目的 探讨益肺宣肺降浊方(YFXF)抗血管性痴呆(VD)的作用机制.方法 通过网络药理学方法获取YFXF差异表达作用靶点(YDEGs);利用列线图模型从YDEGs中筛选高风险基因;基于高风险基因从广义线性、支持向量机、极限梯度上升和随机森林模型中筛选最优机器学习模型.采用双侧颈总动脉闭塞术构建大鼠VD模型,并随机分为模型组、YFXF组(12.18 g/kg,以生药总量计),另设假手术组,每组6只.评价YFXF对VD大鼠行为学(以逃避潜伏期和穿越平台次数为指标)、大脑皮层组织病理形态学变化以及分泌磷酸蛋白1(SPP1)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(又名Akt)信号通路相关蛋白及SPP1 mRNA表达的影响.结果 共获得6个YDEGs,其中SPP1、CCL2、HMOX1、HSPB1可能是VD的高风险基因;基于高风险基因的广义线性模型预测准确性最高(曲线下面积为0.954).与模型组比较,YFXF可显著缩短VD大鼠的逃避潜伏期,显著增加穿越平台次数(P＜0.05);可改善大脑皮层组织神经元固缩和坏死等病理损伤,显著降低SPP1蛋白及mRNA的表达水平(P＜0.05),显著升高PI3K、Akt蛋白的磷酸化水平(P＜0.05).结论 VD高风险基因SPP1、CCL2、HMOX1和HSPB1可能是YFXF的重要作用靶点;YFXF可能通过下调SPP1蛋白及mRNA的表达、激活PI3K/Akt信号通路来发挥抗VD作用.

目的:探讨栝楼桂枝颗粒是否通过HIF-1α-Netrin-1-UNC5B/VEGF促进脑缺血后血管生成和神经功能恢复.方法:随机选取32只SD大鼠建立大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型,造模成功后分为模型对照组、栝楼桂枝颗粒3.6 g/kg组,另设16只假手术对照组.各组灌胃给予相应药物或生理盐水,采用改良神经功能缺损(mNSS)评分、肌张力测评试验及Cat Walk步态分析系统评价各组大鼠神经功能恢复情况;采用MRI检测各组大鼠脑梗死面积,计算脑梗死率;采用免疫组化法、蛋白免疫印迹法(West-em blot)检测各组大鼠促血管生成及HIF-1α通路相关蛋白的表达.结果:与假手术对照组比较,模型对照组mNSS评分和肌张力评分均显著升高,运动时间和最大速率变化均显著升高(P＜0.01),大鼠大脑检测出大片白色梗死区域,脑梗死面积显著增加;缺氧诱导因子(HIF-1α)蛋白表达明显升高,大鼠缺血侧大脑皮层组织中白细胞分化抗原(CD34)阳性表达率明显升高(P＜0.05);与模型对照组比较,栝楼桂枝颗粒3.6 g/kg组大鼠神经行为学评分、肌张力明显降低(P＜0.05或P＜0.01),脑梗死率显著减少,大鼠运动时间显著降低(P＜0.01);血管生成相关蛋白VEGFA、CD34蛋白表达明显上调(P＜0.05或P＜0.01),HIF-1α、神经导向因子-1蛋白(NETRIN-1)、神经导向因子受体(UNC5B)蛋白表达明显上调(P＜0.05或P＜0.01).结论:栝楼桂枝颗粒能够促进缺血性脑中风后的血管生成和神经功能恢复,其作用机制可能与激活HIF-1α-NETRIN-1-UNC5B/VEGF信号通路有关.

目的:探讨吞咽时脑区激活情况及吞咽中枢环路的时空特性。方法:选择10名健康受试者，在磁屏蔽室内应用148通道全头型脑磁图系统采集受试者执行吞咽动作时的脑磁信号，利用CURRY8分析软件进行数据处理，定位算法采用基于最小模分析的低分辨率电磁成像方法(LORETA)，每300 ms作为一个独立分析阶段，以大脑皮层F-分布值(F-distributed)最高的位置为刺激反应区域，通过时间和空间定位，对执行吞咽动作时激活区域进行分析。结果:在执行吞咽动作时，中央旁小叶、中央前回、延髓、中央后回、额下回、顶上小叶、角回、胼胝体、额中回、扣带回、眶回、丘脑、三脑室底部、放射冠、楔前叶、额岛叶、桥小脑角区、额上回、基底节等区域被激活，其中出现频次最高的前八位脑区为中央旁小叶、中央前回、胼胝体、中央后回、顶上小叶、额中回、扣带回、基底节。10名受试者在执行吞咽动作时，有8名受试者在0～300 ms时脑磁信号以左侧大脑半球激活为主，301～600 ms时以双侧大脑半球激活或中间区域激活为主，601～900 ms以右侧大脑半球激活为主。1名受试者在0～300 ms时脑磁信号以右侧大脑半球激活为主，301～600 ms和601～900 ms以左侧大脑半球激活为主。1名受试者在0～300 ms和601～900 ms时脑磁信号以右侧大脑半球激活为主，301～600 ms时以中间区域激活为主。结论:在执行吞咽动作时，早期呈现左侧偏侧性，后期呈现右侧偏侧性，存在高度的时间依赖关系，可能存在以中央区为核心的中央区-胼胝体-顶上小叶-额中回-扣带回-基底节相关的吞咽中枢环路。

目的:探讨大鼠丙泊酚精神依赖形成的机制与腺苷A2A受体-神经递质-细胞外信号调节激酶(ERK)通路的关系。方法:健康雄性SD大鼠48只，采用间断腹腔注射丙泊酚40 mg/kg，连续14 d的方法建立丙泊酚依赖模型。采用随机数字表法将大鼠分为6组( n＝8)：中枢对照组(c-C组)、中枢激动剂组(c-CGS组)、中枢拮抗剂组(c-DMPX组)、外周对照组(p-C组)、外周激动剂组(p-CGS组)和外周拮抗剂组(p-DMPX组)。c-CGS组和c-C组于建模后立即颅内注射腺苷A2A激动剂CGS-21680 2.5 ng/0.5 μl或等量生理盐水，p-CGS组和p-C组腹腔注射CGS-21680 0.1 mg/kg或等量生理盐水；c-DMPX组于每次丙泊酚注射前20 min颅内注射腺苷A2A受体拮抗剂DMPX 50 ng/0.5 μl，p-DMPX组腹腔注射DMPX 0.25 mg/kg。分别于建模前、建模后即刻、激动剂或生理盐水给药后(干预后)测定位置偏爱值(CPP值)。建模后1 d时处死大鼠取血标本及脑组织，采用ELISA法检测血浆及海马多巴胺(DA)、谷氨酸(Glu)及大脑皮层5-羟色胺(5-HT)水平，采用Western blot法检测大脑皮层磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的表达。 结果:与建模前比较，建模后即刻c-C组、c-CGS组、p-C组和p-CGS组CPP值升高( P <0.05)，c-DMPX组和p-DMPX组CPP值差异无统计学意义( P>0.05)；与造模后即刻比较，干预后c-C组和p-C组CPP值差异无统计学意义( P>0.05)，c-CGS组和p-CGS组CPP值升高( P<0.05)。与c-C组比较，c-CGS组海马DA和Glu含量增加，c-DMPX组海马Glu含量减少，大脑皮层5-HT含量增加，p-ERK1/2表达下调( P<0.05)；与p-C组比较，p-CGS组血浆及海马DA和Glu、大脑皮层5-HT和p-ERK1/2水平差异无统计学意义( P>0.05)，p-DMPX组海马DA和Glu含量减少，大脑皮层5-HT含量增加，p-ERK1/2表达下调( P<0.05)。 结论:大鼠丙泊酚精神依赖形成的机制可能与激活腺苷A2A受体，增加脑内兴奋性神经递质，进而上调ERK活性有关。

目的:本研究旨在评估袋鼠式拥抱期间早产儿大脑皮层的功能激活情况，也考虑到胎龄和曾经做过袋鼠式拥抱可能带来的影响。方法:研究共纳入15名早产儿(胎龄：24~32周)。在袋鼠式拥抱15 min和30 min后，通过多通道近红外光谱对额叶、运动和初级体感皮层的激活情况进行评估(评估时的胎龄：30~36周)，利用 t检验分析氧合血红蛋白和脱氧血红蛋白的变化情况。对胎龄和曾经做过袋鼠式拥抱可能带来的影响进行回归分析研究。 结果:袋鼠式拥抱15 min后，在额叶、体感皮层和运动皮层观察到双侧激活(氧合血红蛋白增加)。袋鼠式拥抱30 min后，发现右侧运动和主要体感皮层激活。脱氧血红蛋白在15 min后增加，在30 min时恢复到基线水平。胎龄对15 min后的两种血红蛋白浓度都有积极影响，而曾经做过袋鼠式拥抱对脱氧血红蛋白增加有负面影响。结论:在袋鼠式拥抱的过程中，运动和体感皮层，特别是右侧，表现出显著的激活。袋鼠式拥抱似乎通过改善脑氧供应来激活相应的皮层区域。

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶3（HDAC3）特异性抑制剂RGFP966对创伤性脑损伤（TBI）大鼠早期脑损伤的神经保护作用及其机制。方法:将48只SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI组、TBI+溶媒对照组、TBI+RGFP966组，每组12只。后3组大鼠采用液压冲击脑损伤法建立TBI模型，其中TBI+RGFP966组于造模后30 min经腹腔注射RGFP966（溶于1%DMSO中，剂量为10 mg/kg，2次/d，共给药3 d），TBI+溶媒对照组同期注射等量DMSO。于造模后第3天，分别应用改良神经功能缺损评分（mNSS）评估各组大鼠的神经功能，干湿重法检测各组大鼠损伤侧大脑皮层含水量，尼氏染色检测各组大鼠损伤侧额叶皮层组织中损伤神经元比例，免疫组化染色及Western blotting检测各组大鼠损伤侧额叶皮层组织中HDAC3及焦亡相关蛋白表达，ELISA法检测各组大鼠血清中炎性因子含量。结果:造模后第3天，与TBI+溶媒对照组比较，TBI+RGFP966组大鼠mNSS评分[(9.83±0.75)分 vs.(6.67±0.82)分]、脑组织含水量[(82.73±0.36)% vs. (80.92±0.66)%]明显下降，损伤神经元比例[(75.60±7.44)% vs. (55.87±4.10)%]明显下降，HDAC3蛋白表达明显下降（0.67±0.09 vs. 0.51±0.07），乙酰化H3、乙酰化H4蛋白表达明显上升（0.81±0.02 vs. 1.22±0.02；0.74±0.01 vs. 1.07±0.02），核因子-κB（NF-κB）（1.20±0.05 vs. 0.94±0.04）、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）（0.72±0.02 vs. 0.40±0.03）、活性含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1、消皮素D N-末端片段（GSDMD-N）（0.71±0.03 vs. 0.52±0.01）蛋白表达明显下降，NF-κB、NLRP3免疫组化染色评分明显下降，肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-18含量明显下降，差异均有统计学意义（ P<0.05）。 结论:TBI后早期应用RGFP966干预可以减轻神经细胞焦亡和炎症反应，发挥神经保护作用，其机制可能与抑制NF-κB/NLRP3/GSDMD通路激活有关。

目的:初步探讨同种异体骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗创伤性脑损伤(TBI)的遗传安全性。方法:(1)体内实验：分离提取并传代培养雄性SD大鼠的BMSCs。将微量药物注射套管植入并固定于12只雌性SD大鼠左侧侧脑室3 d后，用气压精密打击器对大鼠右侧大脑皮层进行打击以制备成中度TBI模型。分别于造模后4 h、3 d、6 d、9 d、12 d时经套管对TBI大鼠进行单次/多次BMSCs输注(2.5×10 5个/次，总体积10 μL)，并分别取造模后48 h、72 h、10 d和14 d时TBI大鼠(每时间点3只)的脑组织制备成石蜡标本，应用免疫荧光染色检测小胶质细胞激活情况，应用RNAscope ?技术检测星形胶质细胞、神经元、小胶质细胞与移植的BMSCs的共定位情况，以观察同种异体BMSCs移植至TBI宿主体内后是否与宿主脑内细胞发生整合现象。(2)体外实验：先将冻存复苏的小胶质细胞株BV2用绿色荧光蛋白(GFP)阳性慢病毒颗粒转染，再将pHrodo RED探针预标记的BMSCs与经脂多糖预处理的BV2细胞分别按一定比例(BV2∶BMSCs=1∶1、1∶2、2∶1)进行共培养，36 h、72 h后于共聚焦荧光倒置显微镜下观察2种细胞间是否发生吞噬现象，以观察小胶质细胞对BMSCs的具体作用形式。 结果:(1)体内实验：造模后48 h、72 h、10 d和14 d时，TBI大鼠的脑组织石蜡切片中均未发现移植的BMSCs与星形胶质细胞、神经元存在共定位现象，但在造模后10、14 d时，TBI大鼠的小胶质细胞明显被激活并迁移至左侧侧脑室及脉络丛附近，且与移植的BMSCs发生共定位现象。(2)体外实验：不同比例的BV2细胞与BMSCs共培养36 h、72 h后均发生吞噬现象。结论:同种异体BMSCs移植后并未与TBI宿主的星形胶质细胞、神经元发生整合现象，但其可被小胶质细胞吞噬，表明同种异体BMSCs移植治疗TBI具有遗传安全性。

目前，大脑意识水平的客观检测技术主要包括神经影像学及神经电生理，其中神经影像学包括功能核磁共振成像(fMRI)和功能性近红外光谱成像(fNIRS)等。fNIRS作为一种新型非侵入性光学神经成像技术，相比fMRI更具应用前景：它可以通过静息态或不同任务态如真实运动、运动想象、心算等了解大脑皮层激活情况，不仅能够横向评估意识水平，还可以纵向评估康复治疗效果。本文将简述fNIRS在意识障碍评估中的应用现状，以期为意识障碍的评估探索新的技术手段。

目的:运用单细胞转录组测序分析牙周炎小鼠脑膜的生物学改变，探讨牙周炎小鼠脑膜生物学改变与认知障碍的相关性。方法:将30只C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为2组（每组15只），在对照组小鼠上颌双颊侧局部涂抹不含牙龈卟啉单胞菌（Pg）的2%羧甲基纤维素（CMC），在实验组小鼠上颌双颊侧局部涂抹Pg W83和2%CMC的混合物，3次/周，持续16周。观察对照组和实验组小鼠上颌牙槽骨吸收情况、自主活动能力与认知功能的变化、大脑皮层中小胶质细胞和星形胶质细胞激活情况、检测小鼠脑膜和大脑内紧密连接蛋白Occludin mRNA表达情况。然后使用统一流形逼近与投影（UMAP）算法对单细胞转录组各细胞亚群数据进行降维整合处理。对内皮细胞差异基因进行基因本体（GO）和京都基因和基因组数据库（KEGG）富集分析，进一步采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）验证差异基因转录激活因子3（Atf3）、含载脂蛋白L域1（Apold1）的表达情况。结果:亚甲蓝染色实验显示，实验组小鼠上颌颊、腭侧釉质牙骨质界到牙槽嵴顶的距离［分别为（185.60±17.60）、（206.90±13.37）μm］均显著大于对照组［分别为（135.33±9.57）、（163.05±14.98）μm］（ t=5.02， P=0.002； t=4.37， P=0.005）。旷场实验显示实验组小鼠的总路程和平均速度［（971.88±164.57）cm和（3.25±0.55）cm/s］与对照组［（914.24±278.81）cm和（3.05±0.93）cm/s］相比差异均无统计学意义（ t=0.65， P=0.525； t=0.65， P=0.520）。新物体识别实验中实验组小鼠相对辨别指数［（48.02±16.92）%］显著低于对照组［（66.27±17.90）%］（ t=2.40， P=0.027）。Y迷宫实验显示，实验组小鼠的自发交替率［（50.99±14.17）%］显著低于对照组［（63.56±11.88）%］（ t=2.33， P=0.030）。免疫组化染色结果显示，实验组小鼠脑内小胶质细胞和星形胶质细胞被激活。RT-qPCR结果显示，实验组小鼠脑膜和大脑中紧密连接蛋白Occludin mRNA的表达（分别为0.61±0.10、0.64±0.20）均显著低于对照组（分别为1.02±0.25、1.04±0.31）（ t=3.47， P=0.010； t=2.66， P=0.024）。单细胞转录组测序显示，脑膜存在11种细胞类型，包括内皮细胞、成纤维细胞、免疫细胞等，其中内皮细胞占比最大［对照组为26.47%（1 589/6 004），实验组为26.26%（807/3 073）］，是脑膜中最主要的细胞类型；实验组小鼠脑膜组织中粒细胞比例［11.65%（358/3 073）］较对照组［5.56%（334/6 004）］增加。进一步聚类分析内皮细胞，GO富集分析显示差异基因与血管生成、细胞黏附、细胞凋亡等有关；KEGG分析显示差异基因与白细胞介素-17信号通路、松弛素信号通路等相关。RT-qPCR显示，实验组小鼠脑膜组织中Atf3和Apold1 mRNA表达（分别为0.42±0.24、0.54±0.27）均显著低于对照组（分别为1.03±0.26、1.02±0.23）（ t=3.88， P=0.005； t=3.02， P=0.017）。 结论:Pg W83慢性感染的牙周炎小鼠认知能力下降，存在神经炎症，屏障功能改变；单细胞转录组测序发现脑膜组织存在免疫细胞浸润，Atf3和Apold1基因表达下调，提示脑膜免疫和屏障功能的改变在牙周炎导致的认知障碍中发挥作用。

目的:探讨中性粒细胞对小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中细胞焦亡的作用及其潜在机制。方法:将76只雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH组、SAH+溶剂组及SAH+anti-ly6G组，每组19只。后3组小鼠采用改良线栓穿刺法制备成SAH模型，其中SAH+溶剂组及SAH+anti-ly6G组小鼠分别于造模前24 h经静脉注射生理盐水或anti-ly6G(4 mg/kg)。造模后24 h时分别对各组小鼠采用免疫荧光染色检测大脑皮层中性粒细胞、消皮素D(GSDMD)、S100钙结合蛋白A8(S100A8)的表达及定位情况，FJC染色检测皮层神经元损伤情况，改良加西亚评分及转棒实验评估神经功能，脑组织含水量检测评估脑水肿情况，Western blotting检测皮层组织中S100A8、Toll样受体4(TLR4)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、活化半胱氨酸蛋白酶1(cleaved-caspase1)和活化消皮素D(GSDMD-N)的蛋白表达情况。结果:(1)与假手术组相比，SAH组小鼠损伤侧皮层中出现中性粒细胞浸润，中性粒细胞中有S100A8大量表达，且相同区域内GSDMD表达升高并均能与星形胶质细胞、小胶质细胞及神经元共定位。(2)与假手术组相比，SAH组和SAH+溶剂组小鼠损伤侧皮层中性粒细胞浸润数量和FJC阳性神经元数量均明显增多，改良加西亚评分和转棒实验中掉落时间均明显降低，脑组织含水量明显增高，S100A8、TLR4、NLRP3、cleaved-caspase1和GSDMD-N的蛋白表达均明显升高，差异均有统计学意义( P<0.05)。与SAH组和SAH+溶剂组相比，SAH+anti-ly6G组小鼠损伤侧皮层中性粒细胞浸润数量和FJC染色阳性神经元数量均明显减少，改良加西亚评分和转棒实验中掉落时间均明显增加，脑组织含水量明显降低，S100A8、TLR4、NLRP3、cleaved-caspase1和GSDMD-N的蛋白表达均明显下降，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:抑制中性粒细胞可下调SAH后S100A8的表达，从而减弱TLR4/NLRP3激活介导的细胞焦亡，有利于改善EBI。