[目的]探讨接骨七厘胶囊通过激活骨形态发生蛋白(BMP)/Smad信号通路对大鼠桡骨骨折愈合的改善作用.[方法](1)构建大鼠桡骨骨折模型,检测大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)、钙(Ca)和磷的含量,观察骨折间隙的病理学变化.(2)培养人骨肉瘤细胞SaOS-2,检测ALP活性、矿化水平,实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞成骨相关基因ALP、胶原Ⅰ(COL-Ⅰ)、鸟氨酸转氨酶(OTC)、Osterix、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、BMP2表达,Western Blot法检测细胞BMP/Smad信号通路中关键蛋白的表达.[结果]接骨七厘胶囊促进大鼠桡骨骨折愈合,增强ALP活性,增加钙和磷含量.接骨七厘胶囊刺激SaOS-2细胞矿化结节的形成,并以剂量依赖的方式促进SaOS-2细胞中COL-I、OTC、Osterix、BMP2和OPN的表达水平.接骨七厘胶囊处理可上调SaOS-2细胞BMP/Smad信号通路Smad1/5磷酸化水平以及BMP2和RUNX2的水平.BMP/Smad信号通路的抑制剂Noggin抑制接骨七厘胶囊诱导的SaOS-2细胞成骨分化.[结论]接骨七厘胶囊可通过激活BMP/Smad信号通路,提高成骨相关基因的表达,从而促进骨折愈合.

目的 探讨独正杆有效部位促进骨折愈合的作用.方法 将SD大鼠随机分为模型对照组、云南白药组、有效部位组,每组36只.制备大鼠左前肢桡骨骨折模型.云南白药组和有效部位组分别灌胃给予云南白药胶囊内容物、独正杆有效部位3.0 g?kg-1?d-1,模型对照组给予等体积纯化水.进行血清碱性磷酸酶(AKP)及钙浓度测定、骨折部位DR成像、半定量RT-PCR测定血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达.结果 与云南白药组比较,独正杆有效部位AKP血清浓度峰值、钙浓度峰值显著偏高(P<0.01)、峰值出现时间更早,骨折愈合评分均显著偏高(P<0.01),骨折线消失时间明显提前,VEGF mRNA表达量在骨折后3周内均显著偏高(P<0.01).结论 独正杆有效部位对大鼠骨折愈合作用较强.

目的 探讨独正杆不同极性部位促进SD大鼠骨折愈合活性.方法 以SD大鼠为研究对象,制作左前肢桡骨骨折模型,通过血清钙水平及碱性磷酸酶(AKP)活性测定、骨折组织HE染色、半定量RT-PCR测定VEGF mRNA表达来探讨独正杆不同极性部位灌胃给药对SD大鼠骨折愈合的影响.结果 与对照组比较,独正杆正丁醇部位及乙酸乙酯部位可以显著升高AKP血清浓度(P<0.05),提前钙浓度峰值发生时间及钙浓度降低时间(P<0.05),提前软骨细胞及纤维性骨痂发生时间,增加骨痂生长速度、提前骨折部位塑形及骨髓腔贯通时间,上调 VEGF mRNA 表达水平(P<0.05).结论 独正杆正丁醇部位及乙酸乙酯部位对SD大鼠桡骨骨折愈合有显著促进作用.

目的:研究复方伤痛胶囊对大鼠桡骨骨折愈合的影响.方法:SD大鼠40只,随机取8只作为空白组,剩余32只大鼠戊巴比妥钠腹腔麻醉,用骨剪剪断桡骨,造成双侧标准骨折动物模型.随机将骨折模型大鼠分为模型组、伤科接骨片组(阳性药组,0.45 g·kg-1)、复方伤痛胶囊低、高剂量组(0.25 g·kg-1,0.5 g·kg-1);连续给药30 d后腹主动脉取血,置于肝素钠抗凝的试管内,用以检测全血粘度、血浆粘度及红细胞聚集数;另留出血样,测定碱性磷酸酶(BALP)、血管内皮生长因子(VEGF)、D-二聚体含量;脱颈椎处死后取骨折处标本,一侧先取一半拍X片,其余用石蜡包埋,HE染色,另一侧用于骨矿含量和骨密度检测.结果:复方伤痛胶囊能有效的降低血液粘度和红细胞聚集数(P<0.01或P<0.05),可使BALP水平得到改善(P<0.05),能降低血液中VEGF及D-二聚体的含量(P<0.05),同时也能促进肉芽细胞、骨小梁、骨组织的增长,进而促进骨愈合.结论:复方伤痛胶囊具有调节骨组织修复及再生作用,能改善病变组织血液循环,促进肉芽细胞、骨小梁、骨组织的增长,加快骨折的愈合.

目的:观察益气生骨颗粒对骨折愈合的促进作用.方法:选用32只3月龄大鼠,全部手术制作左侧桡骨中段1 mm骨缺损的骨折模型,随机分为用药组和模型组,每组16只.造模次日,用药组予益气生骨颗粒,12 g/(kg·d),分2次灌胃;模型组予白开水,2 mL/次,2次/d.于造模后第7、14、21、28天分批处死动物,取左侧(造模侧)骨痂先拍X线观察,然后再作组织学观察;右侧(健侧)尺骨行生物力学性能检验.结果:骨痂X线观察显示用药组在14、21d骨痂量多、密度高且缺损基本填满,而模型组多个样本缺损尚未填满、骨痂量少、密度浅淡.组织形态学观察显示造模后7d时,用药组与模型组均无血肿存在,成纤维细胞量很少;用药组骨痂在14、21、28 d均比模型组更成熟,表现为骨小梁排列更加规则.在21、28 d,骨性组织面积高于模型组(P＜0.05).生物力学测试,健侧尺骨的载荷-位移曲线在第2周低于模型组,而在第1、3、4周两组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:益气生骨颗粒能够促进骨折愈合,表现为促进骨痂的生长,提高骨痂的钙化质量.

目的:运用基因重组的方法，对人转化生长因子β 1（transforminggrowth factor - β 1）进行基因克隆，并在大肠杆菌中表达。同时观察其促进骨折愈合的作用。 方法:以pBV220作为原核细胞表达载体，将TGF - β 1 cDNA片段定向重组到pBV 220的多克隆位点上，构建原核细胞表达性质粒pTGF - β 1，并转化至大肠杆菌中进行温度诱导表达。制造兔桡骨骨折模型，经皮注射重组TGF - β 1，并与单纯桡骨骨折模型做对照。术后行X线和同位素骨显像检查。 结果:表达产物经SDS-PAGE分析，TGF - β 1原核表达体系可高效表达TGF - β 1其表达产物占菌体可溶性蛋白的23%。用大鼠肾成纤维细胞（NRK细胞）进行活性检测，该方法生产的TGF - β 1具有该蛋白的野生生物学活性。术后X线检查，实验组骨折愈合较对照组平均超前2周；同位素核素骨显像检查，实验组与对照组差异有显著性意义（ P<0.05）。 结论:TGF-β 1原核表达体系的建立，为TGF-β 1的生产提供了高效的表达工程菌，其表达产物能明显促进骨折愈合。

目的 探讨微小RNA(miR)-27a-5p对抑郁症大鼠桡骨骨折愈合的影响.方法 将SD大鼠随机分为骨折对照组、骨折+抑郁组、miR-27a-5p agomir(激活剂)阴性对照组、miR-27a-5p agomir组、miR-27a-5p antagomir(抑制剂)阴性对照组、miR-27a-5pantagomir组,除骨折对照组外,其余各组大鼠均通过慢性温和不可预知应激刺激建立抑郁模型.所有大鼠均折断前右肢桡骨中段制备骨折模型,并以miR-27a-5p激活剂及抑制剂进行干预分组后,以强迫游泳实验与蔗糖水消耗实验检测各组大鼠抑郁症状.检测各组大鼠骨折段骨痂量和骨微结构;检测各组大鼠血清炎性因子白细胞介素(IL)-2、IL-6及核因子κ B受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测各组大鼠骨痂组织miR-27a-5p、IL-2 mRNA表达.体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),随机分为对照组、miR-27a-5p mimics(模拟物)组、miR-27a-5p mimics阴性对照组、miR-27a-5p inhibitor(抑制剂)组、miR-27a-5p inhibitor阴性对照组.诱导各组细胞成骨分化并以miR-27a-5p模拟物及抑制剂分组干预后,以碱性磷酸酶(ALP)染色检测各组细胞成骨分化;以qRT-PCR实验检测各组细胞miR-27a-5p、IL-2 mRNA表达.以双荧光素酶报告基因实验检测大鼠BMSC中miR-27a-5p对IL-2的靶向调节作用.结果 与骨折对照组相比,骨折+抑郁组大鼠强迫游泳不动时间延长,血清IL-2、IL-6及RANKL水平、骨痂组织IL-2 mRNA表达升高,蔗糖水消耗量、骨痂量、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量减少,血清OPG水平、骨痂组织miR-27a-5p表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05).与骨折+抑郁组相比,miR-27a-5p agomir组大鼠强迫游泳不动时间缩短,血清IL-2、IL-6及RANKL水平、骨痂组织IL-2 mRNA表达降低,蔗糖水消耗量、骨痂量、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量增加,血清OPG水平、骨痂组织miR-27a-5p表达升高,差异有统计学意义(P＜0.05),miR-27a-5p antagomir组大鼠各指标变化趋势与miR-27a-5p agomir组相反,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,miR-27a-5p mimics组细胞ALP阳性细胞相对比例、miR-27a-5p表达升高,IL-2 mRNA表达降低,差异有统计学意义(P＜0.05),miR-27a-5p inhibitor组细胞各指标变化趋势与miR-27a-5p mimics组相反,差异有统计学意义(P＜0.05).大鼠BMSC中miR-27a-5p可靶向下调IL-2表达.结论 miR-27a-5p可通过减轻炎症缓解抑郁症大鼠抑郁症状,并促进其桡骨骨折愈合,其分子机制是miR-27a-5p可靶向下调大鼠BMSC中IL-2表达.