目的 对北部湾3株药用植物的内生真菌进行研究,研究小叶海金沙内生真菌Spegazzinia sp.MDCW-573次级代谢产物.方法 通过10倍稀释法分离小叶海金沙、野牡丹和莲子草的内生真菌,对小叶海金沙内生真菌Spegazzinia sp.MDCW-573的次级代谢产物进行分离纯化,通过NMR、MS、ECD等方法进行结构鉴定,采用DPPH法进行化合物抗氧化活性检测,采用微量二倍稀释法进行抑菌活性测试.结果 从3株植物中分离到内生真菌171株,从Spegazzinia sp.MDCW-573的次级代谢产物中共分离得到异香豆素类化合物3个,其中化合物1为新化合物.化合物1对金黄色葡萄球菌及MRSA、化合物3对MRSA的抑菌活性MIC均为128 μg/mL.结论 化合物1～3都是首次从斯氏霉属真菌的次级代谢产物分离获得,化合物1是1个新化合物,化合物1和3具有抑菌活性.

小叶莲Sinopodophylli Fructus是藏族习用药材,具有调经活血功效.目前从小叶莲中分离鉴定的化学成分主要有木脂素类(15 种,如鬼臼毒素、去氧鬼臼毒素、4'-去甲鬼臼毒素等)和黄酮类(20 种,如槲皮素、山柰酚、芦丁等),具有抗肿瘤、抑菌、降血脂等药理作用;另外,还含有蛋白质、脂肪酸、多糖、维生素、氨基酸、微量元素等其他成分.该文根据国内外文献报道,总结并综述了小叶莲中化学成分和药理作用方面的研究进展,以期为小叶莲资源的开发及临床合理应用提供参考.

应用HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSn技术对小叶莲甲醇提取物中的主要化学成分进行定性分析.采用Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL· min-1.质谱使用ESI离子源,正、负离子分析模式采集数据,通过高分辨质谱解析,并结合相关文献和对照品数据共指认了54个化合物,包括木脂素类成分18个和黄酮类成分36个,鉴定了其中50个化合物,其中27个化合物为小叶莲中首次报道.HPLC-DAD-ESI-IT-TOF-MSn技术能快速准确地鉴定小叶莲中所含的主要成分,研究结果为控制小叶莲药材质量、阐释其药效物质和作用机制提供了科学依据,同时对进一步开发和利用小叶莲资源具有指导意义.

目的 确定小叶莲中graphislactoneA的制备分离方法;探讨graphislactoneA诱导人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡的作用机制.方法 小叶莲药材采用醋酸乙酯超声提取,提取物经过硅胶柱色谱法富集目标成分,再用重结晶法纯化.采用MTT法检测graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR的细胞毒活性.采用流式细胞术、RT-PCR技术和Western blotting法分别检测graphislactone A对乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR凋亡、凋亡相关基因及P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达的影响.结果 建立了小叶莲中graphislactone A的制备分离方法.Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有细胞毒活性,IC50值分别为2.38、9.35 μmol/L,且能够上调乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR中p53、bax、caspase-3基因的表达,下调bcl-2基因和P-gp的蛋白表达.结论 Graphislactone A为首次从高等植物中发现的酚类化合物,该制备分离方法效率高、样品回收率高,得到的目标成分纯度高.与阳性药依托泊苷相比,Graphislactone A对乳腺癌细胞MCF-7和乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR具有较强的细胞毒活性,且能够诱导其凋亡,其机制可能与p53的表达水平上调、激活caspase-3通路、调节bax和bcl-2的相对比例,下调P-gp的蛋白表达有关.

目的:考察甲基莲心碱对小鼠肝缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及机制.方法:将40只小鼠随机分为假手术组(生理盐水)、模型组(生理盐水)和甲基莲心碱低、中、高剂量组(10、30、60 mg/kg),每组8只.每天灌胃给药1次,连续给药7 d.给药结束后,除假手术组外,其余各组小鼠均采用夹闭肝蒂60 min后再灌注6 h复制肝I/R损伤模型.造模结束后,检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平,苏木精-伊红染色后观察肝组织病理学变化并进行炎症评分,检测肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA及核转录因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达情况.结果:与假手术组比较,模型组小鼠血清中ALT、AST、TNF-α、IL-6以及肝组织中MDA、SOD、TNF-αmRNA、IL-6 mRNA和NF-κB p65蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);肝组织间质有大量炎症细胞浸润、肝细胞坏死,炎症评分显著升高(P<0.05).与模型组比较,除甲基莲心碱低剂量组小鼠血清中ALT、TNF-α和肝组织中TNF-αmRNA、MDA、NF-κB p65蛋白表达水平以及肝组织炎症评分降低不显著外,其余各组小鼠上述指标水平均显著降低(P<0.05);甲基莲心碱中、高剂量组小鼠肝小叶结构完整,肝细胞形态基本正常,病理损伤得到显著改善.结论:甲基莲心碱对肝I/R损伤模型小鼠具有保护作用,且呈剂量相关性;其作用机制可能与减轻氧化应激、抑制炎症反应和降低肝组织中NF-κB p65蛋白的表达有关.

目的 研究小叶莲Sinopodo-phyllum hexandrum (Royle) Ying的化学成分.方法 小叶莲95％乙醇提取物采用硅胶柱、Sephadex LH-20、ODS柱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到10个化合物,分别鉴定为5-羟基麦芽酚(1)、对羟基苯甲酸(2)、香草酸(3)、2,4,6-三羟基苯甲酸乙酯(4)、对羟基苯甲酸乙酯(5)、原儿茶酸(6)、β-谷甾醇(7)、胡萝卜苷(8)、5-羟甲基糠醛(9)、α-棕榈酸甘油酯(10).结论 化合物1、2、4、5为首次从该属植物中分离得到,化合物6、9、10为首次从该植物中分离得到.

目的:研究神农蛇药酒的质量标准.方法:采用薄层色谱法对神农蛇药酒中半边莲、东风菜、红背丝绸、小叶三点金、通城虎进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对蛇药酒中通城虎的主要成分马兜铃酸A进行含量测定.采用Accucore C18色谱柱(3×100 mm,2.6μm),以0.1％磷酸溶液为流动相A,以乙腈为流动相B,进行梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,检测波长250 nm,室温下进样量10μL.结果:薄层色谱对处方中半边莲、红背丝绸、通城虎的薄层鉴别方法重现性好、专属性强,定性鉴别色谱特征明显,易于区别.马兜铃酸A在1.0096～100.96 mg/L线性关系良好(r=0.9999),回归方程Y=0.2351X+0.0528,平均回收率为103.50％,RSD=1.90％.结论:建立的质量标准测定方法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于神农蛇药酒的质量控制.

采用HPLC-MSn联用技术对藏族药小叶莲具有抗乳腺癌活性的乙酸乙酯提取物的化学成分进行定性分析.应用Kromasil 100-5 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1.质谱使用ESI离子源,正、负离子分析模式采集数据,通过高分辨质谱解析,并结合相关文献和对照品数据共指认了102个化合物,包括黄酮类成分67个和木脂素类成分35个,其中小叶莲中首次报道的化合物45个(43个为黄酮类化合物,2个为鬼臼木脂素类化合物),新化合物19个(18个为异戊烯基黄酮类化合物,1个鬼臼木脂素类化合物).利用PharmMapper对首次在小叶莲中报道的化合物进行活性预测,发现有20个化合物具有潜在的抗癌活性.该研究发现小叶莲乙酸乙酯提取物中存在较多的同分异构体,共发现同分异构体19组,其中分子式为C21H20O8的化合物同分异构体最多,共有18个化合物,均为α-peltatin或其异构体;其次是C21H20O7,共有10个化合物,均为8-prenylquercetin-3-methyl ether或其异构体.HPLC-MSn技术能快速指认小叶莲具有抗乳腺癌活性的乙酸乙酯提取物中所含的化学成分,研究结果为阐释小叶莲抗乳腺癌的药效物质和作用机制提供了更多的科学依据.

该文对中国毛茛科银莲花属(Anemone L.)进行了分类学研究,共收载86种,可将这些种划分为10组:其中5组,即草玉梅组、西南银莲花组、钝裂银莲花组、短柱银莲花组和直果银莲花组均是该属具中等演化水平的分类群;另外5组,即银莲花组、鹅掌草组、卵叶银莲花组、二岐银莲花组和打破碗花花组则均是具高度演化水平的分类群.在这10组中,钝裂银莲花组与银莲花组有相近的亲缘关系,短柱银莲花组与鹅掌草组有相近的亲缘关系,而其余6组之间的亲缘关系情况,目前尚未了解.该文写出了区别所有属下分类群的检索表、所有分类群的文献引证和地理分布,并对每一种均指出了研究的重要标本,对多数种均提供插图.描述了2新组(短柱银莲花组和直果银莲花组)、4新系(鹅掌草组的鹤峰银莲花系和加查银莲花系,以及直果银莲花组的兴义银莲花系和直果银莲花系)、13新种(九龙银莲花、柏枝山银莲花、狭萼银莲花、道孚银莲花、泸定银莲花、波密银莲花、嘎隆拉山银莲花、三小叶银莲花、折多山银莲花、宝兴银莲花、贡嘎银莲花、福贡银莲花和盘蕊银莲花)、1新亚种(长柄钝裂银莲花)以及4新变种(紫萼折多山银莲花、矮展毛银莲花、疏毛川西银莲花和泸水银莲花).此外,还将变种条叶银莲花提升为种级分类群;将涪陵银莲花降级作为川西银莲花的一个变种;由于Anemone rupestris Hook.f.&Thoms.为一不合法的晚出异物同名,遂拟出一新名(Anemone neorupestris W.T.Wang);小花草玉梅在过去多年间被处理为草玉梅的一个变种,在该文中其原来种级群的地位得到恢复;1939年,H.Handel-Mazzetti将变种云南银莲花归并于展毛银莲花,将稀果银莲花归并于滇川银莲花,对此二归并,该文赞同并采用.

目的 研究小叶莲Sinopodophyllum hexandrum (Royle) Ying中木脂素类成分.方法 小叶莲95％乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS、AB-8大孔吸附树脂柱、制备型HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.结果 从中分离得到14个化合物,分别鉴定为naphtho[2,3,d]-1,3-dioxole-6-carboxylic acid(1)、methyl podophyllotoxinate (2)、6,7-去亚甲基-去氧鬼臼毒素(3)、6,7-去亚甲基鬼臼毒素(4)、6,7-去亚甲基-4 '-去甲鬼臼毒素(5)、去氧鬼臼毒素(6)、4'-去甲-去氧鬼臼毒素(7)、4'-去甲鬼臼毒素(8)、鬼臼毒素(9)、4'-去甲异苦鬼臼毒酮(10)、α-足叶草素(11)、去氢鬼臼毒素(12)、4'-去甲-去氢鬼臼毒素(13)、(-)松脂酚(14).结论 化合物1～2、5、11、14为首次从该属植物中分离得到,化合物3～4、8、12～ 13为首次从该植物中分离得到.