目的:了解穿心莲内酯磺化物(ADS)雾化吸入对需要有创机械通气的儿童中重度急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的治疗效果。方法:前瞻性随机对照单盲研究，收集2018年11月1日至2019年12月31日入住首都医科大学附属北京儿童医院PICU，年龄29 d~18岁，且需要有创机械通气治疗的中重度ARDS患儿。试验组患儿吸入ADS，对照组吸入生理盐水。试验前后分别留取支气管肺泡灌洗液行细胞因子检测。分析组间人口统计学、细胞因子水平及临床诊疗的差异。结果:共纳入患儿20例，男15(75.00%)例，中位年龄2.15(1.48，8.01)岁，中位第2代儿童死亡风险评分为12.25(4.53，16.30)分。两组患儿的人口统计学、基础临床资料及预后比较差异无统计学意义( P>0.05)。试验组患儿的单核细胞趋化蛋白-1降低，对照组上升，差异有统计学意义[967.50(119.25，5 206.00)pg/mL比-945.00(-3 935.50，495.09)pg/mL， P＝0.041]。试验组白细胞介素(IL)-8下降、对照组升高[303.22(-452.00，1 172.38)pg/mL比-490.14(-780.25，240.52)pg/mL， P＝0.151]；试验组IL-6升高幅度低于对照组[-24.53(-501.76，135.27) pg/mL比-325.85(-633.22，133.75)pg/mL， P＝0.364]；差异均无统计学意义( P>0.05)。试验组患儿研究结束时氧合指数优于对照组[11.35(6.00，15.83)比20.65(6.23，38.35)， P＝0.374]，ARDS好转率较高(80%比60%， P＝0.628)，但差异均无统计学意义( P>0.05)。两组患儿病死率及机械通气时间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:ADS雾化吸入或可降低中重度ARDS患儿支气管肺泡灌洗液内IL-6升高幅度，并降低单核细胞趋化蛋白-1、IL-8浓度，且可能改善肺部氧合功能。尚需进一步研究验证上述结论。

目的:明确穿心莲内酯（AD）对脂多糖（LPS）刺激下大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞（AECⅡ）表达促凝和纤溶抑制相关因子的影响。方法:将对数生长期的大鼠AECⅡ细胞RLE-6TN分为正常对照（NC）组、LPS组及6.25、12.5、25 mg/L AD组（AD 6.25组、AD 12.5组、AD 25组）5组。NC组用RPMI 1640常规培养基培养；LPS组在RPMI 1640常规培养基中加入5 mg/L的LPS进行刺激；不同剂量AD组细胞分别用6.25、12.5、25 mg/L的AD处理1 h后给予LPS刺激培养。于LPS刺激细胞24 h后收集细胞及细胞培养上清液，用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）、实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）分别检测细胞中组织因子（TF）、组织因子途径抑制剂（TFPI）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的蛋白及mRNA表达；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中Ⅲ型前胶原肽（PⅢP）、凝血酶-抗凝血酶复合物（TAT）、抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）、活化蛋白C（APC）水平。结果:与NC组相比，LPS组TF、PAI-1的蛋白及mRNA表达显著升高，TFPI蛋白及mRNA表达显著降低；同时细胞上清液中PⅢP、TAT水平明显升高，AT-Ⅲ、APC水平明显降低。与LPS组相比，AD 6.25组、AD 12.5组、AD 25组TF、PAI-1的蛋白及mRNA表达均明显降低〔TF/GAPDH：0.86±0.08、0.45±0.04、0.44±0.04比1.32±0.10，TF mRNA（2 -ΔΔCt）：2.59±0.25、2.27±0.05、1.95±0.04比4.60±0.26，PAI-1/GAPDH：2.11±0.07、1.45±0.04、0.86±0.09比2.56±0.09，PAI-1 mRNA（2 -ΔΔCt）：3.50±0.22、2.23±0.29、1.84±0.09比6.60±0.27，均 P<0.05〕，TFPI蛋白及mRNA表达明显升高〔TFPI/GAPDH：0.78±0.05、0.81±0.03、0.84±0.07比0.36±0.02，TFPI mRNA（2 -ΔΔCt）：0.46±0.09、0.69±0.07、0.91±0.08比0.44±0.06，均 P<0.05〕，细胞上清液中PⅢP、TAT水平明显降低，AT-Ⅲ、APC水平明显增加〔PⅢP（μg/L）：13.59±0.23、12.66±0.23、10.59±0.30比15.82±0.29，TAT（ng/L）：211.57±6.41、205.69±4.04、200.56±9.85比288.67±9.84，AT-Ⅲ（μg/L）：102.95±3.86、123.92±2.63、128.67±1.67比92.93±3.36，APC（μg/L）：1 188.95±14.99、1 366.12±39.93、1 451.15±29.69比1 145.55±21.07，均 P<0.05〕；随着AD剂量的增加，上述促进及抑制作用越加明显，AD 25组TF、PAI-1的蛋白及mRNA表达降低、TFPI mRNA表达升高、上清液中PⅢP水平降低和AT-Ⅲ、APC水平增加与AD 6.25组比较差异具有统计学意义，且PAI-1蛋白表达降低及上清液中PⅢP水平降低与AD 12.5组比较差异也具有统计学意义。 结论:AD在6.25～25 mg/L的剂量范围内，能剂量依赖性地抑制LPS刺激下AECⅡ细胞RLE-6TN表达及分泌促凝和纤溶抑制相关因子，促进抗凝因子的分泌，以25 mg/L作用最明显。

目的:基于网络药理学探讨穿心莲治疗乳腺癌的作用靶点及潜在作用机制。方法:采用TCMSP分析穿心莲的化学成分、作用靶点。借助基因组注释(GeneCards)数据库及人类孟德尔遗传(OMIM)数据库，预测和筛选乳腺癌作用靶点，采用Cytoscape 3.7.2软件，构建"活性成分-靶点"网络图，借助String数据库平台构建蛋白质相互作用网络。利用Bioconductor平台和R语言进行GO富集分析和KEGG通路分析。结果:筛选得到穿心莲24个有效成分，治疗乳腺癌的作用靶点有71个，乳腺癌疾病靶点共13 234个。穿心莲-乳腺癌共同靶点51个，位列前5的靶点有P53蛋白、IL-6、氨基端激酶(JUN)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(CCND1)、雌激素受体α(ERS1)，穿心莲-乳腺癌KEGG富集的通路是雌激素受体通路、P53信号通路、Notch信号通路、Wnt信号通路。结论:TP53、ERS1、CCND1等靶点可能是穿心莲治疗乳腺癌的关键靶点，通过调控雌激素受体通路、P53信号通路等信号通路发挥抗乳腺癌作用。本研究为穿心莲治疗乳腺癌作用机制的深入研究提供了理论依据。

目的:探讨穿心莲内酯(AG)对AP相关肾损伤的影响及其可能机制。方法:将32只C57BL/6小鼠随机分为对照组、AP组、AG治疗组和AG对照组。AP组采用腹腔注射左旋精氨酸联合脂多糖的方法制备AP模型，AG治疗组在制模前8 h静脉注射AG注射液，对照组腹腔注射等体积生理盐水，AG对照组在腹腔注射生理盐水前8 h静脉注射AG注射液。采集小鼠眼内眦静脉血，检测血清淀粉酶、肌酐、尿素氮水平；取胰腺和双肾组织，应用比色法检测胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)活性，光镜下观察小鼠胰腺及肾组织病理变化并进行病理评分；采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱系统进行肾组织代谢组学分析。结果:与对照组比较，AP组血清淀粉酶、肌酐、尿素氮水平和胰腺组织MPO活性明显升高[(13.78±6.01)U/L比(0.23±0.04)U/L、(79.81±24.03)μmol/L比(9.02±2.87)μmol/L、(34.76±14.53)mmol/L比(8.52±2.55)mmol/L、(16.55±4.23)U/g pro比(2.32±0.55)U/g pro]，胰腺、肾组织病理评分亦显著升高[(2.70±0.26)分比(0.20±0.12)分、(3.00±0.35)分比(0.30±0.12)分]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)；而AG治疗组血清淀粉酶、肌酐、尿素氮和胰腺组织MPO活性较AP组显著降低[(8.26±3.87)U/L比(13.78±6.01)U/L、(55.42±17.25)μmol/L比(79.81±24.03)μmol/L、(20.66±10.30)mmol/L比(34.76±14.53)mmol/L、(11.51±3.29)U/g pro比(16.55±4.23)U/g pro]，胰腺、肾组织病理评分亦显著下降[(1.40±0.19)分比(2.70±0.26)分、(1.70±0.26)分比(3.00±0.35)分]，差异均有统计学意义( P值均<0.05)。代谢组学分析共获得31个差异代谢物，这些代谢物主要参与氨基酸代谢和脂肪酸代谢，少部分还参与糖代谢、核苷酸代谢、维生素代谢以及胆汁酸代谢。 结论:AG可能通过改变AP相关肾损伤过程中差异代谢物的水平对肾损伤起到保护作用。

目的:探讨穿心莲内酯（andrographolide，AND）对腹泻型肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS-D）大鼠肠道炎症的影响及对NLRP3/caspase-1信号通路的调节机制。方法:利用低浓度乙酸联合束缚应激建立IBS-D大鼠模型后，将大鼠分为对照组、模型组、阳性药物组、AND低剂量（AND-L）组、AND中剂量（AND-M）组、AND高剂量（AND-H）组，每组10只。检测各组大鼠粪便性状评分及粪便含水量；对各组大鼠的腹部收缩反射（abdominal withdrawal reflex，AWR）进行评分；酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测各组大鼠结肠组织中肿瘤坏死因子- α（tumor necrosis factor- α，TNF- α）、白介素-6（interleukin 6，IL-6）、白介素-1 β（interleukin 1 β，IL-1 β）、白介素-18（interleukin 18，IL-18）水平；Western blot检测各组大鼠结肠组织中NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达水平。 结果:对照组大鼠粪便评分为2.43±0.19、粪便含水量为31.76±2.81、AWR评分为0.43±0.02、TNF- α为123.49±12.35、IL-6为76.45±6.23、IL-1 β为195.76±15.14、IL-18为167.31±13.92，蛋白表达水平NLRP3为0.96±0.06、ASC为1.01±0.08、caspase-1为0.94±0.06。模型组大鼠粪便性状评分为6.12±0.58、粪便含水量为65.24±4.13、AWR评分为2.42±0.18，与对照组相比均升高（ P<0.05）；模型组大鼠TNF- α为315.73±19.47、IL-6为231.97±14.65、IL-1 β为435.83±28.67、IL-18为382.56±26.84，蛋白表达水平NLRP3为2.41±0.18、ASC为2.23±0.15、caspase-1为2.15±0.16，与对照组相比均升高（ P<0.05）。AND低、中、高剂量组大鼠的粪便性状评分分别为5.38±0.46、4.57±0.38、3.31±0.27，粪便含水量分别为54.68±3.67、46.87±3.75、38.11±3.10，AWR评分分别为1.79±0.16、1.35±0.10、0.69±0.04，与模型组相比均降低（ P<0.05）；AND低、中、高剂量组大鼠TNF- α分别为268.65±17.23、224.91±16.36、178.16±14.65，IL-6分别为187.74±14.57、159.64±11.39、124.18±8.62，IL-1 β分别为369.51±21.96、314.72±23.64、263.93±16.82，IL-18分别为334.72±25.17、280.16±21.43、235.67±19.32，蛋白表达水平NLRP3分别为1.94±0.15、1.56±0.12、1.25±0.09，ASC分别为1.89±0.14、1.61±0.13、1.28±0.10，caspase-1分别为1.76±0.14、1.49±0.11、1.20±0.09，与模型组相比均降低（ P<0.05）。 结论:AND可能通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路减轻IBS-D大鼠的肠道炎症。

穿心莲为我国重要的南药之一,用于清热解毒、凉血消肿,其主要活性成分穿心莲内酯具有抗癌、抗HIV病毒、抗炎、保肝等功效.然而,穿心莲内酯人工合成难度较大,主要从人工栽培的植物原料中提取,栽培植物原料的质量因受土壤、气候、水肥管理等各种因素的影响而参差不齐,穿心莲生长周期长且占用土地资源.植物离体培养技术在种苗快繁及活性成分积累等方面都具有显著优势,是实现穿心莲活性成分快速、高效生产的重要途径之一.穿心莲组织离体再生技术体系日益完善,从外植体到完整植株的组织离体再生技术日渐成熟,已在种苗繁育、倍性育种等方面有了一定的应用.同时,在穿心莲愈伤组织培养、细胞悬浮培养、不定根培养、毛状根培养过程中,通过优化培养条件和使用适宜的诱导子可大幅增加培养物中穿心莲内酯等活性成分的积累.该文分别从穿心莲组织、细胞、不定根及毛状根培养等方面,全面系统地综述了近年来国内外关于穿心莲离体培养技术以及其生产穿心莲内酯的研究进展,以期促进穿心莲离体培养技术的发展与应用,为离体生产穿心莲内酯的研究提供参考.此外,还提出了未来在穿心莲离体培养技术及通过该技术生产穿心莲内酯的研究中需重点关注的 3 个方面:(1)熟化完善穿心莲组织离体再生技术体系,建立全面系统的评价体系;(2)优化培养条件和高效诱导子联用,进一步提高穿心莲内酯等重要活性成分产量;(3)开展通过细胞悬浮培养技术生产穿心莲内酯的生物反应器培养研究.

目的:对穿心莲糖苷水解酶(ApGH)基因进行克隆、生物信息学分析、原核表达和相对表达量分析.方法:取穿心莲新鲜叶片,提取RNA并反转录为互补脱氧核糖核酸(cDNA)作为模板,以穿心莲转录组中筛选到的糖苷水解酶ApGH基因开放阅读框(ORF)设计特异性引物,进行聚合酶链式反应(PCR)扩增,经测序后获得的基因序列利用生物信息学软件预测基因编码蛋白特征,构建原核表达载体在大肠埃希菌中诱导表达目的蛋白质,并利用实时荧光定量PCR分析ApGH基因的表达模式.结果:克隆所得ApGH基因的ORF全长 1734 bp,编码 577个氨基酸(GenBank登录号:OR887606).ApGH为稳定亲水蛋白质,无信号肽和跨膜结构域,属于糖苷水解酶家族;系统进化分析表明,ApGH归属于GH1 家族.将ApGH基因构建到原核表达载体HIS-MBP-pET28a上,在大肠埃希菌Transetta(DE3)中成功表达出重组蛋白质.实时荧光定量PCR检测结果表明,ApGH基因在叶中表达量最高,茎和根中表达量较低.结论:克隆得到穿心莲ApGH基因并对其蛋白质序列特征进行了系统分析,证明其在大肠埃希菌中成功表达重组蛋白质,且主要在穿心莲叶中表达.研究结果为进一步探索穿心莲糖苷水解酶的催化功能提供了依据.

分子生药学是一门新兴的交叉学科,以分子生物学和中药学为基础,旨在研究药用植物的次生代谢产物合成和分子调控功能.穿心莲Andrographis paniculata是一种传统大宗中药材,具有保肝利胆、清热解毒和抗菌消炎等重要功效.穿心莲生产过程中受品种、产地环境、种植技术等原因造成的品质不稳定是穿心莲产业持续发展的重要限制因素,基于分子生药学的研究手段,采用现代组学技术进行穿心莲次生代谢产物调控研究已成为解决其品质问题的关键方法.该文总结了近年来穿心莲分子生药学领域的研究成果,包括资源的分子鉴定、遗传多样性、多组学技术、有效成分生物合成和种质创新等,并对该领域的发展趋势进行了展望.深入推动穿心莲分子生药学研究将为进一步开发其药用价值提供更加科学和有效的技术支持,为穿心莲新品种培育提供新思路,有效推动穿心莲产业的高质量可持续发展.

目的 探讨穿心莲内酯对DM大鼠IR、菌群失调及Notch/锌指蛋白转录因子1(Snail1)信号通路的影响.方法 选取70 只SPF级Wistar雄性大鼠,其中30 只进行穿心莲内酯LD50 试验,确定致死量后选取50 mg/kg进行给药及观察,其余40 只中10 只作为空白对照组(NC),30 只建立DM模型,共28 只建模成功,分为T2DM组(n=9)、二甲双胍灌胃组(Met,n=9)及穿心莲内酯灌胃组(And,n=10).NC、T2DM组不做处理,干预 14 d后观察各组变化.结果 与NC组比较,T2DM、Met、And组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、拟杆菌门、厚壁菌门丰度水平、Notch、Snail1 mRNA及蛋白表达、阳性表达率升高(P<0.05),乳酸杆菌、双歧杆菌丰度水平降低(P<0.05).与T2DM组比较,Met、And组乳酸杆菌、双歧杆菌丰度水平升高(P<0.05),HOMA-IR、拟杆菌门、厚壁菌门丰度水平、Notch、Snail1 mRNA及蛋白表达、阳性表达率降低(P<0.05).结论 DM大鼠经穿心莲内酯干预后IR缓解,菌群失调改善,Notch/Snail1信号通路受抑制.

目的 探讨中药有效成分穿心莲内酯对角膜镰刀菌生物膜形成及其黏附能力的影响.方法 采用结晶紫染色法评估不同浓度穿心莲内酯作用下临床多重耐药角膜镰刀菌株的初始黏附及生物膜形成能力.结果 与未加药对照组相比,培养2 h、4 h,抑制50％的镰刀菌孢子黏附的穿心莲内酯浓度分别为64、512 μg/mL;培养24 h,角膜镰刀菌表现出强生物膜形成能力,穿心莲内酯在2 048 μg/mL下可抑制其50％的生物膜形成.结论 穿心莲内酯可显著抑制角膜镰刀菌的初始黏附,并对其生物膜形成有一定的抑制作用.