目的:探讨多嘧啶序列结合蛋白2(PTBP2)在乳腺癌组织及细胞中的表达，探讨PTBP2通过调控上皮-间充质转化(EMT)影响乳腺癌细胞的侵袭和迁移的具体分子机制。方法:利用蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测PTBP2在乳腺癌细胞中的表达水平。并利用Transwell实验、侵袭实验检测PTBP2对乳腺癌细胞迁移侵袭能力的影响。两组之间的比较采用独立样本 t检验。 结果:Western blot及RT-PCR结果表明PTBP2在乳腺癌组织中的表达水平明显高于正常组织(7.22±0.27比3.02±0.16， t＝13.33， P<0.01)；敲低PTBP2表达后，MDA-MB-231细胞迁移能力、侵袭能力明显弱于对照组(30.20±1.56比113.80±4.23， t＝18.52， P<0.01；9.60±1.60比29.20±4.28， t＝4.29， P<0.01)；并导致乳腺癌细胞发生MET转变。过表达PTBP2表达后，MCF7细胞迁移能力、侵袭能力明显强于对照组(136.00±5.33比63.40±4.32， t＝10.57， P<0.01；36.20±1.82比14.20±1.65， t＝8.92， P<0.01)并导致乳腺癌细胞发生EMT转变。PTBP2表达下调后，MDA-MB-231细胞中EMT相关蛋白表达水平明显低于对照组；PTBP2表达上调后，MCF7细胞中EMT相关蛋白表达水平明显高于对照组。PTBP2通过调控EMT的转录因子Slug基因，从而调控乳腺癌细胞的迁移、侵袭及MET。 结论:PTBP2在乳腺癌中高表达，并通过上调Slug基因表达促进乳腺癌细胞发生EMT。

目的:明确多聚嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein, PTB)在正常人和骨质疏松大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)成骨分化中的作用及其机制。方法:收集中国医学科学院整形外科医院收治的4例齿槽嵴裂患儿术后废弃骨髓血，原代分离培养人BMSCs并诱导分化为成骨细胞，RT-PCR和蛋白质印迹法检测PTB在诱导分化7 d和14 d的表达水平；应用shRNA技术对人BMSCs中PTB的表达进行敲减，茜素红染色和荧光定量PCR评价其对成骨分化的影响；体外分别应用浓度为10 ng/ml和40 ng/ml的肿瘤坏死因子α(TNF-α) 处理人BMSCs，荧光定量PCR和茜素红染色检测其对PTB表达及成骨分化能力的影响；流式细胞术检测人BMSCs经PTB敲减后细胞内活性氧(ROS)含量。10只6个月龄雌性SD大鼠采用随机数字表法随机分为卵巢切除骨质疏松模型组和假手术组，每组5只，荧光定量PCR检测其BMSCs中PTB的表达变化。各项定量数据以均值±标准差表示，2组间比较应用 t检验， P<0.05为差异具有统计学意义。 结果:BMSCs成骨诱导分化7 d和14 d PTB表达显著升高，敲减PTB并成骨诱导14 d后，成骨标志基因 RUNX2和 ALP相对表达量显著下降，分别为对照组的0.74±0.15和0.29±0.18倍( t＝3.490、 P＝0.039， t＝7.983、 P＝0.004)，且茜素红染色阳性的矿化结节形成减少。10 ng/ml TNF-α( t＝3.528, P＝0.039)和40 ng/ml TNF-α( t＝4.306, P＝0.023)均下调BMSCs中PTB表达，并抑制成骨分化。敲减PTB后BMSCs细胞内ROS含量(720.7±129.7)较对照组(1 204.0±300.1) 下降，差异具有统计学意义( t＝4.872, P＝0.040)。相比于假手术组(0.001 66±0.000 18)，卵巢切除骨质疏松模型大鼠BMSCs中PTB的相对表达量(0.001 25±0.000 12)显著降低( t＝3.217, P＝0.032)。 结论:PTB的表达可促进BMSCs成骨分化，PTB敲减介导的ROS含量下调是其调控BMSCs成骨分化的一个重要机制。

目的:检测多嘧啶序列结合蛋白1(PTBP1)在前列腺癌中的表达水平，并探究PTBP1对前列腺癌细胞增殖、迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:运用UALCAN数据库分析PTBP1基因在前列腺癌组织中的表达水平、PTBP1基因与前列腺癌患者总生存期(OS)的关系，收集前列腺癌及癌旁组织，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)技术检测前列腺癌及癌旁组织、正常前列腺上皮细胞及前列腺癌细胞中PTBP1 mRNA和蛋白质的相对表达水平。在前列腺癌PC3细胞中转染siRNA-PTBP1，将细胞分为转染组(si-PTBP1)和对照组(NC)，采用RT-qPCR和Western blot验证转染效率。利用细胞克隆形成实验和细胞计数盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力；利用Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力；利用Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)及EMT标志蛋白的表达水平；所有结果应用SPSS 26.0统计软件分析。结果:UALCAN数据库显示PTBP1基因在前列腺癌组织中表达水平升高( P<0.001)，患者总生存期(OS)与PTBP1表达水平呈负相关( P<0.05)；RT-qPCR和Western blot结果表明前列腺癌组织中PTBP1 mRNA和蛋白相对表达水平高于癌旁组织(mRNA：2.31±0.12比1.02±0.11， t＝14.343， P<0.05；蛋白：101.00±9.54比42.33±8.50， t＝7.951， P<0.05)，PC3和DU145细胞中PTBP1相对表达水平高于正常前列腺上皮细胞(mRNA：7.13±0.09比1.02±0.13、4.31±0.11比1.02±0.13， t＝66.578、33.310， P<0.05；蛋白：202.67±11.50比101.33±9.07、172.67±13.05比101.33±9.07， t＝11.979、7.773， P<0.05)；转染组细胞PTBP1 mRNA和蛋白相对表达水平低于对照组(mRNA：0.32±0.09比1.03±0.09， t＝9.040， P<0.05；蛋白：43.33±11.50比104.33±11.06， t＝6.621， P<0.05)；细胞克隆形成实验结果表明转染组细胞克隆形成数目低于对照组[(81.33±11.50)个比(181.00±12.00)个， t＝10.385， P<0.05]；CCK-8实验中，转染组细胞在48、72、96 h的增殖活性均低于对照组(48 h：0.40±0.09比0.62±0.11、72 h：0.63±0.11比1.01±0.09、96 h：0.85±0.11比1.65±0.09， t＝2.076、4.692、9.549， P<0.05)；Transwell迁移实验中，转染组细胞迁移数目低于对照组[(43.33±11.50)个比(131.33±10.59)个， t＝9.744， P<0.05]，侵袭实验中，转染组细胞侵袭数目低于对照组[(36.00±10.54)个比(91.67±8.62)个， t＝7.082， P<0.05]；此外，Western blot实验结果表明转染组细胞β-catenin、N-cadherin和Vimentin的蛋白表达水平低于对照组(β-catenin：99.33±8.02比24.33±8.02， t＝11.452， P<0.05；N-cadherin：101.67±8.50比21.33±7.51， t＝12.267， P<0.05；Vimentin：102.67±8.50比20.00±10.15， t＝10.813， P<0.05)，转染组细胞E-cadherin的蛋白表达水平高于对照组(100.67±7.51比189.33±8.50， t＝13.539， P<0.05)，以上差异均有统计学意义。 结论:PTBP1在前列腺癌组织和细胞中异常高表达，可促进前列腺癌细胞的增殖、迁移和EMT。

目的:观察多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子（PSF）对缺氧诱导的人视网膜微血管内皮细胞（hRMECs）功能的影响。方法:采用三质粒系统构建慢病毒颗粒（LV）-PSF。LV-PSF体外感染hRMECs后通过流式细胞计数法测定其感染效率。应用实时定量PCR （RT-PCR）检测经LV-PSF感染的hRMECs中PSF mRNA表达水平。将实验分为体内和体外两部分。体内实验：7日龄健康C57B/L6小鼠20只，采用随机数字表法分为正常组、氧诱导视网膜病变（OIR）组、OIR+LV-空载体（Vec）组和OIR+LV-PSF组，每组5只。除正常组外，其余3组构建OIR模型。OIR组除缺氧刺激外，不做其余处理。OIR+LV-Vec组和OIR+LV-PSF组小鼠分别玻璃体腔注射LV-Vec或LV-PSF。观察LV-PSF对视网膜新生血管（RNV）形成的影响。体外实验：将hRMECs分为正常组、缺氧组、空载组、PSF高表达组。正常组为正常体外培养的hRMECs；缺氧组为缺氧刺激3 h恢复正常培养条件24 h的hRMECs；空载组、PSF高表达组分别为用LV-Vec、LV-PSF感染48 h，再用缺氧刺激3 h恢复正常培养条件24 h的hRMECs。采用MTT比色法观察PSF对细胞增生能力的影响。采用细胞划痕实验和Transwell迁移实验观察PSF对缺氧刺激下细胞迁移能力的影响。采用RT-PCR观察各组细胞中HIF-1α、VEGF及PSF的mRNA表达。结果:成功构建可稳定高表达PSF的LV-PSF，流式细胞仪测定其感染效率为97%，RT-PCR测得经LV-PSF感染的hRMECs中PSF mRNA水平明显上调。体内实验：OIR组、OIR+LV-Vec组小鼠RNV面积较正常组明显增加（ t=18.31、43.71），OIR+LV-PSF组小鼠RNV面积较OIR组（ t=11.30）、OIR+LV-Vec组（ t=15.47）明显减小，差异均有统计学意义（ P <0.05 ）。体外实验：MTT比色法检测结果显示，缺氧组hRMECs增生能力较正常组明显增强（ t=2.57），PSF高表达组hRMECs增生能力较正常组、缺氧组、空载组明显降低（ t=5.26、5.46、3.73 ），差异均有统计学意义（ P<0.05 ）。细胞划痕实验结果显示，缺氧刺激3 h恢复正常条件24 h或48 h均可刺激缺氧组与空载组细胞明显迁移（ t=8.35、13.84， P<0.05 ）；而与缺氧组与空载组比较，PSF高表达组细胞迁移不明显（ t=10.99、18.27、9.75、8.93、26.94、7.01 ， P <0.05）。Transwell小室实验结果显示，正常组和空载组微孔膜上染色的细胞数较多，而PSF高表达组微孔膜上染色的细胞数明显减少（ t=9.33、6.15， P<0.05）。RT-PCR检测结果显示，与正常组比较，缺氧组、空载组hRMECs中HIF-1α、VEGF的mRNA表达明显增加（ t=15.23、21.09， P<0.05），PSF mRNA表达无明显变化（ t=0.12、2.15， P<0.05 ）；与缺氧组、空载组比较，PSF高表达组hRMECs中HIF-1α、VEGF的mRNA表达明显下降（ t=10.18、13.10， P<0.05），PSF mRNA表达明显增加（ t=65.00、85.79， P<0.05 ）。 结论:PSF可减少OIR模型小鼠RNV面积。PSF可能通过HIF-1α/VEGF信号通路抑制缺氧诱导的hRMECs增生和迁移。

目的 探讨多聚胞嘧啶结合蛋白(PCBP)3过表达对结直肠癌(CRC)细胞增殖和迁移的影响.方法 收集2022年5至6月在嘉兴市第一医院行CRC切除术患者的CRC组织及癌旁正常组织标本各10份,比较CRC组织与癌旁正常组织中PCBP3 mRNA及蛋白表达水平.取人CRC细胞系HCT116、HT29,使用含有PCBP3 CDS区序列的过表达质粒分别转染HCT116和HT29细胞(设为HCT116过表达组、HT29过表达组),未经转染的HCT116和HT29细胞分别设为HCT116对照组、HT29对照组,检测PCBP3过表达对CRC细胞增殖、侵袭能力以及E-钙黏蛋白(E-cadherin)、裂解的胱天蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达水平的影响.结果 CRC组织中PCBP3 mRNA及蛋白表达水平均明显低于癌旁正常组织(均P＜0.05).与对照组比较,PCBP3过表达可明显减弱HCT116和HT29细胞增殖和侵袭能力(均P＜0.05),上调HCT116和HT29细胞E-cadherin、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平(均P＜0.05).结论 PCBP3过表达能抑制CRC细胞增殖和侵袭,可能通过上调E-cadherin、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平发挥作用.

Poly(rC)-结合蛋白[poly (C)-binding proteins,PCBPs]具有高度亲和力,以及与多聚胞嘧啶结合的特殊序列.PCBPs在哺乳动物细胞中广泛表达,其包含4种亚型:PCBP1-4.在真核细胞中,PCBP1通过与基因启动子的特殊位点结合来发挥信号依赖与协调转录调控作用.PCBPs功能多样,通过酵母双杂交研究发现PCBP1在蛋白-RNA,蛋白-蛋白相互作用的层面更是参与多个功能环路,发挥了多种胞内作用.目前PCBP1在各个系统肿瘤,病毒感染,铁离子的转运等方面成为研究热点.本文就PCBP1的重要生物学功能进行相关综述.

目的 高表达多聚嘧啶序列结合蛋白相关剪接因子(PSF)对糖基化终产物(AGEs)诱导下视网膜Müller胞凋亡的影响.方法 实验研究.体外培养的人Müller细胞分为正常细胞组(N组)、空白对照组(N+AGEs组)、空载体对照组(Vec+AGEs组)及PSF高表达组(PSF+AGEs组).N组为常规培养的Müller细胞;N+AGEs组仅做转染处理并联合AGEs诱导;Vec+AGEs组、PSF+AGEs组利用转染试剂脂质体2000分别将增强型绿色荧光蛋白(pEGFP)空载体、pEGFP-PSF真核表达质粒导入Müller细胞并联合AGEs诱导.细胞转染24h后应用AGEs(150 μg/ml)诱导72 h,采用HE、Hoechst 33258染色观察各组细胞形态;分别采用MTT比色法、ELISA细胞凋亡试剂盒及2',7'-二氯荧光素二乙酸酯法检测N+AGEs组、Vec+AGEs组、PSF+AGEs组细胞生存力、细胞凋亡值及细胞内ROS水平.结果 N组细胞形态饱满,胞浆染色均一;N+AGEs组、Vec+AGEs组细胞体积缩小,胞质致密浓缩、嗜酸性染色增强;PSF+AGEs组细胞形态尚饱满,胞浆染色较均匀,胞核染色均一.N+AGEs组、Vec+AGEs组、PSF+AGEs组细胞生存力分别为0.42±0.11、0.35±0.12、0.68±0.12;细胞凋亡值分别为1.08±0.16、0.96±0.20、0.44±0.08;细胞内ROS水平分别为28 833.67±3 550.06、28 356.67±4 854.81、18 616.00±3 382.54.与N+AGEs组、Vec+AGEs组比较,PSF+AGEs组细胞生存力明显提高(F=20.65,P=0.000),细胞凋亡值(F=43.43,P=0.000)及细胞内ROS水平(F=18.86,P=0.000)明显降低,差异均有统计学意义.结论 高表达PSF通过抑制ROS产生来缓解AGEs诱导下人Müiller细胞凋亡,从而发挥对Müller细胞的保护作用.

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)FTX对慢性髓细胞性白血病(CML)伊马替尼(Imatinib)抵抗的影响及可能机制.方法 梯度诱导CML细胞K562伊马替尼抵抗的形成(抵抗组),采用等体积生理盐水处理CML细胞K562(敏感组),对处于对数生长期的抵抗组细胞转染LncRNA FTX-siRNA(转染组),对处于对数生长期的抵抗组细胞转染空白对照载体(对照组).采用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测抵抗组和敏感组细胞中Ln-cRNA FTX的相对表达量以及转染组和对照组细胞中多聚嘧啶序列结合蛋白1(PTBP1)mRNA的表达水平,CCK-8法检测伊马替尼对4组细胞的半抑制浓度(IC50),蛋白质印迹法(Western blot)检测4组细胞中PTBP1蛋白的相对表达量.结果 抵抗组细胞中LncRNA FTX的相对表达量明显高于敏感组(P﹤0.01);伊马替尼对抵抗组细胞的IC50值明显高于敏感组,对转染组细胞的IC50值明显低于对照组(P﹤0.01);抵抗组细胞中PTBP1蛋白的相对表达量明显高于敏感组,转染组细胞中PTBP1蛋白的相对表达量明显低于对照组(P﹤0.01);转染组和对照组细胞中PTBP1 mRNA的相对表达量比较,差异无统计学意义(P﹥0.05).结论 LncRNA FTX可通过抑制PTBP1蛋白的表达,介导CML细胞伊马替尼抵抗的形成.

丙型肝炎病毒（HCV）与其它的黄病毒属的成员一样，其基因组的3＇-非翻译区（NTR）是基因组复制的关键结构位点。HCV的3＇-NTR区的核苷酸序列相互折叠，形成特殊的二级结构，与HCV NS5B以及HCV感染靶细胞中的蛋白质因子，如异源性细胞核核糖蛋白（hnRNP）或称为多聚嘧啶区结合蛋白（PTB）等结合成为HCV的复制酶（replicase）复合体，决定着HCV复制的过程。HCV3＇-结合蛋白的研究，有助于了解HCV的复制过程，为探讨抗HCV治疗的新技术，奠定坚实的基础。

多嘧啶序列结合蛋白(polypyrimidine tract binding protein,PTB)作为一种RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)能参与个体发育过程中的转录调控事件,其主要生物学功能包括选择性剪接、维持mRNA稳定性、蛋白质的转录翻译以及多聚腺苷酸化.本文主要阐述了PTB的生物学功能以及其在神经元转分化过程中与miR-124的关系,旨在为通过调控PTB促进非神经元细胞向神经元转分化提供理论依据,也为治疗神经系统疾病提供新的治疗策略.