目的:探讨miR-138-5p靶向HIF-1α对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响。方法:将GRC-1细胞分为四组，分别为GRC-1组、miR-138 mimic组、pc-HIF-1α组及共转染组(mimic+pc-HIF-1α组)，并将mimic-scramble组设置为miR-138 mimic转染的阴性对照组。采用荧光素酶报告实验验证miR-138-5p与HIF-1α的靶向关系，采用qRT-PCR检测miR-138 mimic对GRC-1细胞HIF-1α mRNA水平的影响，采用Western blot检测miR-138对GRC-1细胞HIF-1α蛋白水平的影响。分别采用CCK-8、流式细胞术和划痕实验检测miR-138-5p靶向HIF-1α对GRC-1细胞的增殖、凋亡和迁移的影响。结果:荧光素酶报告实验结果显示miR-138-5p可靶向HIF-1α。与GRC-1组比较，miR-138 mimic组的miR-138-5p mRNA表达水平较高，HIF-1α mRNA表达水平较低(均 P<0.01);与GRC-1组比较，miR-138 mimic组的HIF-1α蛋白表达水平较低，而pc-HIF-1α组的HIF-1α蛋白表达水平较高(均 P<0.01)；mimic+pc-HIF-1α组的HIF-1α蛋白表达水平低于pc-HIF-1α组( P<0.01)；与GRC-1组比较，miR-138 mimic组的GRC-1细胞增殖倍数较低，而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞增殖倍数较高(均 P<0.01)；mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞增殖倍数低于pc-HIF-1α组，差异有统计学意义( P<0.01)；与GRC-1组比较，miR-138 mimic组的GRC-1细胞凋亡率较高，而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞凋亡率较低(均 P<0.01)；mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞凋亡率高于pc-HIF-1α组( P<0.01)；与GRC-1组比较，miR-138 mimic组的GRC-1细胞划痕愈合率较低，而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞划痕愈合率较高(均 P<0.01)；mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞划痕愈合率低于pc-HIF-1α组( P<0.01)。 结论:miR-138-5p可通过靶向HIF-1α，负向调控HIF-1α mRNA和蛋白的表达，进而减弱人肾癌细胞GRC-1的增殖和迁移，促进其凋亡。

目的:评价沉默调节蛋白(SIRT1)及其相关微小RNA(miRNAs)在右美托咪定减轻糖尿病小鼠肾损伤中的作用。方法:SPF级雄性C57小鼠，8周龄，腹腔注射1%佐链脲菌素制备糖尿病肾损伤模型。取造模成功的小鼠30只，采用随机数字表法分为5组( n＝6)：糖尿病组(D组)、糖尿病＋右美托咪定组(DD组)、糖尿病＋右美托咪定＋EX527组(DDE组)、糖尿病＋右美托咪定＋miR-34a-3p-agomir组(DDH组)和糖尿病＋右美托咪定＋miR-34a-3p-agomirNC组(DDC)。另取正常小鼠6只作为对照组(C组)。DD组、DDE组、DDH组和DDC组腹腔注射右美托咪定40 μg/kg，每2 h 1次，共3次；DDH组和DDC组右美托咪定给药前72 h分别尾静脉注射miR-34a-3p-agomir、miR-34a-3p-agomirNC 2.5 nmol，每3 d 1次，共2次；DDE组右美托咪定给药前1 h腹腔注射SIRT1抑制剂EX527 10 mg/kg。给药结束后24 h，检测血清IL-6、IL-18、Cr和BUN浓度；取肾组织，检测一氧化氮(NO)及总抗氧化能力(T-AOC)含量、ROS活性，采用Western blot法和RT-PCR法分别检测SIRT1、叉形头转录调节因子3(FoxO3a)、P53及其mRNA表达水平，RT-PCR法检测miR-217、miR-138和miR-34a表达水平。 结果:与C组比较，D组血清IL-6、IL-18、Cr、BUN浓度、肾组织T-AOC和NO含量、ROS活性升高，P53及其mRNA、miR-34a、miR-217和miR-138表达上调，SIRT1及其mRNA、FoxO3a及其mRNA表达下调( P<0.05)。与D组比较，DD组血清IL-6、IL-18、Cr、BUN浓度、肾组织ROS活性和NO含量降低，T-AOC含量升高，SIRT1及其mRNA、FoxO3a及其mRNA表达上调，miR-34a表达下调( P<0.05)。与DD组比较，DDE组和DDH组血清IL-6、IL-18、Cr、BUN浓度、肾组织NO含量和ROS活性升高，T-AOC含量降低，SIRT1及其mRNA、FoxO3a及其mRNA表达下调( P<0.05)，DDE组P53及其mRNA、miR-217、miR-34a和miR-138表达差异无统计学意义( P>0.05)，DDH组P53及其mRNA、miR-34a表达上调( P<0.05)。 结论:右美托咪定减轻糖尿病小鼠肾损伤的机制可能与下调miR-34a表达，进而上调SIRT1/FoxO3表达，降低氧化应激水平有关。

目的:探讨微小RNA(miR)-138-5p在前列腺癌(PCa)中的表达及对前列腺癌侵袭、迁移、凋亡等能力的影响。方法:miR-138-5p模拟物转染正常前列腺上皮细胞(RWPE)-1、DU145细胞，实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)用于检测转染前后细胞miR-138-5p的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、Transwell实验、划痕实验和凋亡实验分析miR-138-5p对PCa侵袭、迁移等能力的影响。GraphPad Prism 6 V6.01用于数据分析，组间比较采用Student’s t检验。 结果:RT-qPCR结果表明miR-138-5p在DU145细胞中的表达量(0.470±0.111)低于RWPE-1细胞(5.120±0.824)；转染后，RWPE-1 mimic中miR-138-5p的表达量(18.150±2.742)明显高于RWPE-1 NC(4.930±0.586， t＝6.670， P<0.01)，DU145 mimic中miR-138-5p的表达量(9.865±1.006)高于DU145 NC(0.526±0.145， t＝12.990， P<0.01)，差异均有统计学意义；提高miR-138-5p表达水平后，PCa细胞活力下降；DU145 mimic的迁移面积抑制率[(1.50±0.08)%]高于NC组[(1.00±0.03)%， t＝8.382， P<0.01]，差异有统计学意义；DU145 mimic的侵袭细胞数[(102.00±5.96)个]低于NC组[(198.00±15.09)个， t＝8.392， P<0.01]，差异有统计学意义；DU145细胞mimic组的凋亡率[(17.660±1.312)%]高于NC组[(4.990±0.674)%， t＝12.150， P<0.01]，差异有统计学意义，PCa细胞的凋亡增加。 结论:miR-138-5p可以负向调节PCa细胞的活力、迁移和侵袭，促进PCa细胞凋亡。

目的:探讨人微小RNA(has-miR)-30a-5p调控Frizzled 2(FZD2)基因激活Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对胃癌细胞增殖及侵袭的作用机制。方法:体外培养胃癌MKN-45细胞；在胃癌细胞系中使用小干扰RNA(siRNA)转染建立微小RNA(miR)-30a-5p的敲除和过表达模型，胃癌MKN-45细胞分为3组：miR-30a-5p小干扰RNA(miR-30a-5p inhibitor)组，miR-30a-5p过表达RNA(miR-30a-5p mimics)组和空白对照组(negative control，NC)，荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测miR-30a-5p的直接靶基因FZD2基因及Wnt/β-catenin信号通路下游关键基因c-myc的表达水平；双荧光素酶报告基因实验验证miR-30a-5p与直接靶基因FZD2的靶向调节关系；在培养的胃癌细胞MKN-45中加入Wnt/β-catenin信号通路抑制剂-银杏双黄酮，分为miR-30a-5p inhibitor组、miR-30a-5p inhibitor+银杏双黄酮组、miR-30a-5p Inhibitor NC组，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验验证各组细胞的增殖能力，细胞迁移实验(Transwell)验证各组细胞的侵袭能力；通过免疫组织化学方法验证FZD2基因的蛋白表达水平。各组间比较采用 t检验。 结果:qPCR实验结果显示FZD2 mRNA表达水平miR-30a-5p mimics组明显低于NC组(0.62±0.02比1.01±0.13， t＝5.042， P<0.01)，c-myc mRNA表达水平miR-30a-5p mimics组明显低于NC组(0.46±0.07比1.01±0.15， t＝5.805， P<0.01)，Western blot实验结果显示，FZD2蛋白表达水平miR-30a-5p inhibitor组明显高于NC组(1 181 347.00±39.27比206 382.00±8.33， t＝1 080.000， P<0.01)，miR-30a-5p mimics组明显低于NC组(996 269.00±54.50比1 168 775.00±99.80， t＝1 104.000， P<0.01)，c-myc蛋白表达水平miR-30a-5p inhibitor组明显高于NC组(3 307 840.00±81.00比253 663.00±33.29， t＝1 072.000， P<0.01)，miR-30a-5p mimics组明显低于NC组(138 137.00±131.68比205 780.00±77.69， t＝766.300， P<0.01)；双荧光素酶实验结果显示过表达miR-30a-5p后野生组中FZD2基因活性显著低于对照组(1.02±0.14比0.59±0.06， t＝99.638， P<0.01)；CCK-8结果显示转染48 h后miR-30a-5p inhibitor+银杏双黄酮组细胞增殖能力低于miR-30a-5p inhibitor组(93.09±4.18比146.42±5.80， t＝12.920， P<0.01)。Transwell结果显示miR-30a-5p inhibitor+银杏双黄酮组穿膜细胞量低于miR-30a-5p inhibitor组[(63.67±9.61)个比(100.00±10.44)个， t＝4.440， P<0.05]。免疫组织化学结果显示基因FZD2蛋白在miR-30a-5p低表达[miR-30a-5p/β-肌动蛋白(β-actin)<0.05]的胃癌组织中表达增强(评分≥5分)，与对照组比较差异有统计学意义( P<0.01)。 结论:在胃癌中miR-30a-5p可直接靶向FZD2，通过抑制FZD2的表达，降低Wnt信号通路的活性，从而抑制胃癌的发生与发展。

miR-138-5p作为一种微小RNA,在骨关节炎发病中起重要调节作用,其可通过NF-κB、Wnt/β-catenin、PI3K/AKT等信号通路作用调节细胞的炎症、细胞凋亡与增殖、基质降解等生物学过程进而影响骨关节炎的发生和发展.笔者就miR-138-5p对骨关节炎作用机制的研究进展作一综述.

目的:探究微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱在产前诊断胎儿先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)中的应用.方法:收集2021年1月-2022年12月于天津市中心妇产科医院就诊的30例超声确诊为CHD的孕妇(病例组)和同期10例要求行羊水穿刺的孕妇(对照组),用Illumina测序平台对2组孕妇的羊水上清进行全转录组测序,2组孕妇的全部miRNA进行归一化,分析差异表达的miRNA.从差异表达的miRNA中挑选P＜0.05和llog2 FC|＞3(差异倍数,Fold Change,FC)的miRNA再在羊水和外周血中进行实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)验证,比较羊水中 miRNA 测序与 RT-qPCR 的差异倍数,挑选外周血与羊水表达调控方向一致的miRNA.结果:共发现138个差异表达miRNA,其中85个上调,53个下调.进一步挑选出了 15个差异表达的miRNA,羊水中miRNA测序与RT-qPCR结果比较相一致.外周血与羊水中表达调控方向一致的miRNA有2个,分别为miR-222-3p和miR-189-5p,这2个miRNA在病例组母血中表达量较对照组显著上升(均P＜0.05).结论:母血中miRNA作为新的血清学标志物可以初步应用于筛查胎儿CHD.

目的 探讨慢性心力衰竭患者微小RNA(miR)-182-5p表达水平,并分析其与左心室重构及预后的相关性.方法 选取2019年1月至2021年12月聊城市人民医院心内科收治的慢性心力衰竭患者138例为慢性心力衰竭组(心衰组),另选取同期接受体检的120例健康志愿者为健康组,检测2组血清miR-182-5p表达水平,并采用Pearson分析miR-182-5p表达水平与左心室重构的相关性,ROC曲线分析miR-182-5p表达水平的诊断价值,连续随访1年,收集并分析心衰组生存状况,采用Kaplan-Meier生存曲线评估miR-182-5p表达水平及预后价值.结果 心衰组左心室射血分数(LVEF)水平低于健康组,左心室重构指数(LVRI)和miR-182-5p表达水平显著高于健康组,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);miR-182-5p表达水平与LVEF呈负相关(r=-0.496,P=0.000),与LVRI呈正相关(r=0.460,P=0.000);miR-182-5p表达水平诊断慢性心力衰竭的ROC曲线下面积为0.964,截断值为0.905,敏感性为91.3％,特异性为86.7％;Kaplan-Meier生存曲线分析显示,miR-182-5p低表达患者生存率高于高表达患者(P=0.039).结论 慢性心力衰竭患者miR-182-5p表达水平高于健康人群,且水平越高的患者左心室重构越严重,检测miR-182-5p表达水平有助于慢性心力衰竭患者的诊断和不良预后预测.

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清长链非编码RNA 序列相似性家族 138 成员B(LncRNA FAM138B)、微小RNA-105-5p(miR-105-5p)表达与病理特征的预后的关系.方法 选取 2018 年 1 月至 2019 年 12 月收治的110 例NSCLC患者为NSCLC组,另选取同期60 例体检健康者为对照组,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达.分析血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达与NSCLC患者病理特征的关系.StarBase数据库预测LncRNA FAM138B与miR-105-5p的关系.采用Pearson相关性分析NSCLC患者血清LncRNA FAM138B与miR-105-5p表达的相关性,多因素Cox回归分析NSCLC患者预后影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达对NSCLC患者预后的预测价值.结果 与对照组比较,NSCLC组血清LncRNA FAM138B 表达降低,miR-105-5p 表达升高(P<0.05).经 StarBase 数据库预测,LncRNA FAM138B与miR-105-5p存在互补序列.Pearson相关性分析显示,NSCLC患者血清LncRNA FAM138B与miR-105-5p表达呈负相关(r=-0.770,P<0.001).不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移NSCLC患者LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达比较,差异有统计学意义(P<0.05).110 例NSCLC患者 3 年总生存率为 56.36%(62/110).K-M生存曲线分析显示,LncRNA FAM138B高表达组总生存率高于低表达组,miR-105-5p高表达组总生存率高于低表达组(P<0.05).多因素Cox回归分析显示,低分化、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移和miR-105-5p≥1.494 为NSCLC患者死亡的独立危险因素,LncRNA FAM138B≥0.871 为独立保护因素(P<0.05).ROC 曲线分析显示,血清 LncRNA FAM138B、miR-105-5p表达单独与联合预测NSCLC患者预后的曲线下面积分别为 0.783、0.779、0.905,二项联合预测的曲线下面积最大(P<0.05).结论 NSCLC患者血清LncRNA FAM138B低表达,miR-105-5p高表达,与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后有关,可能成为NSCLC患者预后的辅助预测指标.

目的 探究微小RNA-138-5p(miR-138-5p)对滋养层细胞侵袭和血管生成的影响,并进一步研究其对缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/Notch1轴的调节作用.方法 体外培养人滋养层细胞系HTR-8/SVneo,分别转染mimics NC(miR-NC)、miR-138-5p模拟物(miR-138-5p mimics)、抑制剂阴性对照(inhibitor NC)、miR-138-5p 抑制剂(miR-138-5p inhibitor)、pcDNA-NC(oe-NC)、pcDNA-HIF-1α(oe-HIF-1α)、miR-138-5p 模拟物与 pcDNA-NC(miR-138-5p mimics+oe-NC)、miR-138-5p 模 拟 物 与 pcDNA-HIF-1α(miR-138-5p mimics+oe-HIF-1α).转染后继续培养48 h,采用MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖情况;Transwell法检测细胞侵袭情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;管形成实验检测血管生成情况;qRT-PCR法检测细胞中 miR-138-5p 表达;Western blot 法检测细胞中 HIF-1α、Notch1、MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-138-5p与HIF-1α的靶向关系.两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析和SNK-q检验.结果 过表达miR-138-5p后细胞存活率、克隆形成数、侵袭个数、管形成数量(33.15±3.85比64.53±4.12)下降,细胞凋亡率升高,HIF-1α、Notch1、MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白表达(0.26±0.04比0.46±0.05)降低(P均＜0.05);抑制miR-138-5p表达上述指标变化相反.双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-138-5p与HIF-1α存在靶向关系.过表达HIF-1α后细胞存活率、克隆形成数、侵袭个数、管形成数量升高,细胞凋亡率降低,Notch1及MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白表达升高(P均＜0.05);过表达HIF-1α可逆转过表达miR-138-5p对上述指标变化的影响.结论 miR-138-5p可能通过靶向负调控HIF-1α/Notch1轴对滋养层细胞增殖、侵袭能力与血管生成产生影响.

目的 分析血浆微小RNA-379(miR-379)、微小RNA-195(miR-195)、生长停滞特异性蛋白6(Gas6)水平早期检测在急性心肌梗死(AMI)患者中的应用价值.方法 选取2021年5至2022年7月于首都医科大学附属北京世纪坛医院心内科住院治疗的265例患者,分为AMI组(n=127)和非AMI组(n=138),选取同期120名健康体检者设为对照组.比较三组入组时的血浆miR-379、miR-195表达量及Gas6水平;采用Pearson相关系数分析AMI患者入组时的血浆Gas6水平与miR-379、miR-195表达量的关系;采用受试者工作曲线(ROC)分析入组时的血浆Gas6水平及miR-379、miR-195表达量对早期AMI的诊断价值.结果 三组入组时的血浆miR-379、miR-195、Gas6水平比较差异有统计学意义(P<0.05);血浆miR-379水平比较:AMI组<非AMI组<对照组,miR-195、Gas6水平比较:AMI组>非AMI组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05).Pearson相关系数分析显示,Gas6与miR-379水平呈负相关(P<0.05),与miR-195水平呈正相关(P<0.05).ROC结果显示,血浆miR-379、miR-195、Gas6水平单独诊断早期AMI具有一定局限性(AUC=0.808、0.718、0.752),三者联合诊断的效能更佳(AUC=0.879).结论 血浆miR-379、miR-195、Gas6水平在AMI患者中异常表达,三指标可作为AMI早期疾病诊断的参考指标.