目的 研究白头翁汤含药血清对口腔扁平苔藓上皮细胞生物活性及Hippo信号通路的作用机制.方法 将体外建立的口腔扁平苔藓炎症模型细胞采用数字随机法分为4组,对照组、空白组、低剂量组、高剂量组.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HOK细胞Toll样受体(TLR)4、肿瘤坏死因子(TNF)-α及核因子(NF)-κB mRNA表达水平.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HOK细胞中白细胞介素(IL)-6、IL-8水平;Western印迹检测HOK细胞中转录共激活因子相关蛋白(YAP)、哺乳动物不育系20样激酶(Mst1)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Lats)1/2蛋白表达.结果 与对照组相比,空白组HOK细胞增殖明显降低,凋亡率、TLR4、TNF-α、NF-κB mRNA、IL-6、IL-8、YAP、Mst1、Lats1/2表达明显升高(P＜0.05).与空白组相比,低剂量组HOK细胞增殖明显升高,凋亡率、TLR4、TNF-α、NF-κB mRNA、IL-6、IL-8、YAP、Mst1、Lats1/2表达明显降低(P＜0.05).与低剂量组相比,高剂量组HOK细胞增殖明显升高,凋亡率、TLR4、TNF-α、NF-κB mRNA、IL-6、IL-8、YAP、Mst1、Lats1/2表达明显降低(P＜0.05).结论 白头翁汤通过降低炎性水平抑制人口腔黏膜角质形成细胞凋亡、促进其增殖,改善病情严重程度,其作用机制与调控Hippo信号通路有关.

目的 基于时间序列分析,研究产黑普氏菌(Prevotella melaninogenica,Pm)刺激原代人口腔角质形成细胞(primary human oral keratinocytes,pHOKs)后基因表达的时间趋势,以探究Pm与pHOKs相互作用的潜在机制.方法 利用生物信息学方法分析pHOKs分别与Pm共培养4、24h后的高通量测序结果,使用Mfuzz聚类算法将具有相似时间表达模式的基因划分聚类,并进行GO、KEGG以及STRING网络分析,进一步利用Cytoscape软件取交集得到枢纽基因(Hub基因).采用实时荧光定量PCR检测Hub基因的表达.结果 Pm刺激pHOKs 4、24 h分别有1 456个和1 386个差异表达基因.通过Mfuzz将其划分为3个聚类,其中簇1基因随时间延长其表达呈现下降的趋势,主要参与上皮细胞分化和上皮细胞向间充质细胞转化等生物学过程;簇2基因随时间延长其表达呈现上升的趋势,主要参与细菌感染、视黄醇代谢等过程;簇3基因表达在刺激前期上调、后期下调,主要参与细胞因子相关信号通路等过程.在PPI网络中筛选出簇1 Hub基因为VEGFA、GDNF;簇2中的Hub基因为PTGS2、ICAM1等;簇3中的Hub基因为IL-6、CCL2等.RT-qPCR检测结果显示,VEGFA、PTGS2、IFIT1、IRF1与测序数据中随着时间延长基因的表达趋势一致.结论 本研究对Pm刺激pHOKs过程中相关生物学分子的动态模式进行了深度挖掘,发现与视黄醇代谢相关的基因以及负调控EMT的基因在OLP中异常表达,Pm入侵上皮细胞后可能通过一些适应性机制逃避免疫监视,该发现有助于进一步探究Pm在口腔扁平苔藓中的致病机理.

目的 探究白头翁含药血清对口腔扁平藓上皮细胞增殖、凋亡及Fas/FasL信号通路的影响.方法 选取人口腔黏膜角质形成细胞(HOK)用脂多糖诱导建立口腔扁平藓细胞模型,分别比较空白组(正常培养)、脂多糖组(10 μg/ml 脂多糖)、低剂量组(10 μg/ml 脂多糖+2.5%的白头翁汤含药血清培养)、中剂量组(10 μg/ml 脂多糖+5.0%的白头翁汤含药血清培养)、低剂量组(10 μg/ml脂多糖+10.0%的白头翁汤含药血清培养)细胞的增殖、凋亡及炎性因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6 和肿瘤坏死因子(TNF)-α]的表达;对5 组细胞中凋亡诱导配体(FasL)受体(Fas)、FasL蛋白和mRNA进行检测.结果 脂多糖组细胞分泌的炎性因子较空白组显著增加(P＜0.05);低剂量组、中剂量组和高剂量组细胞中炎性细胞表达较脂多糖组均显著降低,且呈逐渐递减趋势(P＜0.05).与空白组相比,脂多糖组细胞的增殖能力明显下降,凋亡率显著升高(P＜0.05);低、中、高剂量组细胞的增殖能力较脂多糖组得到明显回升,凋亡率较脂多糖组明显回降(P＜0.05).与空白组相比,脂多糖组细胞中Fas和FasL蛋白和mRNA表达显著增加(P＜0.05);与脂多糖组相比较,低、中、高剂量组细胞中Fas和FasL蛋白和mRNA表达均明显回降,呈逐渐递减趋势(P＜0.05).结论 白头翁含药血清可调节口腔扁平藓上皮细胞的生物学活性,促进口腔黏膜角质形成细胞增殖,抑制其凋亡,降低炎性水平,其作用机制可能与调控Fas、FasL蛋白有一定相关性.

目的:探讨凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达检测对口腔扁平苔藓诊治的临床意义.方法:选择我院2015年8月至2017年8月期间收治的口腔扁平苔藓患者40例作为观察组,并同期选择40例健康志愿者作为对照组,运用免疫组织化学法对两组人员的口腔黏膜组织中的Bcl-2、Bax表达情况进行检测,同时运用TUNEL法对上皮细胞的凋亡情况进行检测,进而比较分析凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达在口腔扁平苔藓诊治中的意义.结果:与对照组相比,观察组患者的Bcl-2、Bax在口腔扁平苔藓上皮层呈过度表达,且阳性率显著高于对照组(P＜0.05),观察组病变组织上皮细胞凋亡指数及凋亡率显著高于对照组(P＜0.05).结论:凋亡蛋白Bcl-2、Bax在口腔扁平苔藓病损中均呈高表达状态,该类指标的表达增多有可能与口腔扁平苔藓发生发展有关,故检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达对口腔扁平苔藓的诊治具有重要意义.

目的 探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者口腔黏膜组织的细胞凋亡情况、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)以及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达.方法 选择40例OLP患者作为观察组,并同期选择40例健康志愿者作为对照组,运用免疫组织化学法检测两组口腔黏膜组织的凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达情况,同时运用脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测上皮细胞的凋亡情况.结果 OLP患者口腔黏膜凋亡细胞增多,染色质边聚,且可见凋亡小体.观察组口腔黏膜Bcl-2、Bax表达水平及其阳性率、上皮细胞凋亡指数均高于对照组(均P<0.05).结论 OLP患者口腔黏膜组织存在淋巴细胞凋亡异常,细胞凋亡可能与OLP的发病密切相关,口腔黏膜组织中Bcl-2及Bax的表达水平或可作为临床诊断OLP的重要参考指标.

目的 探讨白色海绵状斑痣的病因、临床表现、诊断及治疗方法,为临床诊疗提供参考.方法 对1例发生于口腔的白色海绵状斑痣病例的临床资料及相关文献进行回顾性分析.结果 白色海绵状斑痣是一种罕见的常染色体显性遗传病,可有家族病史,患者的角蛋白基因K4(Keratin 4)与K13(Keratin 13)突变被认为是主要病因.该病多始发于儿童及青少年,在成年后趋于稳定,表现为黏膜上广泛白色水波样褶皱,质地柔软,以双侧颊黏膜好发,病理检查通常显示病变部上皮细胞角化过度,棘层细胞内水肿与空泡性变,而基底层细胞大致正常.在临床上需与口腔白斑病、口腔扁平苔藓、口腔念珠菌病等疾病相鉴别.目前尚无特异性治疗方法,常以局部涂抹维A酸,应用漱口水保持口腔卫生清洁为主,患者若无自觉症状也可不予治疗.该病预后良好,无恶变倾向.结论 白色海绵状斑痣因较为罕见,易被临床医生忽视,诊断主要依靠病史询问、临床表现和病理检查,今后的研究方向应致力于寻找更为有效的治疗手段.

本文介绍应用间接免疫荧光技术,用不同底物来测定口腔扁平苔藓(OLP)患者血清中抗基底细胞抗体(抗-BCA),并选择鼠食道作底物来测定OLP患者或其他口腔粘膜疾病患者的抗上皮细胞抗体(抗-ECA),同时观察OLP和不同口腔粘膜疾病中抗-BCA的染色构型以及治疗后OLP患者血清中抗-BCA滴度的改变.63例OLP患者,男19例,女44例,年龄22～72岁,平均年龄47岁.其中糜烂型40例,非糜烂型23例,正常对照组为41例年龄和性别相匹配的健康人.

抗菌肽是一类广泛存在于自然界多种生物体中的小分子多肽,是生物固有免疫系统的重要组成部分.人源阳离子抗菌肽-18是迄今发现唯一来源于人的组织蛋白酶抑制素Cathelicidin家族成员,其可由人粒细胞、上皮细胞、单核细胞等多种细胞分泌,在释放过程中经丝氨酸蛋白酶3切割后产生具有活性的LL-37.LL-37具有抗感染、抗肿瘤、中和内毒素、免疫调节等多种作用,在口腔健康的维系中扮演重要角色.其在龋齿、牙周病及口腔扁平苔藓患者口腔中的水平显著高于健康者,而在口腔鳞状细胞癌患者中显著降低,与这些口腔疾病的发生发展关系密切.未来,应深入研究LL-37在这些口腔疾病中所起的作用,以期为其治疗提供新的理论依据和思路.

辅助性T细胞17(T helper cells 17,Th17)细胞是一种新的CD4+T辅助细胞,其通过分泌特有的白细胞介素17(interleukin 17,IL-17)参与机体免疫及炎性反应.在口腔黏膜疾病中,口腔扁平苔藓(oral lichen pla-nus,OLP)、复发性阿弗他溃疡(recurrent aphthous ulcer,RAU)、白塞病(Behcet′s disease,BD)的发病均与Th17细胞、IL-17相关.OLP患者唾液中有17种与OLP发生相关的、可上调Th17细胞的表达及诱导IL-17分泌的蛋白质;IL-17通过刺激上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞产生多种细胞因子,如IL-6、IL-8、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子及细胞黏附分子1,致使炎症的产生及加重;Th17/Tc17细胞的靶向治疗可使OLP患者黏膜和皮肤的临床症状得到明显改善.IL-17可通过IL-17RA或IL-17RE受体刺激口腔角质细胞,在RAU中产生促炎作用.BD患者外周血中Th17细胞明显增高,而Treg细胞显著降低.