X-连锁低磷血症是最常见的遗传性低磷血症，致病基因是位于X染色体上与内肽酶同源的磷酸盐调节基因(PHEX基因)，呈显性遗传。PHEX基因的缺陷使血成纤维细胞生长因子(FGF)23水平上调，继而近端肾小管上皮细胞的膜结合钠-磷协同转运体NaPi-Ⅱa和NaPi-Ⅱc发生降解以及1α-羟化酶表达被抑制、24-羟化酶活性被增强，最终导致临床表现为肾磷酸盐丢失、维生素D代谢及骨矿化异常的佝偻病/骨软化症。诊断该病有赖于临床症状、影像学检查及实验室结果的综合判断，确诊该病后应尽早且终身予以磷酸盐合剂及骨化三醇替代治疗，必要时加用重组人生长激素改善身高，新药抗FGF23单克隆抗体Burosumab的出现具有较好的应用前景与研究价值。

X-连锁显性低血磷性佝偻病(X-linked dominant hypophosphatemic rickets/osteomalacia, XLH)是一种罕见的骨骼矿化异常性疾病，发病率为(3.9~5.0)/10万 [1]，是遗传性低血磷性佝偻病最常见的一型。XLH的发病机制目前认为是位于X染色体上与内肽酶同源的磷酸盐调节(phosphate-regulating endopeptidase homolog, X-linked， PHEX)基因失活性突变，引起成纤维细胞生长因子23(FGF23)清除障碍，肾脏排磷增加，尿磷增多，血磷减少，最终导致骨骼矿化障碍 [2]，其临床表现在儿童主要为低血磷、高尿磷、身材矮小、双下肢畸形、牙齿矿化不全等特征性佝偻病表现，而成人期则表现为骨软化症、骨关节炎、容易诱发骨折和假性骨折 [3]。本文通过临床表现及遗传学分析，报道1例XLH家系，旨在提高对X-连锁显性低血磷性佝偻病的认识，以利于早期诊断，并给予合理的治疗和随访。

目的:回顾性分析1例X连锁低磷性佝偻病患儿幼儿期应用布罗索尤单抗治疗18个月的临床资料，提高临床医生对该药安全性和有效性的认识。方法:收集患儿临床资料，经父母同意后行全外显子基因检测确诊为X连锁低磷性佝偻病。给予布罗索尤单抗治疗18个月，每11～14 d检测空腹血磷、血钙、碱性磷酸酶、计算钙磷乘积，每2～6周检测甲状旁腺激素、25-羟维生素D，每3个月测定膝间距、肝肾功能、尿钙/尿肌酐、心电图等，每6个月进行影像学检查，持续对患儿进行随访。结果:全外显子测序结果显示患儿X染色体上与内肽酶同源的磷酸盐调节基因(PHEX)存在c.1080_1081insCAATGTTA(p.T361Qfs*3)自发杂合移码突变，既往未见报道。患儿应用布罗索尤单抗治疗18个月，生化指标明显改善，佝偻病评分降低，无牙龈脓肿及其他不良反应发生。结论:PHEX基因c.1080_1081insCAATGTTA(p.T361Qfs*3)变异为该患儿致病原因，布罗索尤单抗作为X连锁低磷性佝偻病靶向治疗药物，治疗疗效明显。

本研究旨在解析东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae的腺苷酸激酶(Adenylat kinase,ADK)NcADK的理化性质和分子特性,并检测NcADK基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂过程中的表达特征,以期丰富NcADK相关信息,并为进一步的功能研究提供依据.利用相关生物信息学软件预测和分析NcADK的理化性质、信号肽、磷酸化位点、二级结构和三级结构.使用MEME软件和Batch CD-Search工具分别预测东方蜜蜂微孢子虫和其它7种微孢子ADK蛋白的保守基序和保守结构域.通过Mega 11.0软件基于ADK氨基酸序列构建进化树.采用RT-qPCR检测东方蜜蜂微孢子虫侵染过程中NcADK的相对表达量.结果表明,NcADK的CDS含有540个核苷酸,可编码179个氨基酸;NcADK的分子量约为20.66 kDa,分子式为C903H1488N258O278S8,脂肪系数为100.61,平均亲水系数为-0.502,等电点为6.83,含29个负电荷氨基酸和29个正电荷氨基酸;NcADK可同时定位于细胞质、线粒体、细胞核、囊泡和过氧化物酶体;NcADK含20个磷酸化位点,不含典型的信号肽;NcADK含88个a-螺旋,24条延长链,17个β-转角,50个无规则卷曲,与模板A0A0F9WEU7.1.A之间的序列同源性为100％;在东方蜜蜂微孢子虫、东方赤孢子虫Hamiltosporidium tvaerminnensis、肠脑炎微孢子虫Encephalitozoon intestinalis、按蚊微孢子虫 Anncaliia algerae 和角膜条孢虫 Vittaforma corneae ADK 中均鉴定到 1 个相同的结构域和5个相同的保守基序;东方蜜蜂微孢子虫与蜜蜂微孢子虫Nosema apis的ADK在进化树上聚为一支.相较于接种后1 d(1 day post inoculation,1 dpi),NcADK的表达量在2 dpi上调但无显著差异(P＞0.05),在3 dpi和4 dpi均显著上调(P＞0.05).研究结果明确了NcADK的理化性质和分子特性,并揭示NcADK是潜在的亲水性蛋白和胞内蛋白,不同微孢子虫的ADK具有较强的保守性,东方蜜蜂微孢子虫及其姐妹种蜜蜂微孢子虫的ADK具有高同源性,NcADK在3 dpi和4 dpi被激活表达.

X连锁显性低血磷性佝偻病/骨软化(X-linked hypophosphatemic rickets/osteomalacia,XLH)是由X染色体上内肽酶同源磷调节基因(phosphate regulating endopeptidase homolog X-linked,PHEX)突变导致的最为常见的遗传性低磷血症.XLH的传统治疗方法是补充活性维生素D和中性磷制剂.2018 年,成纤维细胞生长因子 23(fibroblast growth factors 23,FGF23)单克隆抗体布罗索尤单抗被批准用于治疗 1 岁以上儿童和成人XLH患者,疗效显著优于传统治疗.其他以FGF23 信号通路为治疗靶向的药物,如FGF23/FGFR/αKlotho抑制剂、FGF23 c端片段、FGF23 下游通路MAPK的抑制剂等尚在动物实验阶段,在PHEX基因失活性突变的小鼠模型(Hyp小鼠)中被证明可以纠正低磷血症并改善骨骼矿化,有望进一步成为XLH的新治疗手段.

目的 探讨双硫仑/铜(DSF/Cu)对肝细胞癌(HCC)细胞活力和增殖的影响及其可能机制.方法 使用不同浓度DSF/Cu 0、0.25、0.50和1.00μmol/L处理HCC细胞系HUH-7,采用CCK-8法检测细胞活力,免疫荧光分析细胞增殖,流式细胞术和比色法分别检测活性氧和丙二醛(MDA)含量,Western blot法检测磷酸化组蛋白(γ-H2AX)、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达.另用DSF/Cu 0.50 μmol/L分别联合还原型谷胱甘肽(GSH)1.0 mmol/L、米托蒽醌甲磺酸盐(MitoQ)1.0μmol/L处理HCC细胞,观察其对细胞活力、增殖及活性氧含量的影响.结果 DSF/Cu可显著抑制HUH-7细胞活力和增殖,增加活性氧和MDA含量,上调y-H2AX和PTEN蛋白表达,下调p-Akt蛋白表达(P＜0.05).而加入抗氧化剂GSH或MitoQ后,可降低HUH-7细胞内活性氧含量,增加细胞活力和增殖(P＜0.05).结论 DSF/Cu通过促进细胞氧化应激反应,下调PTEN/Akt信号通路的表达,从而抑制HCC细胞活力和增殖.

目的:克隆 1,4-α-葡聚糖分支酶 1(GBE1)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学以及差异表达分析.方法:根据家鸡转录组数据,利用PCR扩增GBE1 的全长cDNA并进行生物信息学分析.使用qRT-PCR 法检测基因在家鸡6 个组织中的表达差异.结果:克隆得到全长为2 145 bp GBE1 基因,开放阅读框(ORF)为2 130 bp,编码709 个氨基酸.GBE1 蛋白相对分子质量为 81.993,理论等电点 6.25,稳定指数为 35.40,平均亲水性值为-0.484,属于稳定酸性亲水蛋白;GBE1 蛋白含有 67 个磷酸化位点,不存在跨膜区域与信号肽序列,主要定位在细胞质、细胞核、线粒体、胞液中;二级结构主要包括α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲和延伸链,三级结构表明为单体蛋白;同源性分析表明,家鸡中GBE1 蛋白氨基酸序列与珠鸡亲缘关系最近.qRT-PCR 结果表明,GBE1 基因在家鸡心、肝、脾、肺、肾、鸡内金 6 个组织内均有表达,但在肝脏和鸡内金中的表达量显著高于其他脏器.结论:该结果为进一步探讨家鸡GBE1 基因的功能及其对葡聚糖分支酶的调控机制积累了必要的研究基础.

目的:探讨 microRNA-21(miR-21)对心肌梗死诱导的心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响机制.方法:SD大鼠采用结扎左冠状动脉前降支法建立心肌梗死模型,造模成功后分为模型组、重组腺相关病毒血清型 9(rAAV9)-NC组、rAAV9-anti-miR-21 组、rAAV9-anti-miR-21+BpV组,每组 12 只;另取 12 只大鼠作为假手术组.rAAV9-anti-miR-21 组、rAAV9-NC 组分别尾静脉注射含 miR-21 antagomir及其阴性对照的腺病毒进行干预,rAAV9-anti-miR-21+BpV组大鼠尾静脉注射 rAAV9-anti-miR-21 的同时以 0.2 mg/kg腹腔注射磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)抑制剂 BpV,假手术组和模型组经腹腔和尾静脉注射等体积的生理盐水,每日 1 次,连续干预 2周.经胸超声心动图检测大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)和左心室收缩末期内径(LVESD),并计算左心室射血分数(LVEF)和短轴缩短分数(FS);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清氨基末端脑钠尿肽前体(NT-proBNP)水平;取左心室并称重,计算左心室质量指数(LVMI);马松(Masson)染色观察心肌组织病理变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测左心室组织miR-21、PTEN、Collagen Ⅰ和 Collagen Ⅲ表达水平;透射电子显微镜观察心肌组织自噬情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测左心室组织自噬和 PTEN/蛋白激酶 B(AKT)/转录因子 EB(TFEB)通路相关蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠 LVEDD、LVESD、血清 NT-proBNP水平、LVMI、心肌胶原体积分数(CVF)、miR-21 和 Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的 mRNA水平以及 p62 蛋白水平、p-AKT/AKT比值升高,LVEF、FS、PTEN的 mRNA和蛋白水平、自噬空泡的数量以及 LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、TFEB蛋白水平下降(P<0.05);与模型组比较,rAAV9-anti-miR-21 组大鼠 LVEDD、LVESD、血清 NT-proBNP 水平、LVMI、CVF、miR-21 和 Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ的 mRNA水平、p62蛋白水平、p-AKT/AKT比值下降,LVEF、FS、PTEN的mRNA和蛋白水平、自噬空泡的数量以及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、TFEB蛋白水平升高(P<0.05);而敲低miR-21基础上应用PTEN抑制剂下调PTEN表达可降低自噬,减弱敲低miR-21对心力衰竭大鼠心肌纤维化的抑制作用.结论:miR-21在心肌梗死后心力衰竭大鼠模型中的高表达可能通过下调 PTEN、激活 AKT、抑制 TFEB的核易位,进而抑制自噬,促进心肌纤维化.

X-连锁低磷性佝偻病(X-linked hypophos-phatem ic rickets,XLHR)是一种最常见的遗传性佝偻病,发病率约1∶20 000.其临床特点主要包括身材矮小、佝偻病、低磷血症、近端肾小管重吸收磷障碍以及活性维生素D生成不足等[1-2].该病遗传方式为X-连锁显性遗传[3].研究表明XLHR的致病基因是位于X染色体上定位于xp22.1-p22.2区域的内肽酶同源性调磷基因(phosphate regulating gene with homologies to endopepti-dases on the X-chromosome,PHEX).该基因有225 kb的基因组序列,包括22个外显子,可翻译成749个氨基酸的蛋白质,主要在骨骼(成骨细胞和骨细胞)和牙齿中表达.

萜类物质是自然界中广泛存在的一类天然化合物,对植物、动物和人类都有重要价值.1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(DXS)对萜类物质合成调控起关键作用,是2-C-甲基-D-赤藻糖醇-4-磷酸(MEP)途径的第一个酶,也是该途径的一个限速酶,亚细胞定位于类囊体中,具有质体转运肽序列和3个功能结构域:TPP结合结构域、转酮醇酶结构域和嘧啶结合结构域,可用高效液相色谱法测定其活性.目前已从178种植物中克隆分离到DXS基因,按蛋白同源性可分为3类:DXS1、DXS2和DXS3.DXS基因表达具有组织特异性、昼夜节律性,与花朵、果实发育程度和品种有关.转外源或内源DXS基因的植株过表达或抑制表达都会引起植物光合色素(如叶绿素和类胡萝卜素)、内源激素(如脱落酸和赤霉素)和单萜等萜类物质含量的改变.重点综述了DXS蛋白的特性、基因的类型、基因表达、调控和遗传转化方面的研究进展,以期为植物育种和代谢调节提供理论和实践参考.