目的 分析基于H19/微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/糖皮质激素调节激酶1(SGK1)通路的金银花提取物对子宫内膜癌术后感染大鼠的干预效果.方法 选取70只SPF级Wistar雌性大鼠,取其中30只进行LD35试验,确定致死量后,选取80 mg/kg的剂量进行给药及观察;剩余40只中10只作为空白组,30只建立子宫内膜癌术后感染模型,共有26只大鼠建模成功,将其分为模型组8只、药物对照组9只、金银花提取物组9只;药物对照组给予阿莫西林克拉维酸钾,金银花提取物组给予金银花提取物,空白组、模型组不做处理,干预14 d后观察大鼠变化.检测各组小鼠白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、金黄色葡萄球菌菌落数水平和H19、miR-195-5p、糖皮质激素调节激酶1(SGK1)mRNA表达量及相对表达量.结果 与空白组相比,模型组、药物对照组、金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mR-NA表达量及相对表达量上升,miR-195-5p mRNA表达量及相对表达量下降(P＜0.05);与模型组相比,药物对照组、金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mRNA表达量及相对表达量下降,miR-195-5p mRNA表达量及蛋白相对表达量上升(P＜0.05);与药物对照组相比,金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mRNA表达量及相对表达量下降,miR-195-5p mRNA表达量及相对表达量上升(P＜0.05).结论 金银花提取物可减轻子宫内膜癌术后感染大鼠炎性反应,减少金黄色葡萄球菌菌落数,其机制可能与H19/miR-195-5p/SGK1得到调节有关.

目的:制备咖啡酸分子烙印聚合物(MIP)并特异性地去除金银花提取物中的咖啡酸,考察咖啡酸去除前后金银花提取物抑制前列腺素E2(PGE2)释放的变化,从整体上评价其抗炎活性.方法:采用溶胶-凝胶法,以粒径为 62～105 μm的二氧化硅微珠为载体、咖啡酸为模板分子、(3-氨丙基)三乙氧基硅烷为功能单体、四乙氧基硅烷为交联剂、四氢呋喃为溶剂,合成了咖啡酸MIP.以此MIP作为液相色谱固定相,以甲醇-乙酸(500∶1和 9∶1)为流动相,特异性去除了金银花提取物中的咖啡酸.通过脂多糖刺激巨噬细胞RAW264.7 释放PGE2 实验评价去除咖啡酸前后金银花提取物的抗炎作用.结果:溶胶-凝胶法制备的咖啡酸MIP能够从复杂体系中特异性地分离和富集微量的咖啡酸,对咖啡酸的容量因子和烙印效率分别为 15.8 和 9.7,最终从金银花提取物 2.6 g中分离了咖啡酸146 μg,纯度为 92%,回收率为 89%.金银花提取物和去除咖啡酸的提取物在质量浓度为 100、200、400 μg·mL-1时对脂多糖诱导的RAW264.7 细胞释放PGE2 的抑制率分别为 5.8%、35.6%、62.5%和 5.4%、13.3%、57.5%,去除微量咖啡酸以后的提取物在 3 个质量浓度时的抑制率较金银花提取物均有所降低.结论:咖啡酸是金银花提取物抗炎活性的一个重要成分,咖啡酸分子烙印聚合物可以实现金银花提取物中微量咖啡酸的特异性分离,分子烙印技术能够在保证中药完整性的前提下评价中药的药理活性.

目的:探讨金银花提取物对哮喘小鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖和凋亡的影响,阐明其相关的作用机制.方法:构建小鼠哮喘模型,分离原代ASMCs并进行鉴定.采用白细胞介素4(IL-4)诱导巨噬细胞RAW264.7 M2极化并进行鉴定.RAW264.7细胞分为对照组及低、中和高剂量金银花提取物组,对照组诱导RAW264.7细胞M2极化后与ASMCs共培养,低、中和高剂量金银花提取物组分别用不同浓度(50、100和 200 mg·L-1)金银花提取物处理 RAW264.7 细胞 1 h,再用 60 μg·L-1 IL-4 处理 6 h,随后将ASMCs与RAW264.7 细胞共培养 24 h.流式细胞术检测各组RAW264.7 细胞中巨噬细胞表面标记蛋白CD86 和CD206 阳性细胞百分率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组ASMCs培养上清液中白细胞介素10(IL-10)水平,MTT法检测各组ASMCs增殖活性,流式细胞术检测各组ASMCs凋亡率.结果:细胞形态表现和免疫荧光染色结果证明所提取的细胞为ASMCs.RAW264.7细胞M2极化鉴定结果显示已诱导成为M2巨噬细胞.与对照组比较,低、中和高剂量金银花提取物组RAW264.7 细胞中CD86 阳性细胞百分率明显升高(P<0.05),CD206阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),ASMCs培养上清液中IL-10水平和ASMCs增殖活性明显降低(P<0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P<0.05);与低剂量金银花提取物组比较,中和高剂量金银花提取物组RAW264.7细胞中CD86阳性细胞百分率明显升高(P<0.05),CD206 阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),ASMCs 培养上清液中 IL-10 水平和 AMSC 增殖活性明显降低(P<0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P<0.05);与中剂量金银花提取物组比较,高剂量金银花提取物组RAW264.7细胞中CD86阳性细胞百分率明显升高(P<0.05),CD206阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),ASMCs 培养上清液中 IL-10 水平和 ASMCs 增殖活性明显降低(P<0.05),ASMCs凋亡率明显升高(P<0.05).结论:金银花提取物可通过抑制巨噬细胞M2极化进而抑制哮喘小鼠ASMCs细胞增殖并促进其凋亡.

本文研究平卧菊三七、金银花、杜仲叶绿原酸提取物的抑菌和抗氧化作用,为选择合适的天然食品防腐剂和抗氧化剂提供参考.采用纸片扩散法,探讨平卧菊三七、金银花、杜仲叶绿原酸提取物分别对几种常见致病菌的抑菌活性.在抗氧化作用方面,探讨平卧菊三七、金银花、杜仲叶绿原酸提取物分别在抗脂质过氧化能力、还原能力和清除DPPH·方面进行了研究.结果表明,三种植物绿原酸提取物对细菌均有很强的抑制作用,特别是对金黄色葡萄球菌的抑制作用,在浓度为100 mg/mL时,平卧菊三七绿原酸提取物、金银花绿原酸提取物、杜仲叶绿原酸提取物的抑菌圈分别可达21.4、23.6、24.7 mm.同时,对大肠杆菌和沙门氏菌液也有明显的抑制作用,但是对酵母菌的抑菌作用不明显;且各供试物的抑菌强弱顺序为:杜仲叶绿原酸提取物＞金银花绿原酸提取物＞平卧菊三七绿原酸提取物.三种植物中绿原酸提取物中,杜仲叶绿原酸提取物的抗脂质过氧化能力、还原能力和清除DPPH·能力均高于其他两种绿原酸提取物.本文揭示了在平卧菊三七、金银花、杜仲叶这三种绿原酸提取物中,杜仲叶绿原酸提取物有较强的抑菌活性和抗氧化作用.

目的 研究3味中草药(金银花、蒲公英、紫花地丁)不同组合的水提取液的抗菌和抗癌活性.方法 微孔浊度法检测三种药材不同组合的水提取液对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、大肠杆菌生长的抑制作用;MTT法检测水提取液对白血病细胞K562、前列腺癌细胞PC3、乳腺癌细胞MDA生长的抑制作用,并用流式细胞术及倒置荧光显微镜检测其对癌细胞的诱导凋亡作用.结果 不同组合的3味中药水提取液均具有一定的抗菌及抗癌活性;3味中草药同等质量组合的水提取液的抗菌活性和抗白血病细胞K562生长作用最强,且能显著诱导K562细胞凋亡.结论 3味中药等质量组合的水提液的抗菌和抗癌活性最强,抗癌作用具有选择性.

目的 研究金银花和鱼腥草乙醇提取物对流感病毒复制的抑制作用,为阐明药用植物有效抗流感物质基础提供科学依据.方法 以流感病毒感染的MDCK 细胞为模型,研究金银花和鱼腥草乙醇提取物对流感病毒复制的抑制作用.结果 金银花和鱼腥草乙醇提取物对流感病毒复制有较强的抑制作用,对 H3N2和H1N1流感病毒的半数抑制浓度(IC50)分别为(236.28 ± 15.37)、(290.50 ± 34.82)μg/mL 和(428.97 ± 38.54)、(522.28 ± 36.48)μg/mL.结论 金银花和鱼腥草乙醇提取物对流感病毒的复制有一定的抑制作用.

自由基过量累积会影响生物体正常机能,筛选具有自由基清除功能的昆虫代谢产物对于开发虫茶至关重要.为了解金银花尺蠖幼虫粪便提取物的抗氧化活性,在室内测定了金银花尺蠖幼虫粪便乙醇提取物的体外抗氧化活性.结果表明,金银花尺蠖幼虫粪便乙醇提取物具有一定的体外抗氧化活性:对二苯代苦味酰自由基(DPPH)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-)、ABTS+·自由基均具有一定的清除能力,在0.05mg/mE时的清除率分别为37.78％、25.31％、21.41％和35.82％;随着提取物浓度的增大,对自由基的清除率逐渐增加,当浓度上升到0.65 mg/mL时的清除率分别为95.52％、69.07％、63.27％和72.46％,分别增加了57.74％、43.76％、41.86％和36.64％,差异达显著水平;对卵黄脂蛋白脂质过氧化也具有一定的抑制作用,在0.05 mg/mL时的抑制率为26.78％,随着提取物浓度的增大,对脂质过氧化的抑制率也逐渐增加,当浓度上升到0.65 mg/mL时的抑制率为50.63％,增加了23.85％,差异达显著水平.在0.05 ～0.65 mg/mL的浓度范围内,对自由基的清除率、对脂质过氧化的抑制率与浓度之间呈显著的线性关系.综上,金银花尺蠖幼虫粪便提取物具有开发为虫茶的潜力.

[目的]采用特征图谱、绿原酸与木犀草苷含量测定、山银花检查等综合方法,评价市场金银花提取物的质量.[方法]高效液相色谱(HPLC)特征图谱及绿原酸含量测定以Kromasil 100-C18为色谱柱,流动相为乙腈—0.4％磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为327 nm,柱温为35℃,流速为1.0 mL·min-1.木犀草苷HPLC含量测定以ZOBAX SB-Phenyl为色谱柱,流动相为乙腈—0.5％(体积分数)冰乙酸(梯度洗脱),检测波长为350 nm,柱温为25℃,流速为0.9 mL·min-1.山银花HPLC-ELSD检查方法,以Kromasil 100-C18为色谱柱,流动相为乙腈—0.4％(体积分数)冰乙酸(梯度洗脱),流速为1.0 mL·min-1.[结果]13批市售金银花提取物特征图谱均检出6个酚酸类特征峰,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸.金银花与山银花药材均检出6个酚酸类特征峰,但药材与提取物相对峰面积差异较大,提示提取物制备过程中发生酚酸类成分异构体的转化.13批样品中有6批样品检出山银花的灰毡毛忍冬皂苷乙特征峰,提示这些样品为山银花提取物伪品或掺假山银花提取物.样品中绿原酸与木犀草苷含量分别为1.56～45.61 mg·g-1、0.038～0.734 mg·g-1,山银花提取物伪品或掺伪品的绿原酸含量相对较高,而木犀草苷含量明显较低,不同厂家的正品金银花提取物绿原酸含量差异也较大,提示可能与金银花原料质量、制备工艺方法及辅料加入量的不统一有关.[结论]市场上金银花提取物质量差异很大,山银花假冒金银花或掺伪金银花现象严重,应加强原料质量控制、确定稳定的制备工艺,以保障提取物质量的稳定性.

目的 探讨复方蜂胶金银花提取物对炎症大鼠和小鼠的抗炎作用.方法 取40只雄性SD大鼠行棉球植入实验,随机分为高、中、低剂量和空白对照组各10只,高、中、低剂量组大鼠按1.0 ml/100 g体重分别给予22.0 mg/ml、11.0 mg/ml、5.5 mg/ml浓度的复方蜂胶金银花提取物灌胃,空白对照组灌胃等体积纯水,给药30 d后测定大鼠肉芽肿净重.另取40只雄性SD大鼠进行足趾肿胀实验,分组及干预同前,30 d后计算足趾肿胀率.取40只雄性昆明种小鼠行耳肿胀实验,分组同前,高、中、低剂量组按0.2 ml/10 g体重分别经口灌胃浓度为11.0 mg/ml、5.5 mg/ml、2.75 mg/ml的复方蜂胶金银花提取物,空白对照组灌胃等体积的纯水,给药30 d后计算小鼠耳郭肿胀率.结果 高、中、低剂量组、空白对照组大鼠双侧肉芽肿总净量依次升高(均P<0.05);各剂量组大鼠的足趾肿胀率均低于空白对照组,且高剂量组大鼠的足趾肿胀率低于低剂量组(均P<0.05),各组大鼠足趾肿胀率均随时间增加而改变(均P<0.05),但时间与剂量之间无交互作用(P>0.05).高、中剂量组小鼠的耳郭肿胀值和肿胀率均低于空白对照组,且高剂量组低于低剂量组(P<0.05).结论 复方蜂胶金银花提取物对炎症大鼠和小鼠均具有抗炎作用.

目的:观察黄连等6味中草药对耐药性鲍曼不动杆菌的体外抑菌作用.方法:选用黄连、黄柏、黄芩、白头翁、千里光和金银花6味中草药,采用水煎法和醇提法来提取其有效成分,采用K-B法进行测定上述6味中草药两种提取物对耐药性鲍曼不动杆菌的体外抑菌作用.结果:菌液浓度为1.0 g/L时,6味种草药均有一定的抑菌作用;而菌液浓度在0.5、0.25 g/L时药物的抑菌效果更明显,其中以黄连、黄芩的抑菌作用最为显著.结论:6味中草药均有不同程度的抑菌作用,其中黄连、黄芩水煎法和醇提法提取物对耐药性鲍曼不动杆菌的抑菌作用显著.