目的:探讨微小RNA-186（miR-186）在肾癌中的作用及其靶向调控E-钙黏蛋白影响肾癌细胞增殖和转移的分子机制。方法:收集2015年1月至2019年1月山西省人民医院肾癌组织标本40例，采用实时定量PCR检测miR-186在40例肾癌组织及4种肾癌细胞系中的表达。采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）、克隆形成、细胞划痕、Transwell实验和流式细胞学等方法检测miR-186过表达对肾癌786-O细胞增殖、侵袭迁移和凋亡的影响，裸鼠成瘤实验分析miR-186对肾肿瘤生长的影响。采用Western印迹分析miR-186对上皮-间充质转化（EMT）相关标记物如E-钙黏蛋白表达的影响，双荧光素酶报告基因验证miR-186与E-钙黏蛋白的靶向关系。结果:40例患者中，男26例、女14例；年龄（58.4±9.2）岁。miR-186在肾癌组织和细胞中表达下调（组织：0.005 2±0.000 4比0.015 5±0.001 5， P<0.001；细胞：0.334 3±0.025 1、0.457 0±0.026 6、0.229 8±0.011 0、0.741 1±0.091 0比1.000 0±0.085 2，均 P<0.001），miR-186在肿瘤直径大小（≥4 cm比<4 cm为0.003 2±0.003 4比0.008 4±0.007 2， P<0.001）、临床分期（≤Ⅱ期比>Ⅱ期为0.007 8±0.005 8比0.002 7±0.002 3， P=0.021）及组织学分级（<Ⅱ级比≥Ⅱ级为0.008 8±0.006 3比0.004 6±0.003 0， P<0.001）的组间差异有统计学意义。miR-186过表达可抑制肾癌786-O细胞增殖和侵袭迁移，诱导细胞凋亡，并抑制肿瘤生长。miR-186可以直接靶向调控E-钙黏蛋白并促进其表达。 结论:miR-186可能通过直接调控E-钙黏蛋白影响EMT并抑制肾癌细胞增殖和转移。

目的:探究LINC00662能否靶向微小RNA(miR)-186-5p/叉头框转录因子D1(FOXD1)轴调控乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭。方法:实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测28例乳腺癌组织和癌旁组织中LINC00662、miR-186-5p和FOXD1 mRNA表达，蛋白质印迹法(Western blot)检测FOXD1蛋白表达。分别转染LINC00662小干扰RNA(si-LINC00662)、共转染si-LINC00662与miR-186-5p抑制剂、si-LINC00662与FOXD1过表达载体至MCF-7细胞，细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验检测细胞增殖，Transwell检测细胞迁移和侵袭，Western blot检测p21、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和FOXD1蛋白表达。双荧光素酶报告系统验证LINC00662与miR-186-5p、miR-186-5p与FOXD1的调控关系，两组间比较采用独立样本 t检验。 结果:乳腺癌组织组中LINC00662(1.01±0.08比2.36±0.09， t＝59.324， P<0.01)、FOXD1水平(0.97±0.07比1.93±0.09， t＝44.553， P<0.01)高于癌旁组织，miR-186-5p水平(0.96±0.05比0.34±0.04， t＝51.236， P<0.01)低于癌旁组织。si-LINC00662组克隆形成数[(114.00±7.93)个比(62.00±5.81)个， t＝15.869， P<0.01]、迁移细胞数[(164±10.03)个比(75±7.14)个， t＝21.687， P<0.01]、侵袭细胞数[(103.00±7.83)个比(44.00±4.35)个， t＝19.761， P<0.01]少于si-NC组，存活率[(100.03±8.12)%比(52.29±5.34)%， t＝14.737， P<0.01]、MMP-2(0.71±0.05比0.24±0.03， t＝24.181， P<0.01)蛋白水平低于si-NC组，P21(0.15±0.02比0.58±0.04， t＝28.845， P<0.01)、E-cadherin(0.23±0.02比0.66±0.04， t＝28.845， P<0.01)蛋白水平高于si-NC组。LINC00662靶向负调控miR-186-5p；miR-186-5p靶向负调控FOXD1。si-LINC00662+抗miR-186-5p组克隆形成数[(60.00±±5.62)个比(102.00±7.23)个， t＝13.759， P<0.01]、迁移细胞数[(74.00±7.26)个比(131.00±9.91)个， t＝13.920， P<0.01]、侵袭细胞数[(45.00±4.41)个比(88.00±5.67)个， t＝17.959， P<0.01]多于si-LINC00662+抗miR-NC组，存活率[(52.31±5.35)%比(85.06±6.46)%， t＝11.714， P<0.01]、MMP-2(0.23±0.03比0.59±0.04， t＝21.600， P<0.01)蛋白水平低于si-LINC00662+抗miR-NC组，P21(0.57±0.04比0.26±0.03， t＝17.400， P<0.01)、E-cadherin(0.64±0.04比0.35±0.03， t＝12.969， P<0.01)蛋白水平高于si-LINC00662+抗miR-NC组。 结论:LINC00662通过发挥miR-186-5p分子海绵上调FOXD1促进乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移和侵袭。

目的:探讨乳腺癌患者血清微小RNA-135b(miR-135b)、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平及其与新辅助化疗效果的相关性.方法:选取116例乳腺癌患者为病例组,均接受新辅助化疗,以21 d为1个周期,共化疗8个周期,根据化疗反应将患者分为耐药组(32例)和敏感组(84例),另选128例体检健康女性为对照组.比较病例组和对照组,耐药组和敏感组血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p表达水平.采用Pearson相关性分析血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p水平间的相关性.乳腺癌患者化疗效果的影响因素采用Logistic回归分析.血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p对乳腺癌患者化疗耐药的预测价值通过受试者工作特征(ROC)曲线分析.结果:与对照组比较,病例组miR-135b、miR-148a-3p水平升高,血清miR-186-5p水平降低(均P＜0.05).耐药组血清miR-135b、miR-148a-3p水平高于敏感组,血清miR-186-5p水平低于敏感组(均P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,血清miR-135b与miR-148a-3p呈正相关,与miR-186-5p呈负相关,血清miR-148a-3p与miR-186-5p呈负相关(均 P＜0.05).多因素 Logistic 回归分析显示,血清 miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p 是乳腺癌患者化疗效果的影响因素(均P＜0.05).ROC曲线分析结果显示,血清miR-135b、miR-148a-3p、miR-186-5p联合预测化疗耐药的曲线下面积(AUC)高于三者单独预测AUC(均P＜0.05).结论:乳腺癌患者血清miR-135b、miR-148a-3p水平呈高表达,血清miR-186-5p水平呈低表达,三者水平变化与新辅助化疗效果有关,且三者联合检测对患者新辅助化疗耐药的预测价值更高.

目的 分析冠心病(CHD)患者血清微小RNA-122-5p(miR-122-5p)变化及与斑块稳定程度、预后的关系.方法 选取2019年8月至2021年8月张家口市第五医院186例CHD患者作为研究组,根据斑块稳定程度分为不稳定斑块组(n=58)及稳定斑块组(n=128),另取同期健康体检者90名作为对照组,检测比较所有受试者血清miR-122-5p水平,采用ROC曲线分析血清miR-122-5p水平对CHD患者斑块稳定程度的诊断价值.记录CHD患者治疗后随访1年内心血管不良事件发生情况,并将心血管不良事件发生情况作为评估预后的标准,将研究组分为预后不良组(n=50)及预后良好组(n=136),采用单因素及多因素Logistic分析影响CHD患者预后的因素.结果 研究组血清miR-122-5p水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不稳定斑块组血清miR-122-5p水平均高于稳定斑块组,差异有统计学意义(P<0.05);由ROC曲线可知,血清miR-122-5p诊断CHD患者斑块稳定程度的AUC为0.845(P<0.05);预后不良组血清miR-122-5p水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic分析显示,血清miR-122-5p水平过高是CHD患者预后不良的独立危险因素(P<0.05).结论 miR-122-5p在CHD患者血清中呈高表达,对斑块稳定程度具有一定的诊断价值,其水平过高是CHD患者预后不良的独立危险因素.

背景 胆管癌(CCA)起源于胆管上皮细胞,起病隐匿,恶性度极高.循环血中微小RNA (miRNA)在CCA诊断中的价值尚待研究.目的 探讨血浆miR-92a-3p、miR-204-5 p、miR-186-5p诊断CCA的价值,以期提高CCA的诊断水平.方法 选取2015年5月-2016年1月河北医科大学第二医院符合纳入标准的CCA患者16例为病例组.同期选取本院无肝胆疾病患者15例为对照组.制备两组患者血浆标本,采用RT-qPCR法检测血浆miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p表达水平.采用二元Logistic回归分析计算miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p联合的Logistic回归方程;绘制miR-92a-3p、miR-204-5 p、miR-186-5p及其联合诊断CCA的受试者工作特征曲线(ROC曲线),计算ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、约登指数.结果 病例组miR-92a-3p表达水平高于对照组,miR-204-5p、miR-186-5p表达水平低于对照组(P＜0.05).miR-92a-3p、miR-204-5 p、miR-186-5p诊断CCA的AUC分别为0.708[95％ CI (0.524,0.892)]、0.725[95％ CI (0.535,0.915)]、0.750 [95％ CI (0.576,0.924)],截断值分别为0.130 8、0.008 5、0.005 2,灵敏度分别为0.938、0.563、0.563,特异度分别为0.467、0.933、0.933,约登指数分别为0.405、0.496、0.496.二元Logistic回归分析结果显示,Logit (P)=-0.031 +9.167 × miR-92a-3p-49.453 ×miR-186-5p-66.771×miR-204-5p,其诊断CCA的AUC为0.879[95％CI (0.749,1.010)],截断值为0.095 8,灵敏度、特异度、约登指数分别为0.938、0.800、0.738.miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p联合诊断CCA的AUC大于miR-92a-3p、miR-204-5 p、miR-186-5p单独诊断CCA的AUC (P＜0.05).结论 miR-92a-3p、miR-204-5p、miR-186-5p可以用于CCA的诊断,且其联合诊断CCA的价值更高.

目的 探讨微小RNA-186(miR-186)靶向调控A型激酶锚定蛋白2( ARAP2)表达及对口腔鳞癌( OSCC)细胞侵袭迁移的影响.方法 采用实时定量PCR( QPCR)检测OSCC细胞HN13和人口腔黏膜正常上皮细胞HOK的miR-186水平;脂质体法向HN13细胞分别转染miR-186模拟物(Mimics组)、抑制物(Inhibitor组)和对照随机序列(对照组),QPCR检测miR-186水平,活细胞计数CCK-8试剂盒检测增殖能力,Transwell侵袭和迁移实验检测穿膜细胞数,双荧光素酶报告基因实验验证miR-186与ARAP2的靶向关系,Western blotting检测ARAP2的蛋白水平.结果 HN13细胞的miR-186水平高于HOK细胞(3. 945±0. 712 vs. 1. 049±0. 268,P＜0. 05);与对照组(1. 074±0. 192)相比,Mimics组的miR-186水平(4. 142±0. 348)升高,而Inhibitor组(0. 124±0. 039)降低,差异有统计学意义(P＜0. 05).与对照组相比,Mimics组在24、48 h的细胞增殖活力升高,而Inhibitor组24、48 h的细胞增殖活力降低(P＜0. 05). Transwell侵袭实验中对照组、Mimics组和Inhibitor组的穿膜细胞数依次为(22. 9±3. 1)、(71. 5±9. 6)和(15. 4±2. 4)个,迁移实验中依次为(51. 2±6. 1)、(106. 7±12. 5)和(36. 8±5. 6)个,与对照组相比,Mimics组的穿膜细胞数增多,而Inhibitor组减少,差异有统计学意义( P＜0. 05). miR-186可抑制ARAP2野生型3′端非翻译区的相对荧光素酶活性( P＜0. 05),但对突变型无影响( P＞0. 05).与对照组( 0. 436 ± 0. 026)相比,Mimics 组的ARAP2水平(0. 024±0. 013)降低,而Inhibitor组(0. 657±0. 019)升高,差异有统计学意义( P＜0. 05).结论 miR-186在OSCC细胞中表达上调,对OSCC细胞的侵袭与迁移起促进作用,可能通过靶向ARAP2来发挥促癌基因,有可能成为OSCC诊断标记物和新型生物治疗的靶点.

目的 探讨依巴斯汀联合马齿苋治疗特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)的临床疗效及对miR-186-5p、miR-409-3p水平、免疫状态的影响.方法 2014年10月至2017年10月在新疆医科大学附属中医医院就诊的112例AD患者被随机分为对照组和观察组,每组56例.对照组口服依巴斯汀,观察组在对照组基础上进行马齿苋塌渍治疗.比较治疗前、治疗2周、4周的症状评分和临床有效率,比较治疗前后外周血Th17/Treg、IL17水平以及皮损边缘皮肤标本的miR-186-5p、miR-409-3p表达.结果 治疗前,2组各指标均无显著差异,治疗2,4周后,观察组症状评分显著低于对照组(P＜0.05);治疗2,4周时观察组的总有效率分别为66.07％,80.36％,显著高于对照组35.72％,57.14％(P＜0.05).治疗后2组Th17％、Th 17/Treg、IL-17均显著下降,且观察组显著低于对照组(P＜0.05);2组miR-186-5p、miR-409-3p表达均显著下降,且观察组显著低于对照组(P＜0.05).结论 依巴斯汀联合马齿苋能有效改善AD临床症状,提高疗效,下调皮肤中miR-186-5p、miR-409-3p的表达,降低血清Th17/Treg表达,改善炎症状态.

目的 观察微小RNA-186-5p(MiR-186-5p)对肾癌细胞侵袭和增殖的影响并探讨可能存在的机制.方法 培养正常肾小管上皮细胞系HK-2、原代及转染MiR-186-5p的肾癌细胞(Caki-2细胞),Real-time PCR检测MiR-186-5p的水平,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法评估各组细胞的存活率,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blotting检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)水平.结果 肾小管上皮细胞系HK-2和转染了MiR186-5p的Caki-2细胞的MiR186-5p水平均显著高于Caki-2细胞(P＜0.05).HK-2细胞和Caki-2细胞的存活率接近100％,而转染了MiR-186-5p的Caki-2细胞的存活率显著降低至72.86％(P＜0.05).与HK-2细胞的迁移数目相比,Caki-2细胞迁移较多(P＜0.05);转染MiR-186-5p的Caki-2细胞迁移较少(P＜0.05).与HK-2细胞内Akt和mTOR分子磷酸化水平相比,Caki-2细胞内Akt和mTOR分子磷酸化水平显著增加(P＜0.05);而转染了MiR-186-5p的Caki-2细胞内Akt和mTOR分子的磷酸化水平有所下降(P＜0.05).结论 MiR-186-5p能够有效抑制肾癌细胞的侵袭与增殖,可能与其抑制Akt/mTOR信号通路的激活相关.

目的 研究高糖处理AC16心肌细胞微小RNA-186-5p(miR-186-5p)、Toll样受体3(TLR3)表达水平的变化及其与心肌细胞凋亡的关系.方法 靶基因预测数据库Target Scan7.1预测miR-186-5p可直接作用于TLR3,采用高糖诱导培养的人AC16心肌细胞,建立糖尿病心肌病模型.采用实时定量PCR检测心肌细胞miR-186-5p水平,Western blot法检测心肌细胞TLR3表达水平.采用细胞转染过表达或降低miR-186-5p或TLR3水平,通过流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,Western blot法检测心肌细胞裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白表达,荧光素酶报告基因检测miR-186-5p与TLR3的相互作用.结果 生物信息学分析和荧光素酶活性测定证实TLR3为miR-186-5p直接作用的靶基因,高糖处理的心肌细胞miR-186-5p表达下调,过表达miR-186-5p可逆转高糖诱导的细胞凋亡,并降低c-caspase-3蛋白水平.下调TLR3水平抑制高糖诱导的细胞凋亡并降低c-caspase-3蛋白水平.过表达TLR3可以上调miR-186-5p抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡水平.TLR3表达水平升高可逆转miR-186-5p抑制HG诱导心肌细胞凋亡的作用.结论 miR-186-5p通过下调TLR3表达抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡.

目的 探讨术前血清miR-186-5p表达对急性冠脉综合征(ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后发生主要不良心血管事件(MACE)的预测价值.方法 选择拟行PCI治疗的150例ACS患者(ACS组)和103例体检健康者(对照组),检测PCI术前及术后1、2、3、7 d血清miR-186-5p表达.出院后随访ACS患者12个月,以随访期间MACE为终点事件,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-186-5p表达预测ACS患者PCI术后发生AMCE的价值.采用Kaplan-Meier生存分析不同miR-186-5p表达患者MACE发生率,采用Cox风险回归分析ACS患者PCI术后发生MACE的危险因素.结果 ACS患者术前、术后1 d血清miR-186-5p表达高于对照组(P均<0.05),术前血清miR-186-5p表达高于术后1、2、3、7 d(P均<0.05),术后1 d血清miR-186-5p表达高于术后2、3、7 d(P均<0.05).术前血清miR-186-5p预测ACS患者PCI术后发生MACE的效能最高,曲线下面积为0.878,灵敏度为82.86％,特异度为88.70％.Kaplan-Meier生存分析显示,miR-186-5p高表达者MACE发生率高于miR-186-5p低表达者(P<0.05),Cox风险回归分析示术前Gensini评分、术前miR-186-5p表达是ACS患者PCI术后发生MACE的危险因素(P均<0.01).结论 术前高表达miR-186-5p是ACS患者PCI术后MACE的危险因素,对预测ACS患者PCI术后发生MACE有较高价值,可作为ACS患者预后评估提供参考.