表达量显著低于R0组(P＜0.05),MSNP基因表达量显著高于R0组(P＜0.05).(2)与R0组相比,R100组肝胰腺碱性磷酸酶(AKP)、谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性显著升高(P＜0.05);随着菜粕水平的升高,R100组丙二醛(MDA)含量显著高于R0组(P＜0.05),肝胰腺过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽S转移酶(GST)活性呈下降趋势且R75和R100组的以上4种的酶活性显著低于R0组(P＜0.05);R50、R75和R100组肝胰腺和肠道AKP基因表达量显著上升(P＜0.05),CAT、SOD和GPX基因表达量显著下降(P＜0.05).(3)R25组克氏原螯虾幼虾肝胰腺和肠道组织结构与R0组无显著差异,随着替代比例的升高,克氏原螯虾幼虾肝胰腺上皮细胞空泡化逐渐加重,R细胞萎缩程度加深,肝小管管腔畸形并变大;肠道上皮细胞脱落,肠绒毛明显变短.综上结果,双低菜粕在克氏原螯虾幼虾饲料中的添加比例以不超过21.25％为宜.

为探讨利用温室大棚进行克氏原螯虾(Procambarws clarkia)种苗繁育对养殖水体的水质影响,文章通过对繁育期间的水样和表层底泥营养盐的定期监测,研究了整个育苗期间水质和表层底泥中营养盐的变化动态.结果表明,水体DO、WT变幅为5.75-6.33 mg/L、12.6℃-22.9℃,水温要高于同期外部水温5-10℃;受饲料投喂和虾活动等影响,上覆水中TN、TP和COD含量快速增加,在养殖期间的变幅分别为2.091-2.688、0.196-0.480和42.400-53.200 mg/L;表层底泥的TN、TP和有机质含量变幅分别为 1032-1279、623-1004和12.00-14.28mg/kg,其增幅分别为24％、23％和41％.受水体浊度较高、水体中亲本虾数量不明等影响,无法判定投入的饲料是否全部为虾子摄食,造成了短期内较高的饲料投入量带来养殖水体营养盐的急剧增加,较高的营养盐含量为后期养殖尾水的治理带来新的要求.

2016年7-8月东南大学附属中大医院急诊科共收治克氏原螯虾相关横纹肌溶解症患者109例,男性34例(31.2％),女性75例(68.8％),年龄5 ～ 75(37.5±13.1)岁.食用家庭烹饪的克氏原螯虾发病人数占60.6％(66/109).腰背部疼痛[96.3％(105/109)]为主要症状.17例误诊,误诊率15.6％.就诊时、住院第2、3日及出院前,肌酸激酶分别为1 175 (446,2 258) IU/L、3 710(2 137,8 875) IU/L、1 899(1063,4 595) IU/L和317(152,532)IU/L(P＜0.001),肌红蛋白分别为(603±484)μg/L、(313±284) μg/L、(104±74) μg/L和(55±20) μg/L(F=39.1,P＜0.001).女性是克氏原螯虾相关横纹肌溶解症的高危人群.本病误诊率高.肌酸激酶和肌红蛋白呈特征性动态改变.

对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,wssv)是一种能够感染虾类并且造成其大面积死亡的环状双链DNA病毒.WSSV有多种分离株,其毒力有所差异.从克氏原螯虾(Procambarus clarkii)中分离得到1株WSSV新分离株WSSV-CN-Pc,其毒力尚不清楚.本研究采用肌肉注射和经口注射的方法,以WSSV-TW型作为阳性对照,分别对克氏原螯虾(P.clarkii和罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)进行活体实验.实验结果显示:肌肉注射WSSV-CN-Pc和WSSV-TW的克氏原螯虾均在第6天出现100％的死亡;罗氏沼虾在肌肉注射WSSV-TW后未出现死亡,但在注射WSSV-CN-Pc后的第9天死亡率达100％.经口注射WSSV-CN-Pc和WSSV-TW的克氏原螯虾均在第16天出现100％的死亡;罗氏沼虾经口注射WSSV-CN-Pc后的第19天死亡率为100％,但注射WSSV-TW的实验组并未出现死亡.结果表明,对于克氏原螯虾,WSSV-CN-Pc具有和WSSV-TW相似的毒力,而对罗氏沼虾存在明显的毒力差异.提示克氏原螯虾是WSSV传播途径中的重要因素.

为探讨外来种克氏原螯虾(Procambarus clarkii)对沉水植物牧食的偏好性和牧食强度,采用投喂实验的方式,研究了3种沉水植物刺苦草(Vallisneria spinulosa)、轮叶黑藻(Hydrilla verticillata)和伊乐藻(Elodea nuttallii)的适口性.结果表明,克氏原螯虾对轮叶黑藻的取食速率最大(7.24±0.24 mg·d-1),其次是苦草(3.70±1.14 mg·d-1),伊乐藻最小(0.60±0.12 mg·d-1),说明伊乐藻的适口性最差,轮叶黑藻的适口性最好,苦草的适口性居中.3种沉水植物的纤维素、多酚含量和氮含量都没有显著性差异,而伊乐藻却具有更高的碳(C)含量和更高的碳氮比(C:N).总体来说,3种沉水植物的物理结构、碳(C)含量和碳氮比(C:N)在外来种克氏原螯虾对沉水植物的牧食中具有重要的作用.

[目的]研究稻虾共作模式条件下,稻田封闭除草剂对克氏原螯虾产生的急性毒性.[方法]采用半静态试验方法,研究3种酰胺类除草剂(乙草胺、丙草胺和丁草胺)对克氏原螯虾的急性毒性,计算3种酰胺类除草剂对克氏原螯虾的安全浓度,并分析其LC50衰减规律.[结果]随着暴露时间和除草剂浓度的增加,虾体侧躺,步行足和游泳足活动频率降低,最终死亡.乙草胺对克氏原螯虾的96 h半致死浓度(LC50)和安全浓度(SC)分别为0.0707和0.0146 mL·L-1;丙草胺对克氏原螯虾的96 h LC50和SC分别为0.0119和0.0021 mL·L-1;丁草胺对克氏原螯虾的96h LC50和SC分别为0.0073和0.0014 mL·L-1.乙草胺、丙草胺及丁草胺除草剂LC50随着暴露时间延长呈下降趋势,符合双曲线衰减模型,回归方程分别为:①y1=2.0840x-0.7380(R2=0.9973);②y2=0.1106x-0.4930(R2=0.9872);③y3=0.2236x-0.7480(R2=0.9990).克氏原螯虾对3种除草剂的敏感性由高到低依次为:丁草胺>丙草胺>乙草胺.[结论]乙草胺和丙草胺可在稻田综合种养生产过程中按常规剂量使用,而丁草胺按常规剂量使用可能存在较大的风险.

克氏原螯虾在20世纪初作为重要的水产品引入中国,但因其繁殖能力强、生长迅速、适应性强、喜掘洞穴,对农作物、池埂及农田水利有一定破坏作用,降低入侵地区当地物种多样性,对当地生态系统造成严重危害.因此,研究未来气候情景下克氏原螯虾适生区的变化,可为其监控和管理措施提供关键信息,有效预防和控制其蔓延.本研究基于克氏原螯虾的分布点,应用最大熵(MaxEnt)模型和规则集遗传算法(GARP)模型模拟了当前气候条件下克氏原螯虾在中国的潜在适生区,并预测了2041-2060年和2061-2080年克氏原螯虾在4种气候变化情景下(RCP 2.6、RCP 4.5、RCP 6.0、RCP 8.5)的分布,采用ROC曲线对预测结果进行检验和评价.结果 表明:在当前气候条件下克氏原螯虾集中分布在上海、江苏、浙江、安徽等长江沿岸地区;最冷季平均温度、最冷月最低温度对克氏原螯虾分布影响最大,其次是温度季节性变化、最暖月最高温度和最干月降水量.在未来气候情景下,2061-2080年克氏原螯虾的适生区面积有不同程度的变化,在RCP 2.6和RCP 4.5情景下总适生面积增加,但在RCP 8.5情景下呈先增后减趋势,而在RCP 6.0情景下无明显变化;克氏原螯虾适生区在空间分布上不仅有纬度方向上的扩散,也有向海拔较高地区迁移的趋势.