目的:探讨兔腹腔高压持续时间不同其腹肌、膈肌的病理改变进程。方法:选取健康成年新西兰兔22只，体质量2.7～3.2 kg。22只实验兔随机分为4组：对照组4只；模型1组～3组，每组6只。4组实验兔制作腹腔高压动物模型，对照组加压水囊不注液；模型1组～3组加压水囊注入含龙胆紫溶液的生理盐水，每注入50 mL生理盐水测量腹腔内压力1次，最终使腹腔内压力达到20 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）。对照组完成模型制备后24 h进行标本取材，模型1组～3组分别于完成模型制备后24、48、72 h进行标本取材。按实验规划时间点使用空气推注法常规处死实验动物，完整切取实验兔左侧膈肌和6 cm×4 cm大小前腹壁组织制备病理切片，HE染色，生物光学显微镜下观察各组标本的病理学改变。结果:22只实验兔均成功完成模型制备，模型1组～3组兔腹腔内压力达到20 mmHg时腹腔加压水囊量为260～380 mL。所有实验动物制备模型后活动明显减少，其中对照组实验兔摄食量轻度下降，模型1组～3组实验兔摄食量明显减少或不进食。实验过程中模型1组、3组各有1只实验兔死亡。（1）腹壁组织病理改变：对照组可见腹壁横纹肌脂肪变性；模型1组腹横纹肌间可见大量炎细胞浸润；模型2组腹横纹肌间可见出血，局部可见炎性坏死；模型3组可见横纹肌断裂，伴脂肪变性及玻璃样变性/坏死。（2）膈肌病理改变：对照组可见膈肌横纹肌肌束部分萎缩；模型1组可见膈肌横纹肌肌束部分萎缩，部分肥大；模型2组可见膈肌横纹肌肌束萎缩，萎缩的细胞核聚集，部分区域可见横纹减少或消失；模型3组可见膈肌横纹肌肌束部分肥大，部分萎缩，肌束间血管扩张充血。结论:腹腔高压可引起腹肌和膈肌出现明显的细胞损害，且随着高腹压持续时间的延长而逐渐加重。

目的:研究Notch1信号通路抑制剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用及其可能机制。方法:将SPF级出生后第7天(P7)的幼鼠与C57BL/6J母鼠共同饲养于含75%氧气的氧箱中5 d，然后放回正常氧气环境下饲养，以制备OIR模型。采用随机数表法将54只OIR小鼠分为OIR组、OIR+DMSO组和OIR+DAPT组，每组18只，所有小鼠右眼作为实验眼。OIR+DAPT组和OIR+DMSO组在P14小鼠玻璃体腔内分别注射10 mmol/L DAPT和DMSO溶液1 μl，OIR组不予注射。P17时处死各组小鼠，摘出眼球后分离视网膜，采用Western blot法测定Notch1信号通路蛋白及其下游Hes1蛋白、视网膜小胶质细胞M1型标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型标志物精氨酸酶-1(Arg-1)蛋白的相对表达量；制备视网膜铺片，采用同工凝集素(IB4)染色视网膜血管，计算小鼠视网膜新生血管相对面积，定义为新生血管面积/视网膜总面积×100%；采用苏木素－伊红染色法观察突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数量。结果:OIR+DAPT组、OIR组和OIR+DMSO组小鼠视网膜中Notch1蛋白相对表达量分别为0.68±0.06、1.00±0.00和1.03±0.08，Hes1蛋白相对表达量分别为0.70±0.08、1.00±0.00和1.02±0.07，组间总体比较差异有统计学意义( F＝70.62、53.65，均 P<0.01)。OIR+DAPT组小鼠视网膜中Notch1和Hes1蛋白相对表达量均明显低于OIR组和OIR+DMSO组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。OIR+DAPT组、OIR组和OIR+DMSO组小鼠视网膜中Arg-1蛋白相对表达量分别为1.49±0.12、1.00±0.00和0.94±0.07，iNOS蛋白相对表达量分别为0.74±0.07、1.00±0.00和1.04±0.10，组间总体比较差异均有统计学意义( F＝89.32、31.63，均 P<0.01)，与OIR组和OIR+DMSO组比较，OIR+DAPT组小鼠视网膜中Arg-1蛋白相对表达量明显升高，iNOS蛋白相对表达量明显下降，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。OIR+DAPT组、OIR组和OIR+DMSO组小鼠视网膜新生血管相对面积分别为(8.82±2.71)%、(22.32±5.34)%和(20.27±3.36)%，突破内界膜的血管内皮细胞数分别为38.17±3.29、60.83±5.11和58.67±4.75，总体比较差异均有统计学意义( F＝33.72、39.44，均 P<0.01)。与OIR组和OIR+DMSO组比较，OIR+DAPT组小鼠视网膜新生血管相对面积缩小，突破视网膜内界膜的血管内皮细胞数较少，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:玻璃体腔注射DAPT可抑制OIR小鼠视网膜新生血管形成，其作用主要是通过抑制Notch1信号通路活化，进而促使M1型视网膜小胶质细胞向M2型转化来实现。

目的:比较腺相关病毒(AAV)不同血清型对小鼠视网膜层的趋向性。方法:构建pFastBacDual-inCap衣壳质粒和pFastBacDual-ITR-CMV-EGFP基因组质粒；包装重组腺相关病毒2型(rAAV2)、rAAV6、rAAV8、rAAV9；以感染复数(MOI)2000的比例感染HEK293T细胞，24 h后观察荧光表达；应用随机数字表法将C57BL/6小鼠分为rAAV2、rAAV6、rAAV8、rAAV9组和对照组，每组5只，分别双眼玻璃体腔注射rAAV2、rAAV6、rAAV8、rAAV9和磷酸盐缓冲液(PBS)各1 μl，注射后2周，制作眼球冰冻切片以及视网膜铺片，分别应用倒置荧光显微镜和激光扫描共焦显微镜观察rAAV不同血清型增强型绿色荧光蛋白(EGFP)荧光强度和感染部位。应用倒置荧光显微镜观察玻璃体腔注射rAAV2后2周、1个月、3个月EGFP荧光强度变化。结果:重组病毒对HEK293T的感染效率从高到低依次为rAAV2、rAAV6、rAAV8和rAAV9，转导效率分别为39.5%、18.4%、8.7%和4.6%；在小鼠视网膜中，rAAV2和rAAV6在神经节细胞表达水平较高，rAAV8和rAAV9在视网膜色素上皮(RPE)和光感受器细胞中表达水平较高；rAAV2介导EGFP可于注射后2周、1个月、3个月内在视网膜稳定表达。结论:rAAV不同血清型对视网膜RPE细胞和神经节细胞具有高趋向性和高效表达，rAAV2玻璃体腔注射后转导效率较高，且在注射后3个月内稳定表达。

目的:研究雷珠单抗对脉络膜新生血管(CNV)模型大鼠视网膜氧化应激的作用及其机制。方法:选取10周龄SPF级雄性SD大鼠60只，按照随机数字表法随机分为正常对照组、模型对照组、雷珠单抗组、转录因子核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)组、雷珠单抗+ML385组，每组12只。除正常对照组外，其余各组以氪激光诱导CNV模型。雷珠单抗组、ML385组和雷珠单抗+ML385组分别玻璃体腔内注射1 μl雷珠单抗、ML385、雷珠单抗+ML385，模型对照组、正常对照组分别给予玻璃体腔内注射等体积生理盐水。脉络膜铺片法检测CNV面积；苏木精－伊红染色观察视网膜病理学变化；实时荧光定量PCR及Western blot检测视网膜组织中Nrf2、超氧化物歧化酶(SOD)、醌氧化还原酶(NQO1)mRNA及蛋白表达水平。结果:模型对照组、ML385组和雷珠单抗+ML385组CNV面积分别为(23.01±1.52)×10 3、(30.23±2.01)×10 3和(18.56±1.85)×10 3 μm 2，明显高于雷珠单抗组的(12.35±1.22)×10 3 μm 2，雷珠单抗+ML385组CNV面积小于模型对照组和ML385组，ML385组CNV面积大于模型对照组，差异均有统计学意义(均 P<0.001)。苏木精－伊红染色结果显示，雷珠单抗组RPE－脉络膜－巩膜复合体结构损害程度较模型对照组轻；雷珠单抗+ML385组RPE－脉络膜－巩膜复合体结构损害程度较雷珠单抗组重，但较模型对照组轻；ML385组RPE－脉络膜－巩膜复合体结构损害较模型对照组严重。雷珠单抗组Nrf2、SOD和NQO1 mRNA及蛋白相对表达量均低于正常对照组，但高于模型对照组、ML385组和雷珠单抗+ML385组，且雷珠单抗+ML385组Nrf2、SOD和NQO1 mRNA及蛋白相对表达量高于模型对照组和ML385组，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:雷珠单抗可抑制氪激光诱导的CNV生长，减轻RPE氧化应激损伤，其机制与Nrf2/ARE通路的激活有关。

目的:探讨程序性坏死特异性抑制剂necrostatin-1(Nec-1)对急性高眼压大鼠模型中视网膜神经节细胞(RGCs)程序性坏死的抑制作用。方法:采用随机数表法将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、Nec-1处理组和阴性对照组，每组6只。其中，正常对照组大鼠不做任何处理；其余3个组大鼠左眼采用前房灌注质量分数0.9%氯化钠溶液的方法将眼压升至110 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa)，持续60 min，制备急性高眼压缺血-再灌注模型；Nec-1处理组和阴性对照组大鼠分别于造模后给予玻璃体腔内注射4 mmol/L Nec-1和二甲基亚砜各2 μl。造模后7 d，摘取各组大鼠实验眼制备视网膜石蜡切片，采用苏木精-伊红染色法观察视网膜结构；采用免疫组织化学染色法检测胸腺细胞抗原1(Thy-1)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:造模后7 d，与正常对照组大鼠比较，模型对照组和阴性对照组大鼠视网膜神经纤维层均变薄，RGCs层细胞排列疏松，内核层细胞减少、排列紊乱，外核层细胞正常或变大；与模型对照组和阴性对照组比较，Nec-1处理组大鼠神经纤维层厚度及RGCs数量均明显增多。免疫组织化学染色显示，模型对照组、阴性对照组和Nec-1处理组大鼠Thy-1染色阳性RGCs数量均较正常对照组减少，Nec-1处理组大鼠Thy-1染色阳性RGCs数量均较模型对照组和阴性对照组增多。正常对照组、模型对照组、阴性对照组和Nec-1处理组GFAP平均积分吸光度( A)值分别为47.209±15.311、116.220±18.194、116.382±19.020和92.818±10.236，总体比较差异有统计学意义( F＝24.675， P<0.001)，其中与正常对照组比较，模型对照组、阴性对照组和Nec-1处理组GFAP平均积分 A值均明显升高；Nec-1处理组GFAP平均积分 A值较模型对照组和阴性对照组明显降低，差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:Nec-1对急性高眼压大鼠RGCs的程序性坏死有抑制作用，可促进RGCs存活。

目的:评估不同质量浓度重组人血管内皮抑制素(rh-endostatin)兔眼玻璃体腔注射的安全性。方法:取健康成年新西兰白兔30只，以右眼为实验眼，按照计算机数字随机分配法随机平均分为0.125 mg rh-endostatin组、0.250 mg rh-endostatin组、0.500 mg rh-endostatin组、生理盐水组和正常对照组，每组6只。各注射组玻璃体腔注射100 μl不同剂量的rh-endostatin或生理盐水，正常对照组不做处理。玻璃体腔注射前，注射后1、3、7、14、30和60 d，裂隙灯显微镜和间接检眼镜下分别检查术眼眼前节和眼底，测量术眼眼压；于注射前，注射后7、30和60 d分别进行兔眼光相干断层扫描(OCT)检查；于注射前，注射后14和60 d行闪光视网膜电图检查；于注射后60 d摘除眼球，各组取其中3只眼球制作石蜡切片行组织病理学观察，另取3只眼球，分离视网膜组织并采用透射电子显微镜观察视网膜超微结构变化。结果:各注射组玻璃体腔注射后各时间点眼前节、后节均未见明显改变，其中0.125 mg rh-endostatin组、0.500 mg rh-endostatin组于注射后1 d各有1眼前房出现絮状渗出，分别于注射后7 d和14 d渗出完全吸收。OCT图像显示未出现异常光反射及形态改变。观察期间，各组注射前后各时间点间眼压值、a波振幅、b波振幅比较，差异均无统计学意义( F分组＝0.134、0.101、0.476， F时间＝1.709、2.479、1.706，均 P>0.05)。光学显微镜及透射电子显微镜检查各组视网膜未见明显异常。 结论:兔眼玻璃体腔注射0.125～0.500 mg rh-endostatin是安全的。

目的:观察3D打印眼模型辅助高度近视患者后巩膜加固术的临床效果。方法:前瞻性病例系列研究。纳入郑州大学第一附属医院2023年2月至2023年9月高度近视患者9例(10眼)。所有患眼术前制作3D打印眼模型，辅助后巩膜加固术中植片定位。在3D打印眼模型上根据后巩膜葡萄肿的大小、形状、面积及植片条带的走行方向制作牛心包植片，缝合固定于术眼相应巩膜壁上。术后随访3～11个月，观察手术前后最佳矫正视力(BCVA，logMAR)、眼压、眼轴长度、眼底情况及相关并发症。结果:本研究在3D打印眼模型辅助下，单纯行后巩膜加固术4眼，行后巩膜加固术联合玻璃体视网膜手术6眼。术前BCVA为1.25±0.72，眼轴长度为(31.18±2.63)mm。术后3个月BCVA为0.92±0.51，眼轴长度(30.50±3.12)mm，术前和术后BCVA差异有统计学意义( t＝2.54， P＝0.032)；术前和术后眼轴长度差异无统计学意义( t＝1.36， P＝0.208)。随访期间无并发症发生。 结论:3D打印眼模型辅助后巩膜加固术治疗高度近视，可准确定位后巩膜葡萄肿并引导植片植入。

目的 免疫组化染是病理诊断过程中重要的检测手段,设置阳性对照尤其重要.本文旨在探讨一种流程简单的使用组织芯片制作仪制作单组织阳性外对照的方法.方法 用组织芯片制作仪中直径2 mm规格的穿刺针在提前备好的空白蜡块上打孔.对照阳性切片的免疫组化染色结果,找出阳性染色部位对应的供体蜡块位置,用直径2 mm规格的穿刺针进行穿刺,并将穿刺出的组织芯注入受体蜡块孔洞中,组织芯片蜡块即制作完成.结果 同一张玻片上,单组织阳性对照呈直径2 mm的圆形,与待检组织界限清楚,阳性定位准确,从而确认了试剂的有效性及染色过程的准确性.结论 用组织芯片制作仪制作单组织阳性对照流程简单,效果良好,适合有条件的单位日常开展使用.

目的:探讨经超声引导下行细针抽吸术(fine-needle aspiration,FNA),术后诊断为甲状腺具有乳头状核特征的非浸润性滤泡性肿瘤(noninvasive follicular thyroid neoplasm with papillary-like nuclear fea-tures,NIFTP)的细胞学病理特征、诊断和鉴别诊断、治疗、预后及分子特征.方法:从病例库中筛选出细胞学诊断为可疑恶性肿瘤术后诊断为NIFTP的病例6例,每例FNA样本制作为传统涂片和液基制片,分别行苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和巴氏染色.由两位高年资细胞病理专科医生重新评估其细胞病理学特征,并结合相关文献进行回顾性分析、总结.结果:镜下,我们发现NIFTP的细胞学表现,虽与甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)存在一定的重叠(两者均表现为核增大,核毛玻璃样,可见核沟),但与PTC又有所不同:前者形成微滤泡样结构的细胞成片分布或单个微滤泡散在分布,不存在乳头状结构;另外,NIFTP核圆,核膜光滑,核内假包涵体少见.结论:本文回顾性分析并总结了 NIFTP的临床特征、细胞病理特点、鉴别诊断、治疗、预后及分子特征.我们发现FNA样本中NIFTP与其他甲状腺肿瘤之间存在不同的诊断线索,有助于细胞病理医师做出更客观准确的判读,也有助于指导临床选择合适的治疗方案.

背景:生物活性玻璃骨修复材料具有骨结合能力、骨诱导能力及骨传导特性,但目前生物活性玻璃的性能尚不符合临床应用要求,添加硼元素有望改善生物活性玻璃的性能.目的:研究不同含量B2O3替代SiO2对生物活性玻璃力学性能及生物活性的影响.方法:以含磷氮氧生物活性玻璃(成分为:SiO2-CaO-ZnO-Na2O-Si3N4-P2O5)为基础,以B2O3部分替代其中的SiO2,采用高温熔融法烧制含B2O3质量分数分别为0%(A组),5%(B组),10%(C组),15%(D组)的基础玻璃(基础玻璃中SiO2与B2O3的质量分数总和为41%),采用有机泡沫浸渍法制作多孔生物活性玻璃支架,利用万能力学试验机单轴压缩和三点弯曲法测试力学性能;将4组支架浸泡于模拟体液中,检测支架的降解性能,利用扫描电镜观察浸泡前后支架的形貌变化,以及X射线衍射分析浸泡前后的支架物相组成.结果与结论:①随着B2O3质量分数的增加,多孔生物活性玻璃支架的抗压强度与抗弯强度升高,4组支架的抗压强度与抗弯强度比较差异有显著性意义(P≤0.05);②浸泡于模拟体液中后,随着时间的延长,多孔生物活性玻璃支架逐渐降解;相同浸泡时间点下,随着B2O3质量分数的增加,支架的降解速率加快,4组支架的抗压强度与抗弯强度比较差异有显著性意义(P≤0.05);③浸泡于模拟体液后的扫描电镜显示,A、B组浸泡1 d后表面沉积大量的颗粒状物质,3 d后表面的颗粒状物质相互融合形成薄膜样沉积,7 d后表面的薄膜即相互融合成片,基本覆盖整个试件表面;C组浸泡1 d后表面形成薄膜样物质沉积,3 d后表面的薄膜即相互融合成片,基本覆盖整个试件表面;D组浸泡1 d后可见基本覆盖整个试件表面的片状物质;④浸泡于模拟体液中1 d后的X射线衍射分析显示,4组支架表面的沉积物为结晶态的羟基磷灰石;⑤B2O3替代部分SiO2会增强多孔生物活性玻璃支架的力学性能、降解性能及体外矿化活性.