目的:采用mRNA高通量测序技术筛选高磷诱导下肢血管平滑肌细胞(VSMCs)钙化差异表达基因(DEGs),分析VSMCs钙化的关键基因及信号通路.方法:将人VSMCs分为对照组和模型组,模型组细胞中加入高磷培养基,对照组细胞采用含10%胎牛血清的DMEM培养基于相同条件下培养.调整 2组稳定转染VSMCs的状态,培养 12 d,倒置显微镜下观察细胞形态表现并拍照.采用Hisat2软件筛选DEGs,采用Stringtie软件从生物过程(BP)、分子功能(MF)和细胞成分(CC)3个方面进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析.Von Kossa染色法观察各组细胞钙化情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组细胞中碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肿瘤蛋白53(Tp53)、谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4)、铁蛋白轻链 1(Ftl1)和糖基磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D1(GPLD1)mRNA表达水平.结果:与对照组比较,模型组共2 524个DEGs,其中1 368个DEGs表达上调,1 156个DEGs表达下调;2组细胞DEGs聚类分离明显.GO功能和KEGG信号通路富集分析表达上调的DEGs主要参与微管细胞骨架组织的调节、细胞极性、蛋白质定位和细胞周期调控等BP,构建细胞膜部分、微管组织、染色体和着丝粒区等CC,发挥与磷脂酰肌醇磷酸盐、Rho鸟苷酸三磷酸酶(GTPase)蛋白结合、参与跨膜转运和调节蛋白激酶活性等MF;表达下调的DEGs主要参与细胞质翻译、蛋白质膜定位、mRNA代谢和蛋白质内质网定位等BP,构建核糖体亚单位、细胞膜和自噬体等CC,发挥与单链DNA、核糖核蛋白复合物、生长因子结合、调节蛋白激酶活性和催化作用等MF.差异表达上调的基因富集7条信号通路,其中最为显著的是糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的生物合成;差异表达下调的基因富集 18条信号通路,其中最为显著的是铁死亡.RT-qPCR法,与对照组比较,模型组细胞中GPX4、Ftl1和Tp53 mRNA表达水平明显降低(P<0.01),GPLD1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与对照组比较,模型组细胞中α-SMA mRNA表达水平明显降低(P<0.01),ALP和BMP2 mRNA表达水平明显升高(P<0.01).结论:钙化的VSMCs与正常细胞存在DEGs,铁死亡和GPI锚定的生物合成信号途径是高磷诱导下肢VSMCs钙化的关键信号通路,主要由GPX4、Ftl1、Tp53和GPLD1共同介导完成.

Toll样受体(TLR)7 是TLR家族中的一员,是Ⅰ型跨膜糖蛋白,由细胞质Toll/白细胞介素-1 受体同源性(TIR)信号传导结构域和包含19～25 个串联富含亮氨酸重复基序的外部抗原识别结构域组成.人体内TLR7 主要分布在浆树突状细胞(pDC)和B细胞的胞体内体膜上,通过高尔基体的囊泡从内质网穿梭至内体.内体膜上的TLR7 与病毒来源的单链RNA分子或咪唑啉类似物结合从而被激活,进一步诱导Ⅰ型干扰素的合成,从而启动辅助性T淋巴细胞(TH)1 细胞的激活,快速招募炎症细胞到感染部分,发挥抗病毒、抗肿瘤以及抗过敏的功能.TLR7 激活后由于具有调节TH1/TH2 细胞比例的作用,其配体用于治疗过敏性疾病的研究日益受到关注.该文围绕TLR7 激动剂对过敏性哮喘、过敏性鼻炎以及过敏性脑炎的临床前研究和临床试验研究进行综述,以期为过敏性疾病的治疗提供新思路.

PDGFR是单链跨膜糖蛋白,属于Ⅲ型酪氨酸蛋白激酶家族,是信号转导途径中的重要成员.PDGFR可激活细胞内多种信号转导通路从而促进细胞的趋化、 分裂与增殖,在机体生长发育、 创伤修复等生理过程中发挥重要作用.PDGFRβ是PDGFR的重要亚型.近年研究发现,PDGFRβ与配体结合生成的PDGF/PDGFRβ复合物与肿瘤的发生发展密切相关,其已成为多种肿瘤治疗的靶点.在骨肉瘤研究中也发现PDGFRβ在骨肉瘤标本中过表达,用激酶抑制剂作用于PDGFRβ后能降低骨肉瘤细胞的恶性行为.文章综述了PDGFRβ与骨肉瘤的研究现状.

CD38是单链跨膜Ⅱ型糖蛋白,可在意义未明的单克隆免疫球蛋白病(MGUS)、多发性骨髓瘤(MM)等恶性浆细胞肿瘤细胞中表达.抗CD38单克隆抗体是针对骨髓瘤细胞表面CD38分子的抗体,对于复发/难治性多发性性骨髓瘤(MM)治疗有效,其与蛋白酶体抑制剂或免疫调节剂联合能够进一步提高疗效.基于良好的耐受性和已被证实的确切疗效,2015年,抗CD38单克隆抗体daratumumab被批准用于复发/难治性MM患者的治疗.除作为单克隆抗体的靶点外,表面分子CD38也可以作为其他免疫治疗的靶点,如抗CD38免疫毒素和双特异性抗体、CD38特异性嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)等.笔者通过介绍CD38在正常组织和不同类型浆细胞肿瘤中的表达模式,阐述了CD38的生理作用及其在MM的病理生理学中的作用,并且对近期以CD38作为靶点的MM免疫靶向治疗方法的研究进展进行综述.

目的:针对抗白细胞分化抗原38(cluster of differentiation 38,CD38)单抗的关键质量属性建立质控方法.方法:采用肽图法进行鉴别;采用还原/非还原十二烷基磺酸钠毛细管电泳(capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate,CE-SDS)和尺寸排阻色谱(size exclusion-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)进行纯度控制;采用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis,iCIEF)测定电荷异质性;采用酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定结合活性;采用补体依赖的细胞毒作用(complement dependent cytotoxicity,CDC)和抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)的方法测定生物学活性.其他各项指标均应符合2015年版《中华人民共和国药典》以及其他相关要求.结果:肽图检测具有特征图谱,起到很好的鉴别作用.还原CE-SDS的轻链与重链峰面积之和百分比为(97.87±0.72)％,非还原CE-SDS主峰峰面积百分比为(97.70±0.35)％;SEC-HPLC单体的峰面积百分比为(99.15±0.01)％,高分子量物质的峰面积百分比为(0.47±0.002)％,低分子量物质的峰面积百分比为(0.37±0.01)％.iCIEF分析的主要亚型的峰面积百分比为(63.54±0.37)％,酸性亚型的峰面积百分比为(23.07±0.50)％,碱性亚型的峰面积百分比为(13.38±0.12)％.结合活性的半最大效应浓度(concentration for 50％ ofmaximal effect,EC50)值为(7.35±0.06)ng· mL-1.CDC活性EC50值为(270.67±12.42)ng· mL-1,ADCC活性EC50值为(8.71±1.04) ng·mL-1.结论:针对抗CD38单抗的质量属性,研究建立质控方法并进行质量研究,确保产品的安全、有效和质量可控,对抗CD38单抗的质量控制具有借鉴意义.

CD36又称脂肪酸转运体(FAT),是一种单链跨膜糖蛋白,属于B族清道夫受体,可识别多种配体,并参与多种正常和病理过程.近年来的研究结果表明CD36可能通过调节血管生成、上皮-间充质转化、肿瘤微泡外溢、脂代谢重构等环节在肿瘤侵袭转移中发挥重要作用.本文拟对CD36的结构与正常功能以及CD36在肿瘤侵袭转移中的研究作一综述.

白细胞分化抗原36 (cluster of differentiation 36,CD36)是一种高度糖基化的单链跨膜蛋白,属B型清道夫受体.其功能较为广泛,不仅可以识别“异己”成分,诱发免疫应答,还参与多种生理、病理过程.CD36作为膜受体与其他膜蛋白和胞质蛋白组成不同的信号通路.CD36是TRL4的辅助受体,可识别病原体相关分子模式,级联NF-κB信号通路,在天然免疫过程发挥作用;作为修饰脂蛋白受体,级联MAPK通路,诱发无菌性炎症及脂代谢紊乱,并参与动脉粥样硬化病变;作为外源长链脂肪酸受体,通过AMPK/mTOR信号通路在能量代谢及脂质蓄积过程中发挥调控作用.该文综述了CD36的分子特征及其偶联相关信号通路在天然免疫和脂代谢等方面的作用与机制,展示CD36的多功能特点,为相关生物医学研究提供依据.

神经病理性疼痛是由躯体感觉神经系统的原发性损害或功能障碍而直接引发的一系列疼痛症状总称,是一种常见而又棘手的慢性疼痛.中枢/外周敏化、离子通道表达异常、中枢去抑制、胶质细胞活化及炎性因子释放等均可诱发自发性疼痛与痛觉过敏等临床表现.表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种单链跨膜糖蛋白,属于酪氨酸激酶型受体,其激活后不仅能够刺激神经胶质细胞的增殖、分化和迁徙等过程,还可以诱导并维持不同条件下的痛敏反应,其介导的信号通路对神经病理性疼痛的发生发展具有重要作用.本文就EGFR及其信号通路在神经病理性疼痛中作用的研究进展进行综述.

血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)是一种单链的跨膜糖蛋白质,主要存在于血管内皮细胞中,也可以在造血祖细胞、单核细胞和巨噬细胞中表达.血栓调节蛋白主要由5个结构域组成:发挥抗炎作用的N-端凝集素样结构域、发挥凝血和纤溶作用的6个表皮生长因子样重复序列、富含丝氨酸苏氨酸的区域、跨膜结构域和胞质结构域.血栓调节蛋白可与凝血酶结合激活蛋白C,从而发挥抗炎和抗凝血作用,血栓调节蛋白与凝血酶形成的复合物,也可激活纤溶抑制物从而起到抗纤溶的作用.研究发现,血栓调节蛋白可通过抑制上皮间充质细胞转化、抑制丝裂原活化蛋白激酶或激活蛋白C和纤溶抑制物等3个方面,阻止肿瘤的发生与发展.在动脉粥样硬化中,血栓调节蛋白可阻断凝血酶介导的PAR-1的激活、抑制内皮细胞自噬和凋亡,进而阻止动脉粥样硬化的发生发展.血栓调节蛋白凝集素样结构域还能与凝血酶结合抑制其活性,进而抑制血栓形成、肺纤维化及炎症反应.不仅如此,在糖尿病肾病、子痫前期和缺血再灌注损伤中,血栓调节蛋白均与其发病机制相关.目前,血栓调节蛋白在临床上仅用于治疗败血症和血管内弥散性凝血.血栓调节蛋白在心脑血管疾病、癌症和神经退行性疾病等方面的作用及治疗潜力值得进一步的探究.

多发性骨髓瘤(MM)是一种起源于骨髓的浆细胞恶性克隆增殖性疾病,好发于中老年人[1],发病率逐年增加,是血液系统较为常见恶性肿瘤.大多数患者随着近些年来免疫调节剂和蛋白酶体抑制剂的临床应用后总体生存率有显著提高,患者生存质量得以改善,然而难治性和复发性骨髓瘤患者的治疗效果不尽如人意.人CD38抗原为单链Ⅱ型跨膜糖蛋白,长度为45kDa,调节细胞活化、分化和增殖[2],通常在造血干细胞、T细胞、NK细胞和树突细胞中表达,外周血中性粒细胞和B淋巴细胞不表达,骨髓瘤细胞高量表达,成为MM免疫靶向治疗药物作用的新靶点[3].