为提高越橘苗木繁殖速度及苗木品质,本研究以越橘茎尖为材料,建立茎尖离体培养诱导成苗的快繁体系.结果表明:茎尖诱导最佳培养基为WPM(改良)+ZT 0.05 mg·L-1+IBA 0.5 mg·L-1+ GA3 0.1 mg·L-1,0.1～0.3 mm长的茎尖诱导成苗率仅为28％,0.3～0.5 mm长的茎尖诱导成苗率能达到68％;茎尖长度达到0.5 ～0.7 mm时,茎尖诱导成苗率为79％,当茎尖长度为0.7 ～1.0 mm时,茎尖诱导成苗率高达94％.

目的:探讨植物生长促进剂在半夏试管微型种茎形成中的作用,研究半夏块茎型人工种子生产技术.方法:以野生宽叶半夏的带芽块茎为外植体,优化植物生长促进剂的添加设计,筛选适宜的试管微型种茎诱导、增殖培养基及种茎萌发、成苗配套技术.结果:以MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA为试管微型种茎的最佳诱导培养基;以MS+ 1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA为最佳增殖培养基;种茎移栽中,10 mm以上种茎发芽率、发芽势、发芽指数最高,分别为95.7％、89.3％、87.1,且幼苗的成活率最高、株高最大、叶片数最多,分别为99.3％、11.8 cm、6.2片.结论:以6-BA与IBA优化配比,能显著提高半夏试管微型种茎的形成,建立了野生优质宽叶半夏高效试管微型种茎繁育技术体系.

以半夏(Pinellia ternata)茎尖为外植体,研究不同生长调节物质浓度配比对半夏茎尖脱毒苗诱导效果的影响.在单因素试验基础上,分别选取6-苄氨基腺噪呤(6-BA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三个最优诱导浓度设计L9(32)正交试验,以确定茎尖愈伤组织诱导的最适培养基,并利用分子生物学方法对脱毒苗进行病毒检测,结果表明:当6-BA浓度为1.5 mg·L-1,2,4-D浓度为2.0 mg·L-1时,愈伤组织诱导率最高.正交试验得出诱导愈伤的最佳培养基配方为MS+1.5 mg·L-1 6-BA+2.0 mg·L-1 2,4-D+7 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖,并可一次性成苗.该培养基所诱导的脱毒苗经斑点酶联免疫吸附法(DOT-ELISA)和反转录PCR检测后,烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)和大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)脱毒率均达到100％.

为提高橡胶树(Hevea brasiliensis)体胚植株的成苗率和移栽成活率,以橡胶树花药离体培养获得的成熟子叶形体细胞胚为试验材料,研究不同质量浓度的活性炭对橡胶树体细胞胚成苗诱导的影响,以及炼苗方式、体胚植株不同根系炼苗移栽对其生长的影响.结果 表明:活性炭影响橡胶树体胚植株茎的伸长和侧根的形成,活性炭质量浓度为1.0 g·L-1时成苗率最高,为69.44％,生成的侧根数多.移栽前室外炼苗有利于提高橡胶树体胚植株的成活率,闭瓶炼苗5～7 d后开瓶2～3 d移栽成活率最高,可达95.83％.生根数对体胚植株移栽成活率的影响大,侧根多的体胚植株移栽成活率达96.88％.

目的:探明北苍术种子萌发与幼苗形态建成的适宜温度和基质含水量,以提高萌发效率和成苗率,为北苍术人工繁育提供理论依据.方法:试验设不同温度(1O℃、15℃、20℃、25℃)和基质含水量(42％、50％、55％、60％、65％、70％)条件下对北苍术种子萌发的诱导效果,及其对幼苗形态建成的影响.结果:发芽温度为20℃、基质含水量为50％～60％时北苍术种子的发芽率和发芽势均最高,发芽较快且整齐.结论:温度为20℃～25℃、基质含水量为50％～70％时,北苍术胚根和真叶生长速度快,出苗整齐.

大苞白山茶(Camellia granthamiana)是我国特有珍稀木本植物,具有重要的理论研究和应用价值.本研究以幼胚子叶为外植体,探究不同植物生长调节剂配比对愈伤形成、体胚发生及体胚诱导成苗的影响.结果 表明,2.0 mg·L-16-BA与2.5 mg·L-12,4-D协同作用下,愈伤组织诱导效果最好,诱导率最高可达100％,但形成的均为非胚性愈伤;TDZ浓度为0.05 mg·L-1时,胚性愈伤诱导率可达85.47％;体胚诱导的最佳培养基为MS+0.5mg·L-1 6-BA+0.05 mg·L1NAA+0.05 mg·L-1TDZ,每克胚性愈伤体胚数可达162个,其正常体胚率达58.34％;在1/2MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.05 mg·L-1NAA中,体胚成苗率最高,达33.91％;试管苗移栽于熟化红壤土:木屑:有机肥=5:4:1的基质中,成活率可达80％以上.

以不同生理年龄马尾松优株茎段芽为外植体,开展了马尾松茎段芽无菌离体再生培养.结果 显示,植株生理年龄显著影响了马尾松茎段芽离体培养效果,外植体来源树龄越大,离体培养效果越差.十五年生马尾松茎段芽离体培养困难,通过诱导复幼处理,来源于十五年生马尾松茎段芽的茎叶形态、显微解剖构造与内源激素均发生了幼化,茎段芽离体培养效果显著提升,始芽诱导率和继代增殖系数分别提升了70％和390％,生根、成苗率均增加了200％以上.这说明,外植体幼化对实现马尾松成年植株茎段芽离体培养尤为重要.

为探明华重楼离体胚培养及植株再生的基本体系,该文以华重楼离体幼胚为试验材料,以MS培养基为基本培养基,研究不同光照、不同浓度梯度组合的植物生长调节剂对华重楼离体幼胚萌发、成苗的影响.结果表明:培养到60 d时,暗培养条件下华重楼离体幼胚的生长率和萌发率分别比光培养条件下高45.25％、19.17％,故暗培养比光培养更有利于华重楼离体幼胚生长发育.当GA3浓度相同时,离体幼胚萌发所需时间随IAA浓度增加而延长.不同浓度的GA3都可促进离体幼胚萌发,促进作用由强到弱依次为5 mg·L-1 GA3>1 mg·L-1 GA3>10 mg·L-1 GA3.在黑暗条件下,优选得到最适华重楼离体幼胚生长发育配方为1/2 MS+30 g·L-1蔗糖+7 g·L-1琼脂+0.5 g·L-1活性炭+5 mg·L-1 GA3+1 mg·L-1 IAA.此配方可诱导华重楼离体幼胚在2个月左右萌发,萌发率达50％需80 d左右.在华重楼成熟胚出苗培养时发现,高浓度的植物生长调节剂会抑制华重楼成熟胚生长发育,高浓度GA3甚至会导致华重楼成熟胚死亡.优选得到最适华重楼成熟胚出苗配方为MS+30 g·L-1蔗糖+6.2 mg·L-1硼酸+7 g·L-1琼脂+0.7 g·L-1活性炭+0.5 mg·L-12,4-D+1.5 mg·L-1 IAA+1.5 mg·L-1 ZT+5mg·L-1 GA3,诱导成熟胚出苗需43 d左右,75 d左右可形成真叶.

以芍药(Paeonia lactiflora)品种粉玉奴花药为外植体,研究不同浓度2,4-D对愈伤组织诱导、体胚发生及植株再生的影响,采用组织细胞学方法观察愈伤组织以及体细胞胚发育过程,采用根尖染色体法鉴定再生植株倍性.结果 表明,芍药花药愈伤组织诱导的最适培养基为MS+1 mg.L-12,4-D+1 mg·L-1 NAA+0.1 mg·L-1 KT+30 g·L-1蔗糖+6.5 g·L-1琼脂,愈伤组织诱导率为14.7％.转入体细胞胚诱导培养基上,历经球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段,体胚诱导率为52.1％;在成苗培养基中能够长出真叶并得到完整植株,成苗率为47.1％.经根尖染色体法鉴定出单倍体和二倍体植株.该研究初步建立了通过体细胞胚间接发生途径实现植株再生的培养体系,可为芍药属其它品种的花药培养提供借鉴,获得的再生植株是芍药遗传学研究和育种工作的重要材料.

为降低猕猴桃组培快繁中的污染率,提高其繁殖效率,该文以猕猴桃的幼嫩茎段为外植体,采用两步培养法进行茎段形成层的愈伤及成苗诱导研究,并利用响应面设计软件对NAA浓度、6-BA浓度、低渗处理时间进行了各条件的优化,同时通过组织切片确定愈伤的来源及幼苗的形成方式.结果表明:(1)培养过程中撕除茎段周皮能显著降低污染率,用200～400 mg·L-1的PVP处理猕猴桃茎段可有效防止去皮茎段的褐化.(2)愈伤诱导的最佳条件为预培养28.3 h、NAA 4.45 mg·L-1、6-BA 0.28 mg·L-1,而幼苗形成的最佳条件为预培养26.4 h、NAA 4.84 mg·L-1、6-BA 0.42 mg·L-1.这表明形成层愈伤诱导需较长低渗处理时间和较高生长素,而成苗诱导则需较高生长素、激动素及较短的低渗处理时间.(3)组织切片观察结果表明猕猴桃愈伤组织源于形成层干细胞的分裂,且幼苗株源于胚状体的发育.综上结果表明,通过除去猕猴桃嫩茎周皮,外加抗氧化、低渗处理,可有效降低猕猴桃组培快繁中的污染率,提高繁殖系数和胚状体发生率,为猕猴桃种苗的规模化生产提供技术支撑.