目的 优化基于ASTM F2131-02标准试验的重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)体外生物活性的检测方法,并进行验证.方法 在美国试验材料学会(American Society for Testing Material,ASTM)建立方法的基础上,对检测细胞株(W-20-17及C2C12细胞)、rhBMP-2稀释方式(2及3倍系列稀释)、细胞培养时间(24、36、48、72h)、细胞冷冻温度(-20及-80 ℃)进行优化,并验证优化方法的特异性、中间精密性、线性及耐用性.应用优化方法检测不同厂家来源rhBMP-2的比活性.结果 确定采用C2C12细胞作为检测细胞;最佳rhBMP-2稀释方式为2倍系列稀释;最佳细胞培养时间为48 h;最佳细胞冷冻温度为-80 ℃.rhBMP-2样品中加入杂蛋白(牛血清白蛋白)时,C2C12细胞可特异性响应其中的rhBMP-2诱导作用;2名实验员于2个时间点共12次检测结果的CV为11.7％;rhBMP-2样品的理论效价在70％～142％范围内与实测效价呈良好的线性关系,拟合直线回归方程为:y=0.983 1 x-0.010 3,R2为0.996 4;采用4、11、21代次C2C12细胞检测rhBMP-2比活性的CV为5.2％.采用优化方法重复2次测定不同厂家来源rhBMP-2样品比活性的CV为1.3％～7.5％.结论 优化的方法具有良好的特异性、中间精密性、线性及耐用性,可用于rhBMP-2体外生物活性的检测,为其研究、生产和应用提供了可靠的分析方法.

目的 比较GnRH拮抗剂方案新鲜周期和复苏周期胚胎移植的妊娠结局,为拮抗剂方案胚胎移植策略提供依据.方法 回顾性分析2017-2022年于湖州市妇幼保健院生殖中心采用拮抗剂方案促排卵的患者,按是否新鲜周期移植分为2组,研究组为新鲜周期移植的患者(197例),对照组为新鲜周期全胚冷冻且完成首次复苏周期移植的患者(136例),比较2组妊娠结局的差异.结果 单因素分析显示新鲜周期组和复苏周期组临床妊娠率(50.8％vs.54.4％,P=0.512)、活产率(41.1％vs.46.3％,P=0.346)比较差异均无统计学意义,2组卵裂胚、囊胚着床率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).修正Poisson分析显示拮抗剂方案促排卵周期年龄是唯一能同时预测临床妊娠率(RR=0.989,95％CI:0.981～0.997,P=0.007)和活产率(RR=0.992,95％CI:0.983～0.999,P=0.048)的因素,新鲜周期胚胎移植不是影响临床妊娠率(RR=1.016,95％CI:0.924～1.118,P=0.742)和活产率(RR=1.020,95％CI:0.922～1.128,P=0.700)的因素.结论 拮抗剂方案促排周期,年龄是唯一能同时预测临床妊娠率和活产率的重要因素,而新鲜周期移植不影响临床妊娠结局.

目的 探讨激素替代方案准备子宫内膜的冷冻胚胎移植(FET)周期中不同孕激素给药方式对妊娠及分娩结局的影响.方法 选取接受第1周期冷冻单囊胚移植并使用激素替代方案准备内膜患者3 357例,根据孕激素给药方式分为肌内注射黄体酮组(IMP组)749例、口服地屈孕酮联合阴道微粒化黄体酮胶囊组(DYD-VPC组)2 249例及口服地屈孕酮联合阴道黄体酮凝胶组(DYD-VPG组)359例.比较三组基本临床特征、孕产期并发症及妊娠分娩结局的差异.结果 三组年龄、BMI、不孕年限、未生育、患有原发性不孕症、窦卵泡数、获卵数、FET前子宫内膜厚度、PCOS患者比例、剖宫产史、移植胚胎发育时间等基线资料比较均无统计学差异(P均>0.05).三组活产率、生化妊娠率、生化妊娠流产率、临床妊娠丢失率等均无统计学差异(P均>0.05);IMP组剖宫产率高于DYD-VPC组和DYD-VPG组(83.42%vs 76.88%vs 73.41%,P<0.05).三组妊娠期和新生儿并发症如早产、巨大儿、低出生体质量儿、大于胎龄儿、小于胎龄儿、妊娠期高血压疾病和妊娠期糖尿病发生率均无统计学差异(P均>0.05).多因素Logistic回归分析校正混杂因素后显示,肌内注射黄体酮与剖宫产风险增加相关.结论 在激素替代方案准备子宫内膜的冻胚移植周期中,口服地屈孕酮联合阴道用黄体酮的临床妊娠率和活产率与肌内注射黄体酮相同,但剖宫产率降低.

目的:基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法(UPLC Q-TOF MS)对比不同种百合(卷丹及百合)的新鲜品和干燥品(冷冻干燥及烘干)成分的差异.方法:采用UPLC Q-TOF MS技术,对不同种百合的新鲜品和干燥品进行分析,进一步通过主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)结合单因素分析筛选百合新鲜样品及烘干样品的差异化合物.结果:UPLC Q-TOF MS结果显示,百合新鲜样品和干燥品主要成分相似.PCA结果显示,百合新鲜品与冻干品聚为一类,而两者与烘干品有明显差异,说明百合冻干样品和新鲜样品整体化学成分相近,而烘干样品经过烫片和烘干处理后化学成分发生了一定变化,故与前两者相异.OPLS-DA结果显示,卷丹新鲜品与烘干品存在 387 个差异成分,百合新鲜品与烘干品存在 335 个差异成分,经数据库比对,初步鉴定出 8 个成分.结论:相较于烘干百合,鲜百合与冷冻干燥百合成分更为相近,为百合药材临床应用与现代中药制剂开发提供依据.

目的:探讨体外受精-胚胎移植治疗中，多囊卵巢综合征（PCOS）患者的基础黄体生成素/卵泡刺激素（LH/FSH）比值与治疗结局之间的关系。方法:采用回顾性队列研究方法，根据纳入排除标准，共纳入2 868例2015年10月至2021年10月间在安徽医科大学附属第一医院生殖医学中心行体外受精-胚胎移植的PCOS患者，其中基础LH/FSH比值>2者为观察组（818例），比值≤2者作为对照组（2 050例）。采用倾向性评分匹配（1∶2.5）来调节患者的非随机分配。通过单因素分析验证基础LH/FSH比值是否与治疗结局相关。结果:经倾向性评分匹配（1∶2.5）后，观察组（778例）与对照组（2 024例）患者的基线数据均无显著差异（ P均>0.05），具有可比性。观察组患者使用促性腺激素总量及持续时间均少于对照组（ t=4.989， P<0.001； t=3.267， P=0.001），卵母细胞体外成熟率高于对照组（ χ2=4.938， P=0.026），获卵数和卵裂数均高于对照组（ t=-2.305， P=0.021； t=-2.816， P=0.005），但两组优质胚胎数和优质胚胎率比较均无显著差异（ P均>0.05）。观察组患者的中重度卵巢过度刺激综合征发生率高于对照组（ χ2=17.277， P<0.001）。无论新鲜胚胎移植还是冻融胚胎移植周期中，剔除多胎妊娠数据后，观察组患者的妊娠期糖尿病发生率仍显著高于对照组（ χ2=9.174， P=0.002； χ2=4.204， P=0.040）。在新鲜胚胎移植周期中，观察组患者的临床妊娠率［分别为30.30%（20/66）、47.75%（53/111）］和分娩率［分别为30.30%（20/66）、46.85%（52/111）］均显著低于对照组（ χ2=5.198， P=0.023； χ2=4.695， P=0.030）；而在冻融胚胎移植周期中，观察组的分娩率显著高于对照组［分别为59.41%（423/712）、55.04%（1 053/1 913）； χ2=7.526， P=0.023］。观察组新鲜胚胎移植周期的临床妊娠率及分娩率均显著低于冻融胚胎移植周期（ χ2=21.308， P<0.001； χ2=20.871， P<0.001），对照组则均无显著差异（ P均>0.05）。 结论:PCOS患者中基础LH/FSH比值较高者，促排卵后更易发生中重度卵巢过度刺激综合征，妊娠期糖尿病的发生率更高。全胚胎冷冻后行冻融胚胎移植可获得更好的妊娠结局。

2015年中国新发恶性肿瘤数据统计表明，30岁以下女性患者为3.88万，这些恶性肿瘤患者急需得到医生关于生育力保护和保存的建议，而卵巢组织冷冻方法是保存内分泌功能和生育能力的最佳方法。目前影响卵巢组织存活的关键是解决卵巢组织移植后的缺血再灌注损伤问题，本文将从卵巢组织移植后缺血再灌注的机制，以及抗氧化剂、促血管生成和远处缺血预处理等干预方法进行系统地文献梳理，有助于结合生物技术与医疗技术开发更有效、安全和可操作的解决方案，以改善卵巢移植后缺血状态，解决日益增长的女性生育力保护需求。

早期肺癌的主流治疗方式是手术。然而，许多患者因各种原因无法手术而选择替代治疗。经支气管镜介入技术因其侵入性更小且有更多治疗方式的选择，成为可行的替代疗法。本文综述了支气管镜治疗周围型肺癌的几种主要的方法。

目的:探讨冷冻消融技术治疗前列腺癌根治性放疗后原发灶复发患者的临床价值。方法:回顾性分析2017年8月至2021年2月复旦大学附属肿瘤医院21例行冷冻消融治疗的前列腺癌根治性放疗后原发灶复发患者的临床资料。平均年龄73.1(57.3~85.0)岁，初诊Gleason评分6分5例，7分8例，≥8分8例。初诊临床分期：cT 2期13例；cT 3期8例。放疗前基线前列腺特异性抗原(PSA)35.3(6.4~78.5) ng/ml，放疗后PSA最低值为1.8ng/ml；中位随访8(3~12)个月后均因PSA持续升高就诊。盆腔MRI及PSMA SPECT检查提示前列腺癌原发灶复发。21例均行挽救性内分泌治疗，冷冻消融术前PSA 4.1(1.8~14.4)ng/ml。术前检查综合评估，患者仅原发灶复发，未见淋巴结或远处转移。采用氩气-氦气低温手术治疗系统，针对复发病灶留置1~3根冷冻针，采用两个冷热循环进行冷冻消融。术后继续应用内分泌治疗。观察不良反应，以及PSA进展、原发灶复发或转移等预后指标。 结果:21例手术均顺利完成，术中评估前列腺体积中位值为42.0(23.0~85.0)ml。21例中术后2例出现尿潴留，1例尿路感染，2例排尿后出现组织脱落。11例术后2~3个月PSA快速下降，下降至中位最低值0.400(0.003~2.800)ng/ml。冷冻消融术后中位随访18(6~51)个月，1例影像学检查提示前列腺局部仍有弥散受限或PSMA摄取增高；4例出现PSA进展，PSA进展时间中位值13(4~36)个月；16例疾病控制良好。无复发转移病例。PSA进展患者较疾病控制良好患者的前列腺体积更大[69.2(59.2~85.0)ml与38.7(23.0~48.7)ml， P<0.001]，冷冻消融术前PSA更高[9.8(6.4~14.4)ng/ml与2.0(1.8~13.8) ng/ml， P＝0.021]。 结论:前列腺冷冻消融可延缓前列腺癌根治性放疗后原发肿瘤复发后的进展，尿潴留、尿路感染等并发症的发生率不高，可作为根治性放疗后原发灶复发的一种局部治疗选择。

目的:通过解剖了解颧弓韧带的形态结构及位置数据。方法:2018年7月至2020年1月，杭州医学院浙江省人民医院整形外科医生团队在杭州师范大学医学部解剖教研室解剖20例中国人半面冷冻新鲜标本，逐层解剖显露颧弓韧带，观察相邻组织结构及层次关系，测量不同层次及起点的尺寸及拉力参数。参考13篇颧弓韧带相关论文，结合解剖数据，得出颧弓韧带的认知及描述。结果:颧弓韧带在颧弓区域皮肤和皮下组织间呈均匀致密垂直于皮肤分布的纤维组织结构，横径2.0~2.5 cm，外侧缘距离耳屏3.5 cm；在浅表肌肉腱膜系统(SMAS)深层分为大小两束，分别距离耳屏4.0、6.5 cm；在颧弓前端下缘骨膜表面可见大束韧带起始部，纵轴平行于颧弓，位于颧大肌起点外侧，拉力最大可达28 N；在颧大肌起点内侧可见小束韧带起始部，纵轴平行于颧骨下缘，大小束之间有细小散在的韧带。结论:颧弓韧带包含大小两束，分别起自颧弓和颧骨下缘，具有特定的解剖规律，不同层次的结构表现和位置参数对临床有重要的参考意义。

人类生殖细胞低温冷冻作为生育力保存的一种方式，在辅助生殖技术（assisted reproductive technology，ART）发展中起着重要作用，目前该技术已成为生殖医学领域的研究热点之一，并在辅助生殖实践中得到越来越广泛的应用。为提高ART的成功率，冷冻保存技术在发展中不断改进，尤其是冷冻策略的选择和冷冻保护剂的改良与优化。冷冻保存技术适用于行ART治疗或是因疾病导致的生育力下降而进行的卵母细胞、精子、胚胎冷冻保存的群体，也适用于癌症患者为保存生育力而进行的卵巢及睾丸组织冷冻保存。然而，不同的冷冻方法对于不同生殖细胞类型的冷冻效果并不一致，且目前不同生殖细胞冷冻效果的评价尚缺乏合理有效的标准。本文综述了人类生殖细胞低温冷冻保存技术的发展现状及应用，并探讨了低温保存未来的发展方向。