2015年中国新发恶性肿瘤数据统计表明，30岁以下女性患者为3.88万，这些恶性肿瘤患者急需得到医生关于生育力保护和保存的建议，而卵巢组织冷冻方法是保存内分泌功能和生育能力的最佳方法。目前影响卵巢组织存活的关键是解决卵巢组织移植后的缺血再灌注损伤问题，本文将从卵巢组织移植后缺血再灌注的机制，以及抗氧化剂、促血管生成和远处缺血预处理等干预方法进行系统地文献梳理，有助于结合生物技术与医疗技术开发更有效、安全和可操作的解决方案，以改善卵巢移植后缺血状态，解决日益增长的女性生育力保护需求。

目的:探索女性肿瘤患者在腹腔镜卵巢皮质切除术中获取未成熟卵体外成熟后（ in vitro maturation，IVM）冷冻卵母细胞保存生育力的可行性及有效性。 方法:回顾分析2015年11月至2022年4月期间于北京大学第三医院妇产科生殖医学中心行腹腔镜下卵巢皮质切除术的22例肿瘤患者的一般资料、手术方法及术后随访资料。研究组纳入腹腔镜术中同时获取未成熟卵IVM的患者（ n=14）；对照组纳入仅行皮质切除的患者（ n=8）。分析两组患者的手术时间、出血量、冻存皮质数量等数据，评估该方法的应用价值及安全性。研究组根据取卵方式不同分为两个亚组，经阴道取卵亚组（ n=10）及经腹腔镜取卵亚组（ n=4），分析两亚组患者的手术时间、获卵数、冻存皮质数量等数据，评估不同获卵方式的效率。全部22例患者术后每年进行随访，询问肿瘤治疗情况、月经情况，条件允许者返院复查盆腔超声、性激素水平测定，记录这些患者肿瘤治疗后的卵巢功能并予以适应证范围内的激素替代治疗（hormone replacement therapy，HRT）。 结果:研究组和对照组患者年龄、患病时间、抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）水平、冻存皮质数量之间差异均无统计学意义（均 P>0.05），但研究组的基础窦卵泡数（19.71±6.04）、手术时间［（68.07±17.35）min］、出血量［（9.0（5.0，10.5）mL］高于对照组［9.25±3.15， P<0.001；（44.25±16.97）min， P=0.005；3.5（2.0，5.0）mL， P=0.001］，差异均具有统计学意义。14例取卵患者中，经阴道取卵亚组的获卵数［15.5 （11.0，21.0）个］及年龄［（27.00±2.94）岁］显著高于经腹腔镜取卵亚组［4.0 （0.8，10.3）个， P=0.028；（15.75±2.22）岁， P<0.001］，两亚组间患者窦卵泡数、手术时间、冻存皮质数量差异均无统计学意义（均 P>0.05）。接受造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation，HSCT）的7例患者出仓后均出现闭经，疾病缓解后予以HRT，身体发育及生活质量得以维持及改善。 结论:年轻肿瘤患者在进行卵巢皮质切除术时同时获取未成熟卵IVM后冻存可增加生育力保存的机会；经阴道获取未成熟卵的效率更高；HSCT治疗后闭经率高，HRT可以提高患者生活质量。

目的:探究骨髓间充质干细胞（bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSC）移植对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢的影响及其作用机制。方法:将7周龄40只清洁级SD雌性大鼠按随机数字表法分为4组：假手术组、模型组、移植组、阳性对照组，除假手术组外其余组均进行双侧卵巢切除术构建骨质疏松大鼠模型。模型构建2个月后，移植组大鼠尾静脉注射80 μl/kg含有BMSC的PBS溶液，假手术组和模型组尾静脉注射等量的PBS溶液，阳性对照组大鼠每天灌胃给与仙灵骨葆0.5 g/100 g。治疗14 d后收集各组大鼠血清和股骨。苏木精-伊红染色（HE）观察股骨组织病理学变化；Micro-CT法测量骨密度（bone mineral density，BMD）与骨参数；酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测骨钙素、骨保护素、碱性磷酸酶、胰岛素样生长因子1表达水平；分光光度计法测定血清钙、磷、镁水平；蛋白免疫印迹（Western blot）检测各组大鼠股骨中核因子κ b配体受体激活剂（receptor activator of nuclear factor κb ligand，RANKL）、骨保护素（osteoprotegerin，OPG）、肿瘤坏死因子受体相关蛋白6（tumor necrosis factor receptor-associated protein 6，TRAF6）和核因子kappa B亚基1（nuclear factor kappa B subunit 1，NF-kB1）蛋白水平表达。结果:与假手术组比较，模型组大鼠BMD降低（0.28±0.01）g/cm 3，骨体积分数（bone volume fraction，BV/TV）降低（19.73±2.02）%，骨小梁厚度（trabecular thickness,Tb.Th）降低（0.082±0.008）mm，骨小梁数量（trabecular number,Tb.N）降低（1.60±0.17）mm -1，骨小梁分离度（trabecular separation/spacing, Tb.Sp）升高（0.273±0.024）mm，骨保护素降低（489.49±55.29）ng/L，碱性磷酸酶降低（229.13±15.05）U/L，胰岛素样生长因子1降低（236.64±14.32）μg/L，骨钙素升高（1.866±0.109）μg/L，钙水平升高（11.98±1.09）mg/dl，磷水平升高（6.85±0.68）mg/dl，镁水平降低（0.62±0.04）mg/dl，RANKL相对表达水平升高（1.05±0.09），OPG相对表达水平降低（0.58±0.08），RANKL相对表达水平升高（0.74±0.10），NF-kB1相对表达水平升高（1.01±0.11）（ P<0.05）；移植组大鼠BMD降低（0.38±0.04）g/cm 3，BV/TV降低（26.73±2.74）%，Tb.Th降低（0.094±0.006）mm，Tb.N降低（2.67±0.09）mm -1，Tb.Sp升高（0.241±0.026）mm，骨保护素基本不变（720.09±67.41）ng/L，碱性磷酸酶基本不变（269.48±14.15）U/L，胰岛素样生长因子1降低（335.95±24.13）μg/L，骨钙素升高（1.392±0.153）μg/L，钙水平升高（7.12±0.53）mg/dl，磷水平升高（4.54±0.32）mg/dl，镁水平基本不变（0.87±0.08）mg/dl，RANKL相对表达水平升高（0.59±0.05），OPG相对表达水平降低（0.97±0.10），RANKL相对表达水平升高（0.45±0.06），NF-kB1相对表达水平升高（0.72±0.06）（ P<0.05）；阳性对照组大鼠BMD降低（0.36±0.05）g/cm 3，BV/TV基本不变（28.72±3.20）%，Tb.Th基本不变（0.096±0.011）mm，Tb.N基本不变（2.85±0.24）mm -1，Tb.Sp基本不变（0.241±0.027）mm，骨保护素降低（716.78±36.90）ng/L，碱性磷酸酶基本不变（270.65±18.59）U/L，胰岛素样生长因子1降低（336.94±17.50）μg/L，骨钙素升高（1.377±0.101）μg/L，钙水平升高（7.13±0.80）mg/dl，磷水平升高（4.58±0.71）mg/dl，镁水平基本不变（0.89±0.04）mg/dl，RANKL相对表达水平升高（0.55±0.08），OPG相对表达水平降低（0.98±0.13），RANKL相对表达水平基本不变（0.40±0.05），NF-kB1相对表达水平升高（0.65±0.09）（ P<0.05）。 结论:BMSC移植可通过调控骨代谢、血清钙、磷、镁水平改善去卵巢大鼠骨质疏松症，这可能与RANKL/OPG/TRAF6通路有关。

目的:探索人羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stem cells，hAMSCs）对自身免疫性早发性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency，POI）小鼠卵巢功能和子宫内膜容受性的影响。方法:使用透明带3多肽-弗氏免疫佐剂诱导小鼠自身免疫性POI，一次性尾静脉注射移植hAMSCs 1×10 6细胞/只，将动物分为正常组（ n=10）、模型组（ n=15）、hAMSCs组（ n=15），阴道涂片监测动情周期，酶联免疫法检测血清卵泡刺激素（follicle-stimulating hornome，FSH）、雌二醇与抗苗勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）含量，HE染色观察卵巢和子宫病理组织学变化，免疫组织化学检测子宫同源框A10（homeobox A10，HOXA10）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和FSH受体（FSH receptor，FSHR）蛋白表达，综合评价子宫内膜容受性。 结果:hAMSCs移植6周，hAMSCs组动情周期异常率［40.00%（6/15）］低于模型组［86.67%（13/15）， P=0.021］。与模型组血清FSH［（10.239±1.091）μg/L］、雌二醇［（103.325±4.952）ng/L］和AMH［（1.133±0.494）μg/L］水平相比，hAMSCs组FSH水平［（7.664±0.735）μg/L］明显降低（ P<0.001），雌二醇［（126.883±23.370）ng/L］和AMH［（2.204±0.453）μg/L］水平均明显升高（ P=0.015， P<0.001）。与模型组不同，hAMSCs组卵巢指数、子宫指数增高；卵巢组织不同发育阶段的卵泡数增加，间质纤维化和闭锁卵泡少见，子宫壁与子宫内膜增厚，腺体数量和体积增加。HOXA10吸光度（absorbance， A）值hAMSCs组（5.90±1.94）高于模型组（2.79±1.27， P=0.029），TNF-α A值hAMSCs组（3.83±1.23）低于模型组（6.26±0.96， P=0.002）；FSHR A值hAMSCs组（3.61±1.66）与模型组（2.74±0.22）差异无统计学意义（ P>0.05），但模型组低于正常组（4.13±0.54， P=0.006）。 结论:移植hAMSCs在恢复自身免疫性POI小鼠卵巢功能的同时，可明显改善子宫内膜容受性，有助于提高生育能力。

目的:探讨复发性交界性卵巢肿瘤患者保留生育力的手术方法和辅助生殖技术助孕策略。方法:回顾性分析1例复发性交界性卵巢肿瘤患者的病例资料。该患者因双侧卵巢复发性交界性肿瘤，多次入院治疗行右附件切除术和左附件囊肿剥除术。患者未避孕3年未孕，考虑该患者强烈的生育需求，采用微刺激方案进行促排卵治疗，辅助生殖技术助孕过程中左侧卵巢肿瘤显著增大，随后行腹腔镜下左附件切除术，选取健康的卵巢皮质冷冻保存，以保留生育能力。结果:患者共经历了5次控制性促排卵，形成了7枚可利用胚胎。患者于第3次冻胚周期移植获得成功妊娠，并分娩一活婴。患者尚有2枚胚胎和3片卵巢组织冻存。结论:年轻且有生育需求的交界性卵巢肿瘤患者，可实施保留生育能力的手术和辅助生殖技术助孕，虽在一定程度上可能会导致疾病复发风险提高，但并不影响患者的生存质量，且使得患者的生育愿望得到实现。

目的:观察放射性核素 177Lu标记的叶酸-二乙烯三胺五乙酸-聚乙二醇-聚乳酸共聚物( 177Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA)纳米粒子的体内靶向分布，评价腹腔灌注纳米粒子治疗小鼠卵巢癌腹膜转移瘤及腹水疗效。 方法:制备 177Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA纳米粒子，向人卵巢癌移植瘤荷瘤小鼠尾静脉注射纳米粒子后4、24、72 h和7 d，行微型单光子发射计算机断层显像仪(micro-SPECT/CT)显像，观察纳米粒子体内分布情况。将12只人卵巢癌腹腔转移瘤裸鼠模型按随机抽签法分为阴性对照组(生理盐水)、化疗组(顺铂3 mg/kg，2次/周)和粒子组( 177Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA粒子18.5 MBq)，每组4只，腹腔灌注给药。7 d后行活体荧光成像评价腹腔肿瘤生长情况，计算相对抑瘤率，TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡率，免疫组织化学法检测肿瘤Ki67增殖活性，比较治疗后各组腹水体积。 结果:micro-SPECT/CT显像显示，移植瘤放射性浓聚，24 h肿瘤肌肉摄取比值(T/M)最高，为2.81±0.49。活体荧光成像显示，腹腔给药治疗后，粒子组、化疗组和阴性对照组的腹腔肿瘤荧光强度分别为(1.45±0.19)×10 10、(2.21±0.36)×10 10和(2.63±0.79)×10 10，差异有统计学意义( F＝6.09， P＝0.029)；粒子组和化疗组的相对肿瘤抑制率(TGI)分别为35.6%和18.6%。粒子组和化疗组的肿瘤细胞凋亡率(AI)均高于阴性对照组( F＝9.96， P＝0.009)，粒子组和化疗组的Ki67指数均低于阴性对照组( F＝9.93， P＝0.013)，粒子组和化疗组腹水体积均小于阴性对照组( F＝13.43， P＝0.006)。 结论:177Lu-FA-DOTA-PEG-PLGA纳米粒子可行小鼠卵巢癌靶向显像，腹腔灌注后局部滞留和降解吸收，抑制卵巢癌腹膜转移瘤和腹水生长，为晚期卵巢癌伴腹膜转移患者诊疗提供新思路。

目的:探讨玻璃化冷冻和组织移植对小鼠卵巢组织的影响。方法:将雌性ICR小鼠分为3组：正常对照组（卵母细胞体外培养及受精， n=9）、新鲜移植组（卵巢组织移植后卵母细胞体外培养及受精， n=9）、冷冻移植组（卵巢组织玻璃化冷冻复苏-移植、卵母细胞体外培养及受精， n=9）。同时，为了更为直接地说明玻璃化冷冻对于卵泡数量的影响和卵巢移植后内分泌功能的改变情况，本研究还设置了冷冻复苏组（卵巢组织玻璃化冷冻复苏， n=6）和卵巢去势组（卵巢组织切除， n=6）。卵巢组织移植3周后，通过苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色计算各组小鼠的卵泡数量、CD31免疫组织化学染色观察卵巢组织新生血管形成、Masson染色观察卵巢组织纤维化、酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测血清性激素水平，并统计获卵数、体外受精数量和形成囊胚数量。 结果:新鲜移植组和冷冻移植组小鼠的卵巢组织中总卵泡数量均较正常对照组明显减少（均 P<0.001），且都明显少于冷冻复苏组（均 P<0.001）；新鲜移植组小鼠卵巢组织CD31阳性率明显高于正常对照组（ P=0.044），冷冻移植组小鼠高于正常对照组，但差异无统计学意义（ P=0.162）；新鲜移植组和冷冻移植组小鼠卵巢组织纤维化面积百分率均明显高于正常对照组（ P=0.004； P=0.005）；新鲜移植组和冷冻移植组小鼠血清雌二醇水平均明显低于正常对照组（ P=0.005； P=0.001），但明显高于卵巢去势组（ P=0.011； P=0.035），血清卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）水平均明显高于正常对照组（ P=0.040； P=0.012），但明显低于卵巢去势组（ P=0.001； P=0.004）；新鲜移植组和冷冻移植组小鼠的获卵数均较正常对照组明显减少（均 P<0.001），新鲜移植组小鼠的获卵数高于冷冻移植组，但差异无统计学意义（ P=0.272）；新鲜移植组和冷冻移植组卵母细胞的体外受精数量和囊胚数均明显低于正常对照组（均 P<0.001）。新鲜移植组和冷冻移植组小鼠在总卵泡数量、CD31阳性率、纤维化面积百分率、血清雌二醇和FSH水平、受精数和形成囊胚数上差异均无统计学意义（均 P>0.05）。 结论:小鼠卵巢组织在接受玻璃化冷冻复苏-移植后能够恢复卵泡生长、内分泌功能以及生育功能，证实利用玻璃化冷冻技术进行卵巢组织冻存可以作为女性生育力保存的一个有效手段。玻璃化冷冻和组织移植均会造成卵巢组织中的卵泡损失并影响生育能力，移植后阶段是卵巢组织冷冻复苏-移植过程中卵泡损失的主要阶段，组织移植是影响卵巢组织冷冻复苏-移植效果的主要因素。

目的:探讨人卵巢上皮癌实体瘤组织片和人卵巢上皮癌细胞株OVCAR-3来源的裸鼠原位移植瘤模型的卵巢内肿瘤浸润类型，以及人卵巢上皮癌卵巢内肿瘤浸润类型的特点。方法:将人卵巢上皮癌实体瘤组织片和人卵巢上皮癌细胞株OVCAR-3皮下移植获取瘤源，再分别植入裸鼠单侧卵巢包膜内制备裸鼠原位移植瘤模型。观察两种方法制备的肿瘤模型卵巢内的浸润类型。同时通过病理检查分析了54例国际妇产科联盟(FIGO)Ⅰ～Ⅱ期人卵巢上皮性癌的肿瘤浸润类型。结果:肿瘤在卵巢内浸润类型大致分为三类：假包膜型、假包膜浸润型和假包膜穿透型。实体瘤组假包膜型发生率(18.2%)低于细胞株组(42.3%， P<0.05)，而实体瘤组假包膜穿透型发生率(50.0%)高于细胞株组(23.1%， P<0.05)，两组间的假包膜浸润型差异无统计学意义( P>0.05)。肿瘤在卵巢内浸润类型随着种植时间而发生变化，种植初期假包膜型比例较高，随着种植时间的延长，假包膜穿透型比例增加。人卵巢上皮癌卵巢内浸润类型中，Ⅰ期假包膜型比例较高( P<0.05)，而Ⅱ期包膜穿透型比例较高( P<0.05)。两种病理类型之间其肿瘤生长类型的比例差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:人卵巢上皮癌实体瘤组织片和人卵巢上皮癌细胞株OVCAR-3制备裸鼠原位移植瘤模型有差别；相对于实体瘤组织片模型，细胞株模型更稳定，更适合后续研究。三种肿瘤卵巢内浸润类型在移植瘤种植8周时比例比较均衡，8周是后续实验最佳切入时机。

肿瘤患者放、化疗治疗可能会导致卵巢功能紊乱、生育能力丧失，如何保护年轻肿瘤患者的生育力，提高愈后生活质量，是肿瘤治疗者面临的问题。卵巢组织冻存与移植可以恢复患者的生殖内分泌功能，是保护年轻肿瘤患者生育力的重要方法之一，为不适用于卵母细胞冻存和胚胎冻存患者的生育力保存提供了新的选择。近年来，有越来越多的健康婴儿借助卵巢组织移植技术出生，但该技术仍存在移植初期卵泡闭锁、再次引入肿瘤细胞的风险等问题。本文就卵巢组织冻存与移植技术的发展现状进行综述。

目的:探讨青春期前重度β-地中海贫血（thalassemia major，TM）患者进行生育力保存的方法，为青春期前血液疾病患者进行生育力保存提供进一步的数据支持。方法:对1例青春期前拟行造血干细胞移植的TM患者通过卵巢组织冷冻（ovarian tissue cryopreservation，OTC）合并卵子体外成熟（ in vitro maturation，IVM）行生育力保存进行病例报道，结合文献阐述青春期前地中海贫血患者进行生育力保存的时机、指征及策略。 结果:患者卵巢组织获取术后，体外穿刺抽吸共获取24枚卵丘-颗粒细胞复合体（cumulus-oocyte complexes，COCs）及11片卵巢组织皮片。COCs经48 h IVM后共有9枚M Ⅱ期卵子行玻璃化冷冻。 结论:对亟待造血干细胞移植的青春期前女童，OTC结合卵母细胞IVM技术能在短期内最大程度地保存TM患者的生育力，提高其生育力保存的治疗效果。