目的:对1例反复高热疑似为少汗型外胚层发育不良的患儿进行基因检测，以明确其病因。方法:应用医学全外显子组测序技术(whole exome sequencing，WES)检测患者基因组内的单核苷酸变异，用低深度全基因组测序技术(low-coverage massively parallel copy number variation sequencing，CNV-seq)对WES检测的结果进行验证，应用PCR和实时荧光定量PCR技术检测患者及母亲 EDA基因第3～8外显子的缺失情况。 结果:WES检测提示患儿chrX：69 243 016-69 395 730区可能存在半合子缺失。CNV-seq检测提示患儿Xq13.1区存在约0.12 Mb的缺失，缺失范围涉及 EDA基因。PCR检测确认患儿 EDA基因第3～8外显子存在半合子缺失，其母亲未见相同缺失。 结论:患儿为 EDA基因第3～8外显子半合子缺失变异所致的少汗型外胚层发育不良患者，可能为新发变异或其母亲为生殖腺嵌合体。WES和CNV-seq技术对于诊断罕见疾病中具有较高的价值。

目的·探索先天缺牙相关的外异蛋白A受体(ectodysplasin A receptor,EDAR)基因突变位点,初步分析EDAR基因突变导致综合征型和非综合征型缺牙的原因.方法·研究对象为就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔第二门诊部的先天缺牙患者及其家系成员,提取其外周血中的基因组DNA进行全外显子组测序.通过初步筛选后,用PolyPhen-2、Mutation Taster、Provean对潜在突变位点的有害性进行预测,对分析后的突变位点进行Sanger测序验证.进行突变位点的保守性分析,使用在线工具Swiss-Model进行同源建模,分析EDAR蛋白的三维结构变化.对患者及其家系成员的先天缺牙和全身发育情况进行临床检查.结果·在纳入的先天缺牙患者中共发现5名EDAR基因突变患者,1名患者携带移码突变c.368_369insC(p.L123fs),4名患者携带错义突变.在EDAR错义突变患者中,有2名患有非综合征型缺牙(non-syndromic tooth agenesis,NSTA),分别携带c.77C＞A(p.A26E)纯合突变和c.380C＞T(p.P127L)杂合突变.另外2名患有少汗型外胚层发育不良(hypohidrotic ectodermal dysplasia,HED),均带有2个基因突变位点:1名为EDAR复合杂合患者,携带来自父亲的EDAR c.77C＞T(p.A26V)和来自母亲的EDAR c.1281G＞C(p.L427F);另1名为EDAR、外异蛋白A(ectodysplasinA,EDA)双基因突变患者,EDAR c.1138A＞C(p.S380R)和EDAc.1013C＞T(p.T338M)均来自母亲,这2个位点在此前的报道中仅与NSTA相关.EDAR c.1281G＞C(p.L427F)、c.77C＞A(p.A26E)为未被报道过的错义突变新位点.错义突变可能通过改变氨基酸残基极性、电荷或体积等,对蛋白空间构象造成影响;移码突变造成了非3整倍数的碱基增加,可能导致蛋白的截短或降解.结论·发现了2个新的EDAR错义突变位点,报道了由EDAR纯合突变导致的NSTA以及由EDA、EDAR双基因突变导致HED的病例,扩展了对于EDAR突变造成HED和NSTA的致病机制的理解.

目的 诊断1例COG6基因复合杂合突变所致的先天性糖基化障碍(CDG),为CDG患儿的的早期诊断、制定干预措施和结局预测提供依据.方法 总结1例携带有COG6复合杂合突变的CDG患儿的临床表型、家系sanger验证信息、影像学表现、实验室检查和随访信息,对COG6及其他Golgi复合体(COG)基因突变所致CDG的疾病表型行文献复习.结果 患儿因早产、生后反复气促吐沫1月余就诊,主要表现为不明原因反复高热伴肝酶异常,皮肤少汗,异常面容,并存在心、肺、肾、凝血和神经系统异常.行核心家系全外显子组检测发现COG6基因复合杂合突变c.511C＞T (p.R171X)和c.540G＞A(p.E180E),c.511C＞T来源于母亲,是人类基因突变数据库(HGMD)已报道的CDGⅡ型的致病突变;c.540G＞A来源于父亲,为新发突变.汇总专业版HGMD已报道的COG6-CDG患儿9例加本文1例共10例表型(CDGⅡ型),异常面容,可表现为肝、皮肤、心脏、肾脏、骨骼、关节、凝血、免疫、神经系、听力和视觉异常或其他畸形等,多数患儿生长发育迟缓,预后不良,5例病死,存活者均进展为严重肝功能障碍伴反复感染.比COG-CDG其他亚型,临床表现更丰富、病情偏重且预后差.结论 新生儿期表现为不明原因高热伴肝酶异常,皮肤少汗,肌张力异常,或存在心、肾、免疫和凝血等多器官和系统功能异常的患儿,应高度怀疑COG6-CDG,此类患儿多数生长发育迟缓,预后不良,新生儿期通过基因测序可早期诊断.

患儿6月龄起病,以发热、抽搐、前囟隆起为主要临床表现,外周血白细胞、红细胞沉降率、C-反应蛋白显著增高,血、脑脊液均培养出肺炎链球菌,诊断为细菌性脑膜炎、侵袭性肺炎链球菌感染、脓毒症.经过联合、敏感、足量、足疗程抗生素治疗后,仍反复高热,各项炎性指标仍高.考虑存在原发性免疫缺陷病,送医学外显子基因包检查(二代测序),未发现致病性突变.加用激素及诊断性抗结核治疗后体温及炎性指标逐步恢复正常.于1岁1个月时,在维持抗结核治疗及激素减量期间,患儿再次发生肺炎链球菌脑膜炎.重新评估临床特征,发现患儿有毛发稀疏,肤色偏白、出汗少、牙齿发育不佳等外胚层发育不良的表现,结合其反复严重感染的特点,符合少汗型外胚层发育不良伴免疫缺陷病的表型.该病的主要致病基因为NEMO,位于X染色体,在其下游存在一个假基因IKBKGP,与NEMO的3～10号外显子具有99.8％的同源性,在二代测序中假基因可以掩盖NEMO基因同源序列的突变.对NEMO基因进行一代测序,发现该患儿在NEMO基因4号外显子上存在新生错义突变c.505G＞ C(p.A169 P),为已报道的少汗型外胚层发育不良伴免疫缺陷病的致病性突变,最终为该患儿的确诊提供了理论依据.

目的 分析X连锁少汗型外胚层发育不良家系的基因变异及遗传咨询.方法 采用二代测序法查找先证者致病基因及其突变位点,Sanger测序验证.根据基因诊断结果对先证者母亲第2胎进行产前分子诊断.结果 先证者男性,出生10天,因发热、特殊面容就诊.经基因检测发现EDA基因c.682_683delCCinsA杂合突变,母亲具有相同突变.第2胎经羊水穿刺,基因检测未发生以上突变.结论 基因检测有助于明确少汗型外胚层发育不良家系患儿的遗传病因,在此基础上可对患儿家系进行遗传咨询和产前基因诊断.

8岁女童因左眼痛伴视力下降来诊,眼科检查发现双眼角膜中央上皮弥漫点状着染,睑板腺开口阻塞,睑缘红肿,睫毛脱落,双眼睑皮肤粗糙,眉毛脱落,全身查体:无发,牙齿缺如,皮肤角化,患儿母亲具有相同的症状和体征,诊断为先天性外胚层发育不良.

目的 分析X连锁少汗型外胚层发育不良患儿的致病基因,为先证者家庭提供遗传咨询和产前诊断.方法 利用高通量测序技术检测先证者的相关致病基因,依据检测结果 的缺失提示,进一步采用染色体微阵列技术检测缺失范围.根据染色体微阵列的缺失区域设计断点PCR引物,对包含断点的PCR产物进行Sanger测序确定缺失范围,并验证先证者母亲基因型,结合基因诊断结果对家系第三胎进行产前分子诊断.结果高通量测序发现先证者EDA基因第一外显子编码区缺失.染色体微阵列检测到X染色体存在约267 kb片段缺失,包含EDA基因第一外显子.断点PCR产物Sanger测序发现先证者存在267808 bp半合子缺失,母亲为杂合缺失携带者.胎儿产前分子诊断结果未发现存在该区域缺失.结论 EDA基因第一外显子及上下游区域的缺失是导致先证者临床表现的主要原因,结合多种分子检测手段有助于明确因拷贝数目变异所致的遗传性疾病,并通过断点PCR的方法对该家系进行了快速的携带者验证及产前诊断,为该家庭的临床诊断和遗传咨询提供了遗传学证据.

报告1例少汗型外胚层发育不良综合征.临床检查:患儿全身毛发稀疏;口内检查:混合牙列,牙列缺损,牙槽嵴发育不良.诊断为少汗型外胚层发育不良综合征,并采用可摘局部义齿修复治疗,咀嚼功能恢复良好.

少汗型外胚层发育不全( hypohidrotic etcodermal dysplasia,HED),指胚胎时期外胚层发育异常导致的外胚层的衍生组织形态和功能出现异常或不发育,常表现为汗腺发育不良,先天缺牙等[1].牛牙症是一种以髓腔垂直方向伸长为特点的牙齿发育异常,常与唇腭裂,发-骨-牙综合征等疾病伴发,临床上非常罕见[2].目前,多采用牛牙症指数( taurodontism index, TI)作为牛牙症的诊断标准[3].我院口腔科对1例少汗型外胚层发育不良合并重度牛牙症患者进行了多学科联合治疗,取得满意的修复效果.