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CRNDE靶向微RNA-212-5p基因对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡及炎症因子分泌的影响
编辑人员丨4天前
探讨CRNDE对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨增殖、凋亡和炎性因子表达的影响及可能机制。研究发现,与对照组比较,骨关节炎组患者软骨组织中CRNDE表达升高,而miR-212-5p表达降低。下调CRNDE可靶向负调控miR-212-5p提高IL-1β诱导的软骨细胞增殖,并降低细胞凋亡和炎性因子表达,CRNDE/miR-212-5p轴可能为骨关节炎的治疗提供了新靶点。
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编辑人员丨4天前
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微小RNA-212-5p调控ATP结合盒E1对结直肠癌细胞生物学的影响
编辑人员丨4天前
目的:探讨miR-212-5p在结直肠癌(CRC)进展中的作用和机制。方法:从新乡医学院第一附属医院收集32例患者的CRC组织及邻近正常组织,体外培养购自上海中科院细胞库的正常结肠黏膜上皮细胞NCM460和CRC细胞系(SW480、SW1116、HT29),实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-212-5p和ATP结合盒E1(ABCE1)。将SW480细胞分为miR-NC组、miR-212-5p组、si-NC组、si-ABCE1组、miR-212-5p+pcDNA组、miR-212-5p+pcDNA-ABCE1组。噻唑蓝(MTT)法、Transwell分析用于检测SW480细胞增殖、侵袭迁移。蛋白质印迹法(Western blot)评估ABCE1蛋白表达;双荧光素酶实验分析miR-212-5p和ABCE1靶向关系。两组数据差异用独立样本 t检验,多组数据的差异用单因素方差分析和SNK- q检验。 结果:CRC组织和细胞中miR-212-5p的表达明显低于对照组(组织: t=100.411, P<0.01;细胞: F=1 192.235, P<0.01),ABCE1 mRNA(组织: t=85.952, P<0.01;细胞: F=219.953, P<0.01)和蛋白(组织: t=39.634, P<0.01;细胞: F=125.185, P<0.01)的表达明显升高;miR-212-5p组SW480细胞活力(48 h:0.34±0.01比0.53±0.03, t=18.025, P<0.01;72 h:0.51±0.02比0.97±0.08, t=16.735, P<0.01)、迁移数(40.31±2.12比87.42±6.85, t=19.710, P<0.01)、侵袭数(29.06±1.35比72.19±5.91, t=21.344, P<0.01)、ABCE1蛋白(0.17±0.02比0.56±0.05, t=21.726, P<0.01)表达明显低于miR-NC组。si-ABCE1组SW480细胞活力(48 h: t=10.436, P<0.01;72 h: t=17.332, P<0.01)、迁移数( t=16.741, P<0.01)、侵袭数( t=17.164, P<0.01)明显低于si-NC组。miR-212-5p与ABCE1直接结合。miR-212-5p+pcDNA-ABCE1组SW480细胞活力(48 h: q=21.689, P<0.01;72 h: q=16.709, P<0.01)、迁移数( q=20.273, P<0.01)、侵袭数( q=29.325, P<0.01)、ABCE1蛋白表达( q=24.000, P<0.01)明显高于miR-212-5p+pcDNA组。 结论:miR-212-5p靶向ABCE1可抑制CRC细胞生物学行为。
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编辑人员丨4天前
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DNA甲基转移酶3A在胰腺癌组织的表达及其调控因子筛选
编辑人员丨4天前
目的:探讨胰腺癌组织和癌旁组织中DNA甲基转移酶3A的表达水平,并采用转录组学筛选调控DNA甲基转移酶3A的微小RNA(miRNA,miR)家族。方法:选取2021年6月到2023年6月新乡医学院第一附属医院住院部手术切除的胰腺癌组织和对应癌旁组织作为研究对象。采用蛋白质免疫印迹分析DNA甲基转移酶3A的表达水平。随机选取6例癌旁组织和胰腺癌组织作为研究对象,采用转录组学分析癌旁组织和胰腺癌组织中差异表达的(microRNA,miRNA),并采用生物信息学和荧光素酶报告基因分析差异表达miRNA对DNA甲基转移酶3A的调控关系。结果:癌旁组织中DNA甲基转移酶3A表达水平(0.77±0.16)明显低于胰腺癌组织(1.48±0.21),差异有统计学意义( t=19.690, P<0.05)。胰腺癌组织和癌旁组织共有390个miRNA差异表达,其中上调259个,下调131个。这些miRNA主要生物学过程包括细胞增殖、细胞发育、细胞分化等;分子功能主要包括肿瘤细胞运动、细胞迁移、细胞侵袭、细胞增殖和细胞间信号转导等。发现下调的miRNA与DNA甲基转移酶3A存在碱基互补,其中差异最为显著排序前10个的miRNA分别为miR-143-3p、miR-129-5p、miR-493-5p、miR-367-3p、miR-29a-3p、miR-212-3p、miR-323A-3p、miR-5195-3p、miR-4465和miR-532-5p。癌旁组织中miR-143-3p、miR-129-5p、miR-493-5p、miR-367-3p、miR-29a-3p、miR-212-3p、miR-323a-3p、miR-5195-3p、miR-4465和miR-532-5p表达水平(1.09±0.11、0.97±0.08、1.08±0.31、1.17±0.121、1.07±0.08、1.01±0.10、0.97±0.08、1.01±0.05、0.99±0.03、1.04±0.10)明显高于胰腺癌组织(0.51±0.10、0.46±0.11、0.47±0.15、0.62±0.12、0.37±0.07、0.56±0.10、0.66±0.04、0.68±0.06、0.73±0.05、0.66±0.13),差异有统计学意义( t=11.860、12.170、5.590、9.910、21.070、9.941、11.180、14.030、13.570、7.470, P<0.05)。miRNA对照和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.97±0.02、0.96±0.02、0.97±0.02、0.98±0.02、0.97±0.02、0.97±0.04、0.95±0.03、0.96±0.03、0.97±0.02、0.96±0.02)明显高于miR-143-3p、miR-129-5p、miR-493-5p、miR-367-3p、miR-29a-3p、miR-212-3p、miR-323a-3p、miR-5195-3p、miR-4465和miR-532-5p模拟物和荧光素酶报告基因共转染细胞荧光素酶活性(0.32±0.07、0.33±0.06、0.35±0.09、0.50±0.04、0.50±0.05、0.53±0.07、0.58±0.03、0.63±0.03、0.65±0.05、0.81±0.05),差异有统计学意义( t=22.400,24.470,16.730,24.480、20.530,14.010,21.360,19.040,15.960,6.751, P<0.05)。 结论:DNA甲基转移酶3a在胰腺癌组织中表达水平显著增加,miR-143-3p、miR-129-5p、miR-493-5p、miR-367-3p、miR-29a-3p、miR-212-3p、miR-323a-3p、miR-5195-3p、miR-4465和miR-532-5p等miRNA参与调控DNA甲基转移酶3a在胰腺癌组织中的表达。
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编辑人员丨4天前
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基于全转录组测序分析核糖核酸氧化影响胰岛β细胞的分子机制
编辑人员丨4天前
目的:探索高糖诱导核糖核酸氧化增加对胰岛β细胞功能和活性的影响及分子机制。方法:体外培养大鼠胰岛β细胞瘤INS-1细胞,高糖干预后同位素稀释超高效液相串联质谱(ID LC MS/MS)评估核酸氧化。利用8-氧代鸟苷-5'-三磷酸酯(8-oxoGTP)体外模拟INS-1细胞RNA氧化增加,CCK-8评估细胞增殖,流式细胞术评估细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)评估胰岛素(INS)、胰-十二指肠同源盒1(PDX1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Casp3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶6(Casp6)基因信使RNA(mRNA)表达,全转录组测序分析RNA氧化影响INS-1细胞的分子机制。结果:高糖致INS-1细胞RNA氧化增加。RNA氧化增加抑制INS-1细胞增殖,降低INS和PDX1基因mRNA水平,促进凋亡相关casp3和casp6基因mRNA合成。全转录组测序分析发现,RNA氧化增加导致INS-1细胞内mRNA、长链非编码RNA(lncRNA)、微RNA(miRNA)和环状RNA(circRNA)差异表达,显著下调Mafa、Pdx1、Pax6和Mnx1转录因子,上调rno-miR-124-3p,rno-miR-133a-3p,rno-miR-3120,rno-miR-212-3p,rno-miR-7a-2-3p,促使相关lncRNAs差异表达,从而抑制胰岛素合成和分泌及β细胞增殖。结论:RNA氧化增加下调β细胞关键转录因子mRNAs水平,促使相关非编码RNA(ncRNA)特别是lncRNAs差异表达,影响β细胞胰岛素合成和分泌,抑制细胞增殖,是2型糖尿病(T2DM)β细胞功能障碍和活性降低的重要原因。
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编辑人员丨4天前
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基于测序的肝细胞癌血浆外泌体微小RNA-1248的差异表达及功能分析
编辑人员丨4天前
目的:筛选血浆外泌体微小核糖核苷酸(microRNA)作为肝细胞癌(HCC)的诊断标志物,并分析候选miRNA在HCC进展中可能发挥的作用。方法:2018年10月至2019年2月收集12例于广州市第一人民医院初诊为"HCC"的患者及12例健康志愿者血浆样本,利用超速离心法收集血浆外泌体,经动态光散射法及蛋白质免疫印迹法鉴定后,提取RNA进行测序。通过定量聚合酶链反应(qPCR)验证候选外泌体miRNA差异表达量,使用 t检验分析各miRNA表达量差异。通过生物信息学方法预测候选miRNA的靶基因及可能调控的通路,分析其在HCC进展过程中发挥的作用,组间比较采用 t检验。 结果:以差异表达倍数2倍以上(Fold change>2.0或<0.5,且 P<0.05)作为标准,分别比较HCC患者术前、术后及健康志愿者血浆外泌体miRNA的差异表达结果,结合两次结果,筛选表达同时上/下调miRNA共12个。其中,表达上调6个(miR-2115-3p、miR-214-3p、miR-511-5p、miR-1299、miR-10a-5p、miR-375-3p),表达下调6个(miR-219a-2-3p、miR-127-3p、miR-9-5p、miR-383-5p、miR-212-5p、miR-1248)。qPCR验证候选miRNA在HCC患者及健康志愿者血浆外泌体中的表达差异,HCC组miR-1248表达低于健康志愿者组(9.046 ΔCt比7.597 ΔCt, t=2.849, P<0.05)。 结论:血浆外泌体miR-1248有作为HCC的诊断标志物的潜力。血浆外泌体miR-1248可通过调控受体细胞的细胞外基质受体相互作用、介导代谢重编程抑制HCC进展。
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编辑人员丨4天前
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前列腺癌患者血清miR-138-5p,miR-212-5p水平表达及与临床预后价值
编辑人员丨1周前
目的 探究前列腺癌(prostate cancer)患者血清miR-138-5p,miR-212-5p水平表达及与临床预后价值.方法 选择2020年7月~2021年6月邯郸市第一医院收治的95例前列腺癌患者,根据术后两年的随访记录分为预后不良组(复发或死亡,n=52)和预后良好组(未复发或好转,n=43),另选同期48例健康体检志愿者为健康对照组.实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time fluorescence-PCR,qRT-PCR)检测血清 miR-138-5p 和 miR-212-5p 相对表达水平,收集并分析患者临床资料,多因素COX回归分析影响前列腺癌患者预后的因素;绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-138-5p和miR-212-5p对前列腺癌患者预后情况的预测价值;Pearson分析miR-138-5p,miR-212-5p与Gleason评分的相关性.结果 与健康对照组相比较,预后良好组、预后不良组患者血清 miR-138-5p(0.88±0.10,0.83±0.09 vs 1.01±0.10),miR-212-5p(0.75±0.09,0.71±0.08 vs 1.02±0.11)水平显著降低,差异具有统计学意义(t=14.021,22.275;9.825,18.063,均P<0.05);前列腺癌患者预后情况与TNM分期、骨转移、组织分化程度、术前PSA水平以及Gleason评分有关(x2=4.417~7.187,t=14.235,均P<0.05);血清 miR-138-5p[HR(95%CI):0.871(0.785~0.966)],miR-212-5p[HR(95%CI):0.822(0.725~0.932)]为预后不良的保护因素(均 P<0.05).Gleason评分[HR(95%CI):1.253(1.026~1.530)],TNM 分期[HR(95%CI):1.224(1.024~1.463)],骨转移[HR(95%CI):1.398(1.036~1.887)],组织分化程度[HR(95%CI):1.520(1.146~2.016)]和 PSA 水平[HR(95%CI):1.426(1.094~1.858)]为预后不良的危险因素(均P<0.05);血清 miR-138-5p,miR-212-5p 预测的曲线下面积(95%置信区间)[AUC(95%CI)]分别为 0.883(95%CI:0.801~0.940),0.863(95%CI:0.777~0.925);血清 miR-138-5p,miR-212-5p 与 Gleason 评分均呈负相关(r=-0.610,-0.420,均 P<0.05).结论 前列腺癌患者血清miR-138-5p和miR-212-5p水平显著降低,且对前列腺癌患者预后具有一定辅助预测价值.
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编辑人员丨1周前
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基于微小核糖核酸筛选和竞争性内源核糖核酸网络构建的尿酸盐肾沉积机制研究
编辑人员丨1个月前
目的:构建竞争性内源核糖核酸(ceRNA)以揭示尿酸盐肾沉积分子调控机制.方法:复制尿酸盐肾沉积大鼠模型,采用高通量核糖核酸(RNA)测序技术分析尿酸盐肾沉积大鼠肾组织中微小核糖核酸(miRNA)的表达,并筛选出差异表达的 miRNA.利用 TargetScan、StarBase、miRDB、miRWalk 4 个数据库预测 miRNA 的靶基因,通过 DAVID 和 Metascape 数据库对靶基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.运用Cytoscape构建主要信号通路的ceRNA调控网络.结果:测序共检测到14个差异miRNA(均为上调),该差异miRNA的靶基因主要富集在细胞衰老和癌症相关信号通路;构建获得的ceRNA调控网络含47个长链非编码RNA(lncRNA)节点、10个miRNA节点、27个信使RNA(mRNA)节点,该调控网络中 miR-155-5p、miR-132-3p、miR-503-5p、miR-146b-5p 和 miR-212-5p 为排名前 5 的 HUB 基因.结论:本研究通过筛选尿酸盐肾沉积差异miRNA,构建了尿酸盐肾沉积ceRNA网络,为尿酸盐肾沉积机制探讨提供了新思路.
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编辑人员丨1个月前
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circMAN1A2调节miR-212-3p/DDIT4轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响
编辑人员丨2024/8/31
目的 探究circMAN1A2靶向miR-212-3p/DNA损伤诱导转录子4(NDA damage-inducible transcript 4,DDIT4)轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法 qRT-PCR法检测胃癌组织和细胞中circMAN1A2、miR-212-3p表达水平.荧光素酶检测circMAN1A2 与 miR-212-3p、DDIT4 和 miR-212-3p 的靶向关系.在胃癌细胞 SGC-7901、HGC-27 中转染 si-NC、si-circMAN1A2、si-circMAN1A2+anti-NC、si-circMAN1A2+anti-miR-212-3p、miR-NC、miR-212-3p mimics,将未转染的 SGC-7901、HGC-27 细胞设为对照.平板克隆实验检测细胞增殖;细胞划痕及Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力.Western blotting检测增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达.结果 在胃癌组织及细胞中,circMAN1A2高表达,miR-212-3p低表达;下调circMAN1A2可以靶向上调miR-212-3p表达,且下调DDIT4表达,进而抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力.抑制miR-212-3p表达可部分逆转抑制circMAN1A2表达对胃癌细胞恶性增殖的抑制作用.结论 在胃癌细胞中抑制circMAN1A2表达可抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,其与调节miR-212-3p/DDIT4 信号轴有关.
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编辑人员丨2024/8/31
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膀胱癌组织微RNA-212、微RNA-137、微RNA-200表达与临床病理特征的相关性及预测经尿道膀胱肿瘤切除术后复发的效能研究
编辑人员丨2024/4/27
目的 探讨膀胱癌组织微RNA-212(miRNA-212)、微RNA-137(miRNA-137)、微RNA-200(miRNA-200)表达与临床病理特征的相关性及预测经尿道膀胱肿瘤切除(TURBT)术后复发的效能.方法 选取2017年6月至2021年6月河北燕达医院100例膀胱癌病人,比较癌组织和癌旁组织及不同病理特征病人miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200表达,并根据术后复发情况分为复发组、未复发组.比较两组miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200表达,采用受试者操作特征(ROC)曲线分析miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200预测复发的价值,比较不同miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200表达水平病人复发率.结果 癌组织miRNA-212为2.03±0.56低于癌旁组织4.52±1.18(P<0.05),癌组织miRNA-137、miRNA-200表达分别为2.69±0.45、24.56±7.39,高于癌旁组织的1.28±0.30、7.33±2.21(P<0.05);随着组织学分级、TNM分期递增,miRNA-212表达逐渐降低,miRNA-137、miRNA-200表达逐渐升高(P<0.05);肌层浸润性膀胱癌病人miRNA-212低于非肌层浸润性膀胱癌,miRNA-137、miRNA-200高于非肌层浸润性膀胱癌(P<0.05);复发组miRNA-212(1.73±0.39)低于未复发组(2.28±0.44)(P<0.05),复发组miRNA-137、miRNA-200分别为3.06±0.72、37.96±12.18,高于未复发组2.35±0.40、22.86±7.50(P<0.05);miRNA-212高水平病人复发率低于低水平病人,miRNA-137、miRNA-200高水平病人复发率高于低水平病人(P<0.05).结论 膀胱癌组织miRNA-212、miRNA-137、miRNA-200表达与临床病理特征相关,联合检测对TURBT后复发具有良好的预测能力,可作为预测术后复发的一种方案.
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编辑人员丨2024/4/27
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IS患者血清lncRNA PVT1、miR-214水平与继发性癫痫的相关性分析
编辑人员丨2024/1/20
目的 探讨缺血性脑卒中(IS)患者血清长链非编码RNA变异性浆细胞瘤异位1(lncRNA PVT1)、微小RNA-214(miR-214)水平与继发性癫痫的相关性.方法 选取2018年6月至2021年6月眉山心脑血管病医院神内八科收治的280例IS患者作为研究对象,根据患者1年内是否发生继发性癫痫,分为单纯IS组(212例)和继发性癫痫组(68例),根据癫痫的严重程度分为轻度癫痫组(19例),中度癫痫组(33例),重度癫痫组(16例).另选取同时期来眉山心脏血管病医院神经八科体检的150例健康者作为对照组.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定所有受试者血清lncRNA PVT1、miR-214水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;经Pearson法分析lncRNA PVT 1与miR-214的相关性,及两者与IL-1β、IL-6、TNF-α的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响IS患者是否发生继发性癫痫的有关因素.结果 与对照组比较,单纯IS组和继发性癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214 水平明显降低(P<0.05);与单纯IS组比较,继发性癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05).与轻度癫痫组比较,中度癫痫组和重度癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05);与中度癫痫组比较,重度癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05).继发性癫痫组患者血清lncRNA PVT1 与 IL-1 β、IL-6、TNF-α 均呈正相关(P<0.05),血清 miR-214 与 IL-1β、IL-6、TNF-α 均呈负相关(P<0.05),血清lncRNA PVT1与miR-214水平也呈负相关(P<0.05).多因素Logistic回归分析表明,IL-1β、IL-6、TNF-α、lncRNA PVT1及miR-214均与IS患者继发性癫痫的发生有关(P<0.05).结论 lncRNA PVT1水平升高及miR-124水平降低与IS患者继发性癫痫的发生有关,可作为评估IS患者发生继发性癫痫的血清标志物.
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编辑人员丨2024/1/20