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甲基莲心碱对七氟烷麻醉后大鼠认知障碍影响的实验研究
编辑人员丨2天前
目的:探讨甲基莲心碱对七氟烷麻醉后大鼠认知障碍的影响及其分子机制。方法:选取2018年7月将45只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组和甲基莲心碱组,每组15只。模型组和甲基莲心碱组大鼠七氟烷麻醉3 h后自然苏醒,对照组不做处理。甲基莲心碱组大鼠在麻醉之前给予腹腔注射甲基莲心碱5 mg/kg,对照组和模型组大鼠经腹腔注射等体积生理盐水。干预24 h,采用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力;采用酶联免疫法测定3组大鼠血清氧化应激指标变化;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析3组大鼠脑组织细胞凋亡水平;采用荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)分析3组大鼠脑组织中半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3和Caspase-9 mRNA表达水平。应用SPSS 17.0统计软件分析,符合正态分布的计量资料以均数±标准差( ± s)表示。 结果:甲基莲心碱组大鼠逃避潜伏期[(7.95±1.89) s]低于模型组大鼠逃避潜伏期[(12.25±2.78) s],而穿台指数(4.98±1.03)高于模型组穿台指数(3.01±0.89),差异均有统计学意义( t=3.103, P<0.05; t=1.895, P<0.05)。甲基莲心碱组大鼠血清丙二醛(MDA)水平[(8.20±1.21)μmol/L]低于模型组血清MDA水平[(13.19±1.59) μmol/L],差异有统计学意义( t=2.908, P<0.05)。甲基莲心碱组大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)水平[(410.43±60.12) U/ml]高于模型组血清SOD水平[(321.10±50.21) U/ml],差异有统计学意义( t=2.441, P<0.05)。甲基莲心碱组大鼠脑组织细胞凋亡比例[(5.01±1.21)%]低于模型组脑组织细胞凋亡比例[(9.10±2.19)%],差异有统计学意义( t=1.809, P<0.05)。甲基莲心碱组大鼠脑组织Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达水平(1.39±0.15、1.52±0.19)低于模型组脑组织Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达水平(1.98±0.23、2.42±0.25),差异有统计学意义( t=1.831, P<0.05; t=1.592, P<0.05)。 结论:甲基莲心碱通过下调氧化应激反应,显著缓解了七氟烷麻醉所致大鼠认知障碍。
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编辑人员丨2天前
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甲基莲心碱通过调控NF-κB信号通路减轻脓毒症大鼠急性肺损伤
编辑人员丨1个月前
[目的]探讨甲基莲心碱对脓毒症大鼠急性肺损伤的治疗作用及机制.[方法]采用盲肠结扎穿刺(GLP)法制备脓毒症大鼠模型,造模成功后,将大鼠分为模型组,甲基莲心碱低、高剂量组和甲基莲心碱高剂量+PMA[核转录因子κB(NF-κB)激活剂佛波酯]组,同时设置假手术组,每组15只.术后6 h,给予相应干预,连续2 d.采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态学改变,并进行损伤病理评分;检测肺组织湿干质量比;血气分析仪检测动脉血氧分压(PaO2)和动脉血二氧化碳分压(PaCO2)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)水平;Western Blot法检测肺组织中NF-κB p65、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)p65(Ser536)、环氧合酶2(COX-2)蛋白表达水平.[结果]与假手术组比较,模型组大鼠肺组织损伤严重,肺组织损伤病理评分、湿干质量比及PaCO2水平显著升高(P<0.01),PaO2水平显著降低(P<0.01),BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及肺组织中p-NF-κB p65/NF-κB p65比值、COX-2蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,甲基莲心碱低、高剂量组大鼠肺组织损伤明显改善,肺组织损伤病理评分、湿干质量比及PaCO2水平显著降低(P<0.05或P<0.01),PaO2水平显著升高(P<0.05或P<0.01),BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6水平以及肺组织中p-NF-κB p65/NF-κB p65比值、COX-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05或P<0.01).然而,PMA干预后,甲基莲心碱对脓毒症大鼠肺组织损伤的改善作用被明显逆转(P<0.01).[结论]甲基莲心碱可改善大鼠脓毒症急性肺损伤及肺功能,其作用可能与抑制NF-κB信号通路激活,进而减少体内炎症因子释放有关.
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编辑人员丨1个月前
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甲基莲心碱通过调节CCL2-CCR2信号通路对缺血性脑卒中大鼠血脑屏障的影响
编辑人员丨2024/7/20
目的:探究甲基莲心碱(NEF)调节CC趋化因子配体2(CCL2)-趋化因子受体2(CCR2)信号通路对缺血性脑卒中(IS)大鼠血脑屏障的影响.方法:将雄性SD大鼠随机分为模型组(Model组)、低剂量NEF组(NEF-L组,25 mg/kg NEF)、高剂量NEF组(NEF-H组,50 mg/kg NEF)和高剂量NEF+CCR2 拮抗剂组(NEF-H+RS102895 组,50 mg/kg NEF+10 mg/kg RS102895)和假手术组(Sham组),每组15只.比较各组大鼠神经功能评分.伊文思蓝(EB)渗透法评价各组大鼠血脑屏障通透性.采用干湿重法测定各组大鼠脑组织含水量.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定大鼠脑组织CCL2、CCR2 mRNA表达.Western blot检测大鼠脑组织CCL2、CCR2、ZO-1、Claudin-5蛋白表达.结果:与Sham组相比,Model组大鼠神经功能评分、右脑组织EB含量、含水量、脑组织CCL2、CCR2 mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05),ZO-1、Claudin-5水平显著降低(P<0.05).相较于Model组,NEF-H组神经功能评分、脑含水量、EB含量、CCL2、CCR2 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05),ZO-1、Claudin-5表达水平显著升高(P<0.05).RS102895增强了NEF对IS大鼠血脑屏障的保护作用.结论:NEF可能通过抑制CCL2-CCR2信号通路对IS大鼠血脑屏障起保护作用.
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编辑人员丨2024/7/20
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甲基莲心碱调节SDF-1/CXCR4信号通路对糖尿病肾病的影响
编辑人员丨2024/4/27
目的·探讨甲基莲心碱(neferine,Nef)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织的作用及其相关机制.方法·采用高脂饲料喂食联合腹腔注射链脲佐菌素的方法构建DN模型大鼠,并将造模成功的大鼠随机分为DN组、Nef(低、中、高)剂量组、Nef高剂量+通路拮抗剂(AMD3100)组,每组10只.同时,选10只普通大鼠作为正常组.检测 6组大鼠的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、24 h尿蛋白、血清糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平及肾指数.分别采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色、马松(Masson)染色观察 6 组大鼠的肾组织的病理变化.采用硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测肾组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,分别采用水溶性四氮唑(water soluble tetrazolium,WST-1)法、钼酸铵法检测肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性.分别采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测肾组织中基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)的mRNA以及蛋白表达.采用高糖(30 mmol/L葡萄糖)诱导大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,以建立DN细胞模型.将该细胞分为对照组、高糖(HG)组、HG+Nef(低、中、高)剂量组(即HG+Nef-L、M、H组)、HG+Nef-H+ AMD3100组.分别采用WST-1法、钼酸铵法检测模型细胞中SOD、CAT活性,采用TBA法检测MDA含量,分别采用qPCR、Western blotting检测SDF-1、CXCR4的mRNA及蛋白表达,采用CCK-8法、流式细胞术检测细胞活力和凋亡率.结果·与DN组比较,Nef(低、中、高)剂量组和Nef高剂量+AMD3100组大鼠的FBG、24 h尿蛋白、HbA1c、Scr、BUN水平以及肾指数、MDA水平均较低,SDF-1、CXCR4的mRNA和蛋白表达以及SOD、CAT活性均较高(均P<0.05),肾组织病理损伤、纤维化程度有所减轻,且均呈剂量依赖性;AMD3100能减弱高剂量Nef对DN大鼠的肾保护作用.与HG组比较,HG+Nef-L、M、H组NRK-52E细胞的活力,SOD、CAT活性,SDF-1、CXCR4的mRNA和蛋白表达均较高,MDA含量及凋亡率均较低(均P<0.05);AMD3100可逆转Nef-H对NRK-52E细胞损伤的保护作用.结论·Nef可能通过激活SDF-1/CXCR4信号通路来控制DN大鼠的血糖水平并提高其抗氧化能力,从而发挥肾保护作用.
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编辑人员丨2024/4/27
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甲基莲心碱的药理作用研究进展
编辑人员丨2024/2/3
甲基莲心碱是从睡莲科植物莲Nelumbo nucifera的种子幼叶和胚根(莲子心)中分离得到的一种具有双苄基异喹啉特殊结构的生物碱,大量研究表明其具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗心律失常、抗血栓、降压和减肥消脂等多种生物活性,在肿瘤、心血管和神经退行性疾病领域有广阔的应用前景.通过对甲基莲心碱在不同细胞和动物模型中的药理作用及作用机制进行综述,为进一步阐明甲基莲心碱的药用价值和合理开发应用提供科学依据.
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编辑人员丨2024/2/3
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莲生物碱生物合成途径及相关基因研究进展
编辑人员丨2023/9/2
莲的多个部位均可作药,其中苄基异喹啉类生物碱是荷叶、莲子心的主要活性成分.荷叶含有荷叶碱、莲碱等阿朴啡类生物碱,具有良好调脂减肥作用;莲子心中主要含有甲基莲心碱、莲心碱等双苄基异喹啉类生物碱,可抗心律失常.近年来,莲生物碱成分的显著药理活性及荷叶与莲子心的"同源异效"现象,激发越来越多研究工作者开展莲生物碱生源合成途径及关键酶研究.为此,本文综述了荷叶、莲子心生物碱成分类型、生物碱合成途径及关键酶基因研究进展,以期为解析莲的生物碱合成途径及荷叶、莲子心的药效分化分子机制提供参考.
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编辑人员丨2023/9/2
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基于PI3K/Akt信号通路探讨甲基莲心碱对HeLa细胞的影响
编辑人员丨2023/8/19
目的 探讨甲基莲心碱对宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响.方法 以不同质量浓度甲基莲心碱(0、10、15、20、25、30 μg/mL)处理HeLa细胞,CCK-8法检测细胞活性,在光学显微镜下观察细胞形态,TUNEL法和流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达.建立裸鼠HeLa细胞移植瘤模型,随机分为对照组、顺铂组和甲基莲心碱低、高剂量组,观察各组移植瘤生长情况,HE染色观察肿瘤组织细胞形态变化,Western blot法检测肿瘤组织蛋白表达.结果 随着甲基莲心碱干预剂量的增加,HeLa细胞逐渐失去正常形态,细胞变圆,贴壁能力降低,透光性增加.与对照组比较,甲基莲心碱组细胞活性降低(P<0.05),细胞凋亡率和Bax、cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),并呈时间和剂量依赖性;细胞PI3K、Akt蛋白表达无明显变化(P>0.05).与对照组比较,甲基莲心碱组裸鼠肿瘤生长受到抑制(P<0.05),肿瘤组织 Bcl-2、p-PI3K、p-Akt蛋白表达降低(P<0.05),Bax、cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).结论 甲基莲心碱可促进宫颈癌HeLa细胞凋亡,其可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路发挥作用.
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编辑人员丨2023/8/19
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甲基莲心碱对HepG2细胞增殖及凋亡的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究甲基莲心碱对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响.方法:采用CCK-8法观察甲基莲心碱对人肝癌细胞HepG2细胞生长增殖的影响;Hoechst33258染色观察甲基莲心碱作用 HepG2细胞后细胞形态的变化;测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率观察HepG2细胞受损程度;Annexin V-PI双染测定甲基莲心碱对HepG2细胞凋亡率的影响;PI/RNase单染检测不同浓度的甲基莲心碱对其凋亡周期的影响.结果:甲基莲心碱对体外培养的人肝癌HepG2细胞的生长具有抑制作用,且呈剂量、时间依赖性;细胞膜的受损程度随着药物剂量的增大逐步提高;Hoechst33258及流式结果表示,甲基莲心碱可使HepG2细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率随药物浓度的增大亦呈增长趋势.结论:甲基莲心碱可显著抑制肝癌HepG2细胞的生长增殖,并在一定的范围内呈剂量、时间依赖性,诱导其阻滞于G0/G1期,发生晚期凋亡.
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编辑人员丨2023/8/6
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甲基莲心碱对人肝星状细胞共培养条件下的人肝癌细胞中的转化生长因子(TGF-β1)的影响
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究甲基莲心碱对人肝星状细胞LX-2细胞株共培养条件下的人肝癌细胞HepG2细胞株中的转化生长因子(TGF-β1)的影响.方法:Transwell建立HepG2细胞和LX-2细胞共培养系统,同时设置阴性对照组和单独的HepG2细胞培养组;倒置显微镜下观察甲基莲心碱诱导肝星状细胞共培养条件下的肝癌细胞的凋亡形态变化;酶联免疫(ELISA)检测上清液中分泌的转化生长因子(TGF-β1)的浓度;Western Blot和实时定量PCR分别从蛋白水平和mRNA水平测定TGF-β1的表达情况.结果:甲基莲心碱作用共培养条件的HepG2细胞48 h,给药组相较于对照组细胞数目减少,形态皱缩,但没有单独的HepG2细胞组凋亡形态明显;TGF-β1经ELISA、Western Blot和实时定量PCR检测,其表达水平均随着药物剂量的增大而下调,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),但没有单独的HepG2细胞组TGF-β1水平下调明显.结论:甲基莲心碱能够下调肝星状细胞LX-2细胞株共培养条件下的肝癌细胞HepG2细胞株的TGF-β1的表达来诱导细胞凋亡,并呈现出剂量依赖性,但肝星状LX-2细胞对甲基莲心碱诱导共培养下的HepG2细胞的凋亡有一定地抑制作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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甲基莲心碱对增生性瘢痕成纤维细胞Bcl-2、Bax及Caspase-3表达影响的研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:研究甲基莲心碱对增生性瘢痕成纤维细胞中Bcl-2、Bax及Caspase-3 中mRNA和蛋白表达的影响.方法:体外培养增生性瘢痕成纤维细胞及正常皮肤组织,随机分为4组:对照组、甲基莲心碱低、中、高剂量组(5、10、20μg/ml).各组分别加入不同浓度药物培养24h后,采用RT-PCR检测Bcl-2、Bax及Caspase-3 mRNA的表达,并运用Western Blot检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白的表达.结果:与对照组相比,低剂量组Bcl-2、Bax及Caspase-3 mRNA表达量均无明显变化(P>0.05);中、高剂量组Bcl-2 mRNA表达量明显降低,Bax及Caspase-3 mRNA表达量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,低剂量组Bcl-2蛋白表达量无明显变化,中、高剂量组Bcl-2蛋白表达量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量组Bax及Caspase-3蛋白表达量均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).结论:甲基莲心碱能上调增生性瘢痕成纤维细胞中Bax、Caspase-3的表达,同时下调Bcl-2的表达.
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编辑人员丨2023/8/6
