目的:了解我国不同来源产志贺毒素 stx2e亚型大肠埃希菌分离株的分子特征。 方法:对2012年—2018年间监测中发现的3株人源、13株动物源及8株食品来源的携带 stx2e基因亚型的大肠埃希菌进行体外抗生素敏感性试验并进行全基因组测序。根据全基因组序列，对菌株 stx基因亚型、血清型、多位点序列分型(MLST)、毒力基因及耐药基因携带情况、系统进化关系及志贺毒素前噬菌体基因组成进行分析。 结果:24株菌分为19种O∶H血清型和19种序列(ST)型，均携带至少1种耐药相关基因，其中19株菌至少对一种抗生素耐药。3株人源菌株分别属于不同血清型及ST型，但存在与之相同血清型或ST型的动物、食品来源菌株；全基因组进化分析显示相同血清型或ST型的人源菌株分别与动物或食品源菌株具有较近亲缘关系。不同菌株间 stx2e序列高度相似(>99.7%)，但志贺毒素前噬菌体基因组成、大小等存在较大差异。 结论:本研究为我国对罕见的人源性 stx2e亚型大肠埃希菌菌株特征进行报道，结合动物及食品源性菌株，表明我国 stx2e亚型菌株具有高度遗传多样性，存在感染人的风险。

产志贺毒素大肠埃希菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类重要的动物源性病原菌,其感染人体后可引起腹泻甚至致死性的溶血性尿毒综合症(hemolytic uremic syndrome,HUS).志贺毒素(Shiga toxin,Stx)是STEC最重要的致病物质,由整合于宿主染色体特定位置的Stx前噬菌体(Stx-converting prophage)编码.在 自发或理化因素诱导下,Stx前噬菌体进入裂解周期,噬菌体颗粒组装并在宿主菌裂解后释放,成为游离的Stx噬菌体(Stx phage).Stx前噬菌体调控志贺毒素表达水平进而影响细菌毒力,而游离Stx噬菌体具有介导新的致病菌型或毒力增强的杂合型致病菌型产生的潜力.本文就Stx噬菌体的形态及基因组特征、诱导特性以及其作为可移动元件对菌株致病性的影响等方面的研究进展做一简要综述.

目的 针对编码大肠杆菌志贺毒素由位于STEC染色体上的前噬菌体携带的stx基因和O157抗原编码基因rfbe设计特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,建立一种针对肠出血性大肠杆菌及其毒素的环介导等温扩增(LAMP)反应技术检测法.方法 通过优化LAMP反应的各影响因素,确定LAMP反应体系和反应条件并利用已优化的LAMP体系进行相关检测.结果 确定LAMP反应体系为:内引物(FIP、BIP)与外引物(F3、B3)的比例为8∶1,Mg2+浓度10 mmol/L,dNTPs浓度1.2 mmol/L,甜菜碱浓度0.4 mol/L,Bst DNA聚合酶的添加量为1μl.LAMP反应时间为60 min,反应温度为60℃.以PCR法作为对照,LAMP检测的敏感度为5×101 CFU/mL,PCR的敏感度为5×104 CFU/mL.同时,研究应用所建立的LAMP快速检测法对部分革兰阳性和阴性菌及102株O157大肠杆菌进行快速检测.结果显示,检测特异度达100％,O157大肠杆菌rfbe检出率为100％(102/102),stx1检出率为95.2％(59/62),stx2检出率为92.9％ (52/56).结论 成功建立了一种可应用于肠出血性大肠杆菌及其毒素的敏感、特异的LAMP检测方法.

志贺毒素(Shiga toxin,Stx)是志贺菌和某些大肠埃希菌等产生的一种重要的毒力因子,包括志贺毒素1(Stx1)和志贺毒素2(Stx2)两种型别.该毒素由λ样志贺毒素噬菌体编码,通过切割核糖体28S rRNA 3′端腺苷酸从而抑制蛋白质合成,也可通过多种途径诱导细胞凋亡.人感染产志贺毒素的细菌可出现腹泻或出血性结肠炎(hemorrhagic colitis,HC),严重者可导致溶血性尿毒综合征(hemolytic uremic syndrome,HUS),甚至死亡.目前,尚无特异性治疗志贺毒素所致疾病的方法,但近年来志贺毒素在癌症靶向治疗或成像等医学领域的应用前景已引起人们的兴趣.本文就志贺毒素的命名、分型、分子结构、遗传学基础、作用机制、应用前景等方面的研究进展做一简要综述.