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基于细胞和斑马鱼胚胎试验的5种新疆香阿魏毒性研究
编辑人员丨3天前
目的:探讨5种新疆香阿魏(准噶尔阿魏、多伞阿魏、山地阿魏、全裂叶阿魏、荒地阿魏)在体外试验中的毒性及其毒性部位。方法:用95%乙醇回流法制备5种香阿魏乙醇提取物。将不同浓度的5种香阿魏乙醇提取物分别加入人胚肾上皮细胞(HKC)、人正常肝细胞(L02细胞)和斑马鱼胚胎培养液中,同时设空白组和正常对照组,计算37.0 ℃培养24 h的HKC和L02细胞增殖抑制率和培养24、48和72 h斑马鱼胚胎存活率。从5种香阿魏中选择毒性最强的1种,制备其不同极性部位(石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和正丁醇和水)提取物进行上述细胞毒性和斑马鱼胚胎毒性试验,以明确其不同部位的毒性。结果:细胞毒性试验显示,5种香阿魏乙醇提取物对HKC和L02细胞增殖的半数抑制率( IC50)均以准噶尔阿魏为最低(70.92 μg/ml和42.33 μg/ml),以多伞阿魏为最高(107.80 μg/ml和97.92 μg/ml)。斑马鱼胚胎毒性试验显示,1.0 μg/ml给药组培养48 h时准噶尔阿魏组即出现胚胎死亡,存活率为70%(14/20),其他4组胚胎存活率均为100%(20/20);10.0 μg/ml给药组胚胎培养24 h时多伞阿魏组胚胎存活率为50%(10/20),其他4组胚胎存活率均为0(0/20)。采用准噶尔阿魏的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、水饱和正丁醇和水部位提取物进行细胞毒性试验,HKC和L02细胞增殖的 IC50均以石油醚部位组为最低(77.35 μg/ml和67.73 μg/ml),以水部位组为最高(731.52 μg/ml和364.09 μg/ml);斑马鱼胚胎毒性试验中,石油醚部位组的斑马鱼胚胎存活率最低,给药浓度为3.0 μg/ml在72 h时下降到50%,10.0 μg/ml在24 h时为50%,48 h和72 h以及在30.0 μg/ml给药浓度的所有观察时间胚胎存活率均为0。 结论:5种新疆香阿魏中准噶尔阿魏的毒性最大,多伞阿魏毒性最小。准噶尔阿魏毒性成分可能多聚集在石油醚部位。
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编辑人员丨3天前
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阿魏属药用植物的物质基础
编辑人员丨2023/8/6
阿魏属在植物分类学上归类为伞形科,全球约150余种,其中13个物种在我国药用.本文评述其化学成分和生物学活性以及临床应用.阿魏属药用植物中单萜、倍半萜和香豆素类化合物无论是在含量上还是在化学结构多样性上,占绝对优势地位,它们可能是阿魏属药用植物的重要生物活性物质基础之一.最具特色的是该属的大部分单萜或倍半萜类化合物在化学结构类型上杂合香豆素的结构单元.该属药用植物的许多活性诸如细胞毒、抗菌、抗病毒、P-糖蛋白抑制和抗炎等皆与单萜杂合香豆素或倍半萜杂合香豆素化合物有关.这些研究结果能够用于阿魏属药用植物的药用亲缘学研究.
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编辑人员丨2023/8/6
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多伞阿魏体外抗胃癌活性筛选、细胞凋亡及周期阻滞机制
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究确定新疆特色维族药多伞阿魏体外抗胃癌活性部位及其敏感胃癌细胞系,并探讨多伞阿魏诱导胃癌细胞凋亡和细胞周期阻滞情况,为其进一步在抗胃癌方面的研究、开发与应用提供实验依据.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同质量浓度多伞阿魏不同提取物(挥发油,95%乙醇提取物,及其石油醚部位,三氯甲烷部位,乙酸乙酯部位,正丁醇部位,水部位)分别对5种胃癌细胞系(AGS,MKN-45,BGC-823,MGC-803,SGC-7901)的增殖抑制作用;采用Hoechst33258荧光染色法观察多伞阿魏挥发油和三氯甲烷部位对胃癌细胞AGS和SGC-7901的影响情况;并应用细胞流式仪检测多伞阿魏不同提取部位作用胃癌细胞AGS和SGC-7901的凋亡和周期阻滞影响情况.结果:与空白组比较,多伞阿魏挥发油,95%乙醇提取物,石油醚部位,三氯甲烷部位,乙酸乙酯部位对5种胃癌细胞均有不同程度的增殖抑制作用(P<0.05),并呈现浓度依赖关系.挥发油对胃癌细胞AGS呈现出较强的增殖抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为(7.98 ± 2.62)mg·L-1,三氯甲烷部位对5种胃癌细胞系均具有较好的敏感性,对胃癌细胞SGC-7901最为敏感,其IC50为(8.73 ± 0.55)mg·L-1,而正丁醇部位和水部位未呈现出明显的细胞增殖抑制作用;多伞阿魏挥发油和三氯甲烷部位作用胃癌细胞AGS和SGC-7901后,细胞核被Hoechst33258染色呈亮蓝色,且随着药物浓度的增加蓝色荧光越强;流式细胞凋亡检测结果显示,多伞阿魏不同提取部位诱导胃癌细胞AGS和SGC-7901发生不同程度的凋亡(P<0.05),且随着药物浓度的增加,细胞总凋亡率明显增高;流式细胞周期检测结果显示,与空白组比较,多伞阿魏挥发油使胃癌细胞AGS的周期发生明显改变,细胞休眠期/DNA复制前期(G0/G1期)细胞比例增高,DNA复制期(S期)细胞比例降低,DNA复制后期/有丝分裂期(G2/M期)比例降低(P<0.05);与空白组比较,多伞阿魏三氯甲烷部位使胃癌细胞SGC-7901的周期也发生显著改变,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例增高,G2/M期比例降低(P<0.05).结论:多伞阿魏挥发油对胃癌细胞AGS呈现出较强的细胞毒活性,三氯甲烷部位对5种胃癌细胞均具有较好的增殖抑制作用,尤其对胃癌细胞SGC-7901 最为敏感;多伞阿魏各提取部位诱导胃癌细胞AGS和SGC-7901主要发生晚期凋亡,而多伞阿魏乙酸乙酯部位诱导胃癌细胞AGS主要发生细胞早期凋亡;多伞阿魏挥发油能够将胃癌细胞AGS阻滞于G0/G1期,阻止细胞进入S期及G2/M期;伞阿魏三氯甲烷部位将胃癌SGC-7901细胞周期阻滞于S期.研究表明多伞阿魏挥发油和三氯甲烷部位具有较好的抗胃癌活性作用,具有潜在的研究价值和开发利用空间,并为多伞阿魏体内抗胃癌及其抗胃癌机制研究提供了一定的科学依据.
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编辑人员丨2023/8/6
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多伞阿魏的繁育系统及其生态适应性
编辑人员丨2023/8/6
多伞阿魏(Ferula ferulaeoides)是新疆特有的类短命植物,具有巨大的生态作用和潜在的经济价值.实验通过研究多伞阿魏的花部形态特征、繁殖系统及传粉昆虫,来阐明其对生态环境的响应.结果 表明:(1)多伞阿魏花序花期一般持续10~ 15 d,单花花期为7~10d,两性花呈现雌雄异位和雌雄异熟的现象;(2)其繁育系统类型为兼性异交,存在自交部分亲和,自然结果率较高,为72.24%;(3)传粉昆虫多种多样,其中以双翅目和膜翅目昆虫居多;(4)开花当天的花粉活力呈单峰曲线,在12:00时活力最高,柱头可授性在花药完全散粉后第2天最强.
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编辑人员丨2023/8/6
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多伞阿魏挥发油化学成分GC-MS分析及D-柠檬烯抗胃癌活性研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 分析多伞阿魏新鲜药材挥发油的化学成分,初步探讨D-柠檬烯体外抗胃癌作用.方法 采用GC-MS分析多伞阿魏挥发油的化学成分;采用MTT法检测D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS和SGC-7901的增殖抑制作用;采用Hoechst33258荧光染色法观察D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS的影响;应用流式细胞仪检测D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS凋亡的影响.结果 多伞阿魏挥发油主要的化学成分有α-蒎烯(6.76%)、崁烯(8.38%)、α-月桂烯(4.66%)、3-蒈烯(4.84%)、D-柠檬烯(52.84%)、乙酸龙脑酯(5.24%)等.MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS和SGC-7901均具有不同程度的增殖抑制作用,呈现剂量依赖关系,其中D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS的增殖抑制作用较强,IC50为(0.87±0.05)mmol·L-1;D-柠檬烯作用于人胃癌细胞AGS后,细胞核被Hoechst 33258染色呈亮蓝色,随着药物浓度的增加蓝色荧光越强;流式细胞凋亡检测结果显示,与空白对照组比较,D-柠檬烯可诱导人胃癌细胞AGS发生凋亡,呈现剂量依赖关系.结论 多伞阿魏挥发油的主要物质基础为单萜类、倍半萜类化合物,其中D-柠檬烯的相对百分含量最高;D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS和SGC-7901均具有一定的增殖抑制作用,其中D-柠檬烯对人胃癌细胞AGS的诱导凋亡活性最强.
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编辑人员丨2023/8/5
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多伞阿魏的研究进展
编辑人员丨2023/8/5
多伞阿魏是我国新疆维吾尔族、哈萨克族等少数民族常用传统药材,主要含有挥发油、萜类、香豆素类等化学成分,具有显著的杀虫、抑菌、抗肿瘤等药理活性.以中国知网、万方和PubMed数据库作为检索平台,检索项选择关键词和全文,以“多伞阿魏”和“Ferula ferulaeoides”为检索词.检索多伞阿魏1993-2020年国内外的文献报道与专利申报,检索得论文58篇,专利6项.文献主要涉及多伞阿魏的生药学、化学成分、药理活性、植物生态学等方面研究,专利主要涉及医药应用、提取工艺和药材鉴定.通过检索有关多伞阿魏的文献,对其研究现状进行归纳分析,旨在为多伞阿魏临床应用和开发利用提供一定的参考依据.
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编辑人员丨2023/8/5
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多伞阿魏对人胃癌MGC-803裸鼠移植瘤生长及凋亡的影响
编辑人员丨2023/8/5
该文系统研究了多伞阿魏活性部位对人胃癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤生长及凋亡的影响.采用细胞悬液种植法建立人胃癌MGC-803裸鼠皮下异位移植性肿瘤模型,通过抑瘤率、脏器指数等评价多伞阿魏活性部位对移植瘤生长的影响.采用HE染色法、TUNEL染色法、RT-PCR法、Western-blot法、ELISA法分别进行病理学检查,凋亡情况观察,以及凋亡相关基因、蛋白、细胞因子表达水平检测.结果 表明,与模型组比较,多伞阿魏活性部位低、中、高剂量组对裸鼠移植瘤均有不同程度的抑制作用,随着药物浓度的增加,凋亡比率增高.与模型组比较,多伞阿魏可下调裸鼠血液中survivin mRNA表达水平,不同程度升高裸鼠肿瘤组织中Bax,Bcl-2,caspase-3和caspase-9蛋白表达水平;多伞阿魏活性部位高剂量组可下调裸鼠血浆中IL-10和TGF-β1含量.结果 表明,多伞阿魏能显著抑制人胃癌MGC-803皮下异位移植瘤的生长,其作用机制可能与下调survivinmRNA表达水平,上调凋亡相关蛋白Bax,caspase-3和caspase-9等表达水平有关.
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编辑人员丨2023/8/5
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多伞阿魏的冰冻切片方法建立及挥发油、香豆素类成分组织化学定位分析
编辑人员丨2023/8/5
目的:建立多伞阿魏的冰冻切片方法,并对其不同器官中挥发油和香豆素类成分进行组织化学定位研究.方法:以多伞阿魏根、茎、叶柄、叶为材料,考察蔗糖保护剂质量分数、液氮速冻时间、包埋条件、切片厚度、冷冻温度和时间、后处理方式等影响因素,对比冰冻切片的完整度、显微效果、伸卷度和清晰度,进而筛选最佳切片条件.分别利用苏丹Ⅳ染色法和荧光显微镜技术定位多伞阿魏的挥发油和香豆素类成分.结果:多伞阿魏根、茎、叶柄、叶冰冻切片的最佳条件为根以质量分数10%、15%、20%梯度蔗糖作为保护剂;茎和叶柄以质量分数10%、20%、30%梯度蔗糖作为保护剂;叶以质量分数20%、25%、30%梯度蔗糖作为保护剂;以胶水-水(2:1)作为包埋剂;液氮速冻20 s,-25℃回温30 min;-20℃下切片,切片厚度25 μm;贴片后用相同质量分数的蔗糖溶液冲洗,将切片在冰袋上静置一段时间,于常温条件下保存,其中蔗糖保护剂质量分数是最主要的影响因素.组织化学定位结果显示,多伞阿魏4种器官中挥发油和香豆素类成分均主要分布于树脂道.结论:该研究首次建立了多伞阿魏冰冻切片方法,该方法成片率高、步骤相对简化;多伞阿魏的挥发油和香豆素类成分主要积累在树脂道中.
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编辑人员丨2023/8/5
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新疆3种阿魏不同极性部位的抗肿瘤活性谱效关系研究
编辑人员丨2023/8/5
目的:筛选出新疆3种阿魏的抗肿瘤活性部位,并明确不同极性部位高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的抗肿瘤活性谱效关系.方法:通过建立不同极性部位HPLC色谱,经双变量Pearson相关分析,分析新疆3种阿魏不同极性部位对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率和各主要色谱峰变量之间的相关性.结果:新疆阿魏、多伞阿魏的乙醇提取物对人胃癌SGC-7901细胞抑制作用较强,IC50分别为42.27、28.31 mg/L;抑制作用较强的部位为石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯部位,水饱和正丁醇部位较差;阜康阿魏抑制作用较弱IC50为130.51 mg/L.新疆阿魏、阜康阿魏和多伞阿魏在86 min与色谱峰呈正相关(P<0.05);新疆阿魏和阜康阿魏在75 min与色谱峰呈正相关(P<0.05),其中75、86 min时的色谱峰所代表的化合物分别为lehmannolol和lehmannolone.结论:lehmannolol和lehmannolone可能是阿魏的抗肿瘤活性成分.
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编辑人员丨2023/8/5
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新疆阿魏雄性不育的细胞形态学研究
编辑人员丨2023/8/5
新疆阿魏是特产于我国新疆的伞形科阿魏属多年生一次结实草本植物,属于国家二级保护的濒危植物.其种群中除了该科植物典型的雄全同株个体以外,还具有一定数量雄性不育的雌株.为了探究新疆阿魏的雄性不育现象及其影响因素,该文从细胞形态学角度对种群中的雌株以及雌花的形态特征进行了观测,采用石蜡切片技术对功能性雌花雄蕊的花药败育过程进行了观察.结果表明:(1)雌株3月底萌动,4月中旬进入花期,5月底果实成熟;物候期与雄全同株个体相同.(2)植株高度(71.00±10.92)cm和直径(71.67±17.64)cm、一级分支(23.83±2.04);基生叶长(33.41±11.63)cm、宽(24.47±8.60)cm;在植株大小、基生叶大小等方面雌株与雄全同株个体无差异.(3)在雌株上,一级分支和二级分支均为雌花序,均可结实;雌花序的伞幅数/每复伞花序(13.22±4.70)、花数/每花序(12.03±2.30)、总花数/每复伞花序(159.08)均高于两性花序;雌株比雄全同株个体产生更多可结实的花,形成更多具有杂种优势的异交后代.(4)雌花序中,花排列紧密,花间距小于两性花序和雄花序;开花时,雌花花瓣微微张开,与两性花、雄花花瓣向下反折的形态明显不同.(5)功能性雌花的花瓣形态、雌蕊形态及大小与两性花/雄花无差异,但是花瓣大小[长(1.79±0.39)mm、宽(1.10±0.21)mm]、雄蕊长度(0.6~1.3)mm最小,花药退化,无花粉.(6)在雌花退化雄蕊的花药发育过程中,出现了花药壁和雄配子体的异常发育;花药败育发生在造孢细胞时期至小孢子四分体时期.综上所述,新疆阿魏雄性不育植株的营养供给与雄全同株个体相同,但是资源分配模式不同;功能性雌花在形态和功能上明显区别于两性花和雄花;其雄蕊败育的主要影响因素是药壁结构的异常发育,尤其是绒毡层的缺失导致了小孢子败育.
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编辑人员丨2023/8/5
