目的:探讨黏着斑激酶(FAK)在口腔鳞癌组织中的表达及其与肿瘤细胞迁移和侵袭的关系。方法:选取新乡医学院第一附属医院和新乡医学院第三附属医院2015年9月至2018年9月收集的79例口腔鳞癌组织和癌旁组织作为研究标本，采用免疫组织化学分析癌旁组织和口腔鳞癌组织FAK蛋白的表达水平；采用FAK短发卡RNA(shRNA)和对照shRNA慢病毒感染人口腔鳞癌细胞系CAL-27建立FAK敲降细胞系和对照细胞系(FAK KD组和shRNA对照组)，采用噻唑蓝(MTT)分析两组细胞的增殖能力；采用划痕实验和Transwell实验分析两组肿瘤细胞的迁移和侵袭水平；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组细胞上皮-间充质转化水平。组间数据比较采用t检验。结果:癌旁组织FAK蛋白表达水平(154.23±23.09)明显低于肿瘤组织(351.29±30.18)，差异有统计学意义( t＝4.109， P<0.05)。对照组细胞吸光度( A)值(2.11±0.29)明显高于FAK KD组(1.52±0.26)，差异有统计学意义( t＝3.281， P<0.05)。对照组细胞克隆形成数量[(133.48±5.91)个]明显高于FAK KD组[(59.87±5.10)个]，差异有统计学意义( t＝4.289， P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(85.62±6.08)%]明显高于FAK KD组[(53.18±4.87)%]，差异有统计学意义( t＝3.948， P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(149.71±18.32)个]明显高于FAK KD组[(81.58±8.32)个]，差异有统计学意义( t＝4.770， P<0.05)。对照组细胞上皮细胞标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平(1.28±0.25)明显高于FAK KD组(0.63±0.19)，差异有统计学意义( t＝3.995， P<0.05)。对照组细胞间质细胞标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平(0.84±0.18、0.96±0.20)明显低于FAK KD组(1.79±0.23、2.39±0.20)，差异有统计学意义( t＝3.027、4.318， P<0.05)。 结论:FAK蛋白在口腔鳞癌组织中呈高表达，参与口腔鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化过程。

探讨长链非编码RNA（LncRNA） PCBP1-AS1对口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其对微RNA-196a（miR-196a）的靶向调控作用。研究发现PCBP1-AS1在口腔鳞癌组织中低表达，而miR-196a表达上调；转染pcDNA-PCBP1-AS1或转染anti-miR-196a均可抑制细胞增殖、迁移及侵袭，并可诱导细胞周期停滞于G0-G1期；PCBP1-AS1可靶向调控miR-196a；miR-196a过表达可逆转PCBP1-AS1对细胞生物学行为的作用。PCBP1-AS1可通过下调miR-196a的表达从而抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移及侵袭。

目的:探讨长链非编码RNA父系表达遗传印记基因10（lncRNA PEG10）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达，以及通过调节微小RNA（miR）-34a对OSCC细胞增殖和迁移的影响。方法:收集53例口腔鳞癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）分析组织中lncRNA PEG10和miR-34a的表达水平。口腔鳞癌SCC-25细胞采用随机数表法分为si-NC组、si-lncRNA EG10组、miR-34a mimics组、miRNA-NC组。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞增殖和迁移能力；双荧光素酶实验报告基因实验验证lncRNA PEG10与miR-34a的靶向关系。计量数据组间比较采用独立样本 t检验，计数数据采用皮尔森卡方检验。 结果:lncRNA PEG10在OSCC肿瘤组织中的平均表达量（2.452±0.750）高于癌旁组织（1.293±0.326），差异有统计学意义（ t＝8.365， P<0.05）。lncRNA PEG10组细胞lncRNA PEG10表达水平（2.868±0.115）高于lncRNA对照组（0.973±0.003），差异有统计学意义（ t＝11.99， P<0.01）。miR-34a mimics组细胞miR-34a表达水平（1.310±0.010）高于miRNA对照组（0.251±0.020），差异有统计学意义（ t＝34.16， P<0.01）。lncRNA PEG10的高表达与淋巴结转移（ χ2＝5.577， P<0.05）和临床分期（ χ2＝6.606， P<0.05）相关。lncRNA PEG10沉默后，SCC-25细胞的增殖能力在48 h（0.416±0.009）和72 h（0.555±0.048）的检测点 A值明显低于对照组（0.561±0.037和0.894±0.025， F48 h＝590.1， F72 h＝105.8， P<0.05）。lncRNA PEG10敲减组细胞划痕愈合率[（157.000±18.457）%]明显低于lncRNA对照组[（74.000±14.256）%]，差异有统计学意义（ t＝19.452， P<0.05）。 结论:lncRNA PEG10在口腔鳞癌中表达上调，而miR-34a表达水平下调，lncRNA PEG10通过靶向结合miR-34a调节口腔鳞癌细胞增殖和迁移。

目的:探讨吲哚菁绿(ICG)近红外荧光(NIF)成像技术在口腔鳞状细胞癌(OSCC)术中实时监测切缘癌残留的可行性。方法:对2019年1月至2020年6月在南京大学医学院附属口腔医院口腔颌面外科行手术治疗的35例OSCC患者，术前(12±1) h经肘静脉静脉注射ICG(0.75 mg/kg)，术中对术野和手术切除标本切缘进行NIF成像，并对OSCC组织和口腔正常黏膜进行荧光强度测定，对异常荧光信号处取材并进行快速冰冻病理检查。NIF成像肿瘤边界分级与病理肿瘤边界分级的相关性分析采用Spearman相关分析。结果:35例患者的肿瘤病灶均获得清晰的ICG NIF成像，阳性率为100%。OSCC组织的荧光强度为(412.73±146.56)au，高于口腔正常黏膜组织[(279.38±82.56)au， P<0.01]。4例患者术野瘤床和手术切除标本对应的切缘处检测到异常荧光信号，其中2例经病理证实为癌细胞残留，另2例为炎性细胞浸润。OSCC术中应用ICG NIF成像技术的切缘阳性检出率为5.7%(2/35)。35例OSCC患者中，手术切除标本NIF成像显示的肿瘤边界1级20例，2级11例，3级4例，与病理肿瘤边界呈正相关( r＝0.809， P<0.001)。 结论:ICG NIF成像技术可有效检测切缘是否存在癌细胞残留，对降低因术中癌残留导致的OSCC术后局部复发具有重要的临床价值。

目的:探讨沉默人PC4和SFRS1互动蛋白1(PSIP1)基因在口腔鳞状细胞癌细胞中的表达以及沉默PSIP1对口腔鳞状细胞癌细胞迁移及侵袭能力的影响，并初步探究其机制。方法:采用RNA干扰技术沉默口腔鳞状细胞癌HN30细胞中PSIP1的表达，将细胞分为si-NC组(转染siRNA-NC)和si-PSIP1组(转染siRNA-PSIP1)。采用荧光实时定量PCR检测PSIP1的表达水平；细胞划痕实验和Transwell小室侵袭实验分别检测细胞迁移及侵袭能力；蛋白质印迹法检测两组HN30细胞内上皮间质转化(EMT)相关蛋白的表达情况。结果:PSIP1在si-NC组、si-PSIP1组HN30细胞中的相对表达量分别为1.00±0.00、0.21±0.06，差异具有统计学意义( t＝22.30， P＝0.002)。si-NC组、si-PSIP1组HN30细胞12 h的划痕愈合率分别为(48.21±4.66)%、(42.05±11.74)%，差异无统计学意义( t＝1.46， P＝0.173)；24 h的划痕愈合率分别为(86.61±6.06)%、(67.76±3.62)%，差异具有统计学意义( t＝8.01， P<0.001)；两组细胞穿膜数目分别为(91.00±7.05)个、(23.34±4.98)个，差异具有统计学意义( t＝19.20， P<0.001)；与si-NC组相比，si-PSIP1组HN30细胞的迁移能力及侵袭能力均显著下降(均 P<0.001)。si-NC组、si-PSIP1组HN30细胞中上皮钙黏素的相对表达量分别为1.06±0.02、1.43±0.13，差异具有统计学意义( t＝-4.94， P＝0.036)；神经钙黏素的相对表达量分别为1.00±0.04、0.57±0.14，差异具有统计学意义( t＝5.03， P＝0.007)；与si-NC组相比，si-PSIP1组HN30细胞的上皮钙黏素蛋白表达上调，神经钙黏素蛋白表达下调。 结论:沉默PSIP1可显著抑制HN30细胞的迁移及侵袭能力，其作用机制可能与PSIP1对口腔鳞状细胞癌EMT途径的影响有关。

目的:探讨环状RNA hsa_circ_0008898对口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤形成的影响和分子机制。方法:实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）和蛋白质印迹法检测OSCC组织、癌旁组织、OSCC细胞和人正常口腔角质细胞（normal oral keratinocytes，NOK）中环状RNAhsa_circ_0008898、Ras同源物基因家族成员A（ras homolog gene family member A，RHOA）及微RNA miR-197-5p的表达水平。在CAL27和SCC-25细胞中分别转染si-hsa_circ_0008898#1（敲低1组）、si-hsa_circ_0008898#2（敲低2组）、hsa_circ_0008898（circ过表达组）及空白质粒（circ空白组）；在敲低1组细胞中，再分别转染miR-197-5p抑制物（抑制组）和空白质粒（抑制对照组）。在CAL27和SCC-25细胞中分别转染miR-197-5p模拟物（miR过表达组）及空白质粒（miR空白组）；在miR过表达组细胞中，再分别转染hsa_circ_0008898载体（共转染1组）、RHOA载体（共转染2组）和空白质粒（共转染对照组）。细胞计数、克隆形成、流式细胞术、Transwell及划痕实验分别检测细胞增殖活力、克隆能力、细胞周期分布、细胞侵袭及迁移能力。将10只裸鼠平均分为2组，每组5只，经腋下皮下分别注射转染空白质粒（对照组）和转染sh-hsa_circ_0008898的SCC-25细胞（敲除组），检测肿瘤体积和质量。结果:OSCC组织中hsa_circ_0008898和RHOA的表达量（分别为2.89±0.72和2.62±0.21）均显著高于癌旁组织（分别为1.00±0.48 和1.00±0.11），miR-197-5p表达量（0.46±0.24）显著低于癌旁组织（1.00±0.42）（ P<0.05）。与NOK相比，CAL27和SCC-25细胞中hsa_circ_0008898、RHOA表达均显著升高，miR-197-5p表达均显著降低（ P<0.05）。敲低1组和敲低2组CAL27和SCC-25的细胞活力、克隆形成数、划痕愈合率和侵袭细胞数均显著低于circ空白组，G1期细胞比例均显著增加（ P<0.05）。与抑制对照组相比，抑制组CAL27和SCC-25的细胞活力、克隆形成数、迁移面积和侵袭细胞数均显著升高，G1期细胞比例显著降低（ P<0.05）。与miR空白组相比，miR过表达组CAL27和SCC-25的细胞活力、克隆形成数、划痕愈合率和侵袭细胞数均显著降低，G1期细胞比例显著增加（ P<0.05）。与共转染对照组相比，共转染2组CAL27和SCC-25的细胞活力、克隆形成数、划痕愈合率和侵袭细胞数均显著增加，G1期细胞比例显著降低（ P<0.05）。敲除组裸鼠移植瘤体积［（660.4±67.8） mm 3］和质量［（0.60±0.06） g］均显著低于对照组［分别为（1 210.4±198.9） mm 3和（1.00±0.12） g］（ P<0.05）。 结论:敲减hsa_circ_0008898表达通过调控miR-197-5p/RHOA轴抑制OSCC细胞增殖、克隆、迁移及侵袭能力，诱导细胞G1期阻滞，抑制裸鼠成瘤。

目的:探讨环状RNA（circular RNA，circRNA）BICD2（circ-BICD2）对口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）谷氨酰胺代谢、细胞增殖、迁移侵袭、凋亡的影响和可能机制。方法:纳入2016年1月至2018年1月就诊于郑州大学第一附属医院口腔科，手术切除的35例OSCC患者的肿瘤组织及其癌旁正常组织样本。通过实时定量PCR（real-time quantitative PCR，RT-qPCR）和蛋白质印迹法检测OSCC组织与癌旁组织、OSCC细胞（CAL27、SCC9、SCC15）与正常上皮细胞HIOEC细胞中circ-BICD2、miR-296-5p和转录球蛋白2（transgelin2，TAGLN2）的表达水平。生物信息学方法、双荧光素酶报告实验、RNA结合免疫沉淀反应（RNA binding protein immunoprecipitation，RIP）实验检测circ-BICD2与miR-296-5p、miR-296-5p与TAGLN2的靶向关系。在CAL27和SCC9细胞中分别转染circ-BICD2小干扰RNAsi-circ-BICD2#1（敲低1组）、si-circ-BICD2#2（敲低2组）及阴性对照si-NC（siRNA空白组）；在敲低1组细胞中分别转染miR-296-5p抑制物anti-miR-296-5p（抑制物组）及其阴性对照anti-miR-NC（抑制物对照组）。在CAL27和SCC9细胞中转染miR-296-5p模拟物（miR过表达组）及其阴性对照miR-NC（miR空白组）。在miR过表达组细胞中转染TAGLN2（共转染组）及空白质粒pcDNA（共转染对照组）。运用细胞计数试剂盒（cell counting kit 8，CCK-8）、集落形成实验、流式细胞术、划痕愈合实验、Transwell实验等检测OSCC生物学行为。同时检测谷氨酰胺（glutamine，gln）消耗量、α-酮戊二酸（α-ketoglutarate，α-KG）产生量和ATP浓度观察其对细胞代谢的影响。蛋白质印迹法检测各组CAL27和SCC9细胞中的细胞周期素D1（cyclinD1）和谷氨酰胺水解酶（glutamine hydrolase，GLS1）蛋白表达量。取4周龄清洁级BALB/c雌性裸鼠12只，于腋下皮肤分别注射转染sh-circ-BICD2（敲低组）和sh-NC（对照组）后的SCC9细胞单细胞悬液，建立移植瘤模型，每组6只。注射32 d时断颈处死裸鼠并切除肿瘤，检测肿瘤质量及两组的circ-BICD2、miR-296-5p及TAGLN2的表达水平。结果:OSCC组织中circ-BICD2、TAGLN2表达量（分别为2.54±0.71和1.86±0.15）显著高于正常组织（分别为1.00±0.35和1.00±0.11），miR-296-5p表达量（0.56±0.23）显著低于正常组织（1.00±0.32）（ P<0.05）。敲低1组CAL27和SCC9细胞活力、克隆形成数、迁移率、侵袭细胞数、S期细胞比例、gln消耗量、α-KG产生量、ATP浓度、cyclinD1和GLS1蛋白表达均显著低于siRNA空白组，细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例显著高于siRNA空白组（ P<0.05）。与抑制物对照组相比，抑制物组CAL27和SCC9细胞miR-296-5p表达显著降低，细胞活力、克隆形成数、迁移率、侵袭细胞数、S期细胞比例、gln消耗量、α-KG产生量、ATP浓度、cyclinD1和GLS1蛋白表达均显著升高，细胞凋亡率、G0-G1期细胞比例显著降低（ P<0.05）。与miR空白组相比，miR过表达组CAL27和SCC9细胞TAGLN2 mRNA、蛋白表达量均显著降低。与共转染对照组比较，共转染组CAL27和SCC9细胞TAGLN2 mRNA、蛋白表达量均显著升高（ P<0.05）。动物实验结果显示，与对照组相比，敲低组裸鼠的肿瘤体积、质量、circ-BICD2及TAGLN2的表达水平均显著降低，miR-296-5p表达水平显著升高（ P<0.05）。 结论:OSCC组织和细胞中circ-BICD2均为高表达，干扰circ-BICD2可抑制OSCC细胞增殖、迁移侵袭、谷氨酰胺代谢以及肿瘤生长，促进细胞凋亡，其机制与调控miR-296-5p/TAGLN2分子轴有关。

目的:检测Bmi-1基因在口腔白斑细胞和组织中的表达，分析其在口腔白斑恶性转化中的作用及临床意义。方法:免疫组化法检测南京医科大学附属无锡人民医院口腔科和华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心1996至2018年收治的109例口腔白斑患者（其中男51例，女58例，年龄18~74岁）白斑组织样本中Bmi-1表达，分析其表达水平与口腔白斑患者临床病理参数、预后的关联；采用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR）和Western蛋白印迹法检测正常口腔黏膜上皮细胞、口腔白斑细胞、口腔鳞癌细胞、口腔白斑组织和配对的邻近正常组织中Bmi-1基因mRNA和蛋白表达水平；在口腔白斑细胞系Leuk-1中沉默Bmi-1基因表达后分析其对Leuk-1细胞增殖、克隆形成和凋亡的影响。结果:Bmi-1在重度和轻度上皮异常增生的口腔白斑组织中的蛋白表达水平差异有统计学意义（6 819±994比4 713±372， P=0.017）；Bmi-1高表达的口腔白斑患者的未癌变生存率为65.5%（36/55），低于Bmi-1低表达者［88.9%（48/54）， P=0.003］。Cox回归分析显示Bmi-1的表达水平可作为预测口腔白斑恶性转化的预测指标（ HR=2.522，95% CI：1.128~5.640， P=0.024）。Bmi-1在口腔白斑组织中的mRNA表达水平为0.455±0.120，高于其在邻近正常口腔黏膜组织（0.063±0.009， P=0.014）；Bmi-1在随访期发生癌变的口腔白斑组织中的mRNA表达水平（1.405±0.397）高于未发生癌变的口腔白斑组织（0.145±0.017， P<0.001）；在口腔白斑细胞系Leuk-1中转染Bmi-1-shNC和Bmi-1-shRNA2腺病毒后，二者的克隆形成数（824±40比414±38， P=0.002）和细胞凋亡率（17.7%±2.3%比36.0%±2.0%， P=0.004）差异均有统计学意义。 结论:Bmi-1表达上调促进了口腔白斑细胞的恶性生物学行为，Bmi-1表达可作为预测口腔白斑恶性转化的分子标志物。

目的:探讨白细胞介素-8（IL-8）干预中性粒细胞叉头状转录因子3（FOXP3）表达对口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞进展的影响。方法:收集2016年12月至2019年12月我院收治的36例OSCC患者癌组织和同期进行体检的12例健康志愿者正常口腔黏膜组织。采用免疫组织化学染色检测组织中FOXP3和IL-8表达，采用免疫荧光检测癌组织中性粒细胞FOXP3表达。购置人舌鳞癌细胞系SCC-9细胞，抽取健康志愿者外周血提取中性粒细胞，分析中性粒细胞和IL-8对SCC-9细胞增殖的影响，采用RT-qPCR检测IL-8对中性粒细胞FOXP3 mRNA表达的影响，利用P60特异性抑制中性粒细胞FOXP3表达分析其表达的下调对SCC-9细胞增殖和迁移的影响。结果:OSCC组织中FOXP3和IL-8阳性表达率（71.05%、76.32%）高于正常口腔黏膜组织（8.70%、4.35%），（ P<0.05）；OSCC组织中性粒细胞FOXP3蛋白呈低表达，且其水平随疾病进展而降低（ P<0.05）；SCC-9+中性粒细胞+IL-8组细胞增殖率高于SCC-9组、SCC-9+中性粒细胞组和SCC-9+IL-8组（ P<0.05）；IL-8干预组中性粒细胞FOXP3 mRNA水平低于PBS对照组（ P<0.05）；SCC-9细胞+中性粒细胞+P60组细胞增殖率显著高于SCC-9细胞组、SCC-9细胞+中性粒细胞组和SCC-9细胞+P60组（ P<0.05）；培养24 h后SCC-9细胞+中性粒细胞+P60组细胞划痕伤口愈合率高于SCC-9细胞组、SCC-9细胞+中性粒细胞组和SCC-9细胞+P60组（ P<0.05）。 结论:OSCC组织中FOXP3和IL-8呈高表达，而中性粒细胞FOXP3表达降低，IL-8可能通过下调FOXP3基因表达趋化中性粒细胞进入肿瘤微环境促进SCC-9细胞增殖和迁移。

目的:探讨下调RACK1基因表达对口腔鳞癌细胞生长及放射敏感性的影响。方法:构建RACK1基因的shRNA载体，通过脂质体转染技术将其转入口腔鳞癌HSC-3细胞，G418筛选得到稳定转染细胞。荧光定量RT-PCR和Western blot分别检测细胞中RACK1mRNA和RACK1蛋白表达水平；CCK8实验检测细胞生长能力；流式细胞仪检测细胞凋亡；细胞体外侵袭实验检测细胞侵袭能力；克隆形成实验检测下调RACK1表达联合X射线照射对细胞增殖能力的影响。构建裸鼠移植瘤模型，观察下调RACK1基因表达联合X射线照射对口腔鳞癌的生长抑制作用。结果:RT-PCR和Western blot结果显示转染后HSC-3细胞RACK1mRNA相对表达量明显降低( P<0.05)，RACK1蛋白表达水平明显降低( P<0.05)。CCK8实验结果显示下调RACK1表达可抑制HSC-3细胞生长( P<0.05)，联合X射线照射使细胞凋亡率明显升高( P<0.05)，外侵袭穿透细胞数显著减少( P<0.05)。克隆形成实验结果显示shRACK1组的存活分数低于对照组，放射增敏比为1.37(D 0值比)。裸鼠移植瘤实验显示shRACK1组照射后瘤体生长缓慢，瘤体体积减小幅度低于对照组( P<0.05)，瘤体质量低于对照组( P<0.05)。 结论:下调RACK1表达可以增强口腔鳞癌细胞的放射敏感性，为提高口腔鳞癌放射敏感性研究提供新思路。