1例20岁女性患者因失眠自行间断口服复方枣仁胶囊（主要成分为制酸枣仁和左旋延胡索乙素，每晚睡前1粒，共服用12粒），15 d后出现乏力、深黄色尿。实验室检查示总胆红素（TBil）62 μmol/L，直接胆红素（DBil）49 μmol/L，丙氨酸转氨酶（ALT）1 658 U/L，天冬氨酸转氨酶（AST）1 525 U/L，γ-谷氨酰转移酶（GGT）160 U/L，碱性磷酸酶（ALP）149 U/L，总胆汁酸（TBA）90.2 μmol/L。给予保肝治疗。30 d后，患者乏力、尿黄症状缓解，复查示TBil 24 μmol/L，DBil 13 μmol/L，ALT 54 U/L，AST 68 U/L，GGT 170 U/L，ALP 90 U/L。9个月后，患者因失眠再次自行口服复方枣仁胶囊（1粒/4 d，共服用3粒），14 d出现巩膜黄染和尿液发黄，实验室检查示TBil 44 μmol/L，DBil 29 μmol/L，ALT 2 041 U/L，AST 1 152 U/L，GGT 110 U/L，ALP 155 U/L，TBA 28.0 μmol/L。再次给予保肝治疗，18 d后巩膜黄染、尿黄症状缓解，复查ALT 199 U/L，AST 78 U/L，GGT 55 U/L。考虑肝损伤为复方枣仁胶囊中的左旋延胡索乙素所致。

目的:探讨线粒体相关蛋白延胡索酰乙酰乙酸酯水解酶结构域含蛋白1（FAHD1）和生长分化因子15（GDF-15）在脓毒症诊断中的价值。方法:从一项基于脓毒症的早期预警及规范化诊疗体系建立的"脓毒症全过程预警及诊治管理数据库"中，收集2014年5月至2015年10月浙江医院、浙江大学医学院附属第二医院、中山大学附属第一医院、四川大学华西医院、宁波市第一医院纳入的疑似感染的成人患者。分析脓毒症和非脓毒症患者基础生命体征信息及确诊时主要血常规指标、肝肾功能指标、血气指标、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ（APACHEⅡ）和序贯器官衰竭评分（SOFA）等。利用保存的血清样本，用电化学发光法检测降钙素原（PCT）水平，用免疫比浊法检测C-反应蛋白（CRP）水平，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测FAHD1和GDF-15水平。采用单因素和多因素Logistic回归分析脓毒症诊断中的危险因素，并应用受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析各指标对脓毒症的诊断效能。结果:共入选132例患者，其中脓毒症76例，非脓毒症56例。与非脓毒症组相比，脓毒症组心率加快（次/min：116.4±17.8比97.4±19.1），平均动脉压（MAP）、血小板计数（PLT）、动脉血氧分压（PaO 2）显著降低〔MAP（mmHg，1 mmHg＝0.133 kPa）：65.8±9.7比74.7±10.3，PLT（×10 9/L）：120（69，204）比163（117，239），PaO 2（mmHg）：83.0（66.6，108.0）比108.0（84.4，130.0），均 P<0.05〕，直接胆红素（DBil）、血肌酐（SCr）、血乳酸（Lac）、APACHEⅡ评分和SOFA评分均显著升高〔DBil（μmol/L）：13.00（5.55，55.31）比6.20（2.20，21.90），SCr（μmol/L）：118.00（70.00，191.73）比77.20（59.65，110.86），Lac（mmol/L）：2.90（1.50，4.10）比1.90（1.20，2.80），APACHEⅡ（分）：20.0（16.0，25.0）比16.0（10.0，21.0），SOFA（分）：12.0（8.0，16.0）比8.0（5.0，13.0），均 P<0.05〕。此外，脓毒症组血清FAHD1、GDF-15、PCT、CRP水平均显著高于非脓毒症组〔FAHD1（μg/L）：3.96（2.25，5.92）比2.47（1.03，3.54），GDF-15（μg/L）：8.46（4.37，19.68）比4.32（1.74，10.39），PCT（μg/L）：3.79（1.37，11.32）比0.42（0.12，2.14），CRP（mg/L）：154.43（61.33，283.20）比65.95（28.15，144.69），均 P<0.01〕。多因素Logistic回归分析显示，血清FAHD1〔优势比（ OR）＝1.135，95%可信区间（95% CI）为1.045～1.234〕、GDF-15（ OR＝1.090，95% CI为1.029～1.155）和CRP（ OR＝1.007，95% CI为1.002～1.011）均是脓毒症诊断的风险因素（均 P<0.05）。ROC曲线分析显示，在脓毒症诊断中，血清线粒体相关蛋白FAHD1和GDF-15的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.727（95% CI为0.641～0.802）、0.677（95% CI为0.588～0.757），经典感染指标PCT和CRP的AUC分别为0.767（95% CI为0.683～0.837）、0.680（95% CI为0.591～0.760），线粒体相关蛋白与经典感染指标的AUC差异无统计学意义。FAHD1、GDF-15、PCT与CRP联合诊断的AUC最大，为0.809（95% CI为0.730～0.874），其敏感度为75.00%，特异度为80.00%。 结论:线粒体相关蛋白FAHD1和GDF-15在脓毒症诊断中具有一定作用，与PCT、CRP指标联合诊断效能会提高，可为脓毒症诊断标志物的筛查提供试验依据。

目的:考察不同加工方式对延胡索外观性状和内部成分的影响,筛选其合理的产地初加工方法.方法:采用晒干、阴干、冷冻干燥、热风干燥、远红外干燥及微波干燥法处理新鲜延胡索,HPLC法测定原阿片碱、海罂粟碱、延胡索乙素、延胡索甲素、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、去氢紫堇碱含量,色差仪测定粉末颜色,分析复水比、折干率、浸出物及外观性状.化学计量法综合评价各方法对药材品质的影响.结果:晒干延胡索外观性状最佳,生物碱含量较高,但耗时长;热风和远红外干燥耗时缩短,60 ℃干燥外观性状与晒干法接近,生物碱含量较高;微波干燥法耗时最短,生物碱含量最高;阴干法耗时最长,生物碱含量较低,性状差;冷冻干燥药材质轻、内部多孔松泡,生物碱总含量最低.结论:热风60℃干燥法可大幅度提高干燥效率,确保药材性状及成分含量,可用于延胡索规模化产地加工;微波干燥设备改进后应用前景广阔.

目的:建立评价消癥止痛凝胶贴膏制备工艺重现性的方法。方法:采用指纹图谱技术及体外释放度试验对消癥止痛凝胶贴膏制备工艺的重现性进行评价。采用HPLC法建立消癥止痛凝胶贴膏的指纹图谱，色谱柱为Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；检测波长280 nm；流速1 ml/min；柱温25 ℃；流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脱。建立HPLC法测定延胡索乙素含量的方法，并采用垂直式Franz扩散池法考察其体外释放度。结果:10批消癥止痛凝胶贴膏与对照图谱的相似度均在0.95以上；消癥止痛凝胶贴膏中延胡索乙素24 h累积释放量为0.23 mg，8 h累积释放率为91.54%，且6份样品各时间点的 RSD值均<3%。 结论:应用指纹图谱技术及体外释放度建立了消癥止痛凝胶贴膏制备工艺重现性的评价方法，可为贴膏剂制备工艺重现性的评价提供参考和依据。

目的:建立疏肝止痛片指纹图谱和多成分含量测定方法.方法:基于HPLC法建立疏肝止痛片指纹图谱,并进行相似度评价、聚类分析(CA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA).同法测定疏肝止痛片中柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、延胡索乙素、芍药苷、橙皮苷、木香烃内酯、去氢木香内酯、甘草苷及甘草酸铵9个成分的含量.结果:建立的疏肝止痛片HPLC指纹图谱标定了 32个共有峰,指认9个成分,15批样品的相似度＞0.960.CA和OPLS-DA将疏肝止痛片样品分为2类,且OPLS-DA筛选出12个对疏肝止痛片质量差异影响较大的成分.建立的9个成分含量测定方法稳定可靠,绝大部分样品未出现离散数据(平均值的70％～130％以外),表明15批疏肝止痛片质量较稳定.结论:HPLC指纹图谱结合多成分含量测定的方法快速、简便,重复性好,可用于疏肝止痛片的质量控制和评价.

目的 制备延胡索乙素纳米混悬剂(THP-NS)及其冻干粉,并对其进行体外评价.方法 通过沉淀-均质法制备延胡索乙素纳米混悬剂,在单因素实验基础上,以粒径与多分散系数(PDI)的归一值作为考察指标,考察延胡索乙素用量、透明质酸钠用量、泊洛沙姆407用量对纳米混悬剂制备的影响,通过Box-Behnken设计响应面法优化THP-NS的处方工艺,并制备冻干粉末.采用透射电镜法(TEM)、差示扫描量热法(DSC)、X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱法(FT-IR)对THP-NS进行表征,透析袋法评价其体外溶出度.结果 延胡索乙素纳米混悬剂最佳处方为延胡索乙素用量51.0 mg,透明质酸钠用量3.1 mg,泊洛沙姆407用量18.4 mg.平均粒径为(195.57±1.80)nm,PDI为0.23±0.019,与Box-Behnken响应面法预测值接近.Zeta电位值为-31.0 mV,延胡索乙素纳米混悬剂外貌为球形,THP-NS中延胡索乙素以结晶状态存在,THP-NS在24 h累积溶出度达到97.43%.结论 将延胡索乙素制备成纳米混悬剂药物处方设计合理、工艺可行,显著提高了其体外溶出率.

目的 研究延胡索乙素(Thp)对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)氧化应激损伤的保护作用,并基于核因子红系2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路探究其可能机制.方法 在Thp抑制PDGF-BB诱导的VSMCs氧化应激损伤效应研究中,将VSMCs分为对照组、PDGF-BB组(25 ng/mL)及Thp低、中、高浓度组(5、10、20 mg/mL).在Thp作用机制研究(沉默Nrf2)中,将VSMCs分为PDGF-BB+阴性对照siRNA(NC-siNrf2)组(25 ng/mL PDGF-BB+NC-siNrf2),PDGF-BB+Thp+NC-siNrf2 组(25 ng/mL PDGF-BB+10 mg/mL Thp+NC-siNrf2),PDGF-BB+Nrf2 小干扰RNA(siNrf2)组(25 ng/mL PDGF-BB+siNrf2),PDGF-BB+Thp+siNrf2组(25 ng/mL PDGF-BB+10.0 mg/mL Thp+siNrf2).2个实验均检测VSMCs的增殖、迁移能力,活性氧(ROS)水平,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性以及Nrf2和HO-1蛋白表达.结果 与对照组比较,PDGF-BB组VSMCs的增殖、迁移能力显著增强(P＜0.01),ROS水平显著升高(P＜0.01),SOD、CAT活性及Nrf2、HO-1蛋白的相对表达量均显著降低(P＜0.01);与PDGF-BB组比较,Thp不同浓度组VSMCs的增殖、迁移能力均显著下降(P＜0.01),ROS水平均显著降低(P＜0.01),SOD、CAT活性及Nrf2、HO-1蛋白的相对表达量均显著升高(P＜0.01).沉默Nrf2可显著逆转Thp对PDGF-BB诱导VSMCs氧化应激损伤的改善作用(P＜0.01).结论 Thp可以通过激活Nrf2介导的抗氧化防御途径来降低VSMCs的氧化应激水平,从而抑制VSMCs的增殖、迁移.

目的 建立消核糖浆的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定其中10个有效成分的含量.方法 以12批消核糖浆为对象,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法,以Athena C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm.色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)》建立消核糖浆指纹图谱并进行相似度评价.采用ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,以0.01%甲酸乙腈-0.01%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,结合高分辨质谱仪,以电喷雾离子源进行正负离子扫描,测定12批消核糖浆中各主要成分的含量.结果 12批样品共标定33个共有峰,相似度均大于0.97;确认其中10个色谱峰,分别为王不留行黄酮苷、芍药苷、阿魏酸、柚皮苷、迷迭香酸、新橙皮苷、丹酚酸B、延胡索乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷D;含量测定结果显示,上述10个成分在各自的质量浓度范围内线性关系良好(R 2＞0.999),其含量分别为0.35～0.64、3.15～5.61、0.11～0.17、1.68～3.17、1.59～1.90、1.15～1.64、0.78～1.48、0.11～0.26、0.06～0.13、0.33～0.61 mg/mL.结论 12批消核糖浆的主要成分相似但含量有所差异;本研究建立的HPLC指纹图谱和UPLC-MS/MS含量测定方法可用于消核糖浆的全面质量评价.

目的 基于体外耐药细胞模型,研究白屈菜-元胡药对(Chelidonii Herba-Corydalis Rhizoma drug pair,CMCR)逆转乳腺癌阿霉素(adriamycin,ADR)耐药药效物质.方法 运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)对CMCR不同配伍比例(1∶1、2∶1)95％、80％、70％、60％、50％乙醇提取部位的化学成分进行表征,确定共有成分;以人乳腺癌阿霉素耐药细胞(MCF-7/ADR)为研究对象,采用CCK-8法检测ADR联合CMCR各提取部位对MCF-7/ADR细胞增殖的影响,计算耐药倍数;利用灰色关联度、Pearson相关性分析和偏最小二乘回归分析建立表征图谱中共有成分峰面积与逆转耐药倍数的相关性,筛选出CMCR最佳逆转耐药活性部位及相关药效物质.采用荧光显微镜观察白屈菜碱联合延胡索乙素作用细胞后罗丹明123累积量的影响;Western blotting和qRT-PCR法检测P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistant protein,BCRP)、肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)蛋白和基因表达.结果 CMCR 10个提取部位分析得到30个共有成分.CMCR(1∶1)95％乙醇提取部位对ADR的逆转耐药活性最强,其逆转耐药倍数为11.08.根据相关性分析结果初步确定白屈菜碱、延胡索乙素、小檗碱、二氢血根碱和白屈菜红碱为CMCR逆转乳腺癌ADR耐药的潜在药效物质.选择药效相关性最高的白屈菜碱和延胡索乙素联合进行实验验证,发现白屈菜碱-延胡索乙素能够增加细胞内罗丹明123累积,显著下调MCF-7/ADR细胞P-gp、BCRP和LRP蛋白和基因表达(P＜0.01、0.001).结论 阐明了CMCR逆转乳腺癌阿霉素耐药的药效物质,为其临床应用及后续抗肿瘤辅助用药开发奠定了基础.

目的:探讨"冬病夏治"全方配伍和无白芥子配伍延胡索乙素在模型家兔"肺俞"穴皮下药代动力学特征及药代动力学-药效动力学(PK-PD)模型的相关性.方法:支气管哮喘模型家兔随机分成延胡索单方组、缺白芥子组、全方组,微透析技术收集14 h穴位皮下透析液,液相色谱-质谱法(Liquid Chromatography Mass Spectrometry,LCMS)法检测方中君药延胡索主要成分延胡索乙素浓度,获得药代动力学参数;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测对应时间点模型动物血清中IgE水平,获得药效学参数;对药动学、药效学参数进行PK-PD模型拟合.结果:白芥子配伍后的药峰浓度(Cmax)、药时曲线下面积(AUC0-t)、平均滞留时间(MRT0-t)均显著增加(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05),达峰时间(Tmax)提前(P＜0.01);"浓度-时间-效应"三维曲线表明,方中有白芥子配伍时,药效出现更快、消退更慢,起效时间晚于峰浓度,具有一定滞后性.结论:动力学参数、PK-PD模型结果表明,白芥子配伍能够改变"方中君药——延胡索的主要成分延胡索乙素穴位局部的皮下分布,促进方中君药有效成分快速吸收,延长滞留时间,在方剂中起到主药、改善其他药物分布的"双重"作用.