本研究旨在探究突散囊菌发酵液对肥胖大鼠脂质代谢和肠道菌群紊乱的影响,为其开发利用提供科学依据.SD大鼠被随机分为正常组、模型组和冠突散囊菌发酵液干预的低、中、高剂量组,以及血脂康阳性对照组.通过高脂喂养建立食源性肥胖大鼠模型,正常组和模型组给予无菌水灌胃,各剂量组灌胃不同剂量冠突散囊菌发酵液.实验为期8周,末次给药后收集粪便和血清,用于肠道菌群分析和相关生化指标测定,并摘取肝脏进行病理学观察.结果显示,模型组大鼠体质量和Lee's指数显著增加,血脂发生异常,肠道菌群多样性显著降低.冠突散囊菌发酵液显著降低了肥胖大鼠血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量,提高了高密度脂蛋白胆固醇的含量.测序结果亦显示,冠突散囊菌发酵液显著提高大鼠肠道菌群的多样性,上调瘤胃球菌NK4A214_group、UCG-005、Christensenellaceae_R-7_group 等菌群的丰度,下调拟杆菌属 Bacteroides 和 Turicibacter 的丰度.LefSe 分析还显示,冠突散囊菌发酵液可显著增加大鼠肠道中乳酸菌Lactobacillus丰度,提高肠道的防御功能.综上所述,冠突散囊菌发酵液能够有效改善高脂饮食肥胖大鼠的脂代谢及肠道菌群紊乱.

[背景]冠突散囊菌LYEC03 是从陕西泾阳茯砖茶中分离得到的主要发酵菌株.[目的]研究冠突散囊菌LYEC03 菌株的基因组信息及其发酵枇杷花产品的特性,从分子水平阐明冠突散囊菌的发酵机制.[方法]应用形态和显微形态观察、ITS序列鉴定、重测序及框架图测序对所分离的菌株LYEC03 进行鉴定和基因组信息解析,采用所分离的菌株LYEC03 发酵枇杷花,研究冠突散囊菌对枇杷花主要功效成分及抗氧化性能的影响.[结果]陕西泾阳茯砖茶中分离得到的主要发酵菌株LYEC03 确定为冠突散囊菌.菌株LYEC03 与参考基因组覆盖率高,含有丰富的纤维素酶、蛋白酶、氧化酶和脂肪酶相关基因;基因组相关整体变异较小,其中假设蛋白、碳水化合物激酶、纤维素酶家族糖基水解酶、位点 2 蛋白酶家族蛋白、多酚氧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶等与菌株生长、能量代谢调节、产纤维酶、产蛋白酶和产氧化酶相关的基因发生了变异.菌株LYEC03 基因组序列长度30 623 602 bp、GC含量 51.70%、编码 13 033 个基因、编码基因占比 55.74%,参与了碳水化合物代谢、氨基酸代谢、外源生物降解代谢、能量代谢、脂质代谢与萜类化合物和聚酮类化合物的代谢等多种物质的代谢途径转化过程.菌株LYEC03 生长、主要功效成分含量的变化与总抗氧化活性、2,2-二苯基-1-苦基肼(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazine,DPPH)自由基清除率和羟自由基清除率 3 个抗氧化指标变化一致,均呈现先增加后缓慢降低的趋势.[结论]冠突散囊菌的发酵特性与其基因组纤维素酶、蛋白酶和氧化酶基因的含量丰富密切相关,对冠突散囊菌的基因组信息分析及其发酵特性研究有利于其发酵产品性能的提升,并为其在食品、轻工业及医药等方面的应用提供科学依据.

目的 测定冠突散囊菌发酵液不同溶剂提取物的抑菌作用、抑菌物质的温度及其pH稳定性.方法 依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇提取冠突散囊菌发酵液,采用打孔法测定冠突散囊菌发酵液不同溶剂提取物对细菌、真菌及放线菌的抑菌作用及在不同温度及pH值下的稳定性.结果 发酵液乙酸乙酯提取相的抑菌作用较其他提取相强.其中,对枯草芽孢杆菌与白色链霉菌的抑制作用最显著,且该抑菌物质在25～121℃,pH 4～8范围内均能保持稳定的抑菌活性.结论 乙酸乙酯能有效提取冠突散囊菌发酵液中的抑菌物质,抑菌物质在一定的温度及pH范围内具有良好的稳定性.

散囊菌属真菌(Eurotium spp.)能赋予发酵茶独特的口感和香味.本研究利用前期从广西某六堡茶中筛选并鉴定的三株散囊菌属真菌Aspergillus chevalieri E2、Aspergillus chevalieri E3与Aspergillus cristatus E6,探讨在不同温度下以优化察氏液体培养基培养的生长状况,发酵前不同灭菌条件下的茶叶品质,以及所得茶汤中茶多酚含量、总抗氧化能力和DPPH·自由基清除能力.结果显示:三株真菌在优化的察氏液体培养基中31℃～34℃下都能良好生长.茶叶发酵温度为28℃,三株真菌在发酵初始含水量为20％以上生长良好,其中E3和混合发酵组的生长速度最快.E2在茶叶表面生长出大量金黄色子囊果以及大量浅绿色分生孢子梗;E3几乎只有浅绿色分生孢子梗;E6几乎只有金黄色子囊果.发酵茶叶制作的茶汤内茶多酚含量比未发酵低,抗氧化性指标也有所下降,说明本实验真菌发酵促进了茶内抗氧化物质的氧化.本研究对源于六堡茶不同散囊菌属真菌的茶叶发酵有重要参考价值.

黑茶作为一类具有重要经济和保健价值的微生物发酵茶,与微生物存在密切的联系,在黑茶加工发酵储存过程中都有微生物参与.为明确微生物种类与黑茶品质关系,对发酵过程中微生物多样性变化进行了综述.比较了不同黑茶种类制作工艺以及渥堆过程中的微生物差异.对黑茶渥堆过程中微生物的变化规律进行了说明,细菌、霉菌、酵母分别在渥堆前期、中期、后期大量繁殖,细菌早期较多,中后期逐渐让位于霉菌和酵母菌.在黑茶—微生物后续研究中宜借助现代鉴定手段明确优势菌的种群构成和分类地位,探究不同微生物组合对黑茶品质影响研究,加强黑茶渥堆机械化控制技术及深加工的研究是未来的重要研究趋势.

以冠突散囊菌菌丝干质量为考察指标,以黑毛茶提取液为原料,对冠突散囊菌液态发酵培养基成分、发酵条件进行优化,并分析发酵过程中理化成分和功能成分的动态变化,比较发酵前后芳香性成分组成.得到的最佳培养基为9 g/L的黑毛茶提取液中添加90 g/L葡萄糖、7.5 g/L NH4 Cl和5 g/L CaCl2;最佳发酵条件为250 mL摇瓶中装液量100 mL、接种冠突散囊菌孢子数2.4×106个(V(装液量):V(孢子悬液)=20:1)、初始pH 4.0、28℃发酵8 d.在最优条件下发酵,发酵结束后菌丝干质量增加约10倍,发酵过程中发酵液中各成分呈现动态变化,茶多酚、总蛋白和水浸出物质量浓度分别减少了36.36％、53.80％和21.95％,总黄酮类、游离氨基酸和茶褐素质量浓度分别增加了14.40％、76.75％和5.08％,茶黄素、茶红素发酵前后含量都较低,芳香性成分增加了12种,多为酯类和醇类.

目的 分离鉴定云南普洱茶、广州小青柑、广西六堡茶和湖南熙茯茶中的主要真菌,并探讨其产消化酶活性.方法 采用平板涂布法分离不同发酵茶中的真菌,通过其ITS序列进行分子鉴定;利用平板透明圈法测定不同真菌的产淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶活性.结果 从4种发酵茶中共分离出8种真菌,其中,在云南普洱茶中分离出2种真菌,分别为篮状菌(Talaromyces.sp.)和T.variabilis;广州小青柑中分离出3种真菌,分别为阿曲霉(Aspergillus amstelodami)、烟曲霉(A.fumigatus)和绳状篮状菌(T.funiculosus);广西六堡茶中分离出2种真菌,分别为黑曲霉(A.niger)和冠突曲霉(A.cristatus);湖南熙茯茶中仅分离出谢瓦曲霉(A.chevalieri).其中Talaromyces.sp.、T.variabilis、A.niger、A.amstelodami、A.fumigatus、T.funiculosus有产纤维素酶活性,Talaromyces.sp.、T.variabilis、A.cristatus、A.fumigatus、T.funiculosus有产淀粉酶活性,Talaromyces.sp.、T.variabilis、A.niger、A.fumigatus、T.funiculosus有产蛋白酶活性,A.niger有产脂肪酶活性.在8种真菌中,T.variabilis、烟曲霉和绳状篮状菌可同时产纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶;黑曲霉能同时产纤维素酶、蛋白酶和脂肪酶;冠突曲霉仅有产淀粉酶活性;阿曲霉仅有产纤维素酶活性.通过比较不同真菌的产酶活性表明,烟曲霉的产蛋白酶活性能力最强;Talaromyces sp.的产纤维酶活性能力最强;Talaromyces.sp.和绳状篮状菌的产淀粉酶活性最强.结论 发酵茶的真菌以曲霉菌属Aspergillus、散囊菌属Eurotium和篮状菌属Talaromyces为主,多数真菌具有产消化酶活性,这些酶可能在茶叶发酵过程中起重要作用,并影响发酵茶叶的品质.

散囊菌属真菌(Eurotium spp.)又称“金花菌”,能在六堡茶表面生长出金黄色的子囊果而得名,是一类对发酵茶叶的品质有积极影响的真菌.本研究前期从广西梧州六堡茶中筛选到的三株散囊菌属真菌Aspergillus chevalieri E2(简称E2),Aspergillus chevalieri E3(简称E3)与Aspergillus cristatus E6(简称E6),将菌株接种于自制液体茶粉培养基中培养,检测发酵液中产生的色素物质;测定发酵液中纤维素酶、果胶酶、淀粉酶的酶活力、总糖和还原糖糖含量、氨基酸含量、总抗氧化能力、自由基清除能力和荼多酚含量.结果 表明:三株真菌在液体茶粉培养基中生长良好,E3生长尤其迅速.在8d的培养期限内,E2、E3和E6的最高果胶酶活力分别为2.52、3.44和5.15 U/mL;最高纤维素酶活力分别为0.57、0.82和1.10 U/mL;最高淀粉酶活力分别为0.31、0.35和0.49U/mL.三株真菌的发酵后培养液中还原糖含量大幅增加,增幅分别达到131.70％、627.02％和459.12％;总糖含量同样呈上升趋势,增幅分别达到6.84％、35.25％和2.07％;E2与E3的氨基酸含量分别下降了17.43％与32.68％,E6则上升了0.52％;E3的总抗氧化活性提升最大,达65.87％;DPPH·自由基清除能力提升最大的是E2,达128.33％;茶多酚含量都显著提升,增幅分别为50.85％、51.58％和53.06％.本研究对改善六堡茶的品质及茶叶的发酵的研究有一定意义和参考价值.

目的 在云南普洱茶、广州小青柑、广西六堡茶、湖南熙茯茶及陕西泾阳茯砖茶分离到9种真菌的基础上,探讨9种真菌发酵液和发酵茶沸水冲泡液的抗氧化酶活性.方法 采用抗氧化试剂盒测定真菌发酵液及发酵茶沸水冲泡液的抗氧化酶活性;利用Past 3软件对9种真菌发酵液抗氧化酶活性和5种发酵茶沸水冲泡液的抗氧化酶活性进行主成分分析.结果 通过比较不同真菌发酵液的抗氧化酶活性表明,小青柑中分离到阿曲霉Q1的CAT(过氧化氢酶)活性最高,酶活力单位为(4.37±0.15) U/mL,熙茯茶中分离到谢瓦曲霉X1的POD(过氧化物酶)活性最高,酶活力单位为(21.67士1.05)U/mL,其次为泾茯茶中分离到赤散囊菌J17,酶活力单位为(18.59±2.74) U/mL;六堡茶中分离到的黑曲霉L1的T-SOD(总超氧化物歧化酶)的活性最高,酶活力单位为(71.11±3.90) U/mL,其次为普洱茶中分离到篮状菌P1,酶活力单位为(59.29±1.42) U/mL;通过比较不同发酵茶沸水冲泡液的抗氧化酶活性表明,5种发酵茶的CAT (F=37.409,P＜0.01),POD (F=164.268,P＜0.01),T-SOD (F=26.639,P＜0.01)活性差异均有统计学意义.其中,泾茯茶冲泡液的CAT活性最高,而其余4种茶叶冲泡液均无CAT活性;普洱茶与泾茯茶冲泡液的POD活性最高,酶活力单位分别为(18.11±0.71)和(18.11士0.64)U/mL;普洱茶和六堡茶冲泡液的T-SOD活性最高,酶活力单位分别为(48.72±0.43)和(45.82士2.02)U/mL;通过对9种真菌发酵液抗氧化酶活性的PCA分析表明,谢瓦曲霉X1、赤散囊菌J17、阿曲霉Q1、烟曲霉Q2、绳状篮状菌Q3和冠突曲霉L2的抗氧化酶活性相近,篮状菌P1、篮状菌P2和黑曲霉L1的抗氧化酶活性相近;通过对5种发酵茶沸水冲泡液抗氧化酶活性的PCA分析表明,小青柑与熙茯茶沸水冲泡后的抗氧化酶活性相近,六堡茶、普洱茶和泾茯茶沸水冲泡后的抗氧化酶活性相近.结论 不同发酵茶的优势真菌不同,其真菌发酵产物的抗氧化酶活性不同,且不同发酵茶冲泡液的抗氧化酶活性也不同.

冠突散囊菌俗称"金花",是黑茶发花过程中的优势菌种,形成了茯砖茶特有的色、香、味品质,是评价茯砖茶品质的重要指标.本研究对贵州九安夏秋黑毛茶接种冠突散囊菌,以未接种的黑毛茶为对照,对茶中的真菌进行分离培养和分子生物学鉴定.同时,对接种和不接种不同时期的黑毛茶中的品质成分茶多酚、氨基酸、黄酮和可溶性糖的含量进行了测定.从接种和未接种冠突散囊菌的黑毛茶中共分离获得278株真菌,经过分子生物学鉴定后分属5属,分别为:曲霉属Aspergillus、拟多毛孢属Colletotrichum、支孢属Cladosporium、Pseudopithomyces、青霉属Penicillium.接种冠突散囊菌的黑毛茶中青霉属菌数量最多,占菌株总数量的44.2％,为优势群类;未接种的黑毛茶中曲霉属菌数最多,占总株数的56％.在接种后20 d歧皱青霉菌和冠突散囊囊菌成为散茶中的优势种群,而在未接种的黑毛茶中以岐皱青霉菌和塔宾曲霉为主.接种和未接种冠突散囊菌的黑毛茶中茶多酚的含量分别从104.09 mg/g降到98.84 mg/g、 103.9 mg/g下降到99.38 mg/g;氨基酸含量分别从5.36％下降到4.25％、5.32％下降到4.25％,接种冠突散囊菌的黑毛荼中氨基酸提前4d降解至最低:可溶性糖含量在接种后8d由37.5 mg/g轻微升高到38.4 mg/g,未接种茶在发花4d后显著升高,由38.7 mg/g升高到40.3 mg/g.不论接种和未接种金花菌的散茶黄酮含量均在接种后20 d降至35.56 mg/g和35.54 mg/g.未接种茶的黄酮含量无显著变化,接种金花菌后黑毛茶中的黄酮含量显著升高,但在发花后8～12d黄酮含量显著下降.