目的:探讨眼附属器滤泡性淋巴瘤（OAFL）的临床病理学特征。方法:回顾性病例系列研究。收集1990年1月至2022年5月在天津市眼科医院确诊的10例OAFL患者的临床资料，分析患者的一般资料和病史、发病部位、影像学、组织病理学及分子检测等资料。其中7例进行爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）小编码RNA（EBER）及B细胞淋巴瘤蛋白2（BCL-2）/免疫球蛋白重链基因（IgH）易位基因检测。对患者的治疗和预后进行随访。结果:10例（10只眼）患者均为单眼发病，其中男性5例，女性5例，年龄为58（43，68）岁。患者临床表现为眼睑肿胀，结膜增厚呈粉红色，泪腺区、眶内或泪囊区缓慢生长的无痛性肿块。病变位于泪腺4例，眶内肌锥外2例，结膜2例，泪囊1例，泪囊和结膜1例。其中原发性8例，继发性2例。Ann Arbor分期Ⅰ~ⅡE期8例，ⅢE期2例。病理分级1~2级6例，3A级3例；另外1例分别为泪囊区3B级和结膜1~2级。滤泡为主型4例，弥漫型3例，混合型2例；另外1例泪囊区和结膜均为混合型。所有患者肿瘤细胞阳性表达白细胞分化抗原分化群（CD）20、CD21和CD23；9例阳性表达CD10，1例部分细胞阳性表达CD10；所有患者阳性表达B细胞淋巴瘤蛋白6（BCL-6）；9例阳性表达BCL-2；特异性周期蛋白-D1（CyclinD1）及多发性骨髓瘤癌基因蛋白1（MUM-1）均阴性表达；ki-67增殖指数为10%~90%。共7例患者进行分子检测，EBER原位杂交未见阳性患者，其中5例存在BCL2与/IgH基因融合。获得随访的7例患者随访时间为17（6，34）个月，其中完全缓解4例，部分缓解2例，因肺部感染死亡1例。结论:OAFL是滤泡中心B细胞发生的肿瘤，肿瘤性滤泡阳性表达BCL-2、CD10和BCL-6，可累及泪腺、眶内、泪囊及结膜，患者预后普遍较好。

目的:探讨C-MYC、bcl-2、bcl-6蛋白的表达与原发性CD5阳性的弥漫性大B细胞淋巴瘤（CD5-positive diffuse large B cell lymphoma，CD5 +DLBCL）患者临床病理特征之间的关系。 方法:收集2013年2月至2018年9月上海交通大学医学院附属瑞金医院初治诊断为原发性CD5 +DLBCL标本57例，采用HE染色、免疫组织化学技术及荧光原位杂交（FISH）法，检测原发性CD5 +DLBCL中C-MYC、bcl-2、bcl-6蛋白的表达情况，并分析其与临床病理特征之间的关系。 结果:57例原发性CD5 +DLBCL中，男性27例，女性30例，发病年龄35~99岁。C-MYC、bcl-2、bcl-6蛋白表达阳性率分别为50.9%（29/57）、84.2%（48/57）、75.4%（43/57），其中C-MYC和bcl-2双表达阳性率为40.4%（23/57）；其在患者性别、临床分期、血清乳酸脱氢酶（LDH）水平、β2微球蛋白水平、国际预后指数（IPI）评分、B症状、骨髓侵犯和中枢神经系统（CNS）复发等临床特征之间差异无统计学意义（ P>0.05）；单因素生存分析显示：C-MYC阴性患者中位总生存率显著高于阳性患者（ P=0.010），双表达阴性患者中位总生存率显著高于阳性患者（ P=0.008），bcl-6阳性患者中位总生存率显著高于阴性患者，差异具有统计学意义（ P=0.021），bcl-2蛋白表达与预后无明显相关性（ P>0.05）；Cox模型多因素分析显示，C-MYC蛋白表达可作为原发性CD5 +DLBCL患者总生存率的独立预测指标（ P=0.034）。 结论:C-MYC、bcl-2、bcl-6蛋白在原发性CD5 +DLBCL的预后价值中，bcl-2表达对预后无影响，bcl-6阳性组预后较好，C-MYC蛋白表达可作为预测原发性CD5 +DLBCL患者预后的独立有效指标，但对于原发性CD5 +DLBCL患者中，C-MYC、bcl-2及bcl-6蛋白的表达与C-MYC、bcl-2及bcl-6基因重排之间的关系，还有待扩大样本量进一步深入探讨。

目的:研究Bcl-2 BH4选择性抑制剂BDA-366对NK/T细胞淋巴瘤（NK/TCL）的抑制作用和杀伤机制。方法:用0、0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 μmol/L的BDA-366处理人NK白血病细胞株YT和人NK/TCL细胞株NK92，使用CCK-8法计算BDA-366对细胞的半抑制浓度（IC 50）值；流式细胞术检测对照组和IC 50浓度BDA-366处理组细胞凋亡水平；蛋白质印迹法检测对照组、1/2 IC 50、IC 50、2倍IC 50浓度BDA-366处理组细胞凋亡相关蛋白表达水平；TMRE和Fluo-3荧光探针法检测对照组和IC 50浓度BDA-366处理组细胞线粒体膜电位，以及对照组、IC 50、2倍IC 50浓度BDA-366处理组细胞内Ca 2+浓度；对对照组和10 mg/kg BDA-366腹腔注射组NOD-SCID小鼠进行称重和小鼠组织HE染色，以评估BDA-366是否具有体内毒性。 结果:BDA-366对于YT和NK92细胞株的IC 50分别为0.065、0.086 μmol/L。流式细胞术结果显示，对照组和0.065 μmol/L BDA-366组YT细胞凋亡率分别为（6.62±1.59）%、（34.60±3.06）%，对照组和0.086 μmol/L BDA-366组NK92细胞凋亡率分别为（5.57±0.88）%、（29.18±0.90）%，差异均具有统计学意义（ t=14.05， P<0.001； t=32.58， P<0.001）。对照组、0.043、0.086、0.172 μmol/L BDA-366组NK92细胞Bax相对表达量分别为0.85±0.00、1.26±0.04、1.51±0.18、1.15±0.10（ F=20.70， P<0.001），各BDA-366处理组Bax相对表达量均高于对照组（均 P<0.05）。对照组和0.065 μmol/L BDA-366组YT细胞TMRE荧光强度分别为8 372.00±330.47、6 419.67±311.34，对照组和0.086 μmol/L BDA-366组NK92细胞TMRE荧光强度分别为9 169.00±535.72、7 311.67±295.52，差异均具有统计学意义（ t=7.45， P=0.002； t=5.26， P=0.006）。在YT细胞中，0.065、0.130 μmol/L BDA-366组细胞内Ca 2+浓度均高于对照组（5 791.67±220.45、6 729.33±585.39、4 874.67±112.61， F=19.16， P=0.003）（ P=0.039； P=0.002）；在NK92细胞中，0.086、0.172 μmol/L BDA-366组细胞内Ca 2+浓度均高于对照组（4 553.67±17.62、4 740.33±254.50、4 185.67±17.67， F=10.96， P=0.010）（ P=0.039； P=0.007）。BDA-366组和对照组小鼠第12天相对于第0天体重变化差异无统计学意义[（3.18±0.01）g比（2.73±0.58）g， t=0.60， P=0.570]，HE染色结果未见BDA-366组小鼠心、肝、脾、肺、肾形态异常。 结论:BDA-366在体外可促进NK/TCL细胞发生凋亡，在体内不引起小鼠体重减轻和器官HE染色形态改变。BDA-366对NK/TCL细胞的抑制作用可能是通过提高Bax表达、诱导Ca 2+释放和降低线粒体膜电位实现的。

目的 探讨原发中枢神经系统(PCNS)弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)临床病理学特点,分析其中bcl-6、bcl-2、C-MYC基因异常、蛋白表达及治疗方案选择对患者预后的影响.方法 收集浙江省肿瘤医院2007年1月至2016年12月收治的33例PCNS-DLBCL患者资料,对33例患者样本进行免疫组织化学(IHC)染色以检测CD10、bcl-2、bcl-6、MUM1、MYC蛋白表达;原位杂交检测肿瘤组织中EB病毒编码的小RNA(EBER);荧光原位杂交(FISH)检测bcl-6、bcl-2、C-MYC基因扩增及易位情况;利用单、双因素生存分析及 Cox 风险回归模型分析上述指标改变与预后的关系.结果33例患者,男女比为1.36:1.00,平均年龄56岁.20例为单发病灶,13例为多发病灶;12例累犯深部脑组织.所有患者接受部分或全部肿瘤切除,5例术后接受全脑放疗,9例接受高剂量甲氨蝶呤为基础的化疗,12例接受全脑放疗联合高剂量甲氨蝶呤为基础的化疗,7例未进一步治疗,8例患者在化疗时联合使用利妥昔单抗.按照 Hans 模型分类非生发中心型(non-GCB)27例(81.8%,27/33).25例(75.8%,25/33)bcl-2蛋白表达阳性,其中8例(24.2%)为高表达(≥70%),12例(36.4%) C-MYC蛋白表达阳性(≥40%),C-MYC和bcl-2蛋白双表达者有6例(18.2%,6/33).EBER阳性率为10.0%(3/30).28例患者中检测到5例bcl-6基因异常;7例bcl-2基因异常;4例C-MYC基因异常,bcl-2、C-MYC基因同时发生异常("双打击")者2例(7.4%).13例患者发现脑脊液中蛋白升高, 10例血中乳酸脱氢酶升高.随访时间2~90个月,平均生存时间(23.0 ± 3.7)个月,2年生存率为39.0%.单因素分析发现bcl-2蛋白高表达、MYC蛋白阳性、bcl-2基因异常是PCNS-DLBCL的不良预后指标,以高剂量甲氨蝶呤为基础的化疗、利妥昔单抗的应用为良性预后因素,双因素分析发现bcl-2、MYC蛋白双表达及bcl-2、C-MYC基因双打击为PCNS-DLBCL的不良预后因素.Cox多因素风险回归分析发现男性、脑脊液中蛋白升高、C-MYC基因拷贝数增加为不良预后因素,高剂量甲氨蝶呤为基础的联合化疗为良性风险因素.结论 PCNS-DLBCL中bcl-2、C-MYC基因双打击及蛋白双表达均和不良预后明显相关,高剂量甲氨蝶呤为基础的联合化疗可明显延长患者生存期,利妥昔单抗可使PCNS-DLBCL患者生存获益.

目的 研究PRDM1基因失活对C-MYC的调控在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的作用,探讨其与免疫分型及预后相关性.方法 选取2009年1月至2015年12月在新疆医科大学第一附属医院收治DLBCL患者的石蜡包埋组织100例,反应性增生淋巴结20例.免疫组织化学EnVision法检测CD20、CD10、MUM1、Ki-67、bcl-6、Blimp1、C-MYC、PAX5蛋白表达,根据Hans分型法进行免疫分型.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测两组中PRDM1、C-MYC mRNA表达情况.单因素生存分析(Kaplan-Meier)法从蛋白、mRNA水平分析 PRDM1/Blimp1及C-MYC与预后相关性.应用阳离子脂质体转染法介导的小干扰RNA(siRNA)转染OCI-LY1[生发中心B细胞型(GCB型)]和OCI-LY3(non-GCB型)细胞系,RT-PCR和 Western blot方法检测 siRNA转染前后细胞系中 C-MYC mRNA和蛋白表达情况.结果 100例 DLBCL患者中,GCB型27例(27/100,27.0%),non-GCB型73例(73/100,73.0%).Blimp1蛋白在肿瘤中阳性表达26例(26/100,26.0%),反应性增生淋巴结中阳性表达20例(20/20,100.0%).PRDM1 mRNA 高表达58例(58/100,58.0%),其中 GCB 型22例(22/27,81.5%),non-GCB型36例(36/73,49.3%),两者之间差异有统计学意义(P=0.004).同时,在mRNA水平,PRDM1在不同免疫分型、血清乳酸脱氢酶(LDH)水平、B症状、原发部位等临床病理参数表达有差异,C-MYC在性别、国际预后指数(IPI)评分、血清 LDH水平之间表达有差异, PRDM1与C-MYC 具有显著相关性(χ2=7.648,P=0.006).沉默两个细胞系中 PRDM1基因后, RT-PCR和Western blot结果显示在OCI-LY1细胞系中C-MYC基因和蛋白在转染组表达较空白对照组及阴性对照组表达上调.结论 在DLBCL中PRDM1基因失活所致的C-MYC基因表达上调可能是DLBCL发生的一个重要因素,为相关研究提供实验证据.同时,PRDM1蛋白及mRNA和免疫分型相关,PRDM1 mRNA是提示不良预后的标志.

目的 探究利拉鲁肽对结肠癌细胞增殖、凋亡的影响及对转录活化因子6(ATF6)通路的影响.方法 按照利拉鲁肽浓度0、10、100、1000 nM培养人结肠癌HCT116细胞24、48、72 h,人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡情况,蛋白质印迹法(Western Blot)检测作用后细胞中21KD蛋白(Bax)、半胱胺酸蛋白酶-3(Caspase-3)及ATF6通路蛋白ATF6 p50、CCAAT-增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)的表达水平.结果 与对照组相比,利拉鲁肽各浓度间增殖率均有显著变化(P<0.05),同一时间点随着利拉鲁肽浓度的增加,0、10、100、1000 nM各组细胞的增殖率分别为(97.16±35.67)％、(81.69±33.37)％、(76.12±30.23)％、(70.65±28.89)％;(86.17±33.98)％、(58.68±26.77)％、(39.74±10.67)％、(30.17±9.24)％;(83.82±31.19)％、(38.77±10.19)％、(22.98±6.78)％、(16.63±6.12)％,均呈下降趋势.同一浓度随着时间推移,24、48、72 h各时间点细胞增殖率分别为(97.16±35.67)％、(86.17±33.98)％、(83.82±31.19)％;(81.69±33.37)％、(58.68±26.77)％、(38.77±10.19)％;(76.12±30.23)％、(39.74±10.67)％、(22.98±6.78)％;(70.65±28.89)％、(30.17±9.24)％、(16.63±6.12)％.不同浓度利拉鲁肽作用于HCT116细胞72 h后,10、100、1000 nM浓度的利拉鲁肽组的G2/M期细胞比例较0 nM组显著减少(P<0.05),且随着浓度的增加G2/M期细胞呈现下降趋势.0、10、100、1000 nM利拉鲁肽作用下细胞凋亡率分别为(9.06±0.98)％、(10.45±1.12)％、(13.89±1.54)％、(56.08±14.33)％,依次升高(P<0.05).与0 nM组比较,10、100、1000 nM浓度的利拉鲁肽组细胞的凋亡率依次显著升高(P<0.05);与10 nM组比较,100、1000 nM组凋亡率依次显著升高(P<0.05);与100 nM组比较,1000 nM组凋亡率显著升高(P<0.05).蛋白质印迹法结果显示,10、100、1000 nM利拉鲁肽作用后细胞中Bax蛋白表达量分别为(0.69±0.13)、(0.93±0.24)、(1.19±0.25),显著升高(P<0.05),1000 nM组Bax蛋白表达量显著高于10 nM组(P<0.05),100、1000 nM两组间差异无统计学意义(P>0.05);Caspase-3蛋白表达量分别为(0.26±0.06)、(0.76±0.15)、(1.15±0.16)依次显著升高(P<0.05),100、1000 nM组Caspase-3蛋白表达量显著高于10 nM组(P<0.05),1000 nM组Caspase-3蛋白表达量显著高于100 nM组(P<0.05);ATF6 p50蛋白表达量分别为(0.69±0.11)、(0.96±0.09)、(1.20±0.08);CHOP蛋白表达量分别为(0.27±0.06)、(0.79±0.08)、(0.99±0.09),均显著升高(P<0.05),100、1000 nM组ATF6 p50、CHOP蛋白表达量显著高于10 nM组(P<0.05),1000 nM组ATF6 p50、CHOP蛋白表达量显著高于100 nM组(P<0.05).结论 利拉鲁肽对结肠癌HCT116细胞具有增殖抑制和凋亡促进作用,且呈时间-剂量的依赖性,其可能通过激活ATF6通路发挥促凋亡作用.