奥加伊妥珠单抗是一种靶向CD22的抗体-药物偶联物（ADC），因其在复发难治急性淋巴细胞白血病（ALL）临床试验中显示出的卓越疗效，于2017年8月被美国食品药品管理局（FDA）批准用于复发或难治前体B细胞ALL的治疗。2021年12月奥加伊妥珠单抗在我国获批上市，为我国复发难治ALL患者提供了新的治疗手段。然而由于奥加伊妥珠单抗在我国上市时间较短，临床医生用药经验较少，临床规范应用和患者管理的相关共识缺乏。为进一步规范奥加伊妥珠单抗在ALL治疗中的临床应用，专家组成员参考国内外相关研究进展，并结合国内外权威指南和循证医学证据，制定了本临床应用指导原则，以供临床参考。

目的:筛选并分析唾液酸结合Ig样凝集素15(Siglec-15)在胃癌细胞中的候选靶基因及其下游信号通路并进行患者预后相关性分析。方法:构建干扰Siglec-15基因的最佳慢病毒转染至人胃腺癌AGS细胞株获得沉默组(AGS-shSiglec-15)，以及空载体慢病毒转染获得的AGS细胞对照组(AGS-NC)，各取三个样本进行转录组测序。根据测序数据筛选差异表达基因，通过GO分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析和GESA分析进行基因的功能注释和信号通路的鉴定。构建蛋白与蛋白相互作用网络图(PPI)，进行可视化分析并获取关键互作蛋白，并对靶蛋白进行生存期分析。结果:共鉴定出符合筛选标准的255个差异表达蛋白编码基因，包括119个上调基因和136个下调基因。经GO、KEGG和GSEA分析表明，差异表达基因(DEGs)主要参与甲型流感、Toll样受体信号传导途径、钙信号传导途径、NOD样受体信号传导途径、病毒蛋白与细胞因子和细胞因子受体的相互作用等进程。同时筛选出10个Siglec-15相关基因的靶蛋白，其中钙黏蛋白23(CDH23)[ HR＝1.31(1.05~1.63)， P<0.05]、蛋白网络成分协调蛋白(USH1C)[ HR＝1.25(1.05~1.48)， P<0.05]、干扰素调节因子7(IRF7)[ HR＝1.7(1.41~2.05)， P<0.001]、MX2[ HR＝1.63(1.33~2.00)， P<0.01]、干扰素调节因子9(IRF9)[ HR＝1.30(1.09~1.54)， P<0.01]高表达的胃癌患者总生存率(OS)较差。而RSAD2(RSAD2)[ HR＝0.78(0.61~1.00)， P<0.05]、CC基序趋化因子配体5(CCL5)[ HR＝0.66(0.55~0.78)， P<0.01]、CXC趋化因子配体(CXCL8)[ HR＝0.65(0.53~0.79)， P<0.01]、XIAP相关因子1(XAF1)[ HR＝0.77(0.65~0.92)， P<0.01]、干扰素调节因子6(IRF6)[ HR＝0.51(0.41~0.63)， P<0.01]高表达的患者具有较好的OS。 结论:沉默Siglec-15基因在胃癌细胞中有明显差异表达基因并参与多种生物学进程和信号通路调节，可能作为胃癌的潜在新免疫检查点标志物及治疗靶点。

目的:建立儿童干扰素刺激基因（ISG）表达检测方法，确立参考值范围，初步探讨其临床应用价值。方法:纳入2017年11月至2021年9月就诊于北京协和医院儿科的Ⅰ型干扰素病患者作为疾病组，同时纳入健康儿童作为对照组。疾病组共纳入18例患儿，其中男性8例，女性10例，共采集血液样本25份，首次检测的中位年龄为8.5岁。对照组共纳入28名健康儿童，年龄1~18岁，中位年龄10.5岁，其中男性15名，女性13名。分别提取疾病组和对照组外周血总RNA并逆转录为互补DNA（cDNA）。以β肌动蛋白基因（β-Actin）和鸟氨酸脱羧酶抗酶基因（OAZ）为内参，采用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测干扰素诱导的四肽重复蛋白1基因（IFIT1）、干扰素α诱导蛋白27基因（IFI27）、干扰素诱导蛋白44样基因（IFI44L）、干扰素刺激基因15（ISG15）、唾液酸结合的免疫球蛋白样凝集素1基因（SIGLEC1）、含有S-腺苷甲硫氨酸结构域2基因（RSAD2）的相对表达量，以6个ISG的中值为干扰素评分（IS）。去除正常对照中表达明显异常的样本，将其他样本的cDNA混合作为参照，重新检测各样本并计算IS，将大于对照 xˉ+2 s的IS结果判断为异常。用独立样本 t检验或Mann-Whitney U检验比较组内和组间IS的差异。 结果:对照组IS均值为1.046，标准差0.755，IS截断值为2.556。18例Ⅰ型干扰素病患者组IS异常的有15例（15/18），IS均值为27.010。与对照组相比，干扰素疾病患者组IS明显升高（ t=4.247， P=0.000 1）。该检测方法的准确度为91.30%（42/46），精密度为7.47%（0.084/1.124），敏感度为15/18，特异度为96.43%（27/28）。 结论:本研究通过ISG表达的检测并计算IS，为临床筛查以及动态监测Ⅰ型干扰素疾病变化提供了新的可靠的手段。

目的:探讨唾液酸结合Ig样凝集素15(SIGLEC-15)基因对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭过程的影响。方法:分别设计特异性靶向人源性和鼠源性SIGLEC-15基因的3个单链引导RNA(sgRNA)序列，利用CRISPR/Cas9技术获得稳定敲除SIGLEC-15基因的MDA-MB-231单克隆细胞[sg-control(对照组)、sg-SIGLEC-15-1、sg-SIGLEC-15-2和sg-SIGLEC-15-3共4组]和稳定敲除SIGLEC-15基因的小鼠三阴性乳腺癌4T1细胞[NC(对照组)、KO1、KO2和KO3共4组]。采用qRT-PCR、Western blot实验检测8组单克隆细胞SIGLEC-15基因mRNA和蛋白表达水平，以评估SIGLEC-15基因的敲除效率。通过EdU增殖实验、划痕愈合实验、Transwell迁移实验和侵袭实验来评估SIGLEC-15基因敲除对MDA-MB-231细胞增殖、迁移侵袭功能的影响。将SIGLEC-15基因敲除的4T1细胞注射到BALB/c雌性小鼠皮下脂肪垫中，每2天1次评估小鼠的肿瘤体积，24 d后处死小鼠，测量肿瘤的体积和重量。SIGLEC-15的mRNA表达量、蛋白表达量、细胞增殖率、细胞划痕愈合率、迁移细胞数、侵袭细胞数、移植瘤体积和重量的2组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析和重复测量方差分析，多组间两两比较采用Tukey法。结果:NC、KO1、KO2和KO3这4组单克隆细胞株中SIGLEC-15基因的mRNA表达量分别为1.00±0.06、0.19±0.02、0.15±0.01和0.16±0.02，组间比较差异有统计学意义(F＝405.807，P<0.001)。KO1、KO2和KO3这3组中SIGLEC-15蛋白的表达量也明显低于NC组(t＝74.832、103.210、71.850，P<0.001)。sg-control、sg-SIGLEC-15-1、sg-SIGLEC-15-2和sg-SIGLEC-15-3这4组单克隆细胞中SIGLEC-15基因的mRNA表达量分别为1.00±0.02、0.20±0.02、0.14±0.01和0.21±0.01，组间比较差异有统计学意义(F＝1 836.010，P<0.001)。SIGLEC-15基因敲除的这3组细胞中SIGLEC-15蛋白的表达量也明显低于sg-control组(t＝23.810、24.370、23.960，P<0.001)。sg-control和sg-SIGLEC-15-2组的细胞增殖率分别为(42.88±0.90)%和(42.35±0.92)%，组间比较差异无统计学意义(t＝0.713，P＝0.515)；2组的划痕愈合率[(62.33±0.72)%比(31.89±0.29)%，t＝68.150，P<0.001]、迁移细胞数[(225.70±4.50)比(104.70±5.69)，t＝28.880，P<0.001]、侵袭细胞数[(157.00±2.00)比(57.33±4.16)，t＝37.380，P<0.001]比较，差异均有统计学意义。WT(注射未经任何处理的4T1细胞)、NC组和KO(KO2)组这3组小鼠乳腺癌移植瘤体积比较，差异有统计学意义(组间比较，F＝13 859.000，P<0.001；不同时间点比较，F＝3 444.021，P<0.001；交互作用，F＝351.700，P<0.001)，KO组移植瘤的肿瘤体积显著低于WT组与NC组(P均<0.001)。3组的瘤体重量分别为(750.08±21.99)mg、(758.60±18.70)mg和(443.80±14.52)mg，组间比较差异有统计学意义(F＝462.000，P<0.001)。结论:在三阴性乳腺癌细胞中，SIGLEC-15基因可能和肿瘤细胞体外迁移和侵袭能力有关，其作用机制值得深入研究。

目的 比较18种中药多糖与唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin,Siglec-9)的亲和力以及抗炎能力,探讨中药多糖发挥抗炎作用的新机制.方法 选择18种不同药性的中药用水提醇沉法提取多糖,苯酚硫酸法检测多糖含量,高效液相色谱法检测多糖的单糖组成,红外光谱法检测中药多糖结构.通过竞争性ELISA法检测多糖与Siglec-9的亲和力,并研究中药多糖对LPS诱导巨噬细胞炎症反应以及R848诱导中性粒细胞NETosis的影响,利用髓系细胞特异性敲除Siglec-E(Lyz2-cre:Siglec-E flox/flox)小鼠来源的原代巨噬细胞和腹腔中性粒细胞进一步明确多糖结合Siglec-9产生抗炎作用的机制.结果 中药多糖的糖含量均在55％以上,主要由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等组成,但单糖构成比各不相同.红外光谱检测4种代表性中药多糖均有典型的多糖吸收峰,柴胡和蒲公英多糖具有葡萄糖醛酸结构.枸杞和黄芪多糖与Siglec-9的亲和力,对LPS诱导的巨噬细胞炎症反应和R848诱导的中性粒细胞NETosis反应无显著抑制作用.柴胡和蒲公英多糖与Siglec-9亲和力较强(P<0.01),能够显著抑制上述炎症反应,但其抗炎作用在髓系细胞特异性敲除Siglec-E基因小鼠来源的巨噬细胞和中性粒细胞中消失.结论 中药多糖与Siglec-9的亲和力有潜力成为研究中药抗炎作用的新的现代药理学机制.

免疫抑制信号通路异常是自身免疫疾病发生的重要机制之一.唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素(sialic acid-binding Ig-like lectins,Siglecs)是免疫球蛋白超家族成员中的抑制性受体,主要表达于免疫细胞,通过结合包含唾液酸的配体,招募SH2结构域的酪氨酸磷酸酶(SH2-domain-containing tyrosine phosphatases)到细胞质,从而抑制宿主自身免疫病的发生.Siglec-10/G(sialic acid-binding Ig-like lectin G/10,SiglecG/10)是Siglecs家族成员中的抑制性受体,主要表达于B细胞、树突状细胞和单核细胞,在自身免疫病和炎症反应中发挥重要的免疫调控作用.

目的 预测唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15(sialic acid binding Ig like lectin-15,SIGLEC-15)的生物学信息.方法 应用多种生物信息学工具对SIGLEC-15的理化性质、组织表达特异性、亚细胞定位、空间结构、翻译后修饰位点、蛋白相互作用等进行预测,同时建立SIGLEC-15的系统进化树,并进行分析.结果 SGLEC-15是一种碱性不稳定蛋白,具有亲水性,含有信号肽结构.SGLEC-15具有1个跨膜结构域,主要定位于细胞外(34.80％)、细胞膜(30.40％)、内质网(21.70％)和高尔基体(13.00％),在正常细胞及癌细胞中均有表达.SGLEC-15的高级结构弹性较大,拥有2个N-糖基化位点,1个0-糖基化位点及8个可能的蛋白磷酸化位点.SGLEC-15与TYROBP等4个蛋白具有高置信度的相互作用关系.人类SIGLEC-15与猩猩、白狨猴等灵长类动物SIGLEC-15的同源性最高,在脊椎动物进化过程中相对保守.结论 SIGLEC-15可作为肿瘤免疫抑制的靶点,为进一步肿瘤免疫疗法的研究奠定了基础.