目的 探讨合成MRI定量参数联合多重灵敏度编码扩散加权成像(multiplexed sensitivity encoding diffusion weighted imaging,MUSE-DWI)鉴别胶质瘤复发(progressive disease,PD)和治疗相关改变(treatment-related change,TRC)的应用价值.材料与方法 本研究于2020年9月至2022年11月期间,依据纳、排标准收集胶质瘤全切术后行完整的放、化疗治疗,定期MRI随访出现新发强化灶的患者45例,其中PD组26例、TRC组19例.所有患者均行MUSE-DWI、合成MRI及对比增强T1加权成像(contrast enhanced T1-weighted imaging,CE_T1WI)序列.测量强化区域表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)及增强前、后T1值(T1pre、T1post)、T2值(T2pre、T2post).采用独立样本t检验或Mann-Whitney U检验比较合成MRI定量参数和ADC值的组间差异,采用二元logistic回归及受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估单参数及其联合的诊断效能.结果 (1)PD T1pre高于TRC(P<0.05),T1post和ADC值低于TRC(P<0.05),两组间T2pre、T2post差异无统计学意义(P>0.05).(2)单参数分析时,ADC值诊断效能最高(AUC=0.878),其次是T1post、T1pre(AUC为0.783、0.745).T1post、T1pre两者联合时,诊断效能较单参数提高(AUC=0.850).多参数联合模型(T1post+T1pre+ADC)诊断效能最高(AUC=0.901).结论 合成MRI定量参数(T1post、T1pre)联合ADC值的多参数联合模型,在鉴别胶质瘤PD和TRC中具有一定价值.

目的 建立基于流式量子点微球技术的甲型流感病毒(FluA)和乙型流感病毒(FluB)抗原联检方法,为常见呼吸道病毒抗原多重检测打下基础.方法 分别使用自制的不同量子点编码微球和小鼠抗FluA/FluB核蛋白(NP)单克隆抗体进行偶联,在流式细胞仪上对已知浓度的甲乙型流感病毒抗原分别和同时进行检测,对检测条件进行优化,建立甲乙型流感病毒抗原联检方法,利用此方法对临床样本进行检测,与实时荧光定量PCR法(quantitative real-time PCR,qPCR)进行比对,验证此方法的临床性能.结果 建立了甲乙型流感病毒抗原联检方法,该方法的甲乙型流感病毒抗原的检出限分别为26.1 pg/ml和10.7 pg/ml,测量范围均为15.3～250 000 pg/ml.对临床样本检测,与qPCR比对一致性良好,阳性符合率为 57.4%,阴性符合率为 100%,总符合率 71.6%,并优于临床常用胶体金试剂(阳性符合率为 56.49%,阴性符合率为99.75%).结论 此流式量子点微球多重检测方法可以用于甲乙型流感病毒抗原的联检,其灵敏度较高、特异度好、检测范围广,可以为呼吸道常见病毒多重检测打下良好基础,在临床上具有应用前景.

目的 探讨多重灵敏度编码扩散加权成像(MUSE-DWI)在提高鼻咽癌图像质量的应用价值.方法 选取34例临床确诊的鼻咽癌患者,均行单次激发平面回波扩散加权成像(SS-EPI-DWI)和MUSE-DWI序列检查,对比2种序列的信噪比(SNR)、对比噪声比(CNR)、病灶清晰度、图像伪影、抗变形能力、表观扩散系数(ADC).结果 MUSE-DWI序列的SNR、CNR均高于SS-EPI-DWI(P＜0.01),病灶清晰度、图像伪影、抗变形能力的主观评分均优于SS-EPI-DWI,差异有统计学意义(P＜0.01).MUSE-DWI与SS-EPI-DWI的ADC值差异无统计学意义.结论 MUSE-DWI序列的SNR、CNR高,图像伪影少,抗变形能力好,病灶及周围结构清晰,在临床应用中更具优势.

目的 研究新型中药制剂对疟原虫的杀伤及对宿主的免疫影响.方法 应用将多重PCR扩增和液相芯片检测技术检测埃博拉病毒(EBV)、拉沙热病毒(LFV)、裂谷热病毒(RVFV)、马尔堡病毒(MRBV)、克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)、中东呼吸综合征病毒(MERSV),为相关输人性烈性传染病的检测提供一种技术储备.方法 建立6种相关病毒的多重PCR扩增反应体系,分别用每种病毒特异性核酸探针与不同编码的荧光微球进行偶联,将PCR扩增产物与偶联有不同核酸探针的微球混合物进行杂交反应,建立6种病毒的液相芯片检测方法,并进行特异性和灵敏度验证.结果 特异性检测结果表明不同病毒之间检测结果没有出现相互交叉干扰的现象,说明建立的6种烈性传染病病毒液相芯片检测方法用于不同病毒的检测具有良好的特异性;EBV检测核酸灵敏度为10-7 ng,LFV、MRBV、RVFV、CCHFV、MERSV检测灵敏度均为10-6 ng.结论 建立的可同时检测EVB等6种输入性烈性传染病病毒的方法具有较高的灵敏度和特异性,可用于相关输入性传染病疫情的应急检测.

目的 建立一种能够在单体系中同时检测产黄曲霉毒素真菌及3种潜藏性产毒真菌的多重实时荧光PCR快速检测方法.方法 分别根据产黄曲霉毒素真菌、赭曲霉、青霉和镰刀菌的蛋白活化基因aflR、ITS序列、β-微管蛋白编码区、LSrRNA,设计引物和探针,通过优化反应组分和反应条件,建立了可同时检测常见产毒真菌的实时荧光PCR方法,并对该方法的灵敏度和特异性进行了分析.结果 优化建立的反应体系对产黄曲霉毒素真菌、赭曲霉、青霉和镰刀菌的检测限分别可达到3.37×104、1.91×104、1.53×104和3.95× 104拷贝/反应.结论 本研究建立的多重实时荧光PCR检测方法特异性强,灵敏度高,可在2h内完成对产毒真菌的检测.

液相芯片技术是以不同荧光编码微球承载生物探针,在液相中进行生物分子之间的相互作用,利用流式细胞术进行检测的生物芯片技术.具有灵敏度高、特异性强、操作简单、反应快速、重复性好等特点,在生物医学领域得到广泛应用.本文就液相芯片技术在蚊媒病毒核酸、抗体或抗原和相关免疫分子检测中的研究进展进行综述.

目的 建立检测多种蚊媒病毒的液相芯片方法.方法 从NCBI数据库分别下载乙脑病毒(JEV)、登革病毒(DENV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)、寨卡病毒(ZIKV)、黄热病毒(YFV)、裂谷热病毒(RVFV)基因组序列,比对分析后,在各病毒保守区域分别设计扩增引物和检测探针,以标准品质粒为模板,建立多重PCR扩增体系;将核酸探针偶联至荧光编码微球,建立液相芯片检测方法,并对方法进行评价.结果 基于多重PCR和液相芯片技术的常见蚊媒病毒的检测方法能同时对其中任意1种、2种、3种、4种、5种和6种病毒进行检测,具有良好的灵敏性,JEV、DENV、CHIKV、RVFV的灵敏度为1×104拷贝/反应;ZIKV、YFV的灵敏度为1×105拷贝/反应.结论 建立的方法能同时快速检测6种常见蚊媒病毒,为蚊媒传染病的预警和控制提供参考.

目的:通过树状扫描统计量(TreeScan)挖掘鄞州区域医疗数据库的他汀类药物的不良反应(ADR)信号,评价TreeScan方法的ADR信号检测能力.方法:选取2010～2016年鄞州区域医疗数据库中18岁以上高血压人群为研究对象,研究目标药物为他汀类药物,通过门诊处方和住院医嘱中的药品名称信息识别他汀类药物暴露情况,根据门诊和住院诊断信息《国际疾病分类》第十次修订本(ICD-10)编码识别ADR.参考国外一项系统综述总结的用于识别ADR的ICD-10编码集建立标准信号,同时通过检索已公开发表的系统综述和Meta分析及药品说明书确定标准阳性和阴性信号.采用诊断试验评价方法评价ADR信号挖掘方法的真实性,评价指标包括灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率、约登指数和受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC).结果:共纳入224 187例研究对象,其中他汀组85 758例,非他汀组138 429例.将126种ADR作为标准信号,其中13个阳性信号,113个阴性信号.在原始数据下TreeScan一共发现29个阳性信号(P＜0.05),与标准信号对比,其中9个是真阳性信号.方法的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为69.23％,82.30％,31.03％和95.88％.正确率、约登指数和AUC值3种综合性指标分别为80.95％,51.53％和75.77％.结论:TreeScan方法能够同时对大量不同水平、互相有重合的ADR进行检测,并能有效地解决多重假设检验问题.其产生的信号数量适中且假阳性较少,可以作为其他ADR挖掘方法的一种补充,为我国的药品安全主动监测提供新的参考.

目的 采用多重扩增阻滞突变分析系统-聚合酶链式扩增反应(ARMS-PCR)方法检测非小细胞肺癌(NSCLC)常见驱动基因的突变情况,探讨其检测特点及应用优势.方法 选取2019-07-15-2021-11-05北京大学第三医院病理科确诊的191例NSCLC,采用多重ARMS-PCR法检测表皮生长因子受体(EGFR)、人表皮生长因子受体2(HER2)、Kirsten鼠肉瘤病毒癌基因(KRAS)、成神经细胞瘤鼠肉瘤癌基因(NRAS)、编码磷脂酰基醇-3激酶催化亚单位基因(PIK3CA)、鼠类肉瘤滤过性毒菌(v-Raf)致癌同源体Bl(BRAF)、间变性淋巴瘤激酶(ALK)、RET和c-ros原癌基因1酪氨酸激酶基因(ROS1)驱动基因突变情况,并分析其突变状态与临床病理特征的相关性.结果 本组191例NSCLC中有129例(67.54％)检出基因突变,其中肺腺癌基因突变检出率为70.86％(124/175),高于其他类型NSCLC(31.25％,5/16),差异有统计学意义,χ2=10.49,P=0.001.肺腺癌中EGFR基因突变率为52.57％(92/175),KRAS基因突变率为7.43％(13/175);BRAF、HER2和PIK3CA基因突变率分别为1.14％(2/175)、2.29％(4/175)和1.14％(2/175);ALK、ROS1和RET基因融合的发生率分别为5.14％(9/175)、0.57％(1/175)和2.29％(4/175);女性肺腺癌患者EGFR基因突变率(61.46％)高于男性患者(41.77％),χ2=6.736,P=0.009.L858R和19del突变率占所有病例EGFR突变的86.96％(80/92).结论 多重ARMS-PCR技术对NSCLC常见驱动基因突变的检出率与文献报道一致,并具有快速、灵敏度和特异性高等优势,适用于临床短时间内准确获取靶向治疗信息的需求.

目的 对比多重灵敏度编码弥散加权成像(MUSE-DWI)与基于周期性旋转重叠平行线增强重建技术(PROPELLER,即螺旋桨技术)的PROPELLER DUO-DWI显示鼻咽癌的价值.方法 对25例经活检病理确诊的鼻咽癌患者采集MUSE-DWI及PROPELLER DUO-DWI,对比2种图像的主观评价指标(图像清晰度、图像伪影及变形)和客观评价指标,即病灶信噪比(SNR)及对比信噪比(CNR).结果 MUSE-DWI显示鼻咽癌清晰度评分及病灶SNR、CNR均优于PROPELLER DUO-DWI(P均<0.01),图像伪影及变形评分均低于PROPELLER DUO-DWI(P均<0.05).结论 相比PROPELLER DUO-DWI,MUSE-DWI显示鼻咽癌更优.