目的:检测Bmi-1基因在口腔白斑细胞和组织中的表达，分析其在口腔白斑恶性转化中的作用及临床意义。方法:免疫组化法检测南京医科大学附属无锡人民医院口腔科和华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心1996至2018年收治的109例口腔白斑患者（其中男51例，女58例，年龄18~74岁）白斑组织样本中Bmi-1表达，分析其表达水平与口腔白斑患者临床病理参数、预后的关联；采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western蛋白印迹法检测正常口腔黏膜上皮细胞、口腔白斑细胞、口腔鳞癌细胞、口腔白斑组织和配对的邻近正常组织中Bmi-1基因mRNA和蛋白表达水平；在口腔白斑细胞系Leuk-1中沉默Bmi-1基因表达后分析其对Leuk-1细胞增殖、克隆形成和凋亡的影响。结果:Bmi-1在重度和轻度上皮异常增生的口腔白斑组织中的蛋白表达水平差异有统计学意义（6 819±994比4 713±372， P=0.017）；Bmi-1高表达的口腔白斑患者的未癌变生存率为65.5%（36/55），低于Bmi-1低表达者［88.9%（48/54）， P=0.003］。Cox回归分析显示Bmi-1的表达水平可作为预测口腔白斑恶性转化的预测指标（ HR=2.522，95% CI：1.128~5.640， P=0.024）。Bmi-1在口腔白斑组织中的mRNA表达水平为0.455±0.120，高于其在邻近正常口腔黏膜组织（0.063±0.009， P=0.014）；Bmi-1在随访期发生癌变的口腔白斑组织中的mRNA表达水平（1.405±0.397）高于未发生癌变的口腔白斑组织（0.145±0.017， P<0.001）；在口腔白斑细胞系Leuk-1中转染Bmi-1-shNC和Bmi-1-shRNA2腺病毒后，二者的克隆形成数（824±40比414±38， P=0.002）和细胞凋亡率（17.7%±2.3%比36.0%±2.0%， P=0.004）差异均有统计学意义。 结论:Bmi-1表达上调促进了口腔白斑细胞的恶性生物学行为，Bmi-1表达可作为预测口腔白斑恶性转化的分子标志物。

目的 研究有吸烟史的口腔白斑病(oral leukoplakia,OLK)患者病损组织microRNA(miRNA)的异常表达,并对差异miRNAs进行癌变相关生物信息学分析.方法 利用人miRNA OneArray?v5.1微阵列芯片检测吸烟组(n=6)和非吸烟组(n=4)OLK石蜡标本间差异表达的miRNA,并运用生物信息学方法从中筛选出与OLK癌变密切相关的目标miRNA,随后对目标miRNA的靶基因进行基因本体数据库(gene ontology,GO)富集分析和KEGG通路分析以预测其可能的作用机制.结果 吸烟组与非吸烟组OLK组织中共检出174个差异表达的miRNAs(P<0.05),其中,39个miRNAs在吸烟组表达上调(log2(FC)≥0.585),135个miRNAs表达下调(log2(FC)≤-0.585).运用生物信息学方法从中筛选出8个与OLK癌变密切相关的目标miRNAs,包括:hsa-miR-6857-5p、hsa-miR-6745、hsa-miR-15a-5p、hsa-miR-363-5p、hsa-miR-6867-3p、hsa-miR-95-3p、hsa-miR-3607-5p、hsa-miR-9500.对上述目标miRNAs的靶基因行GO富集分析,结果显示大部分基因参与调控细胞增殖、凋亡、刺激反应等生物学活动.KEGG通路分析发现上述基因高度相关的作用通路为癌信号通路、PI3K-Akt及FoxO信号通路.结论 吸烟可通过改变OLK组织miRNA表达水平进而改变特定基因功能促进白斑癌变进程.

目的:利用网络药理学分析野黄芩苷抑制口腔白斑(oral leukoplakia,OLK)癌变的分子机制,采用细胞学进一步验证.方法:通过网络药理学挖掘野黄芩苷作用于OLK的分子靶点,构建蛋白互作网络,通过GO、KEGG富集分析预测野黄芩苷可能的作用靶点及相关通路.利用CCK-8实验、Transwell实验验证野黄芩苷对口腔白斑细胞(Leuk-1)、舌癌细胞(Cal-27)增殖、迁移、侵袭的作用;Western印迹法检测相关分子的表达.采用GraphPad Prism 9软件包进行统计学分析.结果:野黄芩苷作用于OLK的潜在作用靶点共29个,HIF-1α为其中关键靶点.GO、KEGG分析结果显示,野黄芩苷高度参与细胞及组织对缺氧的反应并作用于组织缺氧相关的HIF-1信号通路.细胞学结果表明,野黄芩苷能显著抑制Leuk-1、Cal-27增殖(IC50:2 mmol/L)、迁移和侵袭(P＜0.05).Western印迹法进一步验证了关键分子靶点,1 mmol/L野黄芩苷能明显抑制Leuk-1和Cal-27细胞内HIF-1α蛋白的表达.结论:野黄芩苷可能通过抑制HIF-1信号通路表达,对OLK癌变起到抑制作用.

目的 调查呼吸内科住院患者口腔真菌感染的易患因素及与气候因素的关系.方法 对2014年1月—12月在本院呼吸内科住院的1337例患者检测口腔真菌感染发病情况,对发生口腔真菌感染的危险因素进行统计分析.同时收集苍南地区月平均气温、月平均湿度、月总雨量、月总日照、月平均风速等相关气象资料,采用相关与偏相关系数分析方法研究口腔真菌感染与气候因素的相关性.结果 有88例患者发生口腔白斑,并检出假丝酵母菌,感染率为6.6％,单因素及Logistic多因素回归分析显示广谱抗生素和吸入激素是口腔真菌感染发生的独立危险因素.发病率与湿度相关性不显著,与湿度呈弱的正相关性.进行相关与偏相关系数分析,在控制湿度的情况下,发病率与气温存在显著相关性,相关系数为0.636.结论 呼吸内科住院患者口腔真菌感染率较高,以口腔黏膜假丝酵母菌感染常见,使用广谱抗生素和吸入激素可使口腔真菌感染发生率增高;在湿度一定的情况下,气温变化对口腔真菌感染发病起着重要的作用.

目的:光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是一项新兴的结合特殊光敏物质与生物光学技术的微创性治疗手段.近年来,随着光敏剂的快速发展和光源的改进,PDT逐渐应用于多种口腔黏膜疾病的临床治疗,并取得了一定的疗效.本文就光动力疗法在口腔黏膜病中的相关应用现状进行一综述.

目的 比较人口腔白斑、口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)与正常口腔黏膜组织中基因的甲基化变化,以明确DNA甲基化在口腔癌发生发展中的作用.方法 从4例正常口腔黏膜、4例口腔白斑以及4例OSCC组织中提取DNA,样本均来自首都医科大学口腔医学院黏膜科.使用Illumina 450K人全基因组甲基化芯片对其进行检测,对CpG位点发生甲基化改变的相关基因进行基因本体分析(gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书通路富集分析(Kyotoencyclopedia of genes and genomes,KEGG).结果 口腔白斑及OSCC组织中基因的CpG位点甲基化状态发生了改变.在口腔白斑中,异常CpG位点中的高甲基化改变达86.18％ (23 290/27 025);低甲基化改变占13.82％(3 734/27 025).与口腔白斑相比,OSCC无论是高甲基化还是低甲基化的CpG位点均显著增加.多数发生甲基化改变的CpG位点位于CpG岛的外围,其中大约有1/4位于CpG岛滩(距CpG岛0～2 kb),该部位对于基因调控以及肿瘤的发生至关重要.通路分析表明口腔白斑和OSCC组织中发生甲基化改变的CpG位点有共同的通路富集,其中大部分通路都与肿瘤的发生和进展有关.结论 口腔白斑和OSCC在通路方面及基因中都有相似的甲基化改变,表明在口腔白斑和OSCC的发病过程中,它们的表观遗传学方面可能有类似的分子基础.

口腔黏膜病是威胁人类健康及生活质量的疾病.大多数口腔黏膜病病因不明,这为临床及研究工作带来困难.为探索口腔黏膜病的发病机制及防治措施,黏膜病动物模型的建立显得尤为重要.国内外对于一些具体黏膜病,如口腔溃疡、口腔白斑、口腔癌等的模型建立有着详细介绍,但对口腔黏膜病的动物模型的总结性文章文献较少见,因此本文对口腔黏膜疾病较为成熟的动物模型作一阐述.

目的 探讨口腔白斑(oral leukoplakia,OLK)和口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)及其分型和临床意义.方法 采用无创方法收集30例正常人、103例OLK、30例OSCC的口腔黏膜脱落细胞,采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)结合导流杂交技术进行37种HPV基因型别的检测,对受检者进行相关资料分析.结果 正常人检出HPV阳性1例,检出率为3.33％(1/30);OLK检出HPV阳性5例,检出率为4.85％(5/103);OSCC检出HPV阳性1例,检出率为3.33％(1/30);各组间差异无统计学意义(χ2=0.22,P=0.90>0.05).其中OLK中4例为HPV单一型阳性,1例为HPV三重型别阳性.结论 PCR导流杂交检测技术能无创检测口腔HPV分型情况,可应用于临床.HPV在OLK、OSCC中检出率较低,可能与OLK、OSCC的发病关联性不强.

目的:分析湖南省口腔黏膜病的发病情况和分布特点.方法:收集2013年4月至2017年3月就诊于中南大学湘雅医院口腔内科门诊的所有患者的临床资料,经过筛选、去重、归类后,对疾病病种、性别及年龄分布进行分析.结果:21 972例口腔黏膜病中,40 ～49岁女性患者居多,男女比例为1∶1.05,按病种分类前9位分别是复发性口腔溃疡(27.17％)、灼口综合征(15.72％)、口腔黏膜下纤维化(14.75％)、口腔扁平苔藓(10.38％)、口腔白斑(4.21％)、创伤性溃疡(4.14％)、慢性唇炎(3.47％)、口腔真菌感染(3.26％)、萎缩性舌炎(2.74％).其中复发性口腔溃疡(28.65％)、灼口综合征(23.70％)及口腔扁平苔藓(13.31％)是湖南省女性口腔黏膜病前3位病种.口腔黏膜下纤维化是湖南省男性最好发的口腔黏膜病(28.56％).结论:复发性口腔溃疡、灼口综合征及口腔扁平苔藓是湖南省女性高发的口腔黏膜病,口腔黏膜下纤维化是湖南省男性最好发的口腔黏膜病.

口腔黏膜白斑具有易复发易恶变的特征,但目前由于缺乏随机临床对照研究等原因,仍无公认的可显著降低口腔白斑复发及恶变几率的规范化诊疗方案.现阶段,手术切除白斑病变组织并进行组织病理学活检是临床治疗口腔白斑的首选.然而,有研究表明,对于口腔黏膜白斑,手术切除病灶不彻底及区域癌化,可能是白斑复发或恶变的主要原因.同时,手术治疗也可能刺激白斑组织细胞,增加复发和局部恶变风险.因此,除手术干预外,对白斑患者密切随访,观察病灶变化同样具有重要的临床意义.本综述依据现有研究,对口腔黏膜白斑的手术治疗方案和手术治疗适应症的选择进行总结,为口腔黏膜白斑的临床治疗提供参考.