目的:建立猪带绦虫（Ts）14-3-3.2原核表达系统，并观察Ts14-3-3.2蛋白在Ts成虫和囊尾蚴中的表达情况。方法:在遵义医科大学寄生虫学教研室前期获得Ts14-3-3.2基因序列的基础上，采用基于PCR的精确合成（PAS）方法全基因合成Ts14-3-3.2基因，经限制性内切酶 NdeⅠ和 XbaⅠ双酶切后连接质粒pCzn1，构建重组质粒pCzn1-Ts14-3-3.2。将重组质粒转化至大肠埃希菌ArcticExpress感受态细胞中诱导表达，采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和考马斯亮蓝染色分析和鉴定表达产物，通过镍（Ni）柱亲和纯化获得纯化Ts14-3-3.2重组蛋白。采用该纯化重组蛋白免疫新西兰大白兔，制备Ts14-3-3.2重组蛋白多克隆抗体，采用免疫印迹法（Western blot）检测Ts14-3-3.2蛋白在Ts成虫和囊尾蚴中的表达情况。 结果:成功构建重组质粒pCzn1-Ts14-3-3.2，诱导表达后菌体上清液和沉淀均在相对分子质量约29.31 × 10 3处出现Ts14-3-3.2目的蛋白条带。纯化后带有His标签的Ts14-3-3.2重组蛋白能被抗His单克隆抗体识别，获得效价为1∶512 000的Ts14-3-3.2重组蛋白多克隆抗体。Western blot结果显示，Ts14-3-3.2蛋白在Ts成虫和囊尾蚴中均有表达。 结论:成功建立Ts14-3-3.2原核表达系统，获得了高纯度、高效价的Ts14-3-3.2重组蛋白多克隆抗体。Ts14-3-3.2蛋白在Ts成虫和囊尾蚴阶段均有表达。

目的:探讨寡克隆区带（OCB）阳性的神经型布鲁菌病（NB）患者的临床、影像学及脑脊液特点。方法:回顾性分析郑州大学第一附属医院2020年1月至2023年6月间确诊为NB的23例患者，男9例，女14例，年龄47（34，59）岁。根据血清及脑脊液IgG电泳结果将NB患者分为OCB阳性组和OCB阴性组，比较两组的临床、影像学及脑脊液特点。结果:23例NB中脑脊液OCB阳性者占65.2%（15/23），以Ⅱ型（14/15）为主；阴性组8例。OCB阳性组临床重型占比（11/15）、脑脊液白细胞计数升高占比（15/15）、IgG指数［ M（ Q1， Q3），0.97（0.57，2.11）］，24 h鞘内合成率［55.6（15.3，232.2）mg/24 h］显著高于阴性组［1/8，5/8，0.63（0.51，0.69），11.6（-1.6，17.3）mg/24 h，均 P<0.05］。两组患者在病程、临床分型上差异无统计学意义（均 P>0.05）。OCB阳性组可表现为全脑（幕上合并幕下）脑实质多发病灶（5/15），但OCB阴性组均未发现幕下脑实质受累（0/8）。 结论:NB患者OCB阳性检出率为65.2%。OCB阳性者临床重症患者更多，神经系统鞘内体液免疫炎性反应更严重，较OCB阴性组更易出现幕下脑实质受累。

目的:探讨中国广东人群δ珠蛋白（HBD）基因变异谱及δ地中海贫血血液学表型特征。方法:采用回顾性病例分析研究，收集2020年7月至2022年12月参加广州市免费地中海贫血筛查的11 616对夫妇血液样本，进行血常规和血红蛋白（Hb）毛细管电泳分析，依据以上结果，共154例样本入组研究：（1）HbA 2<2.0%且无HbF条带组35例；（2）HbA 2<2.0%伴HbF条带组64例；（3）HbA 2<2.0%伴可疑HbA 2变异体组25例；（4）2.0%≤HbA 2<3.5%伴HbF条带且血常规异常［红细胞平均体积（MCV）<82 fl和/或红细胞平均血红蛋白含量（MCH）<27 pg］组25例；（5）2.0%≤HbA 2<3.0%伴β地中海贫血基因携带组5例。采用Sanger 测序检测δ珠蛋白基因的单核苷酸变异。 结果:（1）共检出22种HBD基因变异，包括6种新变异，前3位基因变异分别为c.-127T>C（57.02%，65/114）、c.-80T>C（9.65%，11/114）与c.349C>T（7.89%，9/114）。（2）HbA 2<2.0%且无HbF条带组检出HBD基因变异22例（62.85%，22/35），其中7例MCV、MCH均低于正常参考值，4例合并α地中海贫血；13例未检出HBD基因变异，其中12例MCV、MCH均明显低于正常参考值。19例血常规异常样本中，HBD基因变异检出异常者（7例）HbA 2水平低于未检出者（12例）（ P<0.01）。（3）HbA 2<2.0%伴HbF条带组检出HBD基因变异59例（92.18%，59/64），均为启动子区变异，59例样本HbF均<5.0%；5例HbF>5.0%样本均未检出HBD基因变异。（4）HbA 2<2.0%伴可疑HbA 2变异体组HBD基因变异检出率为100%（25/25），δ珠蛋白变异体值<1.0%。（5）2.0%≤HbA 2<3.5%伴HbF条带且血常规异常组未检出HBD基因变异。（6）2.0%≤HbA 2<3.0%伴β地中海贫血基因携带组5例全部检出HBD基因变异，HbA 2值为（2.62±0.17）%，HbF值（3.62±2.22）%。 结论:HBD基因变异类型多样，c.-127T>C是中国广东人群最常见类型；启动子区突变可导致HbA 2降低，HbF升高，但HbF值通常<5.0%，合并β地中海贫血可能>5.0%。本研究丰富了广东人群HBD基因突变谱。

目的:探讨程序性细胞死亡因子4（PDCD4）在肝癌组织中表达及其临床诊断价值。方法:选取2021年6月到2023年6月新乡医学院第一附属医院手术切除的肝癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用蛋白质组学分析肝癌组织中差异表达的蛋白；采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白质免疫印迹分析癌旁组织和肝癌组织PDCD4表达水平；采用全自动生化仪检测肝癌患者血清肿瘤标志物糖类抗原199（CA199）与甲胎蛋白（AFP）的水平；分析PDCD4表达水平与肝癌患者临床病理特征和预后的关系，并分析PDCD4与肿瘤标志物CA199与AFP的关系。制备接收者工作曲线，分析PDCD4诊断肝癌的价值。符合正态分布的计量数据比较采用独立样本 t检验。 结果:双向电泳结果显示肝癌组织和癌旁组织差异表达的蛋白54个，其中上调20个，下调24个。下调最为显著的蛋白是PDCD4。肝癌组织中PDCD4蛋白和mRNA表达水平（0.85±0.24、0.85±0.24）明显低于癌旁组织（1.57±0.29、1.06±0.26），差异均有统计学意义（ t＝18.710、17.460， P<0.05）。中高分化患者、未淋巴结转移患者PDCD4表达水平（1.09±0.16、1.17±0.23）明显高于低分化和淋巴结转移（0.74±0.13、0.75±0.15），差异有统计学意义（ t＝11.410、10.720， P<0.05）。PDCD4高表达组患者3年生存率[55.56%（30/54）]明显高于低表达组[35.56%（16/45）]，差异有统计学意义（LogRank＝5.649， P<0.05）。高表达组患者血清CA199与AFP水平[（40.67±8.23） U/ml、（55.72±14.79） μg/L]明显低于低表达组患者[（83.94±13.58） U/ml、（58.44±7.72） μg/L]，差异有统计学意义（ t＝11.570、6.990， P<0.05）。PDCD4、CA199与AFP联合诊断的曲线下面积0.850（0.724～0.985），灵敏度为0.895，特异性为0.879。 结论:肝癌患者肿瘤组织中PDCD4表达显著下调，与患者不良临床病理特征和预后相关，与血清标志物CA199和AFP联合检测有助于肝癌诊断。

患者男，17岁，2020年1月无明显诱因出现左侧桡骨远端疼痛，后发现左桡远端肿块，并逐渐出现弯腰受限。2020年5月患者出现双下肢无力，2020年6月中旬出现发热，体温最高38 ℃，不伴畏寒、寒战、盗汗。查血常规、肝肾功能大致正常，血结核感染T细胞检测阳性(2.619 kU/L)，抗核抗体(antinuclear antibody, ANA)、抗可溶性抗原(extractable nuclear antigen, ENA)、抗中性粒细胞胞质抗体(anti－neutrophil cytoplasmic antibodies, ANCA)、抗环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide, CCP)抗体均阴性，多次血培养及骨髓培养(－)，血、尿免疫固定电泳(－)，血游离轻链比值(－)。外院腕关节MRI示左桡骨远端占位，大小2.7 cm×1.8 cm×2.3 cm，伴周围软组织水肿；髋关节MRI示双髂骨、耻骨、髋臼及左侧股骨颈多发异常信号，考虑"骨肿瘤"。外院 18F－FDG PET/CT显像示左侧桡骨远端、左侧肩胛骨、C4椎体、T3~T4、T7、T11、L3椎体、骨盆多处、左侧股骨颈、左侧股骨内侧髁多发溶骨性破坏，代谢异常增高(SUV max：28.5~32.8)。随后完善桡骨穿刺，病理示多量组织细胞及少量淋巴细胞，免疫组织化学：组织细胞CD68(+)，CD1a(－)，Langerin(－)，S－100蛋白(－)，细胞增殖核抗原Ki－67(约20%)，考虑组织细胞增生性病变，首先考虑Erdheim－Chester病(Erdheim－Chester disease, ECD)，B－Raf原癌基因丝/苏氨酸蛋白激酶(B－Raf proto－oncogene, serine/threonine kinase, BRAF) V600E野生型。2020年6月起予干扰素、泼尼松治疗，患者每日仍有低热，且双下肢无力逐渐加重，无法站立，伴尿潴留。后患者为进一步诊治入本院，为评估骨病变行 99Tc m－亚甲基二膦酸盐(methylene diphosponate, MDP)全身骨显像及胸部SPECT/CT显像(图1，图2)。全身骨显像示颈、胸、腰椎多个椎体、左侧肩胛骨、双侧骶髂关节、右侧髋臼及坐骨、左侧腕关节、左侧膝关节显像剂摄取增高灶，SPECT/CT显像可见这些病灶部分为溶骨性破坏，也有部分是成骨为主的骨破坏，部分椎体病变周围伴有软组织密度影，另外有多个椎体出现病理性骨折。

目的:探讨DNA损伤和修复抑制在银杏叶片对燃煤污染型砷中毒患者肝损伤影响中的作用。方法:2017年3月在贵州省兴仁县雨樟镇交乐村砷中毒病区，按照《地方性砷中毒诊断》（WS/T 211-2015）标准和《职业性中毒性肝病诊断标准》（GBZ 59-2010），筛选出52例砷中毒患者作为银杏叶片干预组，49例砷中毒患者作为干预对照组。银杏叶片按照临床常用方法给药，口服3个月（1片/次，3次/d），所有对象干预期间未给予其他药物，干预对照组给予安慰剂，方法同银杏叶片干预组。选择12 km以外非燃用高砷煤、临床检测无肝功能异常的41例居民作为正常对照组。干预前和3个月干预结束时进行体检。在获得本人知情同意并签署知情同意书的情况下，收集晨尿及外周静脉血，分别采用电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS）检测尿砷含量，全自动生化分析仪检测肝功能生化指标[白蛋白（ALB）、白蛋白/球蛋白比值（A/G）、胆碱酯酶（CHE）、总胆汁酸（TBA）]，单细胞凝胶电泳实验检测DNA损伤情况，荧光定量PCR法检测miR-145（修复抑制指标）的表达。结果:共纳入研究对象116人，正常对照组41人、银杏叶片干预组39人、干预对照组36人，银杏叶片干预组和干预对照组在年龄、性别比例、吸烟习惯及饮酒方面与正常对照组比较差异均无统计学意义（ P均> 0.05）。干预前银杏叶片干预组尿砷含量、TBA水平、DNA损伤程度[彗星尾DNA百分含量（TailDNA%）和彗星尾矩（OTM）]、血浆miR-145表达水平[（38.75 ± 19.09）μg/g Cr、（11.13 ± 1.55）μmol/L、8.50 ± 0.88、7.43 ± 0.68、5.78 ± 0.75]均高于正常对照组[（11.62 ± 5.33）μg/g Cr、（5.36 ± 0.87）μmol/L、5.24 ± 0.33、4.71 ± 0.29、2.05 ± 0.27]，差异均有统计学意义（ P均< 0.05）；ALB、A/G和CHE水平均低于正常对照组，差异均有统计学意义（ P均< 0.05）。干预后，银杏叶片干预组尿砷含量、TBA水平、DNA损伤程度（TailDNA%和OTM）、血浆miR-145表达水平均低于干预前，差异均有统计学意义（ P均< 0.05）；ALB、A/G和CHE水平均高于干预前，差异均有统计学意义（ P均< 0.05）。干预对照组干预前后上述指标比较差异均无统计学意义（ P均> 0.05）。相关性分析结果显示，干预后银杏叶片干预组DNA损伤程度（TailDNA%和OTM）与ALB、A/G、CHE水平均呈负相关（ r = - 0.34、- 0.33、- 0.48，- 0.31、- 0.31、- 0.42， P均< 0.05），与TBA水平呈正相关（ r = 0.49、0.48， P均< 0.05）；miR-145与ALB、A/G、CHE水平均呈负相关（ r = - 0.26、- 0.23、- 0.38， P均< 0.05），与TBA水平呈正相关（ r = 0.32， P < 0.05）；DNA损伤程度与miR-145表达均呈正相关（ r = 0.65、0.52， P均< 0.05）。 结论:银杏叶片可改善燃煤污染型砷中毒所致肝损害，该作用机制与其抑制miR-145表达和降低DNA损伤有关。

本文报道1例少见的单克隆免疫球蛋白导致的冷球蛋白血症肾损害。患者为51岁男性，因"双眼睑水肿8年，皮疹3年，尿少1个月"入院。临床表现为肾病综合征、慢性肾功能不全进行性加重。血清免疫电泳可见IgGκ型单克隆M蛋白，Ⅰ型冷球蛋白（IgGκ型），冷球蛋白为530.7 mg/L。多次骨髓穿刺可见浆细胞轻度增多（5.0%~10.5%），肾活检病理光镜提示为膜增生性肾小球肾炎，电镜肾小球内皮下见系膜细胞与系膜基质插入，毛细血管袢腔内大量电子致密物，致毛细血管闭塞，符合膜增生性肾小球肾炎Ⅰ型。该患者诊断为冒烟型骨髓瘤，继发冷球蛋白血症肾损伤。予六程抗浆细胞治疗后患者血尿免疫固定电泳、冷球蛋白定性定量均阴性，肾功能基本恢复正常。

患者，男，35岁，因"多发淋巴结肿大2个月，发热1个月"于2017年7月就诊于我院。血常规：WBC 8.98×10 9/L、HGB 110 g/L、PLT 72×10 9/L；平均红细胞体积71.7 fl、网织红细胞比例2.05%；铁蛋白384 ng/ml、总铁结合力1300 μg/L、转铁蛋白饱和度10.8%。总蛋白45 g/L，白蛋白23 g/L，碱性磷酸酶930 U/L，肌酐160 μmol/L，C反应蛋白（CRP）258.99 mg/L，血沉78 mm，白细胞介素-6（IL-6）65.1 ng/L。免疫球蛋白：IgG 6.74 g/L、IgA 1.00 g/L、IgM 0.40 g/L。血清免疫固定电泳阴性。抗核抗体谱阴性。HIV抗体及人类疱疹病毒8（HHV-8）抗体阴性，EB病毒DNA检测阴性。颈部右侧淋巴结活检病理：Castleman病（混合型）；免疫组化：CD20（+），CD21（+），bcl-2（+），CD38（局灶+），CD138（局灶+），Ki-67（增殖指数20%）。查体：贫血貌；颈部、颏下、颌下、锁骨上、腹股沟多发淋巴结肿大，质软，界清；腹部膨隆，移动性浊音阴性；肝肋缘下5 cm，脾肋缘下10 cm。CT示双侧腋窝、肺门及纵隔多发肿大淋巴结，腹膜后及肠系膜周多发肿大淋巴结，肝大，脾大，腹腔少量积液。明确诊断特发性多中心型Castleman病-非特指型（iMCD-NOS）。2017年8月起予TCP（沙利度胺+环磷酰胺+泼尼松）方案治疗7个疗程，每4周1个疗程。治疗期间患者体温逐渐降至正常，但生化指标改善欠佳（CRP 183.83 mg/L、HGB 108 g/L、白蛋白23 g/L）。CT示横膈上下多发淋巴结肿大，部分较前略缩小；根据国际Castleman病协作网络（CDCN）疗效评估标准，评估为疾病稳定（SD）。2018年5月起更换为BCD（硼替佐米+环磷酰胺+地塞米松）方案治疗9个疗程，每4周1个疗程。评估患者整体疗效为完全缓解（CR）。2023年1月患者再次出现乏力、发热，浅表淋巴结肿大，CRP 257.32 mg/L、HGB 115 g/L、白蛋白43 g/L、肌酐57 μmol/L，考虑疾病进展。2023年3月起调整治疗方案为西罗莫司1 mg每日1次联合地塞米松20 mg每周1次。用药后第2个月查西罗莫司谷浓度4.5 μg/L，调整西罗莫司为1.5 mg每日1次，复查西罗莫司谷浓度5.9 μg/L，后续维持西罗莫司为1.5 mg每日1次剂量。用药第3个月起将地塞米松减至10 mg每周1次，第4个月减至5 mg每周1次。自第5个月起停用地塞米松，予西罗莫司1.5 mg每日1次单药治疗，维持至今。期间检测西罗莫司谷浓度5～15 μg/L。目前患者症状完全缓解，生化指标：CRP 7.27 mg/L，HGB 145 g/L，白蛋白49 g/L，肌酐63 μmol/L。CT未发现肿大淋巴结。考虑治疗有效，整体评估为CR，患者仍继续接受西罗莫司单药治疗。

目的:提高对华氏巨球蛋白血症（WM）合并重-轻链型淀粉样变（AHL）的认识。方法:回顾性分析宁夏回族自治区人民医院2020年5月收治的1例WM合并AHL患者的临床表现、诊断、治疗及预后，并复习相关文献。结果:患者以头晕、乏力为主要临床表现，检查发现贫血、肾功能不全、免疫球蛋白IgM升高，血免疫固定电泳提示IgM λ型单克隆免疫球蛋白，经骨髓细胞形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学（MICM）分型明确诊断为WM。皮下脂肪刚果红染色阳性，偏振光下见"苹果绿"样改变。采用显微切割及蛋白质谱方法分析沉积蛋白类型，结果显示在轻链λ增高的同时存在大量IgM重链，最终诊断为WM合并AHL。结论:WM合并AHL比较罕见，需通过MICM分型及受累组织或皮下脂肪刚果红染色进行综合诊断，利妥昔单抗及伊布替尼治疗有效。

本文报道1例罕见的单克隆免疫球蛋白相关C3肾小球病合并系统性硬化症。患者为老年男性，临床表现为蛋白尿、水肿、肾功能不全，血、尿免疫固定电泳发现单克隆IgG-κ轻链，骨髓细胞学及活检均未见异常，肾活检光镜示系膜细胞及系膜基质增生，免疫荧光示补体C3（4+），IgA（-），IgG（-），IgM（-），电镜示多节段电子致密物沉积，持续存在抗Scl-70抗体强阳性，且整个病程逐渐进展为系统性硬化症。本文通过文献复习，阐述两者之间的可能相关联系，以提高临床医生对两种疾病的认识。