目的:筛选适宜裂叶地黄遗传转化系统的抗性标记.方法:以裂叶地黄的种子为材料,采用不同浓度抗生素和除草剂对裂叶地黄的种子外植体进行处理,对比不同浓度的卡那霉素、潮霉素和除草剂草铵膦(Basta)的筛选效果,为裂叶地黄遗传转化体系的构建提供基础.结果:裂叶地黄种苗对Basta和潮霉素敏感性的强度强于卡那霉素.Basta浓度为 1mg/L和2mg/L时,地黄种苗培养30d存活率为38.03%和5.07%,对裂叶地黄种苗生长有明显的抑制作用;浓度为 5mg/L时,完全抑制裂叶地黄种苗的生长,可作为遗传转化抗性苗筛选的选择压.潮霉素浓度为 10 mg/L时,地黄种苗存活率为 34.17%,对裂叶地黄种苗生长有明显的抑制作用;浓度为 20 mg/L时,将裂叶地黄种苗全部致死,可作为抗性苗筛选的选择压.卡那霉素浓度为50 mg/L时,种苗白化率达到89.17%,种苗生长受到明显抑制.结论:Basta适宜筛选浓度为5 mg/L,潮霉素适宜筛选浓度为20 mg/L,卡那霉素适宜筛选浓度为不低于 50 mg/L.

子痫前期是产科领域中一种“胎盘源性疾病”，是一种严重的妊娠并发症。人类和其他哺乳动物胚胎的生长发育过程与胎盘功能密不可分。本综述就子痫前期体外细胞模型、胎盘外植体、类器官模型、啮齿类动物模型和灵长类动物模型的应用进行了总结，以有助于加深对胎盘发育和相关妊娠疾病的理解。

蒙古冰草(Agropyron mongolicum)亦称沙芦草,为禾本科(Poaceae)小麦族(Triticeae)冰草属(Agropyron)多年生疏丛型牧草,具有饲用价值高、抗寒耐旱以及耐盐、耐瘠薄、耐风沙等特性,是改良天然草场的适宜草种与挖掘优良耐逆基因资源的重要材料.然而,目前尚未建立蒙古冰草高效遗传转化体系,制约了该物种的基因资源鉴定与遗传改良应用.以蒙农1号蒙古冰草种子为来源的高再生效率的胚性愈伤系#89为外植体,建立了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105介导的蒙古冰草稳定遗传转化体系,转化效率达30％.此外,针对多次继代后蒙古冰草愈伤系再生能力退化的难题,通过在再生培养基中添加1 mg·L-1 ABA或提高蔗糖浓度至45g·L-1,成功将再生能力衰退的蒙古冰草愈伤系再生效率由5％分别提高至35％与42％.研究结果为后续蒙古冰草基因编辑体系建立、基因功能鉴定和新品种培育奠定了重要技术基础.

以2个不同基因型的捕虫堇圆切捕虫堇(Pinguicula cyclosecta)和塞提捕虫堇(P.'Sethos')叶片为外植体,通过探究不定芽再生的影响因素,成功建立了捕虫堇高效再生体系.结果表明,2种捕虫堇对消毒方式和基本培养基种类要求相同,但再生能力有显著差异.圆切捕虫堇叶片在MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1 NAA培养基上再生能力最强,再生率为92.22％,再生系数达4.84.在MS+0.6 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA培养基上,不定芽增殖系数达4.98.塞提捕虫堇叶片在MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1 NAA培养基中再生率最高,为77.78％,再生系数为6.12,在增殖培养基MS+0.3 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA上,增殖系数可达4.84.2种捕虫堇在1/2MS+0.1 mg·L-1 IBA培养基上进行生根培养,根系生长状态最佳.该研究解决了捕虫堇繁殖系数低及工厂化育苗难等问题,为其规模化生产和育种改良提供了技术支持.

毛建草(Dracocephalum rupestre)是一种重要的药用植物.然而,其叶片外植体再生系统尚未建立.以毛建草大田叶片和组培苗叶片为外植体,探讨植物生长调节剂对愈伤组织诱导和分化、不定芽增殖及生根的影响,建立了叶片离体再生体系.结果表明,大田叶片愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 2,4-D+1.0 mg·L-1 IAA,诱导率达84.51％,不定芽分化最佳培养基为MS+3.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 TDZ+0.5 mg·L-1 IAA,分化率为66.37％;组培苗叶片愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 IAA,诱导率达86.73％,不定芽分化最佳培养基为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+2.0 mg·L-1 TDZ+0.05 mg·L-1 IAA,分化率为53.48％.不定芽增殖适宜培养基为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.05 mg·L-1 NAA,增殖率为83.57％,最适生根培养基为 1/2MS+0.1 mg·L-1 NAA+0.1 mg·L-1 IBA,生根率为86.97％;在草炭:蛭石=1∶1(v/v)的混合基质中组培苗长势最好.该研究建立了毛建草叶片离体培养再生体系,为毛建草种质资源保存和种苗快繁提供了技术支持.

穿心莲为我国重要的南药之一,用于清热解毒、凉血消肿,其主要活性成分穿心莲内酯具有抗癌、抗HIV病毒、抗炎、保肝等功效.然而,穿心莲内酯人工合成难度较大,主要从人工栽培的植物原料中提取,栽培植物原料的质量因受土壤、气候、水肥管理等各种因素的影响而参差不齐,穿心莲生长周期长且占用土地资源.植物离体培养技术在种苗快繁及活性成分积累等方面都具有显著优势,是实现穿心莲活性成分快速、高效生产的重要途径之一.穿心莲组织离体再生技术体系日益完善,从外植体到完整植株的组织离体再生技术日渐成熟,已在种苗繁育、倍性育种等方面有了一定的应用.同时,在穿心莲愈伤组织培养、细胞悬浮培养、不定根培养、毛状根培养过程中,通过优化培养条件和使用适宜的诱导子可大幅增加培养物中穿心莲内酯等活性成分的积累.该文分别从穿心莲组织、细胞、不定根及毛状根培养等方面,全面系统地综述了近年来国内外关于穿心莲离体培养技术以及其生产穿心莲内酯的研究进展,以期促进穿心莲离体培养技术的发展与应用,为离体生产穿心莲内酯的研究提供参考.此外,还提出了未来在穿心莲离体培养技术及通过该技术生产穿心莲内酯的研究中需重点关注的 3 个方面:(1)熟化完善穿心莲组织离体再生技术体系,建立全面系统的评价体系;(2)优化培养条件和高效诱导子联用,进一步提高穿心莲内酯等重要活性成分产量;(3)开展通过细胞悬浮培养技术生产穿心莲内酯的生物反应器培养研究.

针对浙科版教材中"通过植物组织培养可获得完整植株"实验教学课时不足、实验材料成活率低、流程耗时长、方法步骤不严谨等问题,进行实验教学改进.通过调整课时安排、优化实验具体操作、开展学生项目化学习等方式帮助学生高效地完成了探究植物激素在植物组织培养中的作用及接种培养外植体,最终得到试管苗并成功移植.历时6年,反复验证本方案可实现学生掌握基本的无菌操作和植物组培技术,有效激发创新和学习激情,树立生命观念和科技助农的社会责任感.

目的 筛选出能有效抑制新霉素导致的毛细胞系(HEI-OC1)细胞死亡的小分子药物,并在小鼠耳蜗外植体和斑马鱼侧线毛细胞中进行验证.方法 通过Cell Counting Kit-8(CCK8)计算细胞存活率来筛选出对新霉素导致的HEI-OC1 细胞系死亡有保护作用的小分子药物;通过免疫荧光染色的方法在小鼠耳蜗外植体和斑马鱼侧线毛细胞中进行验证.结果 在筛选的 350 种小分子药物发现能显著提高新霉素处理的HEI-OC1 的细胞中存活率的药物—盐酸氯米帕明;在耳蜗外植体及斑马鱼侧线毛细胞中发现盐酸氯米帕明对新霉素导致的毛细胞死亡有保护作用.结论 盐酸氯米帕明作为FDA批准的临床用药一定程度缓解了新霉素导致的毛细胞死亡,说明其对新霉素导致的毛细胞死亡有一定的保护作用.

睑板腺功能障碍(meibomian gland dysfunction,MGD)是临床常见的眼表疾病,严重影响患者的日常生活质量.目前MGD发病机制与治疗手段的相关研究已逐渐成为干眼的研究热点,为此建立一个稳定有效的实验模型对于MGD的深入探索是必要的前提.MGD实验模型目前主要分为在体模型和离体模型两大类:在体模型主要通过药物诱导、手术诱导、基因敲除以及转基因方式建模;离体模型是指在体外模拟睑板腺的病理生理.本文就目前报道的多种MGD实验模型及对其应用评价进行简要综述.

为建立银扇草(Lunaria annua)体外再生体系,以其真叶为外植体,探讨消毒条件、植物生长调节剂组合及浓度对愈伤组织诱导、不定芽和不定根分化的影响;进一步分析了生根方式对成苗和幼苗生长的影响.结果表明,用75％乙醇消毒45秒配合0.1％升汞溶液消毒6分钟为银扇草叶片外植体最佳消毒处理;真叶愈伤组织诱导及不定芽分化的最适培养基为MS+0.5 mg·L-1 6-BA+2.0 mg·L-1 2,4-D,愈伤组织诱导率达93.37％,不定芽分化率达84.08％;最佳生根培养基为MS+0.1 mg·L-1 NAA,从接种叶片外植体到获得再生植株约90天.该研究建立了银扇草稳定的再生体系,为开发利用银扇草资源及挖掘功能基因奠定了基础.