目的 探讨当归红芪超滤物(Radix Angelica sinensis and Radix Hedysari ultrafiltration,RAS-RH)对电离辐射致人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激和炎症损伤的影响.方法 6 Gy X射线构建辐射HUVECs损伤模型,用不同浓度(100、200、400 μg·L-1)RAS-RH作用于HUVECs,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,透射电镜观察细胞线粒体的结构变化,DCFH-DA探针法检测细胞内ROS水平,JC-1试剂盒检测细胞内线粒体膜电位变化,流式细胞术检测细胞凋亡和周期,ELISA法检测细胞内IL-6和TNF-α含量,生化试剂盒检测MDA、CAT、SOD 及 GSH-PX 活性,qRT-PCR 检测细胞内 Nrf2、HO-1、NF-κB、eNOS、IL-6基因表达水平,Western blot法检测细胞内Nrf2、HO-1、eNOS、NF-κB、p-NF-κB 和 IL-6 蛋白的表达水平.结果 与模型组相比,给药组HUVECs活性更高,细胞凋亡率下降,细胞内ROS水平降低,细胞内线粒体结构更加完整,线粒体膜电位水平更高,细胞内Nrf2、HO-1和eNOS的表达增加,p-NF-κB、IL-6的表达降低.结论 RAS-RH具有抗辐射、抗氧化及抗炎作用,可能通过激活Nrf2/HO-1信号通路活性,降低电离辐射导致的HUVECs氧化应激及炎症损伤,从而促进细胞增殖活性.

目的 以当归红芪超滤物干预糖尿病肾病模型大鼠,探讨其对糖尿病肾病脂噬的效应机制.方法 50只SPF级雄性Wistar大鼠随机选取7只为空白组,其余43只采用一次性大剂量腹腔注射链脲佐菌素联合高脂高糖饲料喂养制备糖尿病肾病模型.将成模大鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组(17.9 mg/kg)和中药低、中、高剂量组(1.5、3、6 g/kg),分别灌胃相应溶液,连续12周.检测大鼠随机血糖、体质量及24 h尿蛋白含量,生化检测糖化血清蛋白(GSP)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)含量,HE染色观察肾组织形态变化,Masson染色观察肾组织纤维化情况,透射电镜观察肾组织超微结构,RT-qPCR检测肾组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、微管相关蛋白1轻链3(LC3B)mRNA表达,Western blot检测肾组织mTOR、转录因子EB(TFEB)、p-TFEB、LC3B蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组大鼠随机血糖显著升高(P<0.01),体质量显著减少(P<0.01),24 h尿蛋白含量显著升高(P<0.01),GSP、SCr、BUN、TG、TC、LDL-C、FFA含量显著升高(P<0.01),HDL-C含量显著降低(P<0.01);肾小管上皮细胞空泡变性、胞质空泡化、有大量炎性细胞浸润,胶原纤维增多且分布杂乱,脂滴数量增加,自噬体数量减少;肾组织mTOR mRNA表达显著升高(P<0.01),LC3B mRNA表达显著降低(P<0.01),mTOR、p-TFEB蛋白表达显著升高(P<0.01),TFEB、LC3BⅡ蛋白表达显著降低(P<0.01).与模型组比较,各给药组大鼠给药12周随机血糖、24 h尿蛋白含量降低,体质量增加,GSP、SCr、BUN、TG、TC、LDL-C、FFA含量降低,HDL-C含量升高;肾组织炎性细胞浸润、纤维化、脂滴沉积有不同程度缓解,肾组织mTOR mRNA表达降低,LC3B mRNA表达升高,mTOR、p-TFEB蛋白表达降低,TFEB、LC3BⅡ蛋白表达升高,其中厄贝沙坦组和中药高剂量组差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05).结论 当归红芪超滤物能改善糖尿病肾病模型大鼠糖脂代谢紊乱、拮抗肾脏异位脂质沉积、促进脂噬、延缓糖尿病肾病进程,其机制可能与mTOR/TFEB信号通路有关.

目的 明确当归红芪超滤物(RAS-RH)通过抑制心脏CILP1过表达对放射性心肌纤维化的干预效应.方法 将40只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸贝那普利组、RAS-RH组、盐酸贝那普利+RAS-RH组,采用X-ray诱导心肌细胞损伤制备心肌纤维化大鼠模型,盐酸贝那普利组给予盐酸贝那普利1.0 mg·kg-1灌胃;RAS-RH组给予RAS-RH 0.6 g·kg-1灌胃;盐酸贝那普利+RAS-RH组给予盐酸贝那普利1.0 mg·kg-1与RAS-RH 0.6 g·kg-1灌胃;模型组及正常组给予等体积生理盐水灌胃,每日1次,药物干预4周后,采用ELISA法检测各组大鼠血清NT-ProBNP、CTnⅠ、CTnT的含量;HE染色评价各组大鼠心肌组织病理变化;Masson染色评价各组大鼠心肌胶原沉积情况并计算胶原容积分数(CVF);免疫组化检测各组大鼠心肌组中α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ蛋白的表达水平;Western blot法检测各组大鼠心肌组织中TGF-β1、smad3、CILP1蛋白表达情况.结果 与空白组比较,模型组大鼠血清中NT-ProBNP、CTnⅠ、CTnT的含量明显增加(P<0.01),心肌细胞排列紊乱,胞间存在大量纤维组织及炎性细胞浸润,心肌组织中蓝染纤维组织明显增多,心肌CVF显著增加,心肌组织α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、TGF-β1、Smad3、CILP1蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,盐酸贝那普利组、RAS-RH组、盐酸贝那普利+RAS-RH组大鼠血清中NT-ProBNP、cTnⅠ、CTnT含量明显降低(P<0.01),心肌细胞排列稍整齐,纤维组织及炎性细胞浸润有所改善,心肌CVF显著降低(P<0.01),心肌组织中α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、TGF-β1、Smad3、CILP1蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 当归红芪超滤物可通过抑制心脏CILP1的过表达减轻X线辐射诱导的大鼠心肌纤维化.

目的:研究当归红芪超滤物对辐射后心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响.方法:采用差速贴壁法原代分离培养大鼠心肌成纤维细胞;当归红芪超滤物干预或射线辐射心肌成纤维细胞后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞分泌I型胶原(COL-I )的含量;心肌成纤维细胞通过2', 7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色在流式细胞仪下检测活性氧(ROS)的含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测心肌成纤维细胞中COL-I和转化生长因子-β(TGF-β)的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测相关蛋白的表达.结果:低剂量射线(0.5 Gy)辐射心肌成纤维细胞后,细胞内ROS的升高促进细胞增殖和胶原分泌的作用;当归红芪超滤物可以促进细胞中转录因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的核转位来清除ROS,最终抑制辐射诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原分泌;并且当归红芪超滤物明显抑制心肌成纤维细胞中COL-I和TGF-βmRNA表达.结论:当归红芪超滤物可以抑制低剂量辐射诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌.

目的 探究当归红芪超滤物(RAS-RH)对顺铂体外诱导大鼠肾足细胞损伤的保护作用.方法 本实验选取大鼠肾足细胞分为对照组、药物组、顺铂组及联合组,采用倒置相差显微镜观察顺铂对大鼠肾足细胞生长的影响,利用实时细胞分析技术监测给予RAS-RH前、后细胞的生长指数(CI),流式细胞仪检测大鼠肾足细胞的凋亡率.结果 顺铂对大鼠肾足细胞生长增殖具有明显抑制作用,联合组对顺铂诱导的大鼠肾足细胞损伤具显著的保护作用;流式细胞仪显示,联合组大鼠肾足细胞凋亡率明显低于顺铂组凋亡率(P＜0.05).结论 RAS-RH对顺铂诱导的体外大鼠肾足细胞损伤具有明显的保护作用.

目的 探讨当归红芪超滤物对辐射致新生大鼠心肌细胞氧化应激和炎性因子的影响.方法 用X线照射新生大鼠原代培养的心肌细胞建立辐射损伤细胞模型,实验分为空白组、模型组、低剂量干预组、中剂量干预组和高剂量干预组,干预组分别用使用3 mg/ml、6 mg/ml和9 mg/ml浓度的当归红芪超滤物对辐射损伤细胞模型进行干预.对各组心肌细胞进行细胞活性检测,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)等氧化应激指标检测及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β等炎性因子指标检测.结果 各干预组心肌细胞生长抑制率均低于模型组,心肌细胞SOD含量均高于模型组,MDA、LDH含量及TNF-α和IL-1β含量均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),且呈明显剂量依赖性(P<0.05).结论 当归红芪超滤物可有效改善辐射致新生大鼠心肌细胞的氧化应激及炎性因子指标,避免心肌细胞受损,并与剂量存在密切关系.

目的 观察当归红芪超滤物对放射性H9C2细胞损伤的影响,探讨其对心肌损伤的保护作用机制.方法 采用大鼠灌胃方法制备药物血清.将H9C2细胞随机分为空白组、阴性对照组、模型组、盐酸贝那普利组、当归红芪超滤物组和盐酸贝那普利+当归红芪超滤物组.药物血清干预及X线照射H9C2细胞后,ELISA检测肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白Ⅰ(cTn Ⅰ)及C-反应蛋白(CRP)含量,Western blot和RT-PCR检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)的表达,免疫荧光检测转化生长因子-β(TGF-β)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 与空白组比较,模型组H9C2细胞cTnT、cTn Ⅰ、CRP含量明显增加,TNF-α、CTRP9蛋白和基因表达明显升高,α-SMA和TGF-β蛋白表达明显升高;与模型组比较,盐酸贝那普利组、当归红芪超滤物组和盐酸贝那普利+当归红芪超滤物组cTnT、cTnⅠ、CRP含量明显减少,TNF-α、CTRP9蛋白和基因表达明显降低,α-SMA和TGF-β蛋白表达明显降低.结论 当归红芪超滤物可通过下调TNF-α/CTRP9信号通路相关因子的表达,达到保护放射性H9C2细胞损伤的目的.

目的 观察当归红芪超滤物对辐射致H9C2心肌细胞损伤的保护作用.方法 采用大鼠灌胃的方法提取含药血清.体外培养H9C2心肌细胞,辐射诱导H9 C2心肌细胞为心肌细胞损伤模型.将细胞随机分为空白对照组(不干预)、阴性对照组(0 Gy X线照射+生理盐水0.5 mL)、模型组(6 Gy X线照射+生理盐水0.5 mL)、盐酸贝那普利组(6 Gy X线照射+盐酸贝那普利大鼠血清0.5 mL)、当归红芪超滤物组(6 Gy X线照射+当归红芪超滤物大鼠血清0.5 mL)、盐酸贝那普利+当归红芪超滤物组(6 Gy X线照射+盐酸贝那普利+当归红芪超滤物大鼠血清0.5 mL干预).用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)及C-反应蛋白(CRP)表达;用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法和蛋白质印迹(Western blot)法检测H9C2心肌细胞中casepase-3、casepase-9及Bax-2 mRNA和蛋白的表达;用5-乙炔基-2′-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色观察各组H9C2心肌细胞的阳性细胞率;用鬼笔环肽染色观察各组H9C2心肌细胞骨架的改变状况.结果 空白对照组、阴性对照组、模型组、盐酸贝那普利组、当归红芪超滤物组、盐酸贝那普利+当归红芪超滤物组的cTnT表达量分别为(11.19±1.38),(11.62±2.79),(90.31±13.48),(37.72±9.35),(46.39±12.01),(31.89±8.07)ng·L-1,cTnⅠ表达量分别为(7.88±3.24),(6.56±1.92),(30.17±7.23),(15.81±4.06),(19.05±5.34),(11.38±3.42)ng·L-1,CRP表达量分别为(2.73±0.29),(3.76±0.75),(36.87±3.88),(15.04±1.43),(19.57±1.65),(11.32±2.34)μmol·L-1,EdU阳性细胞率分别为(31.08±2.55)％,(30.32±1.11)％,(18.10±2.13)％,(24.86±1.14)％,(24.01±3.48)％,(30.11±1.28)％.空白对照组、盐酸贝那普利组、当归红芪超滤物组、盐酸贝那普利+当归红芪超滤物组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 当归红芪超滤物可能通过上调Bcl-2蛋白,下调caspase-3、caspase-9蛋白的表达,对H9 C2心肌细胞凋亡具有一定的保护作用.

目的 探讨当归红芪超滤物对H9 C2心肌细胞氧糖剥夺/恢复损伤的影响,并探索其可能机制.方法 H9 C2心肌细胞进行氧糖剥夺处理6 h,建立心肌细胞缺血再灌注损伤模型.成年Wistar大鼠口服灌胃给药制备药物血清.H9 C2心肌细胞造模处理后分为4组:模型组、阳性对照组、当归红芪超滤物组和联合组.空白组为正常H9 C2细胞,模型组、阳性对照组、当归红芪超滤物组、联合组分别使用完全培养基、7.5 mg·kg-1·d-1尼可地尔药物血清培养基、10 mg·kg-1·d-1当归红芪超滤物药物血清培养基和联合药物血清(7.5 mg·kg-1·d-1尼可地尔+10 mg·kg-1·d-1当归红芪超滤物)培养基在常氧条件下培养4h.用酶联免疫吸附实验测定肌钙蛋白T、肌钙蛋白Ⅰ及C-反应蛋白含量;用实时定量-聚合酶链反应检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和胱天蛋白酶-3(Caspase-3)的基因表达;用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)荧光染色法检测细胞增殖;用激光共聚焦显微镜检测Bcl-2、Caspase-3相关蛋白的表达.结果 空白组、模型组、当归红芪超滤物组、阳性对照组、联合组的肌钙蛋白T含量分别为(11.72±1.13),(99.34±14.85),(68.50±10.42),(65.50±9.98)和(54.83±9.08)ng·L-1;肌钙蛋白Ⅰ含量分别为(7.53±0.59),(38.33±3.94),(26.17±6.67),(23.17±4.84)和(19.83±2.97)ng·L-1;C-反应蛋白含量分别为(3.12±0.80),(32.17±4.56),(20.67±2.49),(18.17±3.48)和(13.83±2.67)mg·L-1;EdU阳性率分别为(69.61±5.03)％,(31.66±1.90)％,(55.81±2.11)％,(57.47±3.67)％和(67.86±4.54)％;Caspase-3基因表达水平分别为0.80±0.13,2.81±0.56,2.03±0.12,2.01±0.12和1.49±0.35;Bcl-2基因表达水平分别为1.56±0.09,1.07±0.13,1.24±0.07,1.24±0.13和1.28±0.12;Bcl-2和Caspase-3相关蛋白的表达的趋势与基因一致.上述指标,模型组与空白组相比,或当归红芪超滤物组、阳性对照组、联合组与模型相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 当归红芪超滤物降低了H9 C2心肌细胞氧糖剥夺/恢复刺激后的细胞损伤、细胞凋亡,缓解了心肌细胞氧糖剥夺/恢复损伤.

目的 探讨当归红芪超滤物(RAS-RH)对阿霉素致心力衰竭大鼠的炎症因子及PI3K、Akt蛋白的影响.方法 将60只Wistar雄性大鼠随机取12只为空白组后,剩余大鼠均采用腹腔注射阿霉素方法诱导心力衰竭大鼠模型.造模4周末后采用多普勒超声心动图机测定大鼠心功能以鉴定模型,造模成功后将大鼠随机分为模型组、西药组(盐酸贝那普利1.0mg·kg-1·d-1)、中药组(RAS-RH 0.3mg·kg-1·d-1)、中西药联合组(盐酸贝那普利 1.0mg·kg-1·d-1+RAS-RH0.3mg·kg-1·d-1).对药物组进行药物干预6周末后采用多普勒超声心动图机测定大鼠心功能,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6、IL-β、CRP的表达量,HE染色法观察大鼠心肌组织病理形态学变化,Western Blot法检测心肌组织中PI3K、Akt蛋白的表达量.结果 与空白组相比,模型组大鼠心功能降低(P＜0.05);与模型组相比,西药组、中西药联合组给药后大鼠心功能均改善(P＜0.05).与空白组相比,模型组大鼠TNF-α、IL-6、IL-β、CRP等炎症因子及PI3K、Akt蛋白的表达均异常(P＜0.05);与模型组比较西药组、中药组、中西药联合组大鼠TNF-α、IL-6、IL-β、CRP等炎症因子及PI3K、Akt蛋白的表达量显著改善(P＜0.05).结论 当归红芪超滤物对阿霉素致心力衰竭大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-β、CRP等炎症因子及心肌组织PI3K、Akt蛋白的表达具有改善作用.