目的:为了解决传统的中性树脂封片固化时间长，空间占用率高，不适合数字切片扫描等问题，探究紫外光固化胶的制备，保证切片制备质量同时提高封片效率。方法:选择环保安全的预聚物、活性稀释剂和光引发剂制备干燥速度快，透光率高，适用范围广，性质稳定的紫外光固化胶替代传统封片剂。结果:制备出的紫外光固化胶（UV42胶）封片后在紫外光照下15 s可完全固化，透光率达88.4%~89.7%（在波长400~600 nm范围内），广泛适用于冷冻和石蜡切片的常规染色处理封片。使用UV42胶封片的病理切片，放置3年后性质依然稳定，且耐黄变性能良好。结论:UV42胶满足快速病理切片封片的需求。

目的 制备黄芩苷微囊并对其处方工艺进行优化;将微囊压制成片剂使其具有缓释作用.方法 采用单凝聚法制备微囊,以包封率和载药量为评价指标,星点设计响应面试验优化微囊处方工艺;通过单因素试验,以硬度、外观和崩解时间为指标,确定乳糖和微晶纤维素用量,得到片剂的最优处方工艺.结果 微囊最优处方工艺为温度45 ℃,pH 3.9,转速550 r·min-1制得的微囊分散性好,载药量为(22.80±0.33)％、包封率为(82.40±0.45)％;当黄芩苷微囊50 mg,乳糖855 mg和微晶纤维素345 mg,采用粉末直接压片法制得的片剂成型性好,崩解时限6min,24 h释放达到 87.2％.结论 该处方工艺简单,稳定可行,粉末直接压片法能够得到成型性好的片剂,具有一定的缓释作用.

目的:探讨冬凌草甲素包合物口腔崩解片的制备工艺和质量.方法:采用沉淀法制备冬凌草甲素包合物;以体外崩解时间和10 min体外溶出度为考察指标,采用正交设计法优选辅料微晶纤维素、羧甲基淀粉钠和甘露醇的用量;测定冬凌草甲素包合物口腔崩解片的崩解时间和溶出度.结果:冬凌草甲素包合物包封率和载药量分别为75.53％、35.03％;冬凌草甲素包合物口腔崩解片辅料用量的最佳工艺为:微晶纤维素90 mg,羧甲基淀粉钠48 mg,甘露醇25 mg;在该工艺下,冬凌草甲素包合物口腔崩解片的崩解时间<1 min,累积溶出度在2 min即达到98.2％,面向由于普通片剂.结论:辅料微晶纤维素、羧甲基淀粉钠和甘露醇可用于冬凌草甲素包合物口腔崩解片的制备,且其质量符合要求.

本实验室在辅助科研工作中制作大量动脉粥样硬化的实验动物模型,在实践中摸索出HE染色和油红O染色两种技术的优化制片方法.同时应用新型实用专利封片剂(已经申请专利保护),不再使用传统明胶甘油封片,改进封片技术不但使病理切片色泽艳丽,而且可以在室温下长期保存不再褪色.笔者用该方法制作切片标本长达2年,室温保存至今未褪色,现结合实践工作介绍如下.

目的 制备一种用于自动荧光显微分析系统质量控制的荧光细胞标准计数样片.方法 利用定制的带有黑色方框的载玻片做载体,载玻片表面使用多聚赖氨酸进行防脱处理后,将一定数量荧光标记的人上皮细胞固定在黑色方框内,然后滴加甘油,最后在四周添加中性树胶封片剂后盖上盖玻片封存.以此方法制得不同细胞浓度的标准样片,用于自动荧光显微分析系统的准确性、精密度和复现性测试.结果 制备了空白对照、阳性样片A、阳性样片B三种规格的荧光细胞标准计数样片.该系列标准样片经过计量机构检测确认后的结果为真值,用该系列标准样片上机检测,计算得出自动荧光显微分析系统对阳性样片A和阳性样片B的分析准确性分别为98.96％和97.96％;分析精密度分别为1.92％和2.00％;分析复现性误差分别为0.34％和1.33％.结论 设计的荧光细胞标准计数样片性能可靠,可作为自动荧光显微分析系统的成品质控测试工具.

目的 解决玻片固定液干燥过快问题,改良固定液配方.方法 为减缓固定液干燥速度,将5 ml甘油加入封片剂,保持湿度;并将原配方50％质量分数葡萄糖溶液5 ml改为3 ml,降低粘度.结果 新的封片剂配方为阿拉伯胶12 g,水合氯醛晶体20 g,冰醋酸5 ml,甘油5 ml,50％质量分数葡萄糖溶液3 ml,蒸馏水30 ml.结论 该封片剂干燥速度适中,适用于我国北方小型昆虫标本制备.

目的 通过激光共聚焦技术,观察鼻息肉体外培养上皮细胞在3种不同固定剂作用下的免疫荧光染色效果,探讨不同固定剂对免疫荧光染色结果的影响,从而选择最佳固定方法.方法 用酶消化法分离培养鼻息肉上皮细胞,接种培养7d后,分别用4% (质量分数)多聚甲醛(paraformaldehyde,PFA)、等体积甲醇丙酮混合液及甲醇室温固定,1% (体积分数) Triton X-100透膜,山羊血清封闭,滴加一抗4 ℃过夜,滴加相应荧光二抗,含DAPI封片剂封片,激光共聚焦显微镜观察.结果 等量甲醇丙酮混合液及甲醇对标记的4个标记蛋白均有较好的固定作用;4% (质量分数) PFA对跨膜蛋白16A(transmembrane protein 16A, TMEM16A)固定效果差,对紧密连接蛋白(zonular occludens-1,ZO-1)的固定效果不理想.结论 甲醇丙酮混合液及甲醇对标记的4个标记蛋白的固定作用均较好,为体外培养细胞免疫荧光染色最佳固定剂的选择提供参考.

近年随着我国医学科研水平的提高,病理技术在科学研究中越来越受到重视,由于科研病理样本来源及染色复杂,往往不能像病理科一样完全使用全自动染色机染色,多采用手工染色.病理切片制作过程中往往会出现脱水液更换不及时,或封片剂开封后保存不当,造成脱水不足,或封片剂过干,使封片剂不能完全覆盖组织而造成盖玻片与组织之间出现细小间隙影响折射率,产生类似"水珠"一样的间隙,严重影响阅片和采图,成为不合格的病理切片.日常工作中此类情况往往成批出现,如重新制片将造成时间和试剂的严重浪费.本实验室通过多次实践摸索,取得较好效果,现报道如下.

目的 完善进口药品监管方法.方法 统计北京市药品检验所2015年至2019年完成的进口药品抽样数据,分析进口药品抽样数量的变化趋势及现场抽样中发现的问题.结果 2015年至2019年,进口药品抽样主要涉及14种剂型,品种覆盖化学药、中药、生物制品3大类,进口药品报验单位按生产经营范围划分为化学药品制剂生产企业、生物制剂生产企业、药品批发企业、中药材销售企业、医药科技公司等.2017年,进口药品抽样批数为7448批,抽样件数为33769件,均为统计时限范围内的最大值.与2017年比较,2019年的进口药品抽样批数和件数分别下降84.16％和94.45％,其中进口化学药抽样批数和件数分别减少98.89％和99.50％.2015年至2018年,进口化学药(包括化学原料药及制剂)平均抽样批数和件数占比分别为82.45％和93.17％,均高于同期进口中药和进口生物制品.不同剂型中,2015年至2018年片剂抽样批数和平均件数均最多;2019年注射剂抽样批数和件数均最多.不同类型报验单位中,2015年至2017年完成外资生产企业报验的进口药品抽样批数和件数均最多.现场抽验中发现的问题主要有抽样时存在外包装开封现象、有效期标注不规范、暂存环境及条件不符合相关需求等.结论 进口药品抽样和检验任务减少,降低了检验机构的药品检验成本和进口报验单位的进口成本,可促进检验资源的合理分配,释放检验机构的检验能力;给进口报验单位带来便利的同时,应考虑到相应的监管风险,建议在进口药品抽样检验及上市后的市场流通环节执行具有针对性的监管措施.

高原肺水肿(high altitude pulmonary edema,HAPE)是由于在高海拔地区肺动脉压力升高,血管内液体向肺组织渗出形成,发生快,致死率高.西地那非(sildenafil,SIL)可扩张肺内血管,具有预防高原肺水肿的作用,但目前只有口服片剂和注射液剂型,存在给药剂量大、使用不便和全身不良反应大等问题.本文制备了西地那非脂质体(liposomal sildenafil,LS)并进行肺部给药,考察其预防高原肺水肿的作用.用硫酸铵梯度法制备LS,包封率约100％,粒径116.97 nm,zeta电位-30.93 mV.LS在人工肺液中释放前期的释放速率比SIL快,同时释放更完全.所有动物实验经军事科学院军事医学研究院伦理委员会批准且实验均按照相关指导原则和规定进行.将给药剂量(3 mg·kg-1)相同的SIL、LS及空白脂质体分别灌胃给药和经气管喷入小鼠肺中,将模型组和各给药组小鼠置于模拟5000m海拔的低压氧舱中1h后取出.模型组小鼠在旷场实验中运动总路程降低,不动时间升高,同时血氧饱和度(percutaneous oxygen saturation,SpO2)降低,肺组织中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平比正常组小鼠高,还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)水平比正常组小鼠低;给药组中口服西地那非没有明显改善小鼠的生命体征和活动能力,而肺吸入LS却明显改善小鼠活动能力,与模型组相比,血氧饱和度升高,TNF-α和GSH水平均接近正常水平.将给药剂量(3 mg·kg-1)相同的SIL混悬液和LS经气管喷入小鼠肺中,将模型组及给药组小鼠置于低压氧舱中不同时间后取出.模型组小鼠血液中炎性细胞因子TNF-α、白细胞介素-1β(IL-1β)水平比正常组小鼠高,而给药后下降,其中LS组更低,接近正常水平.造模1h及造模48 h的LS组小鼠血液中IL-1β水平比SIL组低(P＜0.05).模型组小鼠肺组织中缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)表达升高,给药后HIF-1α表达降低接近正常水平,LS组的HIF-1α表达比SIL组更低,其中造模48 h的HIF-1α水平有显著性差异(P＜0.01).肺吸入西地那非脂质体是一种有潜力的预防高原肺水肿制剂.