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UPLC-Q-TOF-MS代谢组学探讨巴戟天环烯醚萜苷抗类风湿关节炎及并发骨丢失的机制
编辑人员丨2024/3/16
探讨巴戟天环烯醚萜苷(Morinda officinalis iridoid glycosides,MOIG)对类风湿关节炎大鼠足肿胀和骨丢失的治疗作用,并结合超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)血清代谢组学分析其潜在的作用机制.应用牛Ⅱ型胶原诱导类风湿关节炎模型大鼠(type Ⅱ collagen-induced rheumatoid arthritis rats,CIA),CIA造模成功后,灌胃给药8 周,每周根据足肿胀程度进行关节炎指数评价,ELISA法检测血清骨代谢生化指标,Masson染色观察CIA大鼠股骨微结构,UPLC-Q-TOF-MS检测血清代谢产物的变化,主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)筛选血清样品潜在生物标志物,通过KEGG数据库分析构建相关代谢通路.结果表明CIA大鼠的关节炎指数、血清IL-6水平和血清骨代谢相关指标骨钙素(osteo-calcin,OCN)、Ⅰ型胶原C端肽(C-telopeptide of type Ⅰ collagen,CTX-Ⅰ)、脱氧吡啶啉(deoxypyridinoline,DPD)和抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)水平显著增加,骨保护素(osteoprotegerin,OPG)与核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)的比值显著降低,关节骨组织结构和软骨破坏;MOIG治疗显著降低CIA大鼠的关节炎评分,减轻关节足趾肿胀,逆转血清骨代谢生化指标的变化,改善关节骨组织和软骨的微结构.非靶向代谢组学结果显示CIA大鼠血清中有 24 个代谢物发生变化;与正常组比较,CIA大鼠有 13 个与RA相关的显著变化的代谢物,主要涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢;与CIA模型组比较,MOIG治疗大鼠有 15 个代谢物显著回调,主要涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢,缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸生物合成.因此,MOIG可能通过调控氨基酸代谢减轻CIA大鼠足肿胀,改善软骨和骨组织微结构的破坏.
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编辑人员丨2024/3/16
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基于国家药品评价性抽检的巴戟天饮片质量分析与研究
编辑人员丨2023/11/25
目的:通过国家药品评价性抽检工作,了解市场上的巴戟天饮片质量及存在的问题,为巴戟天的质量标准提高和市场监管提供数据支持.方法:从全国24个省级行政区抽取巴戟天饮片,按照《中华人民共和国药典》2015年版(一部)巴戟天性状项和薄层鉴别项方法开展检验工作,并进行DNA条形码技术、指纹图谱、环烯醚萜含量测定、真菌毒素残留量共4项探索性研究,分析检验结果以评价巴戟天饮片的市场情况.结果:本次抽检的88家企业的巴戟天饮片共计108批,按照国家法定标准检验的合格率为100%.DNA条形码技术可以有效区分巴戟天及其混伪品.指纹图谱研究结果显示,正品巴戟天指纹图谱相似度均超过95%,混伪品相似度均低于70%.含量测定结果显示,不同巴戟天炮制品中环烯醚萜从种类和含量上具有显著性差别.真菌毒素筛查试验结果显示,有1批样品的黄曲霉毒素G1超出药典限度.结论:按标检验结果显示,市场上巴戟天饮片质量基本合格.根据探索性研究结果,建议标准增加环烯醚萜含量测定和黄曲霉毒素限量检查.
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编辑人员丨2023/11/25
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巴戟天盐蒸过程中梅拉德反应及其产物的研究
编辑人员丨2023/8/6
目的:观察巴戟天盐蒸不同时间对水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸和5-羟甲基糠醛含量的动态变化.方法:采用HPLC梯度洗脱的方法,测定巴戟天盐蒸过程中的水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸和5-羟甲基糠醛的含量.同时对蒸制过程中的pH值、吸光度等进行监测.结果:随着巴戟天盐蒸时间的不断延长,环烯醚萜苷类成分水晶兰苷的含量逐渐下降,去乙酰车叶草苷酸的含量变化不大;巴戟天盐蒸后新产生的5-羟甲基糠醛的含量逐渐升高.结论:巴戟天在盐蒸过程中可能发生了美拉德反应.
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编辑人员丨2023/8/6
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UPLC-MS/MS同时测定巴戟天中4个环烯醚萜苷的含量
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定巴戟天中4个环烯醚萜苷(水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸、车叶草苷酸和车叶草苷)含量.方法:巴戟天以甲醇回流提取;采用Xbridge BEH C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.3%甲酸水为流动相,梯度洗脱;电喷雾离子源,负离子多反应监测模式监测,内标法测定.结果:水晶兰苷、去乙酰车叶草苷酸,车叶草苷酸和车叶草苷质量浓度在0.015~79.65、0.030~96.00、0.042~21.00、0.018~37.50 μg· mL-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系(R2≥0.994 9);平均加样回收率分别为99.4%、98.5%、98.1%、97.7%,RSD分别为2.3%、2.5%、3.5%、4.1%;不同产地巴戟天中车叶草甘酸和车叶草甘的含量差异较大;结论:该方法可靠,简便,可用于巴戟天中环烯醚萜苷的快速检测.
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编辑人员丨2023/8/6
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巴戟天治疗抑郁症在整合药理学下的作用机制探索
编辑人员丨2023/8/6
目的 运用中药整合药理学计算平台(TCMIP),探索巴戟天治疗抑郁症的作用机制.方法 借助TCMIP,检索巴戟天所含的化学成分信息;通过网络药理学平台,以“节点连接度”的2倍中位数为卡值,选取中药靶标-疾病基因互作网络的核心节点;在此基础上,计算“节点连接度”“节点紧密度”和“节点介度”等3个拓扑结构特征值,筛选出巴戟天治疗抑郁症的核心靶标;基于基因本体数据库(GO)和KEGG通路数据库,确定药物靶标基因所编码蛋白质的分子功能、细胞内定位及其所参与的生物学反应和通路,再进一步构建“中药-成分-靶标-通路”多维关系网络.结果 测得巴戟天所含活性成分19个,主要包括蒽醌类、多糖类、环烯醚萜苷类及其他成分;筛选出巴戟天治疗抑郁症的3个核心靶标,包括5-羟色胺受体2A、2B、2C (HTR2A、HTR2B、HTR2c);结合富集计算,预测巴戟天治疗抑郁症可能与氧化磷酸化、能量代谢、钙信号通路、心肌收缩、内分泌系统、循环系统、神经系统、感觉系统、细胞通讯等通路有关.结论 借助TCMIP,发现巴戟天对抑郁症的干预作用可能与氧化磷酸化、能量代谢、钙信号通路、内分泌系统、循环系统、神经系统、感觉系统、细胞通讯等通路有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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巴戟天环烯醚萜苷类成分的制备及其对破骨细胞骨吸收的抑制作用
编辑人员丨2023/8/6
目的 研究巴戟天中环烯醚萜苷类成分(Morinda officinalis iridoid glycosides,MOIG)的制备方法及其对破骨细胞骨吸收的抑制作用.方法 用高效液相色谱(HPLC)法测定MOIG中水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸的含量;通过对AB-8、ADS-17、D101、HPD400、HPD600、HP20、S-8、SP850、XDA-1、XDA-6等型号大孔吸附树脂进行静态吸附-解吸附实验筛选大孔树脂型号,并优化大孔树脂富集MOIG的条件;以由小鼠骨髓单核细胞诱导的破骨细胞为模型评价MOIG对骨吸收的抑制作用.结果 经过优选,XDA-1型大孔树脂对MOIG有较好的吸附和解吸附作用,优化的XDA-1型大孔树脂富集MOIG的条件为:上样液中MOIG的质量浓度为19.15 mg/mL,pH值为1.0,树脂柱的径高比为1∶7,上样流速为2.0 BV/h(1 BV=80 mL),上样体积为0.75 BV,树脂吸附时间为11h,7 BV水洗脱以除去其他的成分,10%乙醇以3.0 BV/h流速洗脱MOIG.验证试验结果表明,所制备的MOIG中水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸的总含量可达54%以上.MOIG对由小鼠骨髓单核细胞诱导的破骨细胞增殖无显著影响,但能抑制破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶活性,抑制破骨细胞的骨吸收(P<0.05,P<0.01).结论 XDA-1型大孔树脂可用于富集MOIG,得到的水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸总含量在54%以上;MOIG可抑制破骨细胞的骨吸收.
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编辑人员丨2023/8/6
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不同炮制品及不同产地巴戟天中4种环烯醚萜类成分的含量测定
编辑人员丨2023/8/6
目的:建立UPLC同时测定巴戟天中水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸、车叶草苷酸和车叶草苷含量的方法,并检测巴戟天不同炮制品及不同产地样品中4种环烯醚萜成分的含量.方法:采用ZOBAX SB-C18(150 mm×3mm,3.5 μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.6 mL/min,进样量为1 μL,检测波长为235 nm,柱温为40℃.结果:水晶兰苷在0.9788~7.8304 μg、去乙酰基车叶草苷酸在0.4625~3.7000 μg、车叶草苷酸在0.0084~0.0672 μg、车叶草苷在0.0081~0.0648 μg范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为99.65%、100.38%、100.21%、100.94%.不同产地24批巴戟天样品中4种环烯醚萜成分含量分别为5.642~25.250mg/g、2.587~10.330mg/g、0.019~0.620mg/g和0.000~0.053 mg/g;巴戟天经不同方法炮制后,除车叶草苷含量升高外,其余3种环烯醚萜成分含量均降低;巴戟天须根及木心均含有较高的水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸.结论:所建立的含量测定方法简便、准确、重复性好,可为巴戟天质量控制提供参考.不同产地巴戟天中4种环烯醚萜成分含量差异较大,四种炮制方法均可引起成分含量变化;巴戟天须根及木心部位具有潜在利用价值.
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编辑人员丨2023/8/6
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巴戟天抗疲劳功效成分的研究
编辑人员丨2023/8/6
为探究巴戟天抗疲劳功效及活性成分.实验采用乙醇回流提取,经大孔树脂、MCI、ODS柱层析分离,核磁共振鉴定结构.结果 表明,巴戟天醇提物大孔树脂分离得10%乙醇洗脱物对小鼠运动抗疲劳作用效果最明显,再经MCI、ODS柱分离,得到四个化合物单体,分别是耐斯糖(1)、4-羧基-7-羟基-8-羟甲基-3,6-环烯醚萜苷(2)、4-乙酰基-8-羟甲基-3,7-环烯醚萜苷(3)和4-羧基-7-羟基-8-羟甲基-10-乙酰基-3,6-环烯醚萜苷(4).化合物2、3、4为首次从巴戟天中分离得到的环烯醚萜苷类化合物.
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编辑人员丨2023/8/6
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蒸制时间对盐巴戟天含量及特征图谱的影响研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 建立盐巴戟天含量和特征图谱测定方法,考察不同蒸制时间对盐巴戟天含量及特征图谱的影响.方法 采用超高效液相色谱(UPLC)法同时测定水晶兰苷含量和环烯醚萜类特征图谱、高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法测定耐斯糖含量和超高效液相色谱-电喷雾检测器(UPLC-CAD)法测定寡聚糖类特征图谱,并结合方差分析对不同蒸制时间的特征图谱进行差异性研究.结果 分别建立了盐巴戟天环烯醚萜类和寡聚糖类UPLC特征图谱,确定共有特征峰分别为12个和20个;不同蒸制时间的水晶兰苷含量、耐斯糖含量及特征图谱均发生明显变化,优选盐巴戟天蒸制时间为1h.结论 实验建立的方法稳定、准确、灵敏度好,可用于盐巴戟天的质量控制.
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编辑人员丨2023/8/5
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巴戟天及根皮与木心UPLC特征指纹图谱与化学模式识别方法研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 建立基于UPLC特征指纹图谱-化学模式识别方法研究巴戟天Morindae Officinalis Radix及根皮与木心的差异性.方法 采用UPLC技术建立巴戟天根皮与木心环烯醚萜类和寡聚糖类特征指纹图谱,结合相似度分析、方差分析、聚类分析、主成分分析(PCA)进行化学模式识别研究.结果 分别建立了巴戟天及根皮与木心环烯醚萜类和寡聚糖类UPLC特征指纹图谱,并分别确定了12个和20个共有峰,巴戟天根皮与木心UPLC特征指纹图谱差异性明显.结论 巴戟天环烯醚萜类和寡聚糖类UPLC特征指纹图谱-化学模式识别方法分析能够整体、全面、真实地反映出巴戟天根皮与木心的差异性,为巴戟天去木心必要性提供了依据.
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编辑人员丨2023/8/5
