目的:分析中国25家新生儿重症监护病房（NICU）中早产儿真菌败血症的发生现状和危险因素，为探讨真菌败血症预防策略提供依据。方法:对“基于证据的质量改进方法降低中国新生儿重症监护病房院内感染发生率的整群随机对照试验”建立的早产儿临床数据库资料进行二次分析，回顾性分析2015年5月至2018年4月生后7 d内收入中国25家三级医院NICU的24 731例早产儿的真菌败血症发生现况。根据早产儿是否发生真菌败血症分为真菌败血症组和未发生真菌败血症组，分析真菌败血症的发生率和病原。使用χ 2检验比较不同出生胎龄、不同出生体重和不同NICU早产儿真菌败血症发生率。使用多因素Logistic回归分析方法比较真菌败血症组和未发生真菌败血症组早产儿预后。通过倾向性评分匹配144例真菌败血症组早产儿和288例无真菌败血症组早产儿，使用单因素和多因素Logistic回归分析方法分析发生真菌败血症的危险因素。 结果:24 731例早产儿中166例（0.7%）发生真菌败血症，真菌败血症早产儿出生胎龄为（29.7±2.0）周，出生体重为（1 300±293）g，其中87.3%（145/166）为出生胎龄<32周的早产儿。出生胎龄和出生体重越低，真菌败血症的发生率越高（均 P<0.001）。极早产儿和超早产儿真菌败血症发生率分别为1.0%（117/11 438）和2.0%（28/1 401），极低出生体重儿和超低出生体重儿中分别为1.3%（103/8 060）和1.7%（21/1 211）。3家NICU无真菌败血症发生，其余22家NICU真菌败血症的发生率范围为0.7%（10/1 397）~2.9%（21/724），差异有统计学意义（ P<0.001）。166例早产儿真菌败血症病原菌主要为念珠菌150例（90.4%），其中白色念珠菌有59例、非白念珠菌有91例，非白念珠菌以近平滑假丝酵母菌（41例）为主。真菌败血症早产儿发生中重度支气管肺发育不良（调整 OR=1.52，95% CI 1.04~2.22， P=0.030）和严重早产儿视网膜病（调整 OR=2.55，95% CI 1.12~5.80， P=0.025）风险增加。使用广谱抗菌药物（调整 OR=2.50，95% CI 1.50~4.17， P<0.001）、长时间中心静脉置管（调整 OR=1.05，95% CI 1.03~1.08， P<0.001）和长时间使用全肠外营养（TPN）（调整 OR=1.04，95% CI 1.02~1.06， P<0.001）均是发生真菌败血症的独立危险因素。 结论:中国NICU早产儿真菌败血症主要病原为白色念珠菌和近平滑假丝酵母菌。真菌败血症早产儿发生中重度支气管肺发育不良和严重早产儿视网膜病风险增加。使用广谱抗菌药物、长时间中心静脉置管和长时间使用TPN可增加早产儿发生真菌败血症的风险。后续需针对这些危险因素采取措施以降低NICU真菌败血症发生率。

目的:探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）合并热带念珠菌血症（CTBI）的临床特征、诊疗与预后，提高对该病的认识。方法:回顾性分析2015年1月至2018年12月在6家医院诊断的14例ALL合并CTBI患儿的一般资料、临床表现、辅助检查、治疗及转归情况。收集同期入院的无侵袭性真菌病（IFD）的ALL患儿（28例）及其他IFD患儿（9例）的临床资料作为对照组。采用Logistic回归分析探讨CTBI发生的危险因素。结果:14例患儿中男7例、女7例，年龄1岁5月龄~13岁。14例均有发热，9例有消化系统症状，3例粪培养有真菌；7例有呼吸系统症状，1例痰培养为真菌；2例有中枢神经症状；10例发生休克。14例患儿均有中性粒细胞缺乏，中性粒细胞缺乏持续时间1~53 d。C反应蛋白>50 mg/L的比例明显高于其他IFD病例（8/14比1/9， P<0.05），(1, 3)-β-D-葡聚糖、半乳甘露聚糖检测及肺部影像学无特异性。14例患儿血培养均可见热带念珠菌，13例完善药敏，均对氟胞嘧啶、两性霉素B敏感，4例对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑敏感。14例患儿中，1例放弃治疗后失访，1例在抗真菌治疗前死亡，余12例予抗真菌治疗；14例患儿中死亡7例。ALL合并CTBI组（14例）与ALL未发生IFD组（28例）在ALL未缓解（χ2=37.847， P<0.01）、住院时间>15 d（χ2=8.351， P=0.004）、中性粒细胞缺乏（χ2=14.280， P<0.01）、中性粒细胞缺乏时间>10 d（χ2=10.254， P=0.001）、应用广谱抗菌药物（χ2=13.888， P<0.01）、皮肤黏膜破损（χ2=5.923， P=0.015）方面差异有统计学意义。 结论:CTBI耐药率及病死率高，针对耐唑类热带念珠菌，推荐使用两性霉素B或棘白菌素+氟胞嘧啶联合治疗，降低治疗相关死亡风险。

目的:建立重组人甘露聚糖结合凝集素蛋白（M1蛋白）磁珠富集病原体结合重组酶辅助聚合酶链式反应（RAP）巢式核酸扩增技术检测血液中白色念珠菌和热带念珠菌的方法，以实现对白色念珠菌血症和热带念珠菌血症的早期诊断。方法:针对白色念珠菌和热带念珠菌的内转录间隔区的高度保守区域的设计引物探针，建立检测白色念珠菌和热带念珠菌的RAP检测方法；用梯度稀释的标准菌株核酸和临床常见的血流感染病原体核酸检验灵敏度、重复性、特异性；用模拟样本进行M1蛋白磁珠富集血浆白色念珠菌和热带念珠菌RAP和实时荧光PCR的检测，并对结果进行比较。结果:建立的双重RAP方法灵敏度为2.4~2.8拷贝/反应，重复性好，特异性高；M1蛋白磁珠富集病原体结合双重RAP方法可在4 h内完成对血浆中白色念珠菌和热带念珠菌的检测，<10 CFU/ml的病原体富集后进行RAP检测样本数较PCR检测样本数多。结论:本研究建立了检测血液中白色念珠菌和热带念珠菌的双重RAP方法，该检测方法具备准确、快速、减少污染物的优点，在念珠菌血症快速检测中具有较好的应用潜力。

目的:评价降钙素原（procalcitonin, PCT）血清浓度鉴别诊断血流感染（bloodstream infection, BSI）病原学的准确性。方法:收集2015年1月至2020年6月于中日友好医院重症监护室（ICU）诊断为BSI且阳性血培养同时进行PCT检测的患者资料，以血培养当天的参数计算序贯器官衰竭评分（sequential organ failure assessment, SOFA），比较不同病原体感染者之间各指标的差异，并用受试者工作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线分析生物标志物PCT对单一病原体感染的鉴别诊断价值。结果:在1 456例BSI患者中，单一细菌或念珠菌感染分别为1261例（86.6%）和80例（5.5%），混合感染115例（7.9%）；28 d病死率为24.5%（356/1 456），60 d病死率为30.6%（446/1 456）；无论28 d还是60 d病死率，混合感染组均明显高于细菌菌血症组以及念珠菌血症组。PCT在革兰阴性菌（gram-negative bacteria, GNB）菌血症中显著高于革兰阳性菌（gram-positive bacteria, GPB）菌血症和念珠菌血症｛3.4 μg/L [95%可信区间（95% CI）0.7~17.0 μg/L]比1.3 μg/L（95% CI 0.4~7.3 μg/L）；3.4 μg/L（95% CI 0.7~17.0 μg/L）比1.1 μg/L（95% CI 0.4~3.4 μg/L）； P<0.01｝。ROC曲线分析显示：①PCT鉴别诊断单一细菌菌血症与念珠菌血症的最佳截断值为7.25 μg/L，特异性可达90.0%，ROC曲线下面积（area under ROC curve, AUROC）为0.612（95% CI 0.533~0.691）；当PCT>0.51 μg/L，诊断细菌菌血症的敏感性可达73.3%；②PCT鉴别诊断GNB菌血症与念珠菌血症的最佳截断值为7.32μg/L，特异性为90.0%；AUROC为0.695（95% CI 0.614~0.776）；当PCT>0.51 μg/L时，诊断GNB菌血症的敏感性为84.9%；③PCT鉴别诊断GNB菌血症与GPB菌血症的最佳截断值为0.52 μg/L，敏感性为84.9%，AUROC为0.713（95% CI 0.672~0.755）；当PCT>7.36 μg/L，诊断GNB菌血症的特异性可达80.1%。 结论:PCT能够提供BSI患者可能的病原学方面的额外信息，尤其是较高的PCT水平往往提示GNB菌血症可能。

目的:探讨失代偿期肝硬化患者并发败血症的相关危险因素。方法:收集2018年1月- 2020年12月失代偿期肝硬化患者1 098例，资料完善、符合纳入标准的病例共492例，其中并发败血症的为败血症组（240例），未并发败血症的为无败血症组（252例）。收集两组患者的白蛋白、胆碱酯酶、总胆红素、凝血酶原活动度、尿素、肌酐、国际标准化比值等指标，对两组患者进行Child-Pugh分级及MELD评分。对非正态分布的计量资料进行Mann-Whitney U检验，对等级资料进行秩和检验；并对可能影响失代偿期肝硬化患者合并败血症的相关因素进行logistic回归分析。 结果:检出革兰阴性菌162例、革兰阳性菌76例、念珠菌2例；败血症组的Child-Pugh分级以C级为主，无败血症组Child-Pugh分级以A、B级为主（ Z=-13.01， P＜0.05）；败血症患者的终末期肝病模型评分显著高于无败血症患者（ Z=-12.30， P＜0.05）。失代偿期肝硬化并发败血症患者的中性粒细胞百分比为86.90%（79.00%，91.05%）、C反应蛋白为48.48（17.63，97.55）mg/L、降钙素原为1.34（0.40，4.52）ng/L、总胆红素为78.50（32.75，149.80）μmol/L，显著高于无败血症患者［分别为69.55%（58.58%，75.90%）、5.34（5.00，14.94）mg/L、0.11（0.06，0.24）ng/L、22.50（15.10，37.55）μmol/L， P值均＜0.05］；而败血症患者的白蛋白水平为27.30（24.45，30.60）g/L、凝血酶原活动度为46.00%（33.50%，59.00%）、胆碱酯酶水平为1.87（1.29，2.66）kU/L，显著低于无败血症组［分别为32.65（28.95，37.23）g/L、73.00%（59.75%～84.85%）、3.13（2.23～4.59）kU/L， P值均＜0.05］。经logistic回归分析得出血清总胆红素、白蛋白、凝血酶原活动度水平及合并糖尿病是影响并发败血症的独立危险因素。 结论:失代偿期肝硬化患者肝功能越差、MELD评分越高越容易并发败血症。在临床诊疗过程中对肝脏储备功能差的失代偿期肝硬化患者应积极动态监测其中性粒细胞百分比、降钙素原、C反应蛋白等感染相关指标，以便早期发现可能的潜在感染乃至败血症，早期治疗，改善预后。

目的:探讨先天性念珠菌败血症的临床及实验室检查特征，为临床早期治疗该病提供参考。方法:回顾性分析郑州大学附属儿童医院2016年10月1日至2021年12月31日收治的6例诊断为先天性念珠菌败血症患儿的临床特征、实验室结果及诊治经过，并对菌株进行药物敏感试验。结果:6例患儿中，男4例，女2例，胎龄为26 +1至31 +2周，出生体质量为850~1 490 g，入院日龄为1~5 d。5例阴道分娩，1例剖宫产，试管婴儿3例。母亲妊娠期念珠菌性阴道炎6例，宫颈环扎术2例，宫颈息肉摘除术1例。6例患儿发病时均有呼吸窘迫和腹胀，同时伴高血糖(5例)、肝肿大(4例)、感染性休克(3例)等。实验室检查结果示：外周血白细胞计数升高者4例，白细胞计数减少伴中性粒细胞计数<1.0×10 9/L者2例，C反应蛋白水平均升高，血小板计数均减少。血培养检出念珠菌的时长为36~50 h, 5例血培养检出白念珠菌，1例血培养检出光滑念珠菌，3例脑脊液培养检出白念珠菌。药物敏感试验结果示：光滑念珠菌对氟康唑耐药，对两性霉素B敏感；白念珠菌对氟康唑和两性霉素B均敏感。6例患儿中，4例治愈，2例死亡，治愈患儿抗真菌用药时间为26~38 d。 结论:先天性念珠菌败血症主要发生于极低/超低出生体质量早产儿，白念珠菌多见，最常表现为呼吸窘迫、腹胀，伴高血糖、血小板计数减少，应结合围产期母亲念珠菌感染病史、高危因素及患儿临床特征，及时给予经验性抗真菌治疗。

目的:建立念珠菌血症小鼠模型，寻找辅助诊断念珠菌血症的差异多肽峰。方法:SPF级ICR雄性小鼠170只，体质量27~30 g，根据随机数字表法将小鼠完全随机分为白色念珠菌感染组（ n=80）、近平滑念珠菌感染组（ n=80）和对照组（ n=10），通过尾静脉注射的方法建立念珠菌血症小鼠模型。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测模型小鼠血清多肽谱，选择差异较为明显的多肽峰建立诊断模型。 结果:比较白色念珠菌感染组和对照组共得到65个差异多肽峰，组合质荷比（m/z）为1 100.4、1 581.0、3 808.0这3个差异多肽峰建立诊断模型，敏感度为95.24%（40/42），特异度为90.63%（29/32），准确率为93.24%（69/74），ROC曲线下面积为0.972（95 %CI：0.941~1.000）；比较近平滑念珠菌感染组和对照组共得到73个差异多肽峰，组合质荷比（m/z）为1 433.2、1 148.5、4 093.5、4 522.2、8 140.9、8 234.6这6个差异多肽峰建立诊断模型，敏感度为95%（38/40），特异度为81.25%（26/32），准确率为88.89%（64/72），ROC曲线下面积为0.953（95 %CI：0.903~1.000）。比较白色念珠菌感染组和近平滑念珠菌感染组，共得到78个差异多肽峰，组合质荷比（m/z）为2 736.9、8 091.5、8 153.7这3个差异多肽峰建立诊断模型，区分白色念珠菌感染和近平滑念珠菌感染的准确率为98.78%（81/82）。 结论:通过念珠菌血症小鼠模型筛选的差异多肽峰有利于寻找辅助念珠菌血症诊断的血清标志物，为临床早期诊断及合理用药提供了依据。

目的:联合聚合酶链反应与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）技术，构建检测5种临床常见念珠菌血症病原菌的高通量检测方法。方法:方法学建立。以白色念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌为目标菌株，以内转录间隔区为靶基因，设计特异的单碱基延伸引物，在同一反应体系内进行单碱基延伸反应，用MALDI-TOF MS检测各目的菌特征峰；使用模拟血流感染样本验证上述构建的检测体系敏感度、特异度；前瞻性收集2021年10月至2022年9月解放军总医院第一医学中心检验科108例疑似或确诊念珠菌血症患者血液样本并检测；将核酸质谱检测结果与金标准血培养方法进行比较。结果:用所建立的核酸质谱检测体系同时检测5种临床常见念珠菌，各菌种均可产生特异的产物峰且各菌种之间不存在相互干扰。白色念珠菌的最低检测限可达100 CFU/ml，近平滑念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌的最低检测限可达10 CFU/ml。对108份血液样本进行检测，核酸质谱的敏感度为94.74%（36/38），特异度为97.14%（68/70），阳性预测值为92.31%（36/39），阴性预测值为98.55%（68/69），配对四格表的χ 2检验显示2种方法无显著差异（ P>0.05），Kappa一致性检验显示2种方法一致性良好（ Kappa=0.9， P<0.05）。 结论:成功构建了适用临床念珠菌检测的核酸质谱检测体系，方法验证结果与临床血培养具有一致性。

目的:了解山东地区临床分离真菌的菌株分布以及对常用抗真菌药物的耐药性，促进抗真菌药物的合理选择。方法:依托于山东省儿童细菌&真菌耐药监测研究协作网，收集2018年1月1日至12月31日山东省46所医院1 030例患者的标本，剔除痰液和咽拭子标本，共1 030株真菌。分析菌株来源和类型，并采用微量稀释法进行抗真菌药物敏感性试验。采用Whonet 5.6和SPSS 22.0对数据进行分析。结果:所有真菌中，主要菌株为白假丝酵母菌(38.74%，399/1 030)、热带假丝酵母菌(16.99%，175/1 030)及近平滑假丝酵母菌(16.41%，169/1 030)等。儿童患者的主要真菌为白假丝酵母菌为(52.50%，63/120)、近平滑假丝酵母菌为(12.50%，15/120)和热带假丝酵母菌(9.17%，11/120)等。成人患者的主要真菌为白假丝酵母菌(36.37%，331/910)，热带假丝酵母菌为(17.03%，155/910)和近平滑假丝酵母菌(15.27%，139/910)等。主要假丝酵母菌在1至3月和8至12月的分离率远高于其他月份。白假丝酵母菌对氟康唑和伏立康唑的耐药率分别为7.14%和7.43%，对伊曲康唑的耐药率为50.44%。热带假丝酵母菌对氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑都有较高的耐药率，分别为29.05%、23.29%和48.65%。近平滑假丝酵母菌对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑的敏感率分别为93.06%、93.75%、94.44%。光滑假丝酵母菌对氟康唑表现出2.33%的剂量依赖性敏感率。对244株血液真菌分析显示，非白假丝酵母菌菌血症占比为70.08%，在涵盖92.22%的病原谱中，氟康唑的敏感率为64.65%，伏立康唑的敏感率为68.88%，两性霉素B的敏感率为88.75%，量化后获得氟康唑、伏立康唑和两性霉素B临床治疗真菌菌血症的有效率分别为70.10%、74.69%和96.23%，其中热带假丝酵母菌对伏立康唑的敏感率低于氟康唑。结论:主要的真菌为假丝酵母菌属，热带假丝酵母菌对唑类抗真菌药物的耐药率呈上升趋势，其他假丝酵母菌对临床常用抗真菌药物的敏感度基本稳定。

目的:分析严重爆炸致烧伤患者在不同时间段感染病原微生物的特征，同时探讨宏基因组学第二代测序（mNGS）技术在病原微生物检测中的应用价值。方法:采用回顾性观察性研究方法。2020年6月13日—9月13日浙江大学医学院附属第二医院收治符合入选标准的23例严重爆炸致烧伤患者，其中男21例、女2例，年龄（64±5）岁，烧伤总面积（86±14）%体表总面积。统计入院时，患者的简明烧伤严重指数（ABSI）评分、修订Baux评分、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ（APACHEⅡ）评分和序贯器官衰竭（SOFA）评分。记录患者入院后≤7 d、8~20 d、21~30 d并发症及病原微生物感染来源分布情况，统计病原微生物检出情况并比较微生物培养法与mNGS检测效能的差异。统计患者入院后感染的病原微生物来源分布总体情况并比较微生物培养法与mNGS检测效能差异。对数据行McNemar和Fisher确切概率法检验。结果:入院时，患者ABSI评分、修订Baux评分、APACHE Ⅱ评分和SOFA评分分别为（12.6±2.4）、（91±22）、（26±4）和（10.3±2.3）分。入院后≤7 d，患者的并发症主要为吸入性损伤、脓毒症休克和低蛋白血症；患者感染病原微生物的来源主要为创面、血流和肺部。入院后8~20 d，患者脓毒症休克的发生率最高，吸入性损伤的发生率明显低于入院后≤7 d（ P<0.01）；病原微生物感染来源仍然以创面、肺部和血流为主，其中创面和血流感染发生率均明显低于入院后≤7 d（ P<0.01）。入院后21~30 d，患者仅有多器官功能衰竭和急性呼吸窘迫综合征存在且发生率低，吸入性损伤的发生率明显低于入院后≤7 d（ P<0.01），脓毒症休克的发生率明显低于入院后≤7 d（ P<0.01）和入院后8~20 d（ P<0.01）；仅存在较低的血流感染，创面感染发生率明显低于入院后≤7 d（ P<0.01）和入院后8~20 d（ P<0.05），肺部和血流感染发生率明显低于入院后≤7 d（ P<0.01）。入院后≤7 d，革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌为主；革兰阴性菌以肺炎克雷伯菌和嗜麦芽窄食单胞菌为主；真菌中仅含念珠菌。入院后8~20 d，革兰阳性菌仍以金黄色葡萄球菌为主，肠球菌的检出率明显低于入院后≤7 d（ P<0.01）；革兰阴性菌以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主，且其检出率均明显高于入院后≤7 d（ P<0.01）；新检出了镰刀菌。入院后21~30 d，革兰阳性菌仍以金黄色葡萄球菌为主，肠球菌和芽孢杆菌的检出率明显低于入院后≤7 d（ P<0.01）；革兰阴性菌仍以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主，且随呈时间依赖性增高趋势，铜绿假单胞菌检出率明显高于入院后≤7 d（ P<0.01）和入院后8~20 d（ P<0.01），鲍曼不动杆菌的检出率明显高于入院后≤7 d（ P<0.01），肺炎克雷伯菌检出率均明显低于入院后≤7 d（ P<0.01）和入院后8~20 d（ P<0.01）；念珠菌、霉菌、镰刀菌均有检出。在入院后≤7 d和入院后8~20 d，mNGS和微生物培养法检出病原微生物的一致性较高（ κ=0.659、0.596）；而在入院后21~30 d，mNGS和微生物培养法检出病原微生物的一致性为中度（ κ=0.407）。不同时间段，mNGS的病原微生物阳性检验率是基本恒定的，而微生物培养法呈时间依赖性下降。入院后，创面、血液、痰液和留置导管中共分离出506株病原微生物，以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌为主。创面标本以金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌最为多见，血液标本中以肺炎克雷伯菌多见，在痰液标本中以铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌为主，留置导管标本中以鲍曼不动杆菌最为多见。铜绿假单胞菌在创面和痰液中的检出率均分别显著高于血液（ P<0.05或 P<0.01）和留置导管（ P<0.01）。mNGS和微生物培养法检测病原微生物总体结果的一致性为中度（ κ=0.556），其中血液和留置导管标本的mNGS与微生物培养法检测病原微生物结果的一致性为高度（ κ=0.631、0.619）；而痰液和创面检测结果的一致性为中度（ κ=0.558、0.528）。 结论:该研究中的严重爆炸致烧伤患者最常见的感染是创面感染和血流感染。随入院时间的延长，患者感染的病原微生物由金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和嗜麦芽窄食单胞菌为主转为以鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌为主；mNGS检测与微生物培养法相比，表现出更高的病原微生物阳性检出率。