目的:探究多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）患者与非PCOS患者卵泡液中的差异性代谢物及其对小鼠卵母细胞体外成熟（ in vitro maturation，IVM）和体外受精（ in vitro fertilization，IVF）胚胎发育的影响。 方法:本研究的临床资料采取回顾性队列研究的研究方法获取；动物实验采取随机对照试验。收集2019年6月至2020年6月期间在上海集爱遗传与不育诊疗中心第一次接受IVF或卵胞质内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）周期的女性患者的卵泡液。根据是否为PCOS患者，分为PCOS组（ n=71）和非PCOS组（ n=70），回顾性分析两组患者的临床资料，并利用深度学习的拉曼光谱分析技术检测两组患者卵泡液的代谢谱差异。后续进行实验性研究，在PCOS患者和非PCOS患者卵泡液中进行小鼠GV期卵母细胞IVM培养，收集两组成熟的鼠卵母细胞进行IVF，进一步探讨卵泡液中差异性代谢物对鼠卵成熟及胚胎发育的影响。 结果:PCOS组患者卵母细胞成熟率［82.19%（886/1 078）］和受精第3天的有效胚胎率［51.30%（553/1 078）］显著低于非PCOS组［85.85%（625/728）， P=0.038；53.30%（388/728）， P=0.042］，两组患者的累积临床妊娠率和累积活产率差异均无统计学意义（均 P>0.05）。PCOS患者和非PCOS患者卵泡液之间存在差异性拉曼代谢光谱。两组间特征性拉曼位移主要集中在600~1 000 cm -1、1 168 cm -1、1 344 cm -1、1 440 cm -1、1 504 cm -1、1 632 cm -1、1 664 cm -1。拉曼特征位移数据库显示，两组卵泡液样本的差异代谢物主要集中蛋白质、脂质、游离核酸、葡萄糖、胆固醇、类胡萝卜素和氨基酸等物质。利用两组卵泡液行鼠卵IVM，PCOS卵泡液组的鼠卵MⅡ率［49.04%（77/157）］较非PCOS组更低［65.07%（95/146）， P=0.005］，利用小鼠MⅡ卵进行IVF，PCOS卵泡液组卵裂率［46.75%（36/77）］显著低于非PCOS组［63.16%（60/95）， P=0.031］，而两组囊胚率差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:PCOS患者卵泡液存在差异性拉曼代谢光谱，其差异性代谢物可能导致卵母细胞成熟障碍，并进一步影响IVF胚胎的发育，拉曼光谱为PCOS诊断和代谢组学的差异物分析提供了简便有效的方法。

目的:基于代谢组学分析稀有人参皂苷（RGS）对环磷酰胺（CP）所致雌性大鼠生殖损伤的改善作用。方法:将24只雌性大鼠分为4组：空白对照（NC）组、RGS组、CP组、CP+RGS组，每组6只，CP组和CP+RGS组腹腔注射CP（30 mg/kg）5 d进行造模，CP+RGS组并予灌胃RGS（50 mg/kg）进行干预。观察各组大鼠的一般生长状况，计算脏器指数，HE染色后观察卵巢、子宫、肝脏及肾脏的组织病理学变化，检测血清雌二醇、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和炎症因子白细胞介素（IL）6、IL-1β、肿瘤坏死因子α水平；采集各组大鼠的尿液，使用超高效液相色谱-质谱（UPLC-MS）联用技术对尿液的代谢产物进行代谢组学分析，筛选差异代谢物并富集分析代谢通路。结果:与NC组比较，CP组大鼠卵巢指数［（0.054±0.015）%］、子宫指数［（0.293±0.036）%］、雌二醇水平［（62.9±6.4）pmol/L］均显著降低（ P均<0.05），血清FSH、LH、IL-6、IL-1β水平［分别为（20.4±1.0）U/L、（29.0±3.0）U/L、（185.4±28.6）ng/L、（72.9±2.0）ng/L］均显著升高（ P均<0.01）；与CP组相比，CP+RGS组大鼠卵巢指数［（0.075±0.010）%］明显升高（ P<0.05），血清雌二醇水平［（122.1±16.2）pmol/L］明显升高（ P<0.01），血清FSH、IL-6、IL-1β水平［分别为（16.7±1.0）U/L、（111.8±17.4）ng/L、（60.1±2.2）ng/L］均显著降低（ P均<0.01）。使用UPLC-MS联用技术进行代谢组学分析显示，从尿液中共检测到352个代谢物，根据筛选条件发现其中12种是与CP组的生殖损伤相关的差异代谢物，经RGS治疗后向NC组方向改善；RGS的治疗作用与多种代谢通路相关，包括嘌呤代谢、牛磺酸和次牛磺酸代谢通路等。 结论:RGS可能是通过影响嘌呤代谢等通路，减少炎症发生，进而改善CP对雌性大鼠生殖系统造成的损伤。

目的 基于超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UHPLC-QE-MS)分析苍附导痰汤对多囊卵巢综合征大鼠血清中内源性标志物的影响,并结合网络药理学研究其发挥药效的作用通路.方法 将40只大鼠随机分为正常组、模型组、达英-35组和苍附导痰组,每组10只.采用来曲唑法诱导多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型,造模成功后,达英-35组给予达英-35灌胃,苍附导痰组给予苍附导痰汤灌胃,每天1次,连续28 d.ELISA法检测大鼠血清促卵泡生长激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)含量差异水平;苏木精-伊红(HE)染色法观察大鼠卵巢组织病理形态学变化;采用UHPLC-QE-MS分析各组大鼠血清样品,基于主成分分析法(PCA)及正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)筛选出相关差异代谢物,并依据MetaboAnalyst数据库查询相关代谢通路.采用网络药理学探究苍附导痰汤治疗多囊卵巢综合征的关键靶点,使用KEGG数据库富集分析作用通路,并借助MetScape插件构建"代谢物-反应-酶-基因"网络.结果 与正常组相比,模型组大鼠血清中FSH含量明显上升(P＜0.05),LH、T、E2含量显著上升(P＜0.01);与模型组相比,达英-35组大鼠血清中LH、T、E2含量显著降低(P＜0.01),苍附导痰组大鼠血清中T明显降低(P＜0.05),LH、E2含量显著降低(P＜0.01).与模型组比较,达英-35组和苍附导痰组大鼠卵巢组织形态明显改善;代谢组学筛选15个苍附导痰汤治疗多囊卵巢综合征的差异代谢物,涉及类固醇激素生物合成、甘油磷脂代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等途径.网络药理学分析显示苍附导痰汤治疗多囊卵巢综合征的核心靶点为AKT1、ESR1、EGFR等,KEGG富集显示涉及内分泌抵抗、类固醇合成、雌激素信号通路等;采用MetScape插件构建"代谢物-反应-酶-基因"网络,发现6个关键靶点CYP1B1、CYP19A1、AKR1C1、AKR1C3、HSD17B1、HSD17B2,以及涉及类固醇激素生物合成通路.结论 苍附导痰汤对多囊卵巢综合征大鼠显示出潜在的治疗作用,这可能与其对类固醇激素合成代谢路径的调节作用有关,治疗的内源性标志物包括17a-羟基孕烯醇酮、孕酮、皮质酮,这些指标有助于监测治疗效果.

目的:观察越鞠丸合毓麟珠汤对多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症的治疗效果及对脂代谢和下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)的影响.方法:选取 2020 年 1 月至2022 年6 月该院收治的PCOS不孕症患者100 例,按照计算机随机数字分组法分为对照组、观察组,各 50 例.对照组患者给予常规西药口服,观察组患者在对照组的基础上加用越鞠丸合毓麟珠汤.治疗 3 个月经周期后对两组患者的临床疗效进行评价,对两组患者治疗前后中医证候表现进行评分,并检测血清脂代谢指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、HPA轴相关指标[卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和生长激素(GH)]水平,观察两组患者成熟卵泡数、宫颈黏液评分和排卵期子宫内膜厚度的变化.结果:与治疗前比较,两组患者治疗后中医证候评分明显降低,血清TG、TC和LDL-C水平明显降低,血清FSH、LH和ACTH水平明显降低,血清HDL-C、GH水平明显升高,成熟卵泡数、宫颈黏液评分和排卵期子宫内膜厚度均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者中医证候评分、血清脂代谢、HPA轴相关指标和排卵指标的改善均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).观察组患者的临床总有效率为 90.0%(45/50),明显高于对照组的 76.0%(38/50),差异有统计学意义(P<0.05).结论:越鞠丸合毓麟珠汤辅助治疗可有效缓解PCOS不孕症患者的症状,提高卵巢功能,调节脂代谢水平和HPA轴功能紊乱,效果较单独应用炔雌醇环丙孕酮片更佳.

目的 探究多囊卵巢综合征(PCOS)患者颗粒细胞中差异表达基因(DEGs)对其发病机制的影响.方法 收集2022年6-10月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心接受卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕的PCOS不孕症患者为研究对象,并以同期卵巢功能正常患者为对照组,每组各5例.收集取卵后废弃的卵泡液并提取颗粒细胞进行单细胞RNA测序(sc RNA-seq),采用生物信息学软件Single R包预测细胞类型,采用Ggplot2包绘制颗粒细胞DEGs的火山图,并进行GO功能富集和KEGG通路分析.然后,应用String在线数据库(http://string-db.org)构建DEGs的蛋白-蛋白互作(PPI)网络图;运用Cytoscape(3.9.1)软件中MCODE和CytoNCA插件进行可视化分析,应用GEO数据库对DEGs进行验证.结果 单细胞RNA-seq结果显示,与对照组相比,PCOS组筛选出9 017个特有的DEGs,其中49个基因显著上调、25个基因显著下调.GO富集分析结果显示,在生物过程(BP)方面主要在细胞质翻译、伤口愈合富集;在细胞组分(CC)方面主要在粘着斑、胞质核糖体富集;在分子功能(MF)方面主要在核糖体的结构成分和钙粘着蛋白绑定富集.KEGG通路分析结果显示,DEGs主要富集在冠状病毒病COVID-19、核糖体、卵巢类固醇生成等信号通路.结论 本研究揭示了 PCOS不孕女性的颗粒细胞可能受类固醇生成、代谢、炎症、氧化应激的影响,为PCOS发病机制以及临床相关治疗策略制定提供了思路.

目的 探讨健脾化痰方对多囊卵巢综合征合并胰岛素抵抗(PCOS-IR)大鼠脂代谢及叉头盒转录因子-1(FOXO1)/丙酮酸脱氢酶激酶 4(PDK4)信号通路的影响.方法 40 只雌性SD大鼠随机分为空白对照组 10只和造模组 30 只.采用高脂饮食(8 周)联合来曲唑(第 4～8 周加入)建立PCOS-IR大鼠模型.完成造模后,将造模组大鼠随机分为模型对照组、健脾化痰方组、二甲双胍组,药物干预 4 周.观察各组一般情况,测定中医证候评分,计算体重变化;采用苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理学改变;血液生化仪测定空腹血糖(FBG)和血脂四项;酶联免疫吸附(ELISA)法测定性激素如卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌激素(E2)、胰岛素(FINS)水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)法及实时荧光定量PCR法测定卵巢FOXO1、PDK4 表达的变化.结果 与空白对照组相比,模型对照组出现脾虚痰湿症状,体重明显增加,血清LH、T、LH/FSH升高,E2、FSH降低,卵巢多囊性改变明显,糖脂代谢调控失常(P＜0.01).与模型对照组相比,健脾化痰方组与二甲双胍组大鼠体重增速放缓,卵泡发育情况见好,血清LH、T、LH/FSH、FBG、FINS、HOMA-IR、TC、TG、LDL-C降低,E2、FSH升高,卵巢FOXO1、PDK4 mRNA及蛋白表达下调(P＜0.05,P＜0.01);可升高血清HDL-C含量,但是组间差别无统计学意义(P＞0.05).结论 健脾化痰方能有效调节性激素分泌,改善PCOS-IR大鼠卵巢生殖功能,调节糖脂代谢,其机制可能是通过抑制FOXO1/PDK4 通路发挥作用.

目的 比较肥胖和非肥胖多囊卵巢综合征(PCOS)患者的肠道微生物群特征及代谢功能.方法 选取2020年6月至2022年6月 就诊的16例肥胖PCOS女性(BMI≥28 kg/m2,肥胖PCOS组),12例非肥胖PCOS女性(BMI为18.5～23.9 kg/m2,非肥胖COS组)和14例健康年轻女性(BMI 18.5～23.9 kg/m2,非肥胖正常组),以及6例健康但肥胖女性(BMI≥28 kg/m2)作为肥胖正常组.收集并分析所有参与者的血液和非经期粪便样本.通过对原核16S rDNA基因进行测序来分析粪便样本.通过液相色谱-串联质谱法进行血浆代谢组学分析.结果 与非肥胖正常组相比,非肥胖PCOS组中多毛症评分、痤疮评分、黄体生成素(LH)、LH/卵泡刺激素(FSH)、睾酮、E2和脱氢表雄酮显著增加(P＜0.05).与肥胖正常组相比,肥胖PCOS组中多毛评分、LH/FSH和睾酮显著升高(P＜0.05),FSH显著降低(P＜0.05).差异丰度分析确定了与肥胖状态显著相关的 4 个属(Finegoldia、Anaerococcus、Sneathia 和 Adlercreutzia)(P＜0.05).与没有肥胖的女性相比,Finegoldia、Anaerococcus、Sneathia、Adlercreutzia 在肥胖女性中的丰度显著较低(P＜0.05).在按 PCOS 状态分层的分析中,Finegoldia和Anaerococcus在PCOS和非PCOS女性中均与肥胖呈显著负相关,而PCOS和肥胖与Sneathia和Adlercreutzia之间存在暗示性但不显著的相互作用(分别为PPCOS×肥胖=0.090、0.057).Anaero-coccus 与犬尿氨酸/色氨酸比率和缬氨酸呈负相关(r=-0.38、-0.30,P=0.007、0.041),而Adlercreutzia与脯氨酸和丙氨酸呈负相关(r=-0.37、-0.32,P=0.012、0.034).结论 在PCOS女性中,肥胖与肠道微生物群和血浆代谢物的改变有关,包括产生丁酸盐的细菌群的消耗以及更高的色氨酸分解代谢.这些发现表明肠道菌群、肥胖与PCOS之间存在潜在的相互关系.

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种具有高度异质性的卵巢功能障碍综合征,是无排卵性不孕的主要原因,在临床上以雄激素过高的临床或生化表现、持续无排卵及卵巢多囊改变为特征,常伴有卵泡发育异常、肥胖及胰岛素抵抗(IR).

为明确超数排卵过程中机体血清代谢物的变化,以寻找与卵泡及卵子成熟相关的代谢物,研究利用液相色谱结合质谱(LC-MS/MS)的非靶向代谢组学方法,对同期发情后外源FSH注射前(1st)与人工输精前(2nd)供体绵羊血清中的代谢物进行分析.结果显示:共检测到1 158种代谢产物(正离子模式下721种,负离子模式下437种),注释表明代谢物种类最多的是脂类分子,其次是有机酸及其衍生物.根据VIP＞1;FC＞1.2或FC＜0.83和P＜0.05筛选,2nd与1st差异表达代谢物共295个,其中,上调代谢物186个,下调代谢物109个.差异代谢物功能分析共富集到88条功能通路,包括类固醇激素生物合成、花生四烯酸代谢、皮质醇合成和分泌等.进一步分析表明,血清中高含量的脱氧皮质酮、磷脂酰胆碱和花生四烯酸可能有助于绵羊超数排卵过程中卵泡的发育.研究结果为超数排卵中卵泡发育调控机制解析提供一定帮助,为超数排卵过程中的营养调控和供体选择提供参考.

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种复杂的异质性内分泌疾病,育龄妇女发病率约为5％～18％,但病因和病理生理仍不清楚.PCOS是无排卵性不孕症最常见的病因,接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的PCOS患者常存在卵巢过度刺激综合征发生率高、受精率低、流产率高等问题.卵泡液代谢物可为各个阶段的卵母细胞提供养分,小分子代谢物改变会严重影响卵母细胞的生长以及胚胎发育潜能.本文就PCOS患者卵泡液中的各类代谢物进行综述,以期为研究PCOS患者卵母细胞发育潜能低下的发病机制以及寻找更有效的药物作用靶点提供有效证据.