目的 探讨微小RNA-542-3p(miR-542-3p)、长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(ln-cRNA TUG1)在重型颅脑损伤(STBI)病人血清中的表达及与病人预后的关系.方法 2020年1月～2022年7月收治的128例STBI病人为重型组,130例轻、中型TBI病人为对照组,检测病人血清miR-542-3p、lncRNA TUG1表达量,采用Pearson法分析二者相关性.Logistic回归分析血清miR-542-3p、lncRNA TUG1对STBI病人预后不良的影响,并以受试者工作特征(ROC)曲线分析二者对STBI病人预后的预测效能.结果 重型组病人血清miR-542-3p与lncRNA TUG1表达量分别低于和高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).STBI病人血清miR-542-3p与lncRNA TUG1表达量呈负相关(r=-0.595,P＜0.001).预后不良组血清lncRNA TUG1与miR-542-3p水平分别高于和低于预后良好组,差异有统计学意义(P＜0.05).高lncRNA TUG1水平是STBI病人预后不良的危险因素(P＜0.05),高miR-542-3p水平是保护因素(P＜0.05).血清miR-542-3p、lncRNA TUG1联合预测STBI病人预后的曲线下面积(AUC)(0.939)高于单独预测的AUC(Z=2.410,P=0.016;Z=3.339,P＜0.001).结论 STBI 病人血清 miR-542-3p 表达下调,lncRNA TUG1 表达上调,二者均可用于STBI病人预后预测,且二者联合的预测价值更高.

目的 明确miR-542-3p对骨肉瘤细胞系HOS和SAOS2细胞侵袭能力的影响,通过生物信息学建立miR-542-3p靶基因调控网络,并探讨其潜在作用靶点.方法 使用miR-542-3p mimics转染HOS和SAOS2细胞,同时设立正常组(未转染)及阴性对照组(转染miR-neg mimics),Transwell小室试验检测转染后细胞的侵袭能力.通过美国国立生物信息中心(NCBI)基因表达共享数据库(GEO)联合GEO2R平台,获取并分析miRNA-542-3p与miR-neg转染的U2OS细胞的基因表达谱数据及其差异表达基因,进而使用miRNA预测数据库及Cytoscape软件,预测并建立miR-542-3p靶基因调控网络.实时荧光定量PCR验证miR-542-3p转染HOS和SAOS2细胞后,部分预测目标靶基因的mRNA表达水平变化.结果 miR-542-3p干预组HOS和SAOS2细胞的侵袭能力较正常组和阴性对照组明显降低(P均<0.05).数据库差异基因分析表明,miR-542-3p与miR-neg转染的U2OS细胞的表达差异基因共有417个,其中185个基因表达下调.miRNA预测数据库预测的266个靶基因中,有14个与差异基因分析中得到的表达下调基因重合.实时荧光定量PCR分析得出,ILK、TBPL1、ETS1这3个预测靶基因在miR-542-3p干预组中的表达水平显著低于阴性对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 miR-542-3p通过下调ILK、TBPL1、ETS1显著抑制骨肉瘤细胞的侵袭能力.

目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-542-3p在脑胶质瘤患者肿瘤组织中的表达及其对肿瘤细胞增殖、迁移的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测33例脑胶质瘤患者肿瘤组织及29例颅脑外伤患者正常脑组织中miR-542-3p的表达水平;合成miR-542-3pmimics及无关序列(miR-542-3p NC),并采用Lipofectamine 2000分别将miR-542-3p mimics和miR-542-3p NC转染至人胶质瘤U87细胞株;分别进行培养后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞的增殖能力;划痕实验检测细胞的迁移能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力,评价miR-542-3p在胶质瘤细胞U87中的生物学功能.结果 微小RNA miR-542-3p在脑胶质瘤组织及正常脑组织中的相对表达量分别为0.74±0.06和1.06±0.09,胶质瘤组织中miR-542-3p的相对表达水平显著低于正常脑组织(t=3.03,P＜0.01).在人胶质瘤细胞株U87中分别转染miR-542-3pmimics和无关序列miR-542-3p NC后,转染miR-542-3mimics对U87细胞增殖能力无明显影响(t=0.236,P＞0.05).但U87细胞中转染miR-542-3p mimics后细胞的迁移能力和侵袭能力明显增强.结论 miR-542-3p在人胶质瘤细胞中表达水平减低,并在胶质瘤细胞中发挥抑制细胞迁移和侵袭.

目的 长链非编码RNA(long-chain non-coding RNA,lncRNA)被发现在肾癌发生和发展调控方面具有重要作用.本研究观察lncRNA LINC01224在肾癌组织和细胞株中表达,探讨LINC01224对肾癌细胞增殖和转移影响及作用机制.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测肾癌组织14例和肾癌细胞株(Caki-1、ACHN、786-O、OS-RC-2和A498)中LINC01224表达.将载有LINC01224编码序列的慢病毒载体(Lenti-LINC01224)感染LINC01224表达量最低的肾癌细胞株作为观察组,以载有绿色荧光基因的慢病毒(Lenti-GFP)为对照组.细胞增殖实验和Transwell迁移实验检测感染后细胞增殖和迁移能力.生物信息学技术预测LINC01224的下游基因.qRT-PCR检测感染后细胞中LINC01224和下游基因mRNA表达.蛋白质印迹法检测下游蛋白表达.结果 癌旁组织和肾癌组织LINC01224表达量分别为4.27士0.42和1.94±0.23,差异有统计学意义,t=4.826,P＜0.001.人正常肾小管上皮细胞HK-2和人肾癌细胞株Caki-1、ACHN、786-0、OS-RC-2和A498中LINC01224表达量分别为6.95士0.73、2.74士0.38、4.73士0.48、4.76±0.28、1.04±0.16和3.09士0.35,差异有统计学意义,F=27.530,P＜0.001.观察组细胞增殖能力从第3天开始降低,t=6.104,P=0.004.对照组和观察组OS-RC-2细胞迁移数分别为(191.50±31.15)和(71.12士16.52)个,差异有统计学意义,t=3.415,P=0.014.LINC01224可结合miR-542-3p,miR-542-3p可结合MFN2 mRNA.与对照组比较,观察组OS-RC-2细胞测定指标表达量差异有统计学意义的包括:LINC01224表达量分别为1.03士0.15和7.93±0.80,t=8.511,P＜0.001;miR-542-3p表达量分别为1.03士0.13和0.32±0.04,t=5.005,P=0.002;MFN2 mRNA表达量分别为1.03±0.15和4.32±0.37,t=8.155,P＜0.001.结论 LINC01224在肾癌中表达减少,可抑制肾癌细胞的增殖和迁移能力,其机制可能是抑制miR-542-3p的表达,减少miR-542-3p表达对MFN2基因抑制作用.

探究不同来源子宫内膜间质细胞(ESC)外泌体微小RNA (miRNA)表达谱的差异.将40例子宫内膜异位症(EMs)患者(研究组)及40例子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ行子宫手术患者(对照组)ESC原代培养后分离培养基中外泌体,芯片检测两组外泌体miRNA表达谱差异,qRT-PCR检测两组外泌体miR-205、miR-542-3p水平;对上调、下调倍数较高miRNA且与EMs相关靶基因进行预测.研究组与对照组ESC外泌体有39种miRNA表达差异有统计学意义(P＜0.05),其中上调miRNA有14个,以miR-205上调倍数最高;下调有25个,以miR-542-3p下调倍数最高.qRT-PCR检测ESC外泌体miR-205、miR-542-3p水平与芯片检测倍数差异无统计学意义(P＞0.05).PTEN、FBN1、S100A2等与EMs相关的26种基因被预测为差异表达的miRNA靶基因.EMs患者ESC外泌体中存在多种差异表达的miRNA,且靶向多种EMs相关基因.

目的 观察微小RNA-542-3p(miR-542-3p)、Toll样受体4(TLR4)在癫痫患者血浆中的表达水平,并讨论其临床意义.方法 选取2014年10月至2019年10月于长江大学附属仙桃市第一人民医院神经内、外科收治的原发性癫痫患者134例作为观察组,另选取同时期于长江大学附属仙桃市第一人民医院体检结果证实健康者140例作为对照组.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定受试者血浆中miR-542-3p的表达水平;应用酶联免疫吸附实验(ELASA)测定两组受试者血浆中TLR4的表达水平.受试者工作特征(ROC)曲线分析癫痫患者血浆中miR-542-3p、TLR4对癫痫不同发作类型的预测价值.Pearson分析miR-542-3p与TLR4的相关性.结果 观察组血浆中miR-542-3p表达水平低于对照组(P＜0.05),TLR4表达水平高于对照组(P＜0.05);全面性发作患者血浆miR-542-3p表达水平显著低于部分性发作患者,TLR4表达水平高于部分性发作患者(P＜0.05);血浆miR-542-3p对癫痫不同发作类型预测的ROC曲线下面积为0.886,截断值为0.838,敏感度为87.3％,特异性为76.2％;TLR4 对癫痫不同发作类型预测的ROC曲线下面积为0.803,截断值为2.285 ng·mL-1,敏感度为83.1％,特异性为71.4％;两者联合检测对癫痫不同发作类型预测的ROC曲线下面积为0.926,敏感度为93.0％,特异性为85.7％;癫痫患者血浆中miR-542-3p与TLR4呈负相关(r=-0.610,P＜0.05).结论 癫痫患者血浆中miR-542-3p表达水平下降,而TLR4表达升高,两者之间负相关,未来或可作为预测癫痫发作类型的有效指标.

目的 探究微小RNA-542-3p(miR-542-3p)在鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤中的表达和临床意义及对鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤细胞的增殖、侵袭和凋亡的影响.方法 收集56例鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤患者和40例同时期慢性鼻腔炎患者,取病理制作并石蜡标本.应用qRT-PCR法检测两组患者病理石蜡标本中miR-542-3p的表达,分析鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤标本中miR-542-3p相对表达量与临床病理特征的关系.取SNK-6细胞培养,将细胞分为miR-542-3p组(转染miR-542-3p模拟物)、miR-NC组(转染miR-542-3p模拟物阴性对照)、anti-miR-542-3p组(转染miR-542-3p抑制剂)和anti-miR-NC组(转染miR-542-3p抑制剂阴性对照);MTT法测定各组细胞增殖能力,Transwell法测定各组细胞侵袭能力,TUNEL法观察各组细胞凋亡情况,Western印迹实验检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3的表达.结果 鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤患者中miR-542-3p相对表达量显著低于同时期慢性鼻腔炎患者(P<0.05),鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤患者miR-542-3p低表达与患者临床分期较晚有关.过表达miR-542-3p能抑制细胞增殖、侵袭,促进细胞凋亡;敲低miR-542-3p能促进细胞增殖、侵袭,并抑制凋亡.结论 miR-542-3p在鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤中显著下调,且与患者临床分期有关.miR-542-3p可显著抑制鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤的进展.

目的 探讨脑胶质瘤组织中锌转运体1(ZnT1)信使RNA(mRNA)、微小RNA(miRNA)miR-542-3p表达水平与肿瘤病理特征的关系及对脑胶质瘤患者术后复发的预测价值.方法 将2018年6月至2021年1月于该院行手术治疗的92例脑胶质瘤患者纳入研究.比较患者胶质瘤组织及瘤旁组织ZnT1 mR-NA、miR-542-3p的表达水平.比较不同病理特征的瘤组织ZnT1 mRNA、miR-542-3p的表达水平.分析患者术后复发的影响因素.评估ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达水平用于预测术后复发的价值.结果 胶质瘤组织ZnT1 mRNA表达水平高于瘤旁组织(P<0.05),miR-542-3p表达水平低于瘤旁组织(P<0.05).胶质瘤组织ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达水平与病理分级、组织学分化、肿瘤浸润有关(P<0.05).胶质瘤组织中ZnT1 mRNA高表达及miR-542-3p低表达会增加脑胶质瘤患者术后复发风险(P<0.05).构建ZnT1 mR-NA、miR-542-3p联合检测用于术后复发预测的方程,绘制预测术后复发的受试者工作特征(ROC)曲线,结果显示,这两项指标联合预测的效能高于单一指标预测(P<0.05).结论 脑胶质瘤组织中ZnT1 mRNA、miR-542-3p表达水平与病理分级、组织学分化、肿瘤浸润等病理特征有关,二者联合检测可用于预测患者术后复发.

目的 探讨黑炭与铅联合暴露对大鼠脉络丛上皮细胞系Z310细胞中细胞黏附分子表达和调控细胞黏附分子的微小RNA(miRNA)影响.方法 (1)将Z310细胞随机分为对照组、黑炭暴露组、铅暴露组和联合暴露组,铅暴露组、黑炭暴露组细胞分别予剂量为10 μmol/L的乙酸铅和10 mg/L的黑炭染毒,联合暴露组予上述剂量的黑炭与乙酸铅染毒;12.0 h后,采用蛋白印迹法检测Z310细胞中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、黏膜血管地址素细胞黏附分子-1(MAdCAM-1)的蛋白表达,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测调控ICAM-1基因的miR-326、miR-328-3p和miR-542-3p的表达.(2)将Z310 细胞或miRNA-326 mimic转染成功的Z310 细胞随机分为对照组、miRNA-326转染对照组、联合暴露组和miRNA-326转染联合暴露组,2个对照组细胞均不予染毒处理,2个联合暴露组均予剂量为10 mg/L的黑炭染毒和10 μmol/L的乙酸铅染毒12.0 h,采用蛋白印迹法检测ICAM-1的蛋白表达.结果 (1)黑炭暴露组细胞中的ICAM-1、VCAM-1、MAdCAM-1和铅暴露组细胞中ICAM-1蛋白相对表达水平均高于对照组(P值均<0.05);联合暴露组细胞中ICAM-1和MAdCAM-1蛋白相对表达水平分别高于其余3组(P值均<0.05),VCAM-1蛋白相对表达水平均高于对照组和铅暴露组(P值均<0.05).黑炭暴露组和铅暴露组细胞中miR-326相对表达水平均低于对照组(P值均<0.05),联合暴露组细胞中miR-326相对表达水平分别低于其余3组(P值均<0.05);4组细胞中miR-328-3p和miR-542-3p相对表达水平比较,差异均无统计学意义(P值均>0.05).(2)ICAM-1蛋白相对表达水平在miR-326转染对照组细胞中低于对照组(P<0.05),在联合暴露组、miR-326转染联合暴露组细胞中均高于对照组和miR-326转染对照组(P值均<0.05),在miR-326转染联合暴露组细胞中低于联合暴露组(P<0.05).结论 黑炭与铅单独暴露均可导致Z310细胞中ICAM-1、VCAM-1、MAdCAM-1表达不同程度的上调;黑炭与铅联合暴露对ICAM-1和MadCAM-1表达上调具有协同作用,以ICAM-1变化最为显著.黑炭与铅联合暴露可能通过下调miR-326表达进而上调ICAM-1蛋白的表达.