目的:探讨微小RNA(miR)-135b-5p在食管鳞癌发生发展中的调节作用和机制。方法:通过收集食管鳞癌患者的组织标本28例，检测miR-135b-5p在食管鳞癌组织中的表达水平，分析比较高表达与低表达组的差异，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、划痕实验、Transwell实验及蛋白质印迹法(Western blot)实验探究miR-135b-5p在食管鳞癌细胞中的调节作用，利用生物信息学技术从数据库中寻找miR-135b-5p的下游信号通路。组间比较采用T检验或卡方检验。结果:miR-135b-5p在食管鳞癌患者中低表达(0.004比0.014， Z＝－2.89， P<0.01)且与T分期相关( χ2＝5.82， P<0.05)。此外，划痕实验发现24 h后对照组划痕空白面积低于高表达组(ECA109：0.22±0.02比0.26±0.01， t＝2.21， P<0.05；KYSE150：0.33±0.01比0.54±0.02， t＝9.77， P<0.01)，Transwell实验说明24 h后高表达组细胞迁移数量低于对照组(ECA109：47.17±4.98比136.00±7.78， t＝9.62， P<0.01；KYSE150：25.83±2.10比153.00±7.49， t＝16.34， P<0.01)，48 h后高表达组细胞侵袭数量低于对照组(ECA109：171.00±24.02比382.30±15.34， t＝7.42， P<0.01；KYSE150：244.00±27.33比493.70±53.23， t＝4.17， P<0.01)，高表达组p-smad2/3蛋白表达低于对照组(ECA109：0.82±0.02比1.10±0.03， t＝7.70， P<0.01；KYSE150：0.28±0.02比0.73±0.02， t＝14.12， P<0.01)。 结论:miR-135b-5p可能通过下调smad2/3磷酸化水平抑制食管鳞癌细胞的迁移与侵袭。

目的:探讨消化性溃疡合并幽门螺杆菌（ Hp）感染患者血清微小RNA（miR）-155和miR-135b-5p表达水平及其临床意义。 方法:采用前瞻性研究的方法，连续选取济宁医学院附属医院2021年7月至2023年2月消化性溃疡患者263例。其中，经 14C呼气试验确定为 Hp感染146例（ Hp感染组），未合并 Hp感染117例（非 Hp感染组）；免疫印迹法确定Ⅰ型 Hp感染110例，Ⅱ型 Hp感染36例。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测血清miR-155和miR-135b-5p表达水平，放射免疫法检测血清胃泌素水平，酶联免疫吸附法检测血清胃蛋白酶原（PG）Ⅰ和PG Ⅱ水平；记录患者基本临床资料。采用多因素Logistic回归分析影响消化性溃疡患者发生 Hp感染的独立危险因素；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-155和miR-135b-5p对消化性溃疡患者发生 Hp感染的诊断价值。 结果:Hp感染组胃泌素、PG Ⅰ、PG Ⅱ、溃疡出血率和复发比例明显高于非 Hp感染组[（108.47 ± 15.35）ng/L比（79.63 ± 10.58）ng/L、（295.41 ± 37.26）pg/L比（236.75 ± 29.17）pg/L、（44.08 ± 8.52）pg/L比（39.29 ± 6.74）pg/L、25.34%（37/146）比15.38%（18/117）和21.92%（32/146）比11.97%（14/117）]，差异有统计学意义（ P<0.01或<0.05）。 Hp感染组血清miR-155和miR-135b-5p明显高于非 Hp感染组（1.94 ± 0.63比0.95 ± 0.29和1.86 ± 0.57比1.03 ± 0.31），差异有统计学意义（ P<0.01）。Ⅰ型 Hp感染患者血清miR-155和miR-135b-5p明显高于Ⅱ型 Hp感染患者（2.05 ± 0.66比1.60 ± 0.54和1.97 ± 0.61比1.52 ± 0.45），差异有统计学意义（ P<0.01）。多因素Logistic回归分析结果显示，血清miR-155、miR-135b-5p、胃泌素、PG Ⅰ是影响消化性溃疡患者发生 Hp感染的独立危险因素（ OR = 1.443、1.436、1.452和1.438，95% CI 1.165～1.787、1.146～1.799、1.187～1.777和1.150～1.798， P<0.01）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-155和miR-135b-5p联合诊断消化性溃疡患者发生 Hp感染的曲线下面积明显大于血清miR-155和miR-135b-5p单独诊断（0.907比0.839和0.836， Z = 2.57和2.81， P = 0.010和0.005）。 结论:消化性溃疡合并 Hp感染患者血清miR-155和miR-135b-5p水平较高，两者联合检测对消化性溃疡患者发生 Hp感染具有较高的诊断价值。

目的:通过检测乙醛脱氢酶(ALDH)2、微小RNA(miR)-135b-3p在子宫内膜癌组织中表达情况，探究其与临床特征的相关性。方法:选取西北妇女儿童医院2019年2月至2022年2月间手术切除的94例子宫内膜癌组织标本(EC组)和60例正常子宫内膜标本(对照组)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测两组子宫内膜组织中ALDH2 mRNA、miR-135b-3p表达变化，免疫组化法检测ALDH2蛋白阳性表达率。分析ALDH2 mRNA、miR-135b-3p表达水平与临床病理特征关系。结果:EC组ALDH2 mRNA表达(0.67±0.15)低于对照组(1.05±0.12)，miR-135b-3p表达水平(1.52±0.26)高于对照组(1.01±0.06)。EC组癌组织ALDH2蛋白阳性表达率为30.85%(29/94)，低于对照组正常子宫内膜组织中ALDH2蛋白阳性表达率51.67%(31/60)( P<0.05)。子宫内膜癌患者ALDH2 mRNA、miR-135b-3p表达水平与FIGO分期、淋巴结转移、分化程度、子宫肌层浸润有关(均 P<0.05)，而与年龄、病理类型、绝经、HPV感染、初潮年龄、产次、肿瘤长径、BMI无关(均 P>0.05)。 结论:子宫内膜癌组织中ALDH2表达下调、miR-135b-3p表达上调，二者可能参与肿瘤的发生、发展。

目的:探讨微小RNA(miR)-135a对骨肉瘤干细胞(OSCs)迁移、侵袭和自我更新的影响。方法:微球体筛选移植瘤原代细胞的OSCs(P-OSCs)和Saos-2的OSCs(S-OSCs)。实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测分化群(CD)CD133、CD44、CD24和BMI1的转录水平，蛋白质印迹法(Western blot)检测CD133、CD44、CD24、BMI1和B细胞淋巴瘤2(bcl-2)的蛋白水平。构建miR-135a过表达的P-OSCs或S-OSCs为miR-135a组，相应的阴性病毒转染P-OSCs或S-OSCs为对照组(NC)。划痕、Transwell和球体形成实验分别检测细胞的迁移、侵袭和自我更新能力。采用GraphPad Prism 8.4.2进行分析。结果:miR-135a组P-OSCs和S-OSCs的伤口愈合率[(46.33±11.25)%比(73.46±2.24)%和(31.25±2.61)%比(47.20±1.94)%， t＝3.346、8.489，均 P<0.05]、穿膜细胞数[(287.00±34.29)个比(401.33±14.66)个和(255.67±17.02)个比(574.67±31.58)个， t＝4.336、12.570，均 P<0.05]、成球率[(1.89±0.44)%比(3.72±0.21)%和(1.57±0.17)%比(2.65±0.05)%， t＝5.360、6.789，均 P<0.01]和球体直径均低于NC组[(97.21±8.89) μm比(184.91±15.32) μm和(90.68±7.02) μm比(163.75±14.14) μm， t＝7.003、6.546，均 P<0.01]。CD44和bcl-2蛋白在骨肉瘤组织中表达高于骨组织(分别为0.87±0.11比0.46±0.08和1.96±0.69比0.41±0.13， t＝4.286、3.126，均 P<0.05)，细胞中的表达趋势与组织一致。miR-135a组P-OSCs和S-OSCs中CD44(0.68±0.02比1.02±0.06和0.29±0.01比1.03±0.01， t＝9.311、90.630)和bcl-2(0.46±0.01比0.95±0.01和0.41±0.02比0.84±0.01， t＝60.010、33.310)的蛋白表达量低于NC组，均 P<0.01。 结论:miR-135能够通过抑制CD44和bcl-2抑制OSCs的迁移、侵袭和自我更新。

目的:探讨微小RNA-135a(miR-135a)对骨肉瘤(OS)细胞增殖、迁移和凋亡的影响及可能的机制。方法:构建miR-135a过表达和空载病毒的Saos-2细胞分别为miR-135a UP组(实验组)，Control组(对照组)。采用实时定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)检测c-Myc信使核糖核酸(mRNA)的改变，采用蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测c-Myc蛋白及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)(PAM)通路蛋白的改变。细胞集落形成和细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测细胞增殖能力，划痕和Transwell实验分别检测迁移和侵袭能力，细胞流式技术检测抗凋亡能力，两组比较采用 t检验。 结果:miR-135a表达量实验组高于对照组(59.006±5.034比1.008±0.151， t＝23.031， P<0.01)，c-Myc与PAM通路蛋白表达量实验组低于对照组，细胞增殖能力实验组低于对照组(CCK-8法：1.311±0.048比2.029±0.046， t＝24.301， P<0.01；集落形成：0.210±0.034比1.000±0.016， t＝36.715， P<0.01)，迁移能力实验组低于对照组(0.539±0.097比1.000±0.037， t＝7.694， P<0.01)，侵袭能力实验组低于对照组[(77.333±28.885)/视野比(701.000±77.149)/视野， t＝13.113， P<0.01]，凋亡率实验组高于对照组(87.267±2.616比36.933±5.460， t＝14.399， P<0.01)。 结论:miR-135a通过调控c-Myc及PAM通路抑制OS细胞的增殖、迁移、侵袭及抗凋亡能力。

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)相关血清微小核糖核酸(miRNA)对糖尿病肾病(DKD)早期诊断的临床价值.方法 收集2019年1月至2021年12月在缙云县壶镇镇中心卫生院及缙云县人民医院就诊的2型糖尿病(T2DM)患者260例作为研究对象.根据尿白蛋白排泄率(UAER),研究对象分为单纯T2DM组135例、早期DKD组82例、临床DKD组43例.另选取50名健康志愿者作为对照组.检测各组血清miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c水平和TGF-β1水平,并进行指标间的相关关系分析.利用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNAs对DKD的早期诊断价值.结果 单纯T2DM组、早期DKD组和临床DKD组患者血清miR-27a、miR-27b、miR-200c水平及TGF-β1水平均高于对照组,miR-29c水平低于对照组(F=235.624、70.351、108.127、672.304,P均＜0.001).TGF-β1与血清 miR-27a、miR-27b、miR-200c呈正相关,与 miR-29c 呈负相关(r=0.668、0.429、0.618、-0.502,P均＜0.001).血清 miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对T2DM患者发生DKD的诊断曲线下面积(AUC)为0.913、0.775、0.812、0.894,miR-27a和miR-200c的敏感度和特异度均＞0.7.验证队列中血清miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对T2DM患者发生DKD的诊断AUC 分别为 0.901、0.787、0.802、0.896,差异有统计学意义(Z=-9.012,P＜0.0l).结论 血清 miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c对于早期DKD都有一定的诊断价值.

目的:探讨乳腺癌患者血清微小RNA-135b(miR-135b)、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果的相关性.方法:选取116例乳腺癌患者为病例组,均接受新辅助化疗,以21 d为1个周期,共化疗8个周期,根据化疗反应将患者分为耐药组(32例)和敏感组(84例),另选128例体检健康女性为对照组.比较病例组和对照组,耐药组和敏感组血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平.采用Pearson相关性分析血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p水平间的相关性.乳腺癌患者化疗效果的影响因素采用Logistic回归分析.血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p对乳腺癌患者化疗耐药的预测价值通过受试者工作特征(ROC)曲线分析.结果:与对照组比较,病例组miR-135b、miR-148a-3p水平升高,血清miR-186-5p水平降低(均P＜0.05).耐药组血清miR-135b、miR-148a-3p水平高于敏感组,血清miR-186-5p水平低于敏感组(均P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,血清miR-135b与miR-148a-3p呈正相关,与miR-186-5p呈负相关,血清miR-148a-3p与miR-186-5p呈负相关(均 P＜0.05).多因素 Logistic 回归分析显示,血清 miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p 是乳腺癌患者化疗效果的影响因素(均P＜0.05).ROC曲线分析结果显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p联合预测化疗耐药的曲线下面积(AUC)高于三者单独预测AUC(均P＜0.05).结论:乳腺癌患者血清miR-135b、miR-148a-3p水平呈高表达,血清miR-186-5p水平呈低表达,三者水平变化与新辅助化疗效果有关,且三者联合检测对患者新辅助化疗耐药的预测价值更高.

结直肠癌的发生是一个多基因、多步骤的过程.许多已知基因(结肠腺瘤样息肉基因、磷脂酰肌醇-3-激酶基因、肉瘤基因、P53基因等)的突变都是通过微小RNA-135b(miR-135b)起作用.miR-135b能够通过调控基因的活性,参与许多基因的转录.抑制miR-135b的表达可以同时阻断多个致癌基因的突变,有望成为不引起耐药的抗癌新途径.在血液样本及粪便中筛查miR-135b,有望成为结直肠癌早期筛查的新方法.

目的:检测非编码微小RNA135b在宫颈癌中的表达,并初步探讨其可能的作用机制.方法:Real-time PCR检测19例宫颈癌组织和癌旁组织中miR-135b-5p的表达量,并和患者年龄、细胞分化程度、临床分期、淋巴结转移的相关进行分析;同时通过软件预测miR-135b-5p的目的基因KLF4,Western Blot检测靶基因蛋白的表达变化.结果:Real-time PCR结果显,和癌旁组织相比,宫颈癌中miR-135b-5p的表达量明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);而且和宫颈癌患者的细胞分化程度、临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05);Western Blot检测结果显KLF4在宫颈癌组织中表达量较癌旁组织减低(P<0.05).结论:miR-135b-5p能够促进宫颈癌的发生和发展,可能和抑制KLF4的表达有关.

目的 探讨轻、中度阿尔茨海默病患者血清微小RNA(microRNA,miRNA)表达及加减薯蓣丸对其影响.方法 检索Pubmed和中国知网数据库中研究AD患者外周血miRNAs文献,选择多篇(≥2篇)文献中一致性差异表达的miRNAs(至少1篇以血清为样本)作为目标miRNAs进行研究.56例轻、中度阿尔茨海默病患者给予加减薯蓣丸浓缩汤剂口服,每日2次,每次15 mL,疗程12周.另收集同期认知功能正常的老年健康体检者56例为对照组.采用荧光定量PCR法检测AD患者治疗前后及对照组血清目标miRNAs水平.结果 与对照组比较,AD组治疗前血清miR-107、miR-29a、miR-29b、miR-181c、miR-125b、miR-135a、miR-342-3p表达明显降低,miR-146a表达明显升高(P＜0.01);与治疗前比较,AD组治疗后血清miR-107、miR-29a、miR-29b、miR-181c、miR-125b、miR-342-3p表达明显升高(P ＜0.05～0.01),miR-146a表达明显降低(P＜0.01).结论 通过检测血清miR-107、miR-29a、miR-29b、miR-181c、miR-125b、miR-135a、miR-342-3p及miR-146a表达水平可能有助于AD患者早期诊断;加减薯蓣丸可能通过调节AD患者血清miR-107、miR-29a、miR-29b、miR-181c、miR-125b、miR-342-3p、miR-146a表达水平而发挥治疗AD的作用.